4种海藻膳食纤维对Cd2+、Pb2+、Hg2+的吸附作用

采用模拟胃和小肠环境进行体外实验,同时对大白鼠进行体内实验,研究了4种海藻膳食纤维对Cd2 、Pb2 、Hg2 的体内、体外清除效果,并与麦麸(Wheat bran)膳食纤维进行了比较研究。结果表明:(1)在体外模拟实验中,4种海藻和麦麸膳食纤维对Cd2 、Pb2 、Hg2 的吸附效果与pH、纤维种类有关。在小肠环境下较胃环境吸附强烈,海带(Lamiraria japonica)吸附最强,其次为麒麟菜(Eucheuma)、麦麸和江蓠(Gracilaria),马尾藻(Sargassum)最差。各种膳食纤维对Pb2 吸附最强,对Hg2 最弱。(2)在动物体内实验中,各膳食纤维对大鼠体内重金属排出量(率)均显著大于空白对照组(P<0.05),各膳食纤维对重金属的排出能力由大到小依次为:麒麟菜、海带、麦麸、江蓠、马尾藻。结论认为,海藻膳食纤维具有清除重金属的效果,因此在降低重金属对人体蓄积毒性方面具有应用价值。[中国水产科学,2007,14(1):132-138]     

琼胶寡糖体外清除自由基活性的研究

在不同条件下对琼胶进行酸水解,得琼胶寡糖A1(以二、四糖为主)和A2(以己糖、辛糖为主)采用化学发光法和DPPH体系分别研究A1、A2对O2·-、·OH和DPPH3种自由基的清除作用。结果表明,A1、A2对3种自由基都有较好的清除作用,而且清除活性随糖浓度的增加而加强。在O2·-体系中,A2的IC50为0.54mg/mL,效果要好于A1(IC50为0.8mg/mL)。在·OH体系中,A2对·OH的清除作用比A1效果好,IC50分别为1.2和2.3mg/mL。2个体系比较发现A1、A2对O2·-的清除作用高于对·OH的清除作用。在DPPH体系中,A1、A2对DPPH有一定的清除,但A1较A2效果好,IC50分别为4和6 4mg/mL。由此可见,琼胶寡糖在不同体系中清除自由基的活性不同。琼胶寡糖在抗氧化方面具有很好的应用价值。     

麒麟菜膳食纤维对有益金属钙、锌、铁吸附作用的影响

采用麒麟菜（Eucheuma sp．）可溶性膳食纤维（Soluble dietary fiber,SDF）、不溶性膳食纤维（Insoluble dietary fiber,IDF）和总膳食纤维（Total dietary fiber,TDF）为研究对象,分别通过体外模拟哺乳类动物胃和小肠生理pH环境条件和体内吸附实验,研究麒麟菜膳食纤维对有益金属钙、铁、锌吸附作用的影响。体内吸附实验以SD大鼠为实验动物,以混饲法给大鼠喂食膳食纤维饲料（含膳食纤维10％）,实验期为5周。结果表明：（1）在体外模拟实验中,麒麟菜膳食纤维对有益金属离子Ca^2＋、Fe^2＋、Fe^3＋、Zn^3＋的吸附效果与pH、膳食纤维的可溶性和金属离子种类有关。在小肠环境中的吸附能力大于胃环境;IDF吸附能力最强,其次为TDF,SDF吸附能力最弱;各膳食纤维对Ca^2＋吸附作用最强,其次是Fe^2＋和Fe^3＋,最弱是Zn^2＋。（2）在动物体内实验中,各麒麟菜膳食纤维饲喂组动物的血清钙、血清锌和血清铁的含量随饲养时间略有增长,但与正常对照组无显著性差异（P〉0．05）。因此认为,麒麟菜可溶性膳食纤维、不溶性膳食纤维和总膳食纤维对有益金属离子Ca^2＋、Fe^2＋、Fe^3＋和Zn^2＋具有不同程度的体外吸附作用,但对动物体内的钙、锌、铁元素的正常生理水平无显著影响。[中国水产科学,2008,15（2）：323-329]     

麒麟菜膳食纤维对SD大鼠30天喂养实验和致畸作用

为评价麒麟菜（Eucheuma）膳食纤维的食用安全性，按照中国食品安全性毒理学评价方法对SD大鼠进行了30d喂养和传统致畸实验。30d喂养实验，分对照组和低、中、高剂量组，分别将麒麟菜膳食纤维用0％、1％、5％、10％的剂量添加于饲料中通过30d混饲方式给予受试物，实验期间观察其一般状况、体重、摄食量、食物利用率。第30天处死各组大鼠，对血液学指标、血清生化指标、器官以及组织病理学检查。传统致畸实验，分阴性对照组和10％饲料添加量的剂量组，另设阳性对照组，以浓缩鱼肝油25mL／kgBW灌胃，实验期间按时检查孕鼠体重，实验末期取胎检查其外观、记录死、活胎数及骨骼和内脏的异常情况。结果表明，30d喂养实验中，动物生长正常，无一死亡或中毒症状，各项观察指标不随剂量的增大和受试时问的延长出现剂量反应关系；致畸实验中，孕鼠生长良好，胚胎发育正常，胎鼠异常率均在自然发生率范围内。因此，可认为麒麟菜膳食纤维无毒、无致畸作用，食用安全可靠。     

Optimization of the preparation of bioactive peptides from Sinonovacula constricta and its hydroxyl free radical scavenging activity

以缢蛏为试验材料,采用羟自由基清除率为评价指标,从胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适水解用酶,在单因素试验基础上使用响应面法优化酶解工艺条件,考察缢蛏蛋白肽的羟自由基清除能力并通过SephadexG-15凝胶层析测定其分子质量分布.结果表明,碱性蛋白酶酶解制备的缢蛏蛋白肽清除羟自由基能力明显强于其他蛋白酶,优化后的碱性蛋白酶水解缢蛏蛋白工艺条件为底物浓度6 mg/ml、加酶量3％、pH8.0、温度55℃、酶解时间4h,蛋白肽的羟自由基清除率为76.60％,IC50值为1.89 mg/ml,蛋白肽中80％以上是分子质量小于1500 Da的小分子肽.     

蜈蚣藻多糖纯化及抗氧化作用的研究

采用热水浸提法提取蜈蚣藻多糖,通过对超氧阴离子（·O2-）、羟基自由基（·OH）清除效果的研究,评价了蜈蚣藻多糖的体外抗氧化活性,以及对蛋白脱除率和多糖损失率的分析,比较了TCA法和Sevage法脱蛋白的效果,利用Sephadex G-150柱纯化蜈蚣藻多糖,并分析了其部分理化性质和相对分子质量分布.结果表明,蜈蚣藻多糖对·OH清除率的IC50为4.62 mg/mL,对·O2-清除率的IC50为0.62mg/mL,具有体外抗氧化效果;Sevage法脱蛋白效果优于TCA法,蛋白脱除率达85.55％,多糖损失率为15.93％;蜈蚣藻多糖是一种以多糖为主、含有糖蛋白的复合物,其相对分子量的分布范围在3.5×105 ～1.2 ×105 Da.     

鲢酶解物对羟自由基的清除作用

通过测定酶解物对Fenton体系产生的羟自由基的清除效果，从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和复合蛋白酶5种酶中，筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解鲢制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的理想水解酶；用正交试验L9(3^4)对两种酶的水解条件进行了优化，并对最佳酶解条件下得到的酶解物进行Sephadex G-25凝胶柱分离，洗脱液分别在波长280nm处比色，测定酶解物中主要抗氧化活性肽的分子量分布。结果表明，木瓜蛋白酶在温度50℃、酶解时间15min、pH=6．5、酶质量分数1．50％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为88．2％；胰蛋白酶在温度55℃、酶解时间60min、pH=8．0、酶质量分数0．25％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为84．2％。木瓜蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时有最大羟自由基清除率峰，清除率为95．1％，在最大峰处酶解物中活性肽的分子量为2．2kDa；胰蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时也有最大羟自由基清除率峰，其清除率为89．6％，该峰处活性肽的分子量为14．2kDa。     

二种海胆性腺的脂质组成及其抗氧化活性

为分析马粪海胆和光棘球海胆性腺的脂质组成和抗氧化活性,采用核磁共振和气相色谱—质谱技术对2种海胆性腺油脂的脂质成分和脂肪酸组成进行分析,并通过DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法和超氧阴离子自由基清除法对其脂质的抗氧化活性进行研究。结果显示,马粪海胆和光棘球海胆性腺脂质均以甘油三酯和磷脂为主,胆固醇、胆固醇酯和游离脂肪酸含量较低。马粪海胆和光棘球海胆性腺总脂富含C20:4n-6和C20:5n-3,且二者总量分别占脂肪酸含量的35.88%和34.98%;同时2种海胆性腺的中性脂和极性脂的脂肪酸组成存在较大差异,中性脂以C14:0和C16:0等饱和脂肪酸为主,而极性脂以C20:4n-6和C20:5n-3等多不饱和脂肪酸为主。马粪海胆和光棘球海胆性腺脂质对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基均具有较好的清除能力,DPPH自由基IC₅₀分别为2.75和1.98 mg/mL,羟基自由基IC₅₀分别为0.33和0.29 mg/mL,超氧阴离子自由基IC₅₀分别为0.33和0.31 mg/mL。研究表明,马粪海胆和光棘球海胆性腺脂质具有较高的营养价值和抗氧化活性,可作为C20:4n-6、C20:5n-3和磷脂等功能性脂质因子的重要膳食来源。     

缢蛏蛋白肽制备工艺优化及其清除羟自由基作用

以缢蛏为试验材料,采用羟自由基清除率为评价指标,从胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适水解用酶,在单因素试验基础上使用响应面法优化酶解工艺条件,考察缢蛏蛋白肽的羟自由基清除能力并通过Sephadex G-15凝胶层析测定其分子质量分布。结果表明,碱性蛋白酶酶解制备的缢蛏蛋白肽清除羟自由基能力明显强于其他蛋白酶,优化后的碱性蛋白酶水解缢蛏蛋白工艺条件为底物浓度6mg/ml、加酶量3%、pH8.0、温度55℃、酶解时间4h,蛋白肽的羟自由基清除率为76.60%,IC50值为1.89mg/ml,蛋白肽中80%以上是分子质量小于1500Da的小分子肽。     

鳄鱼血蛋白酶解产物抗氧化特性和血管紧张素转化酶抑制活性研究

研究了鳄鱼血蛋白酶解产物的抗氧化特性和对血管紧张素转化酶（ ACE）的抑制活性。利用木瓜蛋白酶酶解鳄鱼血浆蛋白和血球蛋白,用分光光度法测定了酶解产物的抗氧化能力和用高效液相色谱（ HPLC）测定其ACE的抑制率。结果显示：鳄鱼血浆和血球蛋白酶解产物的亚铁离子螯合能力差异性不显著（ P＞0．05）;在0～5 mg/mL的浓度范围内,血球蛋白酶解产物清除ABTS自由基的能力大于血浆蛋白酶解产物,且在浓度为1 mg/mL时,两者清除ABTS自由基的能力差异性极显著（ P＜0．01）;血浆蛋白酶解产物清除DPPH自由基的能力在0～5 mg/mL的浓度范围内随着蛋白浓度的增加而升高,血球蛋白酶解产物在蛋白浓度为4 mg/mL处达到最大清除率,之后下降;在0～20 mg/mL的浓度范围内,两种酶解产物的还原力随着蛋白浓度的提高显著升高,但两者还原力的差异性不显著（ P＞0．05）;鳄鱼血浆和血球蛋白酶解产物对ACE具有良好的抑制力,其最大抑制率可分别达到75．56％和86．42％。研究表明,鳄鱼血蛋白酶解产物在体外具有抗氧化和抑制ACE的活性。     

3种藻类膳食纤维的功能及毒理评价

对马尾藻、江蓠和麒麟菜３种膳食纤维的常规成分和功能性进行分析,并采用小鼠及人体试验,对这３种藻类膳食纤维的某些毒理和生理功能进行了初步研究。结果表明,这３种膳食纤维均属于无毒级,未发现致突变作用,食用安全,对便秘患者具有良好疗效,但效果不同,以麒麟菜膳食纤维的效果最好。     

Chemical Characterization,Temperature Stability,and Enzymatic Studies on Edible Marine Algae Kappaphycus alvarezii (Doty)

Antioxidant activity of the marine alga Kappaphycus alvarezii was investigated. Methanol, acetone, petroleum ether, aqueous methanol, ethyl acetate, and chloroform extracts (1 mg/mL) of K. alvarezii were tested for their 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity. The values were compared with those of Vitamin C and butylated hydroxytoluene (BHT). Extracts showing positive results, when tested for DPPH free radical scavenging, were examined for dose effect, in-vivo hydrogen peroxide (H₂O₂) and hydroxyl radical scavenging assays. All extracts showed dose-dependent DPPH scavenging and significant hydroxyl radical scavenging activities (> 82.6%). The acetone, aqueous methanol, and methanol extracts of K. alvarezii showed the highest scavenging activity. Ethyl acetate extract showed a moderate activity of 62.9%. In the DPPH method, petroleum ether and hexane extracts showed less activity with IC₅₀ values of 118.58 ± 8.94 and 116.25 ± 7.14 μg/mL, respectively. Acetone, methanol, and ethyl acetate extracts exhibited IC₅₀ values of 57.32 ± 1.07, 61.31 ± 0.67, and 79.50 ± 1.59 μg/mL, respectively. K. alvarezii showed higher antioxidant activity in both in vitro and in vivo studies. Proton NMR studies revealed signals in the region 0.5 to 2.0 ppm suggesting the presence of steroidal identity in the extracts.     

海参水煮液酶解多肽的抗氧化活性

以海参水煮液的冻干粉为原料,选取中性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶分别酶解制备多肽,测定其对·OH、O2-·和DPPH·自由基的清除能力,并与合成抗氧化剂TBHQ对比.结果表明,3种蛋白酶酶解制得的海参水煮液多肽对·OH、O2-·和DPPH·自由基的清除能力均随样品质量浓度的升高而增强;其中,中性蛋白酶酶解制得的海参水煮液多肽清除·OH、O2-·和DPPH·自由基的IC50值依次为8.565、6.658和2.015mg/ml,其对O2·的清除能力优于TBHQ.经液相色谱法测定,中性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解制得的海参水煮液多肽分子量分别分布在＜2 500、＜3 500和＜1 000 D的小分子肽中.     

大型海藻对氮磷吸收能力的初步研究

实验选取了经济价值较高、生态特征较为明显且研究较为深入的三种大型海藻:海带(Laminaria japonica Aresch)、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)和龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)作为实验材料,在模拟自然环境条件(14℃、1500lx)和适宜的氮、磷浓度(50μmol/L、5μmol/L)下,研究其在72h内对氮、磷的吸收能力。实验数据测得,海带、鼠尾藻和龙须菜对氨氮吸收速率分别为0.397μmol/g·h、0.317μmol/g·h和0.300μmol/g·h,吸收效率为66.3%、53.6%和51.2%;对磷的吸收速率分别为0.036μmol/g·h、0.030μmol/g·h和0.033μmol/g·h,吸收效率为65.2%、55.7%和58.8%。结果表明,三种海藻对氮、磷均有明显的吸收效果,吸收能力顺序为:海带>龙须菜>鼠尾藻。     

Antioxidant Activity of Brown Seaweeds

Antioxidant potential of three brown seaweeds, Anthophycus longifolius, Sargassum plagiophyllum, and Sargassum myriocystum, obtained from the Gulf of Mannar region of India were evaluated utilizing different in vitro systems. Ethyl acetate (EtOAc) fraction of Anthophycus longifolius registered significantly greater hydroxyl radical scavenging ability (IC₅₀ 0.19 mg/mL) and was effective in stabilizing the 2,2′-azino-bis-3-ethylbenzothiozoline-6-sulfonic acid (IC₅₀ 1.23 mg/mL) and 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazil (DPPH) radicals (IC₅₀ 0.48 mg/mL) (p < 0.05). No significant differences in hydrogen peroxide (H₂O₂) scavenging and ferrous ion chelating properties of the EtOAc extracts of the seaweeds were apparent. The utilities of the reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) method hyphenated to diode-array detection for analyzing the fingerprints of phenolic constituents in the solvent extracts and fractions of the seaweeds were denoted. High-performance liquid chromatographic analysis indicated the presence of phenolic acids in the solvent extracts of seaweeds. This study demonstrated the potential use of A. longifolius as candidate species to be used as a nutritional food supplement/functional foods to increase the shelf life of food items for human consumption.     

Influence of Different Hydrolysis Processes by Trypsin on the Physicochemical,Antioxidant, and Functional Properties of Collagen Hydrolysates from Sphyrna lewini,Dasyatis akjei,and Raja porosa

ABSTRACT

Acid soluble collagen hydrolysates from the cartilages of Sphyrna lewini, Dasyatis akjei, and Raja porosa on different hydrolysis conditions by trypsin were prepared and named as S, D, and R, respectively. The hydrolysates (S1, D1, and R1) obtained from hydrolysis in pH 2.5, 3 h, 37°C presented wonderful foaming and emulsifying capacities, caused by their high average molecular weights (AMWs), high degree of Pro and Lys hydroxylation, and imino acid contents (17.1, 15.3, and 14.1%). At the concentration of 0.1% (w/v), the foaming capacities of S1, D1, and R1 were 104.75 ± 2.57, 63.87 ± 2.73, and 76.87 ± 2.02%; and the emulsifying activity indexes of them were 116.07 ± 1.89, 91.04 ± 1.79, and 123.85 ± 2.14 m²/g, respectively. Conversely, hydrolysates (S2, D2, and R2) obtained from hydrolysis in pH 7.8, 3 min, 37°C exhibited strong scavenging activity on 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical (EC₅₀ 0.568, 0.680, and 1.634 mg/mL), hydroxyl radical (EC₅₀ 0.253, 0.376, and 0.438 mg/mL), and moderate reducing power (0.0465–0.4702 at the concentration of 5 mg/mL), due to their low AMWs. The results indicated that S1, D1, and R1 could be used as emulsifiers and foaming agents, and S2, D2, and R2 could be used as natural antioxidants in food systems.     

刺参肠、性腺酶解多肽体外抗氧化作用研究

刺参（Apostichopus japonicus）肠和性腺是刺参加工过程中的副产物,为丰富其高值化利用的基础理论,研究了刺参肠、性腺酶解过程中可溶性蛋白和氨基酸态氮质量浓度变化,分析了酶解多肽对11-二苯基苦基苯肼（DPPH·）、羟基自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2^-·）的体外清除效果。结果显示,刺参肠和性腺经生物酶水解后,水解度分别为53.63%和63.40%,酶解液中可溶性蛋白质量浓度分别为4.62 mg·mL-1和5.01 mg·mL-1,氨基酸态氮质量浓度分别为0.43 mg·mL-1和0.56 mg·mL-1。刺参肠和刺参性腺酶解多肽清除DPPH·的半抑制质量浓度（IC50）分别为3.31 mg·mL-1和0.88 mg·mL-1,清除·OH的IC50分别为9.53 mg·mL-1和8.81 mg·mL-1,清除O-2·的IC50分别为6.42 mg·mL-1和3.22 mg·mL-1。刺参肠和刺参性腺酶解多肽具有一定的体外抗氧化效果,应用前景广阔。     

鲣鳔蛋白抗氧化酶解物制备工艺

为有效提高鲣鳔蛋白的附加值,研究以DPPH自由基清除率为抗氧化活性评价指标,采用蛋白酶酶解制备活性多肽的工艺,选用菠萝蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶7种酶在各自最适的条件下酶解,筛选出复合蛋白酶为最适用酶,通过单因素实验分别研究加酶量、溶液初始p H、酶解温度和时间对酶解物抗氧化活性的影响,在此基础上,根据响应面法优化鲣鳔抗氧化酶解物的制备工艺。结果显示,最佳酶解工艺条件为加酶量8.53 U/mg,p H 5.54,温度50.03°C,时间5.07 h。此外,利用超滤法对最佳条件下制备的酶解物进行初步分级,得到分子质量分别为大于10 000 u、3000~10 000 u和小于3000 u的3段组分,且这3段组分对DPPH自由基的半抑制浓度IC50值分别为0.64、0.52和0.37 mg/m L。研究表明,最优条件下制备的酶解物的DPPH清除率达72.00%,与模型预测值71.60%接近,且其中小于3000 u的组分具有较强的DPPH自由基清除活性。