锯缘青蟹呼肠孤病毒p40蛋白的体外表达与单克隆抗体制备

锯缘青蟹呼肠孤病毒(Scylla serrata reovirus,SsRV)第9节段(S9)编码的p40蛋白可能为病毒的甲基转移酶(methyltransferase)。为了便于确认p40在病毒复制过程中扮演的角色,将S9片段的开放阅读框(ORF)克隆到原核表达载体pET28a(+),实现了在宿主表达菌E.coli BL21(DE3)中的高效表达,进而纯化了重组表达蛋白p40(rp40),并制备了抗SsRV p40蛋白的2株单克隆抗体(4B7、3E5)。经Western blot分析表明,2株单克隆抗体均可特异地识别rp40蛋白,以及识别SsRV病毒蛋白中分子量为46 ku和40 ku 2条蛋白条带。实验结果不但确认SsRV p40为SsRV的结构蛋白,也提示p40和p46蛋白可能具有相同的抗原表位。为该蛋白的后续功能研究奠定了基础。     

锯缘青蟹

锯缘青蟹不仅两个钳子大,个头儿也很大,一只螃蟹足足有500g,在市场上能卖100元／500g。大青蟹除了好吃之外,还含有丰富的矿物质、维生素,不仅能够鲜食还能药用。吃螃蟹时通常在调料里放姜末,祛除寒性,而大青蟹是温性食物,所以食用它不吃姜也不会闹肚子,这个优势是锯缘青蟹所独有的。     

印太地区锯缘青蟹的养殖和育肥

印太地区锯缘青蟹的养殖和育肥中国水产科学研究院信息所王宇锯缘青蟹（Ｓｅｙｌｌａｓｅｒｒａｔａ）在海味爱好者中已经普及。由于在主要消费国家和地区马来西亚、新加坡、台湾省和香港需求量增加，而供应量减少。所以锯缘青蟹正在来源于印太地区国家，包括孟加拉国、印...     

人工感染呼肠孤病毒对拟穴青蟹部分免疫因子的影响

采用注射和浸泡的方式人工感染拟穴青蟹呼肠孤病毒,研究了其对拟穴青蟹血细胞密度以及血清中酚氧化酶（PO）、超氧化物歧化酶（SOD）和碱性磷酸酶（AKP）活力的影响.结果表明：注射（第Ⅱ组）和浸泡（第Ⅳ组）方式均能感染健康青蟹,病发死亡时间为7～9 d,死亡率达100%,血细胞平均密度在试验36～72 h间迅速上升并达最高值,其血细胞密度最高值分别为1.4008×107cells/mL与1.8243×107cells/mL;感染病毒的青蟹PO活性均大致呈现下降的趋势,其中,第Ⅳ组感染12 h青蟹PO活性相对对照组显著升高（P〈0.05）,其值为（6.90±1.54）,达实验所测PO活性最高值;各实验组血清SOD活性呈无规律的变化;AKP活性感染组与对照组表现不同.表明测定血细胞密度以及PO和AKP活性可用来辅助诊断青蟹疾病,而SOD活性变化不能很好地表征青蟹受病毒感染的状况.     

对虾与锯缘青蟹混养的可行性及其增产措施

对虾与锯缘青蟹Scylla serrata(Forskal)混养（下称虾蟹混养）国内、外尚未，凶有系统的理论研究资料，作者经过几年研究，证实虾触混养非保可行，而且可以提高海水池塘综合经济效益，本文从理论与实践结合上论述虾触混养的可行性及其增产措施。     

锯缘青蟹系列配合饲料饲养试验

锯缘青蟹是我国主要的海水养殖蟹类之一，其养殖已取得了巨大的经济和社会效益，被视为我国海水养殖的一个新的经济增长点。对锯缘青蟹系列配合饲料进行饲养试验，经32d饲养的结果表明，饲喂配合饲料的幼蟹生长性能良好、存活率高；经90d饲养的结果表明，开发的系列配合饲料能满足锯缘青蟹不同生长发育阶段的营养需求和摄食习性，促进锯缘青蟹正常蜕壳生长，且具有良好的诱食性、水中稳定性。Ⅰ期幼蟹饲养90d的最终存活率达75．9％，每只均重达205．0g。     

锯缘青蟹雄性腹肢的结构和功能

于2000年6月至2002年10月,采用扫描电镜方法对锯缘青蟹（Scylla serrata）雄性附肢结构进行观察。结果表明,青蟹雄体输精管在第八胸节通向一个短的肌肉质的阴茎开口。第一腹肢由一个基部原肢和一个延长的内肢组成,表皮环包,形成一个交接管。第二腹肢吻合这个表皮管,而阴茎则放在内肢的基部侧面。交配时,阴茎在肌肉作用下,精液射到第一腹肢的射精管中,射出物在第二腹肢的活塞样的泵作用下,沿着管腔向里推进。第一腹肢顶端侧扁状、具侧缝,前部表面具棘突状和腺体孔,弯曲部棘较大。侧缝处具细长的棘和羽状刚毛,刚毛基部为杯状凹陷。     

锯缘青蟹雄性腹肢的结构和功能

于2000年6月至2002年10月,采用扫描电镜方法对锯缘青蟹（Scylla serrata）雄性附肢结构进行观察。结果表明,青蟹雄体输精管在第八胸节通向一个短的肌肉质的阴茎开口。第一腹肢由一个基部原肢和一个延长的内肢组成,表皮环包,形成一个交接管。第二腹肢吻合这个表皮管,而阴茎则放在内肢的基部侧面。交配时,阴茎在肌肉作用下,精液射到第一腹肢的射精管中,射出物在第二腹肢的活塞样的泵作用下,沿着管腔向里推进。第一腹肢顶端侧扁状、具侧缝,前部表面具棘突状和腺体孔,弯曲部棘较大。侧缝处具细长的棘和羽状刚毛,刚毛基部为杯状凹陷。     

锯缘青蟹血蓝蛋白酚氧化酶活性研究

以锯缘青蟹Scylla serrata为研究对象,运用亲和层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、十二烷基璜酸钠(SDS)-PAGE、Western-blot以及酚氧化酶活性测定等方法研究了锯缘青蟹血蓝蛋白的酚氧化酶活性以及几种金属离子对其酚氧化酶活性的影响.研究结果表明,锯缘青蟹血蓝蛋白在没有任何诱导物作用的情况下表现出酚氧化酶活性,胰蛋白酶对此活性有轻微抑制作用;与对照组相比,Ca2 和Cu2 能使血蓝蛋白酚氧化酶活性显著增强,增强率分别为281%和273%;EDTA可显著抑制Cu2 对血蓝蛋白酚氧化酶活性的激活作用,抑制率达78.5%.由此可知,锯缘青蟹血蓝蛋白确有酚氧化酶活性,且受Ca2 、Cu2 等金属离子作用的影响.     

锯缘青蟹的营养需求及其健康养殖

概述了国内外近10年来锯缘青蟹营养需求及其健康养殖的研究进展，包括青蟹的蛋白质（氨基酸）、脂类（脂肪酸、磷脂、胆固醇等）和碳水化合物等的营养需求与亲体生殖营养等方面的研究成果及青蟹健康养殖的技术关键，指出健康养殖是青蟹养殖的发展方向，是建立在科技创新基础之上的一项综合性技术措施，各个技术环节相互联系、相互制约、相辅相成，贯穿于整个养蟹过程的始终。     

锯缘青蟹(Scylla serrata)越冬日光温室的热环境模拟研究

提高浅海滩涂开发的科技含量是当前海洋开发中的重要课题之一.日光温室被称为"具有中国特色的设施园艺",由于其具有良好的保温、节能效果,被广泛应用于北方地区的蔬菜和花卉生产.已有多位学者对其作过光、热环境及建筑结构等的试验和理论研究,并进行了优化,将它用于水产品的越冬养殖是日光温室发展中的又一新领域.影响日光温室热环境的主要因素有:太阳辐射、风速、气温、相对湿度等.附带水池的日光温室中的水有较强的蓄热能力,其热环境有别于种植温室;另一方面日光温室具有保温性,其内的水池又有别于天然水池.根据有关试验的结果,并借鉴前人关于种植温室和天然水池的结论,本文建立了用于锯缘青蟹越冬的日光温室的热环境数学模型.经试验验证,该模型的计算值与实测值吻合较好,对水产品的越冬管理具有重要意义.     

盐度变化对锯缘青蟹Scylla serrata免疫因子的胁迫影响

在实验室条件下测定了在盐度5.0,10.0,17.5,25.0,35.0胁迫0,12,24,48,72和96 h,锯缘青蟹血细胞总数(THC)、血细胞吞噬能力及其血清中溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化物酶(POD)、酚氧化酶(PO)、溶血素等免疫相关因子的活力变化。结果表明：各梯度盐度胁迫下THC明显下降,其他免疫指标均在12至24 h出现一个峰值变化,而后趋于平稳。在12 h盐度5.0和35.0组吞噬百分比(PP)、吞噬指数(PI)值高于对照组,盐度10.0和25.0组的LZM,PO活力显著高于对照组,除盐度5.0组以外的ACK,APK活力均高于对照组;POD、溶血素活力在盐度10.0和25.0组显示随时间的延续而增高,分别在72和24 h达到最大值,且极显著高于对照组;SOD的变化不显著。说明盐度突变对锯缘青蟹各相关免疫因子均有影响,低浓度短时间的盐度胁迫能引起应激反应,适当提高其免疫力,而大幅度长时间的盐度胁迫可显著影响锯缘青蟹的抗病力。     

胶孢炭疽菌侵染杨树叶片的组织病理学研究

目的明确胶孢炭疽菌在杨树叶片上的侵染过程,为进一步从分子水平研究该菌的致病机制和杨树抗病分子育种奠定基础。方法用绿色荧光蛋白标记的胶孢炭疽菌菌株BH12-2的分生孢子悬浮液接种健康杨树叶片,采用光学显微镜和电子显微镜观察病原菌的侵染过程和杨树叶片的防卫反应。结果接种4h后,孢子开始萌发产生芽管;8h时芽管顶端形成附着胞;12h时成熟的附着胞中央形成侵染钉;24h时,孢子另一端萌发形成芽管和附着胞;48h后芽管不断分枝异化成菌丝并产生次级分生孢子;接种3d时,附着胞基部的侵染钉穿透寄主角质层和表皮细胞壁膨大形成侵染泡囊,侵染泡囊初始生长在寄主细胞壁和细胞膜之间,不穿透寄主的原生质体,随后产生初生菌丝和次生菌丝的分化;接种4~5d后,次生菌丝在寄主表皮和叶肉组织内大量扩展;第6d时,菌丝聚集在角质层下形成子座组织,并产生分生孢子梗和分生孢子。随着菌丝的扩展,叶片组织发生一系列的病理变化,在侵入点周围的叶肉细胞壁附近产生胼胝质,细胞壁向内凹陷并发生溶解,细胞质消解,叶绿体等细胞器解体以及寄主细胞坏死塌陷,最终在叶表面产生典型的褐色坏死病斑。结论胶孢炭疽菌在侵染过程中,一个分生孢子可萌发形成多个芽管和附着胞,提高其成功侵染的几率;胶孢炭疽菌对杨树叶片的侵染类型为细胞内半活体营养侵染型。      

自然感染巴氏杆菌藏羊组织器官的病理学研究

为了对甘肃省武威市某羊场藏羊自然爆发的疑似巴氏杆菌病的病羊进行确诊和病理学研究,试验采用染色镜检、分离培养、生化试验鉴定、动物试验、病理组织制作和染色等方法,对采集的病料分别进行了细菌学检测和病理组织学观察.结果发现:瑞氏染色可见两端着色椭圆形短杆菌,分离培养、生化试验鉴定、动物试验均表明其特性为多杀性巴氏杆菌.病理组织学变化为:肺脏呈纤维素性-化脓性肺炎,心脏呈程度不等的变质性心肌炎和化脓性心肌炎,肝脏呈程度不等变质性肝炎,脾脏呈程度不等坏死,肾脏呈急性肾小球肾炎和局灶性化脓性肾炎,全身淋巴结呈浆液-出血性淋巴结炎.同时,病羊重要实质器官肝、脾、肾、淋巴结等组织内均出现大量单核巨噬细胞的广泛增生.病变组织中间质胶原纤维肿胀、断裂、崩解,血管壁纤维素样坏死.结果表明,本次武威市某羊场藏羊自然爆发疾病为羊巴氏杆菌病,其主要病理组织学变化特点为肺脏呈纤维素性-化脓性肺炎和心脏的变质性-化脓性心肌炎.     

锯缘青蟹Sox基因的PCR扩增(英文)

SRY基因(sex-determining region of the Y chromosome)是人类及哺乳动物睾丸决定因子TDF(testisdetermining factor)的最佳候选基因。SRY蛋白含有204个氨基酸,其中1个约79个氨基酸区域即HMG盒(high mobility group box)是SRY基因编码蛋白质的唯一功能区。由于SRY的发现,人们进而发现了1个庞大的与性别决定有关的SRY盒-Sox(SRY-related HMG box gene)基因家族。锯缘青蟹是我国重要的海洋经济蟹类之一,其性染色体和性别决定机制仍处于进化的早期阶段,在分子水平上探讨其性别决定机制尚不多见。通过采用PCR技术,以特异扩增人SRY基因HMG盒保守区的1对兼并引物,扩增了锯缘青蟹基因组的Sox基因。结果表明锯缘青蟹雌雄个体与人一样,均能扩增出1条大小约为216bp左右的基因片段,显示出该基因在进化上的高度保守性,为探索锯缘青蟹的性别决定机制及Sox基因的进化提供了分子资料。     

锯缘青蟹Sox基因的PCR扩增

SRY基因(sex-determining region of the Y chromosome)是人类及哺乳动物睾丸决定因子TDF(testisdetermining factor)的最佳候选基因。SRY蛋白含有204个氨基酸,其中1个约79个氨基酸区域即HMG盒(high mobility group box)是SRY基因编码蛋白质的唯一功能区。由于SRY的发现,人们进而发现了1个庞大的与性别决定有关的SRY盒-Sox(SRY-related HMG box gene)基因家族。锯缘青蟹是我国重要的海洋经济蟹类之一,其性染色体和性别决定机制仍处于进化的早期阶段,在分子水平上探讨其性别决定机制尚不多见。通过采用PCR技术,以特异扩增人SRY基因HMG盒保守区的1对兼并引物,扩增了锯缘青蟹基因组的Sox基因。结果表明锯缘青蟹雌雄个体与人一样,均能扩增出1条大小约为216bp左右的基因片段,显示出该基因在进化上的高度保守性,为探索锯缘青蟹的性别决定机制及Sox基因的进化提供了分子资料。