羧甲基纤维素钠对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。     

Sch B对猪精液常温保存效果的影响

为了研究五味子乙素(Sch B)对猪精液常温保存效果的影响,本实验设计6个猪精液常温保存稀释粉配方,在筛选出的最佳自配基础稀释粉配方中添加了0、1、5、10、15μmol/L的Sch B,通过检测精子活率、质膜完整性、顶体完整性以及总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,分析Sch B对猪精液常温保存效果的影响。结果表明:6号基础稀释粉猪精液常温保存效果最佳,有效保存时间为4d,精子活率为0.63,质膜完整率为59.33%,顶体完整率为78.29%,均显著高于其他处理组(P0.05);在6号自配基础粉中加入10μmol/L Sch B猪精液的有效保存时间为5d,精子活率达到0.61,T-AOC浓度为4.85 U/mL,显著高于其他处理组(P0.05),并使MDA浓度显著降低为1.44nmol/mL(P0.05)。因此,基础稀释粉中添加Sch B可提高猪精液常温保存品质,延长精子有效保存时间,其最佳添加量为10μmol/L。     

稀释倍数对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究稀释倍数对湖羊精液4℃保存的影响，本实验使用3只1～2岁体况良好的公羊，将采集的精液稀释2、5、10、15、20、25倍后，检测4℃保存过程中精子活率、活力、运动速率以及质膜完整性和顶体完整性。结果表明：保存3～5 d,10倍稀释保存的精子活率和活力显著高于其他各组；保存1～4 d,25倍高倍稀释的精子活力下降最快，且显著低于其他组；保存1～3 d,10倍稀释保存的精子曲线速率（VCL）和路径速率（VAP）显著高于20和25倍稀释组；保存期间，10倍稀释保存的精子质膜完整性最高，且在第4天显著高于其他组；保存3～5 d,5和10倍稀释保存的精子顶体完整性显著高于15～25倍稀释组。因此，在本实验条件下，5～10倍为湖羊精液4℃保存的最适宜稀释倍数，过低或者过高的稀释倍数都不利于湖羊精液4℃保存。     

稀释粉对猪精液常温保存效果的研究

为了开发猪精液常温保存新型稀释粉,通过检测精子活率、质膜完整性、顶体完整性以及超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)产生量等指标,分析常温保存稀释粉对猪精液的保存效果的影响。结果表明,在常温保存条件下,自配稀释粉保存猪精液5d时间内,精子活率平均为0.63,精子顶体完整率和质膜完整率分别达到78.4%和48.6%;SOD活力、H2O2产生量和MDA产生量分别是177.39IU/mL、86.28mmol/mL和9.36nmol/mL,可以在生产实践当中应用。     

商品稀释剂pH值、渗透压测定及其对猪常温精液保存效果的比较

搜集市售的26种商品稀释剂,测定其pH值和渗透压。选择其中15种稀释剂稀释精液,检测保存时间、精子畸形率和精子顶体完整率,观察不同稀释剂对猪常温精液的保存效果。结果表明:26种稀释剂的pH值在6.36~7.26,渗透压在278.3~358.0 mOsm。15种稀释剂对精液保存时间在1.25~7.52 d,保存精液3 d时,精子畸形率为7.14%~15.29%,精子顶体完整率为90.37%~98.18%。12种稀释剂对精液保存效果较好,基本满足精液生产需要。     

壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液保存效果的比较分析

随着猪人工授精技术的广泛应用,精液保存技术也迅速发展。为了提高猪精液常温保存的效果,本研究通过向猪精液常温保存稀释液中分别添加0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068 g/L维生素C,检测1～6 d的精子活力、质膜完整性、顶体完整性和凋亡水平,并与庆大霉素组和维生素C组进行比较。结果表明,在保存6 d后,三组的保存质量显著高于对照组(P0.05),其中添加庆大霉素组的保存质量显著高于其他组(P0.05),稀释液中添加壳聚糖组的保存质量显著高于维生素C组(P0.05),维生素C组的顶体完整率在6 d与对照组无显著差异(P0.05),而添加壳聚糖组6 d的精子活力、质膜完整率和顶体完整率达到61.67%、68.67%、72.67%。稀释液中添加壳聚糖组和添加庆大霉素组,两者之间在保存2 d内差异不显著(P0.05)。壳聚糖组合庆大霉素组的质膜完整率和顶体完整率均高于对照组和维生素C添加组(P0.05)。因此,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖可达到庆大霉素等传统添加剂的效果,其有效保存时间可达到6 d。     

弱酸性环境对猪精液常温保存的影响

试验旨在探究不同pH的弱酸性环境常温稀释液对于猪精液常温保存的影响。通过测定不同pH（PH为6．2、6．3、6．4、6．5、6．6、6．7）的稀释液条件下猪精子的活率、质膜完整率和顶体完整性来检测对猪精液的保存效果。结果表明,稀释48h后,pH为6．4和6．5的稀释液中精子活率、质膜完整性和顶体完整性都分别出现降低,明显低于对照组（P〈0．05）。pH为6．2时,稀释液中精子的活率、质膜完整性和顶体完整性显著降低（P〈0．01）,不同PH的稀释液稀释后精液的品质在24h后开始出现明显的下降（P〈0．05）。试验表明,适宜猪精液常温保存的稀释液的弱酸性环境PH为6．4和6．5,在24h内保存效果较好。     

猪精液4℃低温保存技术研究

为丰富猪鲜精保存技术、改善与提高精液保存质量,本研究以市场占有率高、性能稳定和可耐受4℃低温的长效稀释剂为对照,探讨本课题组研制的4℃稀释剂(低温Ⅰ号、低温Ⅱ号)对猪精液低温保存效果的影响。结果表明:低温Ⅰ号和低温Ⅱ号稀释剂对猪精液的有效保存时间和总存活时间均显著高于对照组(P<0.05)。保存至第6天时,对照组精子活力显著降低(P<0.05),保存至第10天时,低温Ⅰ号、低温Ⅱ号、对照组精子活力分别为74.6、76.0、0;保存第10天时,对照组pH显著低于2个实验组(P<0.05);保存从第5天开始,实验组质膜完整性显著高于对照组(P<0.05)。综上,本课题组研制的稀释剂对猪精液4℃低温保存效果较好,而且低温Ⅱ号对精子活力和质膜完整性保存效果更优。     

曲酸对关中黑猪精液常温保存的影响

研究将抗氧化剂曲酸(Kojic acid)应用到关中黑猪精液的常温保存中,通过渗透压、精子活率、质膜完整率、顶体完整率和总抗氧化能力(T-AOC)等指标检测,探究曲酸对精子的保护作用,为关中黑猪精液稀释粉的研发提供技术支持。试验结果显示,BTS稀释液中添加0.1 g/L浓度以内的曲酸能够有效提高精子质膜、顶体完整性,提升精子的总抗氧化能力。其中0.04 g/L浓度组保存效果最好,保存第5天时精子活率为61.45%,可将精子有效保存时间延长2 d,0.06 g/L浓度组与之差异不显著(P0.05)。综上所述,在BTS液中添加0.04 g/L曲酸能够对精子常温保存起到最佳的抗氧化保护效果。研究对解决猪精液常温保存中精子的氧化损伤问题具有重要参考意义,同时为自主研发稀释粉产品提供试验依据。     

稀释剂配方对猪常温精液保存效果及受胎率试验

为了研究稀释剂配方对猪常温精液的影响,试验以英国Energy稀释剂为对照,设计7个稀释剂配方,测定pH值和渗透压;用上述8种稀释剂保存精液,检测保存时间、精子活力、精子畸形率和精子顶体完整率,比较其保存效果;选择3个保存效果较好的配方进行受胎率试验。结果表明:7个配方和英国Energy稀释剂的pH值和渗透压为6.50~7.25和271~297 mOsm;配方Ⅰ、配方Ⅵ、配方Ⅶ对精液保存时间超过5 d显著高于英国Energy稀释剂。配方Ⅰ和配方Ⅵ保存效果较好。     

Gln对猪精液常温保存效果的影响

L-谷氨酰胺具有增强免疫力和抗氧化等生物学作用。为了探究猪常温稀释液中添加L-谷氨酰胺(Gln)对保存效果的影响,本试验在自配基础稀释液中添加0、0.5、1、2、4、8、16 mmol/L的L-谷氨酰胺,在常温保存过程中,检测精子活率、顶体完整性、质膜完整性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)浓度等指标,分析Gln对猪精液常温保存效果的影响。结果表明:常温保存的过程中,在基础稀释液中添加4 mmol/L的Gln,精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其他组(P0.05),保存第5天时,精子活率为59%、质膜完整率为47.05%、顶体完整率为74.40%、T-AOC浓度为4.34 IU/m L、MDA浓度为1.51 nmol/m L。因此,添加4 mmol/L的Gln能够提高猪精液常温保存效果,延长猪精液常温保存时间。     

没食子酸对猪精液常温保存的效果及浓度筛选

本实验旨在研究不同浓度没食子酸(GA)对猪精液常温(17℃)保存效果的影响并筛选没食子酸的浓度范围。在猪精液稀释剂中分别添加不同浓度(0、5、6、7、8、9、10μg/mL)没食子酸,于不同保存时间测定猪精子的活率、A+B级精子数、质膜完整率及顶体完整率指标。结果表明,保存第1～3 d各浓度组间指标无明显差异(P0.05),保存第5 d, 6、9μg/mL组除组质膜完整率极显著高于对照组(P0.01),保存第5、7 d时,7、9μg/mL组精子活率显著高于对照组(P0.05);保存至第9 d时9μg/mL组活率显著高于对照组(P0.05)。综上表明,一定浓度范围的没食子酸有助于提高常温(17℃)保存下猪精液的质量,并延长保存时间。     

原花青素对猪精液常温保存效果的影响

为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。     

精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响

为了研究精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响,试验以低倍稀释(1∶2)为对照组,研究以高倍稀释(1∶10,高倍稀释组)和离心洗涤(洗涤组)两种方式去除精浆后的精子保存效果,再人为添加不同浓度精浆(0、10%、20%,30%、40%)于低温保存稀释液中,测定精子活率、运动速率、顶体完整性、质膜完整性及线粒体活性等精液品质指标。结果表明:高倍稀释组在各时间段内的精子活率、运动速率[直线速率(VSL)、曲线速率(VCL)及平均路径速率(VAP)]、质膜完整率均显著高于对照组和洗涤组(P0.05);高倍稀释组的精子顶体完整率和线粒体活性与对照组和洗涤组相比无显著差异(P0.05);在外源添加不同浓度精浆的试验中,10%、20%精浆组的精子活率、质膜完整率及运动速率均显著高于其他组(P0.05),而10%、20%精浆组之间无显著差异(P0.05),但20%精浆组的各项精子质量指标略高于10%精浆组。说明在低温保存山羊精液时存在一定浓度的精浆可以有效提高保存效果,在本试验条件下10%～20%的精浆添加量比较适宜,但20%精浆组的保存效果相对更好。     

维生素类物质对民猪精子常温保存效果的影响

为了提高民猪精液常温保存效果,为民猪资源保护和利用提供技术保障,试验在含有民猪精液的常温稀释液中分别添加维生素C、维生素B12和水溶性维生素E,在17℃条件下保存0~6 d,测定精子的活率和质膜完整性,以评估该稀释液对民猪精液的保存效果。结果表明:与对照组比较,添加维生素类物质能够明显延长精子保存时间和提高质膜完整性,其中添加维生素E的保存效果最好,民猪精液在保存5 d后精子活率为50.8%,其质膜完整性为26.2%,仍可用于生产。说明在民猪精液的常温稀释液中添加维生素E能够延长精液保存时间,提高精子质量。     

稳定pH值对猪精液液态保存效果的影响

为了研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,找到适合猪精液液态保存pH值,从而改进液态保存液的配方,提高人工授精效率,试验比较了不同pH值条件下猪精液液态保存效果,通过检测精子活力、存活时间、顶体完整性和质膜完整性等参数,研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,并尝试改进保存缓冲液。结果表明:采用Androhep保存时,最佳初始保存pH值为6.40。在保存的第3天稳定pH值组能够显著提高精子活力(P0.05),用2-吗啉乙磺酸(MES)代替Androhep保存液中的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES),在保存的第3天能显著提高精子活力、存活时间(P0.05),同时维持更高的质膜完整性,但是顶体完整性差异不显著(P0.05)。说明采用能够稳定pH值的保存液更有利于精液常温保存。     

3种商品稀释剂对关中黑猪精液常温保存效果的研究

研究通过检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜完整率来评价3种商品稀释剂对关中黑猪精液保存的效果。结果表明,日本某稀释剂对关中黑猪精液常温保存效果要显著优于比利时以及英国某稀释剂(P0.05),保存至第5天时日本某稀释剂组的精子活率仍达到0.75,大于比利时某稀释剂组的0.53和英国某稀释剂组的0.51。此外,保存至第5天精子活率、顶体完整率、线粒体膜完整率保存效果上,比利时某稀释剂组和英国某稀释剂组较为相近,而在对质膜完整率的保存效果上,英国某稀释剂组要显著优于比利时某稀释剂组(P0.05),保存至第5天时质膜完整率英国某稀释剂组和比利时某稀释剂组分别为44.52%和32.48%。     

蛋氨酸碘对常温保存猪精液品质的影响

为探讨蛋氨酸碘杀灭病原菌的效果和对精子质量的影响,以达到阻断病原菌垂直传播的目的,本试验以大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌为试验菌株,通过肉汤二倍稀释法研究蛋氨酸碘的抑菌作用;利用不同浓度的蛋氨酸碘溶液处理猪精液,在保存后不同时间点取样进行精液接种和培养,用细菌菌落计数的方法检测细菌菌落总数,采用显微镜镜检法检测精子活力、精子快速染液染色检测顶体完整性和低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整性。结果显示,蛋氨酸碘对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为100μL/L;用蛋氨酸碘消毒猪精液时,在0~400μL/L随着蛋氨酸碘溶液体积浓度的增加杀菌效果越好,保存4、5、6 d时100、200、400μL/L处理组与对照组相比细菌菌落数低,且差异显著(P0.05);在猪精液稀释液中添加体积浓度0~100μL/L的蛋氨酸碘对17℃保存猪精子质量无影响,保存3、4、5、6 d时200、400μL/L的处理组与对照组相比,精子活力、质膜完整率和顶体完整率明显降低(P0.05)。表明蛋氨酸碘在体积浓度100μL/L能很好地抑制病原菌的生长,且对17℃保存猪精子质量常规指标(活力、质膜完整率和顶体完整率)无显著影响。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对猪精液常温保存效果的影响

为探究不同浓度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对猪精液常温保存效果的影响,该试验通过在猪精液常温保存基础稀释液中添加0、5、10、20、30、40、50μmol/L EGCG,检测保存过程中精子活率、质膜完整率、顶体完整率等指标.结果表明:⑴猪精液常温保存基础稀释液中添加EGCG可以显著提高精子活率、质膜完整率和顶...     

不同稀释液对藏猪精液4℃保存效果的影响

为探讨不同精液稀释液对4℃保存藏猪精液的效果,保证优良藏猪种公猪精液的合理、高效利用,该试验选用5种常用的猪精液常温保存稀释液,并在藏猪精液4℃保存至第5天时检查藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率等。结果表明,在精液保存过程中,2号液对藏猪精液的保存效果最佳,精子活力在保存至第5天时仍然保持在0.54,且藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率均高于其余4组（P〈0.05）。该试验研究初步筛选了4℃保存藏猪精液的稀释液,为今后藏猪精液的生产应用奠定了基础。