仔幼犬常见死因及提高成活率的有效措施

仔幼犬死亡率高是目前制约犬业发展的关键因素,造成仔幼犬死亡的原因多种多样,但主导因素是对母犬和仔幼犬饲养管理不当引起仔幼犬感染疾病致死。及时发现、科学诊治犬瘟热、犬细小病毒肠炎等常见疾病可以显著提高幼犬成活率。此外,加强对妊娠母犬及仔幼犬的饲养管理、对仔幼犬进行程序化免疫等也是提高仔幼犬成活率的重要措施。     

犬瘟热病毒疫苗免疫逃逸株的血凝素基因变异研究

为了弄清是否有新基因型犬瘟热病毒出现,对山东省不同地区的免疫水貂、狐狸和犬进行了犬瘟热病毒检测,扩增了病毒核衣壳基因和血凝素基因(H),并对13个犬瘟热病毒山东株(8株貂源,2株狐狸源,3株犬源)血凝素基因进行了测序。结果表明,13个犬瘟热病毒山东株之间H基因核苷酸同源性为99.1%~100.0%,均为Asia-1型,这也是我国目前水貂犬瘟热病毒唯一的基因型。与2012年之前的犬瘟热病毒中国分离株及疫苗株相比,13个毒株H基因有4个氨基酸的一致性变异,即P200S、M263I、I542N和Y549H,N-糖基化位点比Onderstepoort株多6或7个,比CDV3株多3或4个。抗原性分析表明,与疫苗株相比,13株山东株在540-549位氨基酸出现一个新的抗原区域,210-230,327-347位的抗原区域也与疫苗株不同,这些变异可能是我国貂狐犬瘟热免疫失败的原因。     

养好仔貉从管理抓起

一、母貉产仔前后的管理1.母貉产前拔毛。在母貉预产期的前5天,轻轻抓出母貉,拔掉其腹部的毛,将乳头露出,以防母貉腹部毛丛过密,仔貉出生后因找不到乳头、吃不着奶而饿死。     

犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因免疫小鼠诱导抗体的研究

将犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)核衣壳蛋白基因(Nucleocapsid protein, N)的N蛋白基因克隆到pMD-18T载体,经酶切分析测序获得阳性重组质粒。采用EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切后定向克隆进真核表达载体pcDNA中,电泳测序筛选阳性克隆pcDNA-N,转染COS-7细胞,IFA验证结果显示转染的COS-7细胞胞浆中表达了CDV的N蛋白。与弗氏佐剂乳化完全后将重组质粒pcDNA-N腹腔注射8周龄BABL/c小鼠,同时设pcDNA原载体做阴性对照,2周为间隔共免疫3次,三免两周后采血,ELISA检测效价。结果显示：pcDNA-N试验组抗体滴度为101.62±0.164,对照组为100.52±0.56。表明犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因免疫小鼠可诱导机体产生特异性体液免疫。     

猪圆环病毒II型感染抑制伪狂犬病病毒疫苗的体液免疫反应

为了探讨猪圆环病毒II型(PCV2)感染对伪狂犬病病毒(PRV)疫苗体液免疫反应的影响,检测了PCV2实验感染仔猪血清中PRV疫苗抗体含量的动态变化。将仔猪随机分成二组,一组仔猪进行PCV2接种和PRV疫苗免疫而作为PCV2组;另一组仔猪不予PCV2接种但进行PRV疫苗免疫而作为对照组。所有仔猪在PCV2接种后14天均进行PRV弱毒疫苗免疫,用间接ELISA检测仔猪血清中病毒特异性抗体;到PCV2接种后14天,PCV2组仔猪全部出现PCV2病毒血症。在PRV疫苗免疫后7天,多数仔猪血清中可检测到疫苗抗体之后疫苗抗体含量逐渐上升,在免疫后14天时对照组疫苗抗体水平显著(P<0.05)高于PCV2组,但在免疫后21天时两组之间抗体水平没有差异。研究结果显示：PCV2实验感染仔猪的PRV疫苗抗体产生出现延迟,表明PCV2感染可抑制PRV疫苗诱导的体液免疫反应。     

毛皮动物犬瘟热的中西医疗法

犬瘟热,是由犬瘟热病毒引起的一种传染性极强的急性传染病,除幼犬最易感染外,毛皮动物中的狐、水貂和貉也十分易感。近年来,犬瘟热的流行给养犬业和毛皮动物饲养业造成了巨大的损失,是我国特种毛皮动物养殖的第一大传染病。现将犬瘟热的诊疗技术总结如下：     

嵌合猪圆环病毒对仔猪的免疫保护研究

为分析嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)对仔猪的免疫效力,检测了PCV1-2免疫诱导仔猪产生抗猪圆环病毒II型(PCV2)感染的保护性免疫。将10头28日龄健康普通仔猪随机平均分成两组,一组肌注免疫106.05TCID50 PCV1-2作为免疫组;另一组不予免疫作为对照。到免疫后28天,免疫组仔猪血清中PCV2 ORF2蛋白抗体全部转为阳性。在免疫后28天,所有仔猪经口鼻予以106.95TCID50 PCV2攻击。攻毒后,免疫组仔猪全部保持临床健康,而对照组仔猪全部出现了PCV2疾病的临床症状;免疫组血清和淋巴组织中PCV2 DNA载量均显著(P<0.05)减少;对照组仔猪淋巴组织普遍出现中度到重度的淋巴细胞减少与组织细胞浸润,而免疫组没有。研究数据表明：PCV1-2免疫诱发了仔猪对PCV2感染的保护性免疫,有望成为候选PCV2弱毒疫苗。     

猪流感H3N2亚型HA 基因真核表达载体构建及其对小鼠的免疫效果的研究

采用PCR方法扩增出猪流感病毒四川分离株H3N2亚型HA全基因,将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,成功构建出真核重组质粒pcDNA3.1-HA.采用纯化后的pcDNA3.1-HA质粒和灭活全病毒以不同的组合免疫4～6周龄的Balb/c小鼠,免疫2次间隔3周,加强免疫3周后,小鼠接种致死量的H3N2病毒;检测免疫后小鼠的血清抗体水平及攻毒后肺部病毒残留.结果表明,pcDNA3.1-HA质粒和灭活全病毒免疫小鼠后,均能够产生一定的免疫效果,能为小鼠提供H3N2亚型猪流感病毒保护.     

造成繁殖母猪死胎的6种病毒病

<正> 近几年,母猪繁殖障碍性疫病广泛流行,严重影响养猪生产的健康发展,造成繁殖母猪死胎的病毒性疾病主要有6种,将其预防免疫经验介绍如下:1.高致病性猪蓝耳病高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株引起的一种急性高致死性传染病。母猪感染后流产,产死胎、弱仔等。仔猪感染后表现呼吸困难、败血症等症状,发病率可达100%,死亡率可达50%以上。临床表现     

膜联蛋白B1在猪囊尾蚴免疫逃避作用的研究进展

膜联蛋白是一类有效的内源性调节蛋白,在Ca²⁺存在的条件下与膜磷脂结合,参与细胞活动的多种功能,其与肿瘤发生、自身免疫性疾病、病毒和寄生虫感染等密切相关。作为膜联蛋白家族成员Annexin B1具有独特的氨基酸残基结构,与不同种属的寄生虫入侵特异性宿主密切相关。本文主要阐述了膜联蛋白的种类及膜联蛋白B1在猪囊尾蚴感染宿主机体过程中免疫逃避的作用,旨在探索其猪囊尾蚴感染的免疫逃避机制。深入对膜联蛋白B1和囊尾蚴之间相互关系的进一步了解,以及膜联蛋白B1在寄生虫免疫中更深入的研究,对寄生虫免疫逃避的生物学意义和寄生虫病诊断治疗提供了相关的策略。     

犬瘟热病毒核衣壳蛋白N基因的真核表达及鉴定

根据GenBank发表的犬瘟热病毒N基因全序列,设计合成了1对特异扩增CDV N基因的引物。以山东泰安分离的CDV-FOX-TA株细胞毒中提取病毒RNA来制模板,利用RT-PCR扩增出了1.6kb的N基因,将其克隆到pIREShyg载体上,构建了pIRES-N真核表达载体。然后通过磷酸钙共沉淀法转染CHO-K1细胞,通过潮霉素筛选得到阳性克隆,间接免疫荧光实验（IFA）鉴定N基因在CHO细胞中的表达,并用RT-PCR方法从转录水平证实N基因在CHO-K1细胞中的表达,最终建立了CHO/ CDV-N细胞株,为犬瘟热病毒的血清学检测和基因疫苗的研制奠定了基础。     

一起猪圆环病毒和副伤寒混合感染的诊治

2009年3月中旬,山东省鱼台县老砦乡某猪场从外地购进100头仔猪,1周后个别猪只出现发热、腹泻、皮炎等症状6经过十几天的治疗,病猪采食反复无常,用消炎解热药物注射治疗后就吃点食,停药后就停食,不但没有从根本上制止发热和腹泻,且猪场原有的50头体重为30-40千克的仔猪也部分感染发病,但哺乳仔猪、母猪和育肥猪均未发病。     

生猪重大疫病“三苗两点注射”免疫方法和优点

生猪重大疫病"三苗两点注射"免疫方法,是指将国家要求强制免疫的猪瘟、高致病性猪蓝耳病两种疫苗同时用猪瘟疫苗稀释液或高致病性猪蓝耳病疫苗稀释液按1∶1∶1的比例稀释后一次性注射到猪一侧颈部肌肉内,另一侧颈部同步注射猪O型口蹄疫合成肽疫苗的免疫方法。1.操作要点一是稀释疫苗。疫苗稀释前应恢复到     

鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的近期免疫效力检验

应用３批鸡传染性鼻炎价油乳剂灭活疫苗进行了安全性和近期免疫效力检验,安全性试验采用１５只鸡进行,胸肌注射疫苗４￣５ｍＬ／只后,逐日观察,结果鸡只食欲、精神未见异常,２周后观察,注射部位未发现明显异常和病变。用该疫苗免疫（０．５ｍＬ／ｋｗ ）后的鸡只对Ａ型高致病力菌株的攻击保护率可达１００％,对Ｃ型高致病力菌株的攻击保护率为９３．３％。采用Ｂ－ＥＬＩＳＡ和ＳＰＺＡ对鸡群的抗体水平的评估表明该疫苗可激发产生较高的抗体水平。     

表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白抗原表位乳酸菌对实验小鼠免疫功能的影响

为了探讨表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白抗原表位乳酸乳球菌对小鼠安全性及免疫功能,以口服的方式给实验小鼠免疫重组乳酸菌,观察小鼠的精神状态,采用ELISA试剂盒方法检测免疫指标。结果表明：重组乳酸菌对小鼠的精神状态及体重均无影响,能显著提高小鼠血清中IgG和粪便sIgA的含量。与对照组相比,免疫后1周、2周、5周的血清中IgG的含量差异显著(P<0.05),3周、4周差异极显著(P<0.01),表明能显著提高小鼠体液免疫水平;能显著提高外周血中T淋巴细胞增殖情况,与对照组相比,差异极显著(P<0.01),表明能显著提高小鼠细胞免疫水平。表达TGEV S蛋白抗原表位乳酸菌能显著提高小鼠体液免疫和细胞免疫水平,具有良好的免疫原性,且安全可靠。     

金钗石斛茎尖培养脱毒和检测

选用金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl．）无菌试管苗剥取0．1～0．4mm的茎尖组织，接种在滤纸桥制作成的液体培养基上进行培养，10周后待苗长至2～3cm高时，采用目测症状法、指示植物鉴定法、斑点酶联免疫吸附检测法（DOT—ELISA）和电镜观察法进行病毒检测鉴定。结果表明：无病毒石斛苗可明显表现出叶色浓绿、株高茎粗增加等特点。用酶联免疫法和电镜观察法检测，结果客观、可靠，更加彻底。     

TUNEL法检测类猪圆环病毒2型因子P1诱导猪免疫器官细胞凋亡的研究

研究类猪圆环病毒2型因子P1体内诱导的细胞凋亡作用。将P1分子克隆接种普通仔猪,用原位末端标记技术(TUNEL)检测猪的扁桃体、脾脏、腹股沟淋巴结等免疫器官细胞的凋亡情况。猪感染P1后21和35 d的扁桃体、脾脏和腹股沟淋巴结等免疫器官细胞出现了凋亡。P1可能引起猪的免疫抑制。     

HCG对黄体发育不全奶牛受胎率的影响试验

对黄体发育不全的奶牛分别在输精后的第3、4、5、6、7、8、9、10天肌肉注射HCG3000IU 1次，60d直肠检查统计怀孕牛头数，同时对输精后的奶牛在排卵后第0天和第5天分别肌肉注射HCG3000IU，并用酶联免疫法测定第0～14天孕牛排卵后血液中孕酮浓度。结果显示对于黄体发育不全的奶牛输精后第5天注射效果最好；排卵时注射HCG血液中孕酮和对照组基本相同，排卵第5天注射HCG，血液中孕酮浓度从第6天开始比对照组明显提高。     

PRRSV 2b蛋白与LGALS1相互作用的验证研究

旨在研究猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用。本研究利用酵母回返试验、GST-pull down试验、免疫共沉淀试验3种方法对LGALS1与PRRSV 2b蛋白间是否相互作用进行验证。结果表明:在酵母回返试验中,含有LGALS1与2b基因的杂交酵母菌株在SD/-Trp-Leu-His-Ade/AbA/X-α-gal的平板上生长出蓝色菌落;在GST-pull down试验中,LGALS1与2b蛋白反应的样品经Western blot可检测到融合蛋白带;在免疫共沉淀试验中,LGALS1与2b蛋白反应的样品经HA单抗沉淀后,经Western blot可检测到相应蛋白带。该研究证明了LGALS1与PRRSV 2b蛋白间发生相互作用,为研究PRRSV感染途径和增殖过程提供了理论基础。     

复方中药制剂“球宁”对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡红细胞免疫功能的影响

用青蒿、常山等组成复方中药制剂“球宁”,并对其进行超微粉碎加工成微粉制剂。按不同比例添加与饲料中,饲喂人工感染柔嫩艾美耳球虫的雏鸡,以磺胺喹啉钠为对照,在感染后8d剖杀,检测血浆中红细胞C3b受体(RBC-CR1)花环率和免疫复合物(RBC-IC)花环率,以观察“球宁”及其微粉制剂对人工感染柔嫩艾美耳球虫的雏鸡的红细胞免疫功能的影响。结果,粗粉组(2%)、微粉组(2%)、微粉组(1%)三组的红细胞C3b受体花环形成率比阳性对照组有明显提高(p<0.05);红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环形成率比阳性对照组有所降低(p<0.01)。说明所试药物能改善红细胞的免疫粘附功能,显著降低血浆中免疫复合物的含量,降低球虫病对机体的损伤。