几种离子和有机化合物对枯草芽胞杆菌蛋白酶活力的影响

研究了不同浓度的金属离子及有机化合物对枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）蛋白酶活力的影响，结果：①在5种金属离子中，Mg^2 、Na^ 、K^ 对酶有激活作用，其中Mg^2 浓度为2mmol/L时，激活作用最大。随着金属离子浓度的降低，K^ 和Na^ 对酶的激活作产减弱，Ca^2 对Zn^2 对酶活力有抑制作用。②在7种重金属离子中，除Mn^2 对蛋白酶有激活作用外，Cu^2 、Pb^2 、Cd^2 、Co^2 、Cr^3 和Cr^6 均对蛋白酶有抑制作用。③在有机化合物中，半胱氨酸和EDTA对酶均有激活作用，且在20mmol/L时最为强裂。④Na^ -K^ 、Ca^2 -Mg^2 和Cu^2 -EDTA共同作用时对蛋白酶活力均有不同程度的抑制作用。     

绵羊瘤胃微生物胞外蛋白酶的动态及纯化

本实验用装有永久性瘤胃瘘管的成年新疆细毛羯羊3只,对饲喂前后瘤胃蛋白酶活性的变化规律及瘤胃液离心各组分的酶活比例进行测定,并对离心(12000转/min,30min,4℃)后的瘤胃上清液中的微生物胞外蛋白酶进行纯化。结果表明:①瘤胃蛋白酶活性在饲喂后3h左右最高,以后逐渐下降,至饲喂后8h左右恢复到饲喂前的水平。②瘤胃液中以游离形式存在的蛋白酶占40％,其余附着在微生物和饲料颗粒上。③用硫酸铵对上清液中的微生物胞外蛋白酶进行浓缩,依次经SephadexG—150、DEAE—Sephadex A—50和FPLC(Mono Q HR5/5柱)进行纯化后,得到电泳纯度的胞外蛋白酶品,其活力从1.77个单位/mg蛋白提高到295个单位/mg蛋白,提高了166.7倍,回收率为4.7％。SDS—PAGE测得纯化蛋白酶的分子量为38KD。     

蚕蛹蛋白双酶法水解工艺优化

研究了碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法水解蚕蛹蛋白的工艺条件.在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,研究温度、脱脂蚕蛹粉浓度、水解时间、加酶量、酶质量比(碱性蛋白酶:中性蛋白酶)对蚕蛹蛋白水解效果的影响,通过正交试验优化水解工艺条件.结果表明,优化的工艺条件为脱脂蚕蛹粉浓度30 g/L,水解时间6h(其中碱性蛋白酶的水解时间为4.5 h,中性蛋白酶的为1.5 h),加酶量3％,温度55℃,酶质量比3:1,碱性蛋白酶处理时pH9.0、中性蛋白酶处理时pH7.5.在此工艺条件下蚕蛹蛋白水解度可达22.99％.     

不同地理来源球孢白僵菌菌株的生物学特性

采集并分离来源于吉林省10个地区的15株野生球孢白僵菌菌株,比较了各菌株孢子萌发率、菌落直径、产孢量、胞外蛋白酶产生水平等指标的差异.结果表明:孢子萌发率高的菌株类型为孢子型,菌落生长迅速的菌株类型为菌丝型,介于孢子型和菌丝型菌株生物学特性之间的菌株类型为混合型;胞外蛋白酶产生水平与菌落形态特征不具相关性.筛选出菌株D4-2-1、CHL20可作为生物防治菌株.     

昆虫酚氧化酶作用机制的研究进展

酚氧化酶（Phenoloxidse,PO）是昆虫体内一类重要的氧化酶,在昆虫的正常生长发育过程中具有重要的生理功能。阐述酚氧化酶在昆虫免疫防御及其他生理发育过程中的作用机制,以及可能影响昆虫发育和免疫的诸多因子与酚氧化酶间的关系,以期为进一步探究酚氧化酶对昆虫自身调控机制提供新的思路。     

种子活力与发芽环境对玉米种子蛋白酶α-淀粉酶活性的影响

为探讨不同活力玉米种子田间发芽成苗率存在明显差异的生理原因,测定了不同环境条件下玉米种子发芽期间蛋白酶和α-淀粉酶的活性.结果表明,种子活力对玉米籽粒蛋白酶和α-淀粉酶活性的影响因发芽环境条件而异.高活力种子胚乳的蛋白酶活性在较低的温度下发芽比低活力种子的高,且在不同温度条件下的变化较小.胚乳蛋白酶活性在10℃和25℃下的比值与种子活力密切相关.玉米种子胚中蛋白酶的活性比胚乳的高,且高活力种子胚的蛋白酶活性较高.α-淀粉酶的活动开始于吸水约5 h时的种子中,发芽5～6 d时活性达最高.在10℃发芽时,高活力种子α-淀粉酶活性显著地高于低活力种子,但在25℃发芽时两者差异不显著.在不良环境条件下发芽,玉米种子的蛋白酶活性增高,α-淀粉酶的活性降低.高活力种子的蛋白酶和α-淀粉酶的稳定性和协调性较好.     

酶法制备活性肽的讨论

酶解蛋白质产生的短肽混合物中,一些肽段不仅提供营养,而且具有特殊生理功 能,称为活性肽。目前,由于蛋白酶解制备法可实现规模化大生产,活性肽的主要生产方法是酶 法制备活性肽。本文讨论了酶法制备活性肽工艺流程的主要步骤,判定酶解效果的指标,酶的 选用,酶解各种影响因素如温度、酸度、加酶量、底物浓度、水解时间等对应参数的确定。对当前 存在的问题提出了理论上的的解决方法,并对在新的技术背景下,如何更高效率地生产活性肽 进行了展望。     

嗜碱菌S9碱性蛋白酶酶学性质研究

对嗜碱微生物所产的碱性蛋白酶进行酶学性质研究。发酵液首先经硫酸铵盐析和缓冲液透析,获得粗酶。试验结果表明,该酶最适反应温度60℃,pH为9.0,酶蛋白稳定温度40℃,pH为8.0～10.0。K 、Ca2 、Mn2 和Mg2 对酶有激活作用,Zn2 、Fe3 和Cu2 有抑制作用,Pb2 和Hg2 有强烈抑制作用。     

微生物高温蛋白酶的研究和应用进展

综述了微生物源高温蛋白酶的研究状况,包括酶的微生物来源、生产菌株的选育、酶学特性、应用领域,并对其前景进行了展望。     

四氢嘧啶提高中性蛋白酶热稳定性的研究

[目的]提高中性蛋白酶的热稳定性。[方法]在中性蛋白酶酶液中添加四氢嘧啶,考察四氢嘧啶对中性蛋白酶热稳定性的影响。[结果]四氢嘧啶对经热处理的中性蛋白酶有明显的保护作用。添加浓度3 mmol/L的四氢嘧啶可以使经过50℃处理的中性蛋白酶剩余的相对酶活提高12.7%;添加浓度5 mmol/L的四氢嘧啶可以使经过60℃处理的中性蛋白酶剩余的相对酶活提高51.8%。[结论]四氢嘧啶是一种有效的中性蛋白酶热保护剂。     

腊牛肉腌制过程中酶对蛋白质变化影响的研究

在腊牛肉腌制中,分别将木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶按原料肉重的0.01%、0.015%、0.02%、0.025%和0.03%的添加量掺入腌制剂中腌制7 d,发现肉中非蛋白氮含量和氨态氮含量随着腌制天数的增加而大幅度增加,表明在此期间,肌肉蛋白质在酶的作用下发生了强烈降解.降解程度随着酶添加量增大而提高.在腊牛肉中加入酶制剂使挥发性盐基氮含量明显增加,但从成品的色、香、味等感观分析上并无腐败变质特征.     

球孢白僵菌胞外蛋白酶产生水平及其与毒力关系的研究

检测了球孢白僵菌不同类型分离株的胞外蛋白酶产生水平,总体显示出继代培养将降低菌株胞外蛋白酶活性,胞外蛋白酶产生水平与菌株毒力有一定的协同性,但相关不显著。     

粘菌基因组DNA提取方法的研究

针对粘菌标本(孢子)数量少、形态微小等特点，分别采用CTAB法、SDS法、蛋白醇K法4和SDS-蛋白酶K4种方法，提取基因组DNA。所得DNA完整，可用于RAPD等研究。     

昆虫丝氨酸蛋白酶抑制剂在免疫调节中的作用

丝氨酸蛋白酶抑制剂是一类分布广泛的蛋白酶抑制剂超家族,能与体内参与各种调控作用的丝氨酸蛋白酶相互制约,形成一定的动态平衡,调节生物体内许多重要的生命活动。该文就近几年来关于昆虫丝氨酸蛋白酶抑制剂在免疫调节中的研究进展进行综述。     

一株产碱性蛋白酶的酵母菌发酵条件优化

对一株产碱性蛋白酶假丝酵母菌(Candidasp.N9211)的发酵条件进行了优化,研究各种碳源、氮源及无机盐对产酶的影响,应用正交试验优化发酵培养基组成。结果表明:最佳培养基组成为酵母膏20g/L,蛋白胨15g/L,干酪素20g/L,硫酸亚铁0.01g/L。优化后蛋白酶活性提高了27倍(由1.55U/mL提高到41.85U/mL)。摇瓶培养的最佳条件为:初始pH值10.0,接种量1%,发酵温度35℃,最佳培养时间为15h。     

pH influences the profiles of midgut extracts in Cnaphalocrocis medinalis(Guenée) and its degradation of activated Cry toxins

Midgut extracts play crucial roles in food digestion and detoxification. We evaluated the effect of pH on the profiles of the midgut extracts in rice leaffolder, Cnaphalocrocis medinalis and the degradation of activated Bt-toxins by the midgut extracts under different pH conditions. Total protease activity increased slightly with the increase with the simulated pH in the midgut extracts and the maximal protease activity was observed at pH 10.5, while an upward trend was observed as the pH of reaction buffer increased. Activity of chymotrypsin-like enzymes increased with pH, both in the buffer and midgut extracts, while the activity of trypsin-like enzyme was unaffected. Degradation of the activated Cry2 A by the midgut extracts enhanced as the pH increased. Cry2 A was fully degraded into smaller segments at pH 9.0–10.5. Activated Cry1 C protein at pH 9.0–10.5 was partially degraded by the midgut extracts. Activated Cry1 Aa and Cry1 Ac were partially degraded into fragments by the midgut extracts at high pH. These results will facilitate our further understanding of the interactions between C. medinalis and the Cry toxin.     

嗜热真菌Thermomyces lanuginosus热稳定蛋白酶的纯化及特性

嗜热真菌Thermomyces lanuginosus在液体培养基中于50℃振荡培养1周后，培养液经硫酸铵分级沉淀、DEAE－Sepharose离子交换层析、Phenythl-Sepharose疏水层析，得到了凝胶电泳均一的蛋白酶。用SDS－PAGE测定分子量为55kD，该酶的最适反应温度为70℃，最适作用pH值为6.0。该酶具有很好的耐热性，在pH值6.0 50℃条件下酶是稳定的；60℃保温1h，仍保留92％的原酶活性；90℃时酶活半衰期为6min，抑制剂试验证明，该酶为丝氨酸蛋白酶。     

pH对月鳢蛋白酶活性的影响

对月鳢(Channa asiatica)消化系统不同部位蛋白酶活性的最适pH进行了研究，结果表明：月鳢成鱼胃黏膜组织、前肠黏膜组织和肝胰脏蛋白酶活性的最适pH分别为6．2、5．4和5．4，不同消化部位的该酶活性最大时的pH有所差异。     

蚯蚓纤溶酶的研究进展

蚯蚓纤溶酶是近年发现的一种新型溶栓物质,该酶具有纤溶活性和溶栓活性,故其研究受到了极大的关注。文章概述了蚯蚓纤溶酶结构特点、药用价值、酶学活性、基因获取与表达、开发利用等方面近10年以来的研究进展。     

菌株Ⅰ13产碱性蛋白酶的酶学性质研究（摘要）

[目的]研究菌株I13产碱性蛋白酶的酶学性质。[方法]从一株碱性蛋白酶生产菌株I13中得到了碱性蛋白酶粗酶液,并研究了温度和pH值对该酶液酶活力的影响。[结果]所产碱性蛋白酶的最适反应温度为40℃,但在30～60℃范围内活力水平均较高,且在20～30℃范围内也保持了最大活力的40%以上;最适反应pH值为10.5,在8.0～11.0pH值范围内保持了最大活性的90%以上,有较宽的pH值谱。[结论]该碱性蛋白酶具有开发成为洗衣粉添加剂的巨大潜力。