PKC、PKA和TPK在血小板激活中的作用

目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）,蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）,酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）在血小板聚集激活中的作用。方法：本实验是在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Ａｐｙｒａｓｅ去除ＡＤＰ情况下,利用３２Ｐ－ＮａＨ２ＰＯ４标记猪血小板,然后以ＰＭＡ、凝血酶、ＰＧＦ１、腺苷等处理。以血小板聚集仪测定血小板聚集;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离血小板蛋白;并进行放射自显影;碱处理电泳凝胶检测酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）底物;ＴＬＣ进行磷酸氨基酸分离。结果：（１）随着ＰＭＡ激活ＰＫＣ,血小板发生聚集;（２）３５μｍｏｌ／ＬＰＧＦ１或１ｍｍｏｌ／Ｌｄｂ－ｃＡＭＰ不能抑制５０ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集,腺苷却能抑制ＰＭＡ诱导的血小板聚集（ＥＣ５０＝０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）．（３）ｄｂ－ｃＡＭＰ、腺苷都不能抑制１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的４０ｋＤ蛋白磷酸化,ＰＫＡ激活不能抑制ＰＭＡ激活的ＰＫＣ。（４）在ＰＭＡ、凝血酶激活的血小板中,ＰＫＣ、ＴＰＫ都发生激活,４０ｋＤ底物既是ＰＫＣ的底物又是ＴＰＫ的底物。结论：ＰＫＣ和ＴＰＫ在血小板聚集中起着重要的调节作用。     

蛋白激酶C激活剂PMA和钙离子通道A23187对血小板聚集、蛋白磷酸化的影响

本实验是以洗涤血小板为材料,研究蛋白激酶C在血小板聚集中的作用,结果显示:(1)PMA诱导血小板聚集发生缓慢,聚集浓度为10～500nM;A23187诱导的血小板聚集浓度为1～25μM,聚集发生迅速,PMA     

腺苷及类似物对猪血小板膜磷酯酰肌醇磷酸化的抑制作用

为进一步探讨腺苷的作用机理,本文研究了腺苷对猪血小板膜磷酯酰肌醇磷酸化的影响,其过程及结果如下:猪血小板膜与不同浓度的腺苷或100μmol/L的腺苷类似物及γ—~(32)P—ATP37℃反应5min,被标记的     

红细胞、淋巴细胞腺苷脱氨酶的测定及其正常值

腺苷脱氨酶(adenosinedeaminase 简称 ADA)是一种氨基水解酶,能催化腺苷氨基使之变成肌苷(次黄嘌呤核苷)。这种酶广泛存在于血液(红细胞、淋巴细胞、血小板及血浆)、心肌、肝脏等织织中,ADA 的测定对某些疾病的诊断有重要的意义。我们采用了 Beuffer 等介绍的方法,建立了红细胞及淋巴细胞 ADA 活性的检测程,现介绍于下。     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、肌动蛋白聚合的影响

本实验分别以阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Apyrase去除ADP,研究蛋白激酶C在血小板聚集、肌动蛋白聚合过程中的作用。研究结果表明:蛋白激酶C在血小板激活过程中起着重要的调节作用,蛋白激酶C     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、蛋白磷酸化和肌动蛋白聚合的影响

目的：进一步研究蛋白激酶C抑制剂Staurosporine在血小板聚集、蛋白磷酸化、肌动蛋白聚合中的作用。方法：以32P－Na2HPO4标记血小板；以血小板聚集仪测定血小板聚集；以SDS－PAGE分离蛋白质，进行放射自显影；以TritonX－100抽提法沉淀骨架蛋白。结果：（1）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板聚集，大部分抑制20μmol／LA23187诱导的血小板聚集。（2）1μmol／LStaurosporine几乎完全抑制0．5U／ml凝血酶、或10μmol／LPMA、或20μmol／LA23187诱导的血小板40kD和20kD蛋白磷酸化。（3）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板肌动蛋白聚合。结论：Staurosporine抑制蛋白激酶C的活性．从而抑制血小板的聚集和肌动蛋白聚合；蛋白激酶C在血小板聚集和肌动蛋白聚合中起着重要调控作用。     

肌醇脂质及cAMP第二信使系统在血小板活化因子诱导血小板聚集中的作用

本文观察了蛋白激酶C激动剂PMA、Ca~(2+)载体A23187及蛋白激酶A激动剂SPcAMPS和抑制剂Rp—cAMPS对PAF诱导兔血小板聚集的影响,并采用~3H—Inositol和~(14)C—Adenine同时标记血小板中肌醇和腺     

腺苷及类似物对猪血小板膜磷脂酰肌醇磷酸化的抑制作用

猪血小板膜与不同浓度的腺苷或100μmol/L的腺苷类似物及γ—~(32)P—ATP37℃反应5min.被标记的磷脂酰肌醇—4—单磷酸通过薄层层析法分离、放射自显影定位、液体闪烁计数定量的结果表明:腺苷可强烈抑制猪血小板膜磷脂酰肌醇磷酸化,半数抑制率为14μmol/L;腺苷类似物cAMP、5′—氯—5′—脱氧腺苷、腺嘌呤、α′—脱氧腺苷、AMP、阿糖腺苷、cGMP在浓度为100μmol/L时对猪血小板膜磷脂酰肌醇磷酸化有不同程度的抑制作用。     

HPLC法同时测定地顶孢霉培养物中腺苷、虫草素和麦角甾醇含量

为建立同时测定地顶孢霉培养物中腺苷、虫草素和麦角甾醇含量的高效液相色谱法,选择色谱柱为Waters C₁₈柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),流动相为水-乙腈,梯度洗脱,检测波长270 nm,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,进样量20μL。结果表明：腺苷、虫草素和麦角甾醇在浓度20～640μg·mL^-1(X)范围内与峰面积(Y)呈良好的线性关系,腺苷、虫草素和麦角甾醇的回归方程分别为Y=98.53X+586.26 (R²=0.999 3)、Y=124.16X+277.69 (R²=0.999 7)、Y=57.652X+107.47 (R²=0.999 6)。腺苷、虫草素和麦角甾醇的加标回收率分别为95.96%～99.95%、97.43%～99.94%和96.31%～99.95%。该方法准确度高、重复性好、灵敏度高,适用于地顶孢霉培养物中腺苷、虫草素和麦角甾醇含量的测定,为其质量监控提供了技术支撑。     

藏鸡肌肉中肌苷酸含量潜在影响基因概述

肌苷酸(Inosinemonphosphate,IMP)是一种在核糖核酸中发现的核苷酸,是鸡肉鲜味特性的主要物质基础,同时具有治疗白细胞减少症、血小板减少症和肝硬化等功能。氨基咪唑氨甲酰核苷酸转甲酰基酶/次黄嘌呤核苷酸环水解酶基因(PURH)、腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因、腺苷一磷酸脱氨酶(AMPD)基因、GARs-AIRs-GART基因和谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(GPAT)基因是影响鸡肉肌苷酸含量的主要因素。本文通过对上述相关基因的综合分析,以期为西藏地区藏鸡肌肉中肌苷酸的研究提供基础资料。     

环磷酸腺苷(cAMP)对绿豆种子萌发及幼苗生长的影响

试验以绿豆种子为试材,研究环磷酸腺苷对其萌发及幼苗生长的影响。试验设置5个环磷酸腺苷浓度处理(20,40,60,80,100 mg·L~(-1)),以清水、15 mg·L~(-1)多效唑和2 mg·L~(-1)油菜素内酯作为3个对照组,测定各处理对绿豆种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:与清水对照组相比,环磷酸腺苷浸种后,提高了绿豆种子发芽势;除80 mg·L~(-1)浓度外,其他环磷酸腺苷处理均可提高绿豆种子发芽率;随着环磷酸腺苷溶液浓度的增加,绿豆幼苗的叶长、叶宽、鲜质量、干质量、胚轴和根长呈先上升后下降趋势。综合考虑绿豆种子萌发和幼苗生长,5个环磷酸腺苷浓度中以60 mg·L~(-1)处理的种苗效果最佳。     

腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶研究进展

腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylase,AGPase)是植物和细菌中淀粉和糖原合成的限速酶,该酶催化l-磷酸葡萄糖(G-1-P)与三磷酸腺苷(ATP)反应形成腺苷二磷酸葡萄糖(ADPG).有关该酶的定位、功能、酶学特性、分子生物学已经进行了较为深入和系统的综述.     

腺苷及其类似物对猪红细胞膜上磷脂酰肌醇磷酸化的抑制作用

本文研究腺苷及其类似物对猪红细胞膜上磷脂酰肌醇磷酸化的影响,结果表明:(1)腺苷对磷脂酰肌醇磷     

植物SnRK1蛋白激酶研究进展

植物SnRK1蛋白激酶家族(Sucrose non-fermenting 1-related protein kinase 1)属于Ser Thr类蛋白激酶,广泛存在于生物体中,在维持生物体内能量稳态方面发挥着重要作用。本文主要对植物SnRK1蛋白激酶复合体的结构、活性调节、SnRK1参与植物生长发育和品质的调控以及参与植物抗逆4个方面进行综述,并对SnRK1蛋白激酶在育种应用方面进行了讨论。     

坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展

坏死性凋亡,即程序性坏死,主要由细胞因子(TNF-α、IFN-α、IFN-γ)、Toll样受体(TLR3、TLR4、TLR9)以及核酸(DNA、RNA)感受器等介导起始过程.受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)、受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)和底物混合谱系激酶样蛋白(MLKL)参与坏死性凋亡的发生,MLKL是关键...     

FGF-21对大鼠血小板聚集和活化的抑制作用

临床上大部分抗血小板药物存在继发性出血等副作用,亟需寻找一种安全有效的抗血小板药物。二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)是介导血小板聚集的主要物质,文章探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是否抑制ADP或AA诱导大鼠血小板聚集和活化。将大鼠分为正常对照组、正常鼠血小板活化组、阿司匹林干预后血小板活化组、FGF-21高、中、低剂量干预后血小板活化组。给药干预后提取各组血小板,分别用ADP或AA处理,观察处理后血小板聚集情况以及P选择素和血栓素(TXB2)表达水平。与正常对照组相比,正常鼠血小板经ADP或AA处理活化后,血小板聚集率显著升高,血浆中P选择素和TXB2含量明显上升;与正常鼠血小板经ADP或AA处理活化后相比,经阿司匹林和FGF-21干预后分别经ADP或AA处理活化后的血小板聚集率显著下降,血浆中P选择素和TXB2含量显著下降;FGF-21干预组经ADP或AA活化后,血小板聚集率、P选择素和TXB2含量下降水平呈明显剂量依赖性。目前国内外尚未发现FGF-21对血小板聚集与活化作用的相关报道,研究首次证明FGF-21具有抑制ADP和AA诱导血小板聚集和活化作用及明显的抗血凝作用,填补FGF-21在抗血凝研究领域空白,为开发安全有效的抗血凝药物提供理论依据。     

蛋白激酶C在血小板聚集中的作用

本实验以洗涤血小板为材料,在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢情况下,研究血小板不同激动剂对蛋白激酶C的作用.血小板激动剂,在聚集浓度范围内,除肾上腺素外,PAF、ADP、凝血酶、胶原、PMA和A23187对     

热胁迫对葡萄叶片中蛋白激酶活性的影响

 以葡萄品种京秀（Vitis vinifera L. cv. Jingxiu）一年生扦插苗为试材，40℃高温处理30 min，并以25℃为对照，采用体外底物磷酸化方法对叶片中蛋白激酶的活性进行了测定。结果表明，热胁迫处理后，叶片中蛋白激酶在底物髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)浓度为0.5 mg·ml-1时，其活性达到最大(7 678.7 cpm)，而后随底物浓度的进一步增加，其活性下降。Mg2+浓度为5 mmol·L-1时，蛋白激酶活性达到最大(8 165.8 cpm)。Ca2+对蛋白激酶活性的影响极弱，Mn2+对蛋白激酶活性的激活没有影响。ATP浓度为50 μmol·L-1时，蛋白激酶的活性最大（7 900.9 cpm），比对照高4.7倍。在以组蛋白-Ⅲ（histone-Ⅲ）为底物时，蛋白激酶的活性很微弱，且Mg2+和Ca2+对蛋白激酶有极弱的激活作用。     

不同食用方式下蝉花麦角甾醇、虫草素、腺苷和多糖的比较

开展对蝉花不同食用方式下其子实体、菌核、浸提液和浸提后蝉花,进行麦角甾醇、虫草素、腺苷和多糖的定量研究,以期得出有实用价值的差别性数据,为对蝉花进一步的综合利用提供理论数据。不同食用方式分为直接食用蝉花粉末、水煮后制剂和水煮后蝉花整食。根据市场上将蝉花质量高低按子实体大小划分,分别开发食用蝉花子实体、蝉花菌核、蝉花浸提液和浸提后蝉花。研究结果表明:(1)麦角甾醇。子实体中为0.34±0.05 mg·g~(-1),浸提蝉花中为0.31±0.03 mg·g~(-1),菌核中为0.07±0.01 mg·g~(-1),浸提液中未检出。(2)虫草素。子实体中为0.54±0.04mg·g~(-1),浸提蝉花中为0.28±0.02 mg·g~(-1),浸提液中为0.37±0.03 mg·g~(-1),菌核中为0.14±0.02 mg·g~(-1)。(3)腺苷。子实体中为0.61±0.04 mg·g~(-1),浸提蝉花中为0.35±0.05 mg·g~(-1),菌核中为0.30±0.06 mg·g~(-1),浸提液中为0.45±0.04 mg·g~(-1)。(4)多糖。菌核中为(14.84±1.79)%,浸提蝉花中为(13.34±0.95)%,子实体中为(13.17±1.02)%,浸提液中为(9.61±0.71)%。结果显示,蝉花子实体、菌核与浸提前后蝉花活性成分存在差异。     

猪血小板中蛋白激酶CK2的天然底物

目的：寻找猪血小板中蛋白激酶ＣＫ２可能的天然底物。方法：以［γ－３２Ｐ］ＧＴＰ为磷酸供体,用精胺激活蛋白激酶ＣＫ２和用肝素抑制蛋白激酶ＣＫ２活性,然后用放射自显影的方法检测底物蛋白磷酸化。结果：精胺可增加１７．４ｋＤ蛋白磷酸化;肝素能完全抑制４３ｋＤ和６６ｋＤ底物蛋白磷酸化,肝素还增加３９．４ｋＤ底物磷酸化。结论：猪血小板中１７．４ｋＤ、４３ｋＤ和６６ｋＤ的蛋白质可能是蛋白激酶ＣＫ２的天然底物