苜蓿花药愈伤组织胚状体诱导因素的研究

以7个基因型的苜蓿花药愈伤组织为材料,进行了基因型、愈伤组织生长率、培养温度、培养基碳源等因素对苜蓿花药培养诱导胚状体影响的研究.结果表明:不同基因型苜蓿花药愈伤组织生长率、胚状体诱导率都存在显著性差异,两者的相关系数r=-0.326 1(P＜0.01),两者没有明显的相关性;低温处理可促进花药愈伤组织的分化,4℃低温...     

苜蓿花药培养及倍性鉴定

在不同低温预处理时间,不同培养基和不同激素组合下进行了苜蓿花药培养实验。结果表明,花药4℃低温预处理24h、48h较72h诱导效果好。NB培养基对愈伤组织的诱导效果比战培养基好。最佳愈伤组织诱导培养基组合为NB＋2,4-D0．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋6-BA0．5mg／L＋KT3．0mg／L。通过不同蔗糖浓度对愈伤组织的诱导效果比较,表明低浓度的蔗糖有利于降低愈伤组织的褐化率,高浓度的蔗糖有利于单倍体愈伤组织的诱导。分化培养的最佳组合为MS＋NAA0．2mg／L＋6-BA3．0mg／L。诱导生根最好的培养基为1／2MS培养基,最适合蔗糖浓度为10g／L。     

不同外源激素及培养方式对甘草试管苗生长的影响

以MS为基本培养基,采用固体,液体和固液双层3种不同培养方式研究不同外源激素对甘草试管苗生长的影响,以建立优化的甘草试管快繁体系。试验结果表明,固体培养是甘草试管苗快繁的最佳培养方式,试管苗全长、根长、株重、根重、根直径以及叶片数均明显优于液体及固液双层培养方式。不同外源激素对试管苗具有显著的影响,甘草试管苗在1.0 mg/L IBA外源激素下的各项生长指标明显强于1.0 mg/L IAA,并在MS+1.0 mg/L IBA+13.5 mg/L KH2PO4培养基中表现最好。而13.5mg/L KH2PO4更有利于诱导试管苗快速生根。     

柳枝稷人工穗芽高效再生体系的建立

以柳枝稷‘西稷1号’、‘西稷2号’和‘西稷3号’3个基因型的幼穗为材料,采用单因素试验依次从基因型、幼穗长度、激素、初次切割时期穗芽长度、大量培养阶段穗芽长度、碳源、pH值、穗芽块的切割方式和生根培养基等对柳枝稷人工穗芽再生体系进行了优化研究,建立了柳枝稷人工穗芽高效再生体系,即基因型选用西稷1号,幼穗长度为1.5 cm,激素采用3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D, 初次切割时期和大量培养阶段穗芽长度均为1.5 cm,碳源采用麦芽糖,pH值5.8,穗芽块采用纵切方式,并以1/2 MS培养基作为生根培养基,增殖效率可高达4 167.00%。     

低温预处理与植物生长调节剂对结缕草愈伤组织诱导的影响

以结缕草Zoysia japanica的茎尖、茎基、根尖为外植体材料,研究了低温预处理、不同激素配比对结缕草诱导愈伤的影响,结果表明：10 ℃低温预处理3次（即累积30 d）为最佳低温预处理时间;经过3次处理后,3种外植体的愈伤诱导率都明显提高,其中茎基最好,愈伤诱导率达94%,较对照提高了38%,芽分化率为74.47％;以此为基础,在配方为MS+2,4 D(2 mg/L)+6 BA(0.1 mg/L)的培养基上,3种外植体均获得最高的愈伤诱导率,其中茎基最好,为94％;外植体材料中最佳为茎基,出愈容易,且出愈率高。     

新麦草幼胚愈伤组织诱导

以山丹新麦草和新麦草新品系的幼胚为外植体,MS为基本培养基,研究不同胚龄、不同激素配比及低温预处理对愈伤组织诱导的影响.结果表明,两种材料最佳胚龄均为14d左右,幼胚大小约为1mm;激素最适配比均为2,4-D 2 mg/L 6-BA 0.2 mg/L;低温预处理最佳时间为1d.     

紫花苜蓿花药愈伤组织和幼苗诱导技术的研究

在不同时期、不同花药低温预处理时间及热激处理、不同培养基、不同激素浓度组合、不同培养条件下对苜蓿花药进行了培养,结果表明：9月份较7月、8月份选取的花药愈伤组织诱导率高;花药低温预处理24～48h较72h处理对愈伤组织诱导的效果好,低温预处理与热激处理相结合比单用低温预处理其花药愈伤组织诱导率高;NB培养基对愈伤组织的诱导效果比B5培养基好,2,4-D浓度0.5～2.0mg/L、NAA浓度0.1～1.0mg/L、6-BA浓度0.5～1.0mg/L、KT浓度1.0～3.0mg/L都能诱导出愈伤组织,其最佳的浓度组合为NB＋2,4-D 0.5mg/L＋NAA 0.2mg/L＋ 6-BA 0.5 mg/L＋KT 3mg/L;暗培养结合光照培养较直接光照培养愈伤组织诱导率低,但绿苗率较高.     

紫花苜蓿花药愈伤组织和幼苗诱导技术的研究

在不同时期、不同花药低温预处理时间及热激处理、不同培养基、不同激素浓度组合、不同培养条件下对苜蓿花药进行了培养,结果表明:9月份较7月、8月份选取的花药愈伤组织诱导率高;花药低温预处理24~48h较72h处理对愈伤组织诱导的效果好,低温预处理与热激处理相结合比单用低温预处理其花药愈伤组织诱导率高;NB培养基对愈伤组织的诱导效果比B5培养基好,2,4-D浓度0.5~2.0mg/L、NAA浓度0.1~1.0mg/L、6-BA浓度0.5~1.0mg/L、KT浓度1.0~3.0mg/L都能诱导出愈伤组织,其最佳的浓度组合为NB 2,4-D 0.5mg/L NAA 0.2mg/L 6-BA 0.5mg/L KT 3mg/L;暗培养结合光照培养较直接光照培养愈伤组织诱导率低,但绿苗率较高。     

新麦草幼胚愈伤组织诱导

以山丹新麦草和新麦草新品系的幼胚为外植体,MS为基本培养基,研究不同胚龄、不同激素配比及低温预处理对愈伤组织诱导的影响。结果表明,两种材料最佳胚龄均为14d左右,幼胚大小约为1mm;激素最适配比均为2,4-D2mg／L＋6-BA0．2mg／L;低温预处理最佳时间为1d。     

蒙农红豆草愈伤组织诱导及植株再生的研究

采用MS为基本培养基,对内蒙古地区特有的红豆草品种蒙农红豆草(Onobrychis viciifolia Scop.cv.mengnong)的种子进行不同预处理,统计在不同培养基培养下供试材料种子的萌发率,并在出苗后对红豆草幼苗各外植体(下胚轴、子叶、幼茎、叶片)在不同激素配比培养基中进行组织诱导培养,最终确定理想的培养基激素配方并获得红豆草再生植株。研究结果表明,在1/2MS培养基中种子的萌发率高于MS培养基,并在4℃冷藏预处理下其萌发效果最佳,萌发率达94%。不同激素配比对不同外植体的愈伤诱导和芽分化的效果有所差异。附加MS+2,4-D 2mg/L+6-BA 1mg/L+KT 1mg/L培养基下胚轴整体出愈效果最好,愈伤组织诱导率为86%;附加MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 2.0mg/L培养基有利于芽的分化,分化率为24%。外植体出愈顺序为:下胚轴>子叶>叶片>幼茎。     

羊草幼穗离体培养诱导植株再生的研究

采用离体培养方法首次获得羊草体细胞再生植株。其方法要点是:取羊草幼穗为外植体,经0.1%HgCl₂溶液表面消毒后,接种到含2mg/L2,4-D的MS培养基上,置于恒温25℃条件下诱导愈伤组织。在加有1mg/L2,4-DMS培养基上继代2次后,转移到含1.0mg/LKT和0.5mg/LNAA的MS培养基上分化培养得到再生芽。在无激素的基本培养基上获得了生根的试管苗,试管苗移栽到温室后生长正常。研究结果还表明,尽管从羊草叶片、幼穗和成熟胚在同样培养条件下均能诱导出愈伤组织,但只有幼穗愈伤组织能够继续分化出再生植株。羊草试管苗的分化因基因型和外源激素的不同而异。     

谷氨酰胺、脯氨酸和激素对苜蓿花药培养的影响

为提高苜蓿(Medicago sativa L.)花药培养效率,以小孢子发育处于单核中期到单核靠边期的花药为材料,对谷氨酰胺、脯氨酸和激素配比对花药培养的影响进行研究。结果表明:培养基中附加谷氨酰胺或脯氨酸对苜蓿花药愈伤组织诱导、增殖和分化都是有益的,其中谷氨酰胺700 mg/L或脯氨酸600 mg/L的效果较佳;增殖培养基中附加2 mg/L 2,4-D和0.5mg/L 6-BA配合使用较单独使用更有利于愈伤组织增殖和后期绿苗分化;分化培养基中附加0.5 mg/L NAA和2 mg/L KT的绿苗分化率较高。     

一株瘤胃源产纤维素酶菌株的培养条件优化

山羊瘤胃内容物菌群中分离得到的一株产纤维素酶菌株T15,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)进行优化。对菌株培养基成分碳源、氮源和金属离子进行优化时发现,6 g/L的葡萄糖为碳源和5 g/L的牛肉膏为氮源时,产生酶活力达到最高。培养基中添加0.03 mol/L的Ca~(2+),对菌株产生纤维素酶有促进作用。在最优发酵培养基成分为基础,对菌株T15的发酵培养温度、培养时间、培养pH条件和接种量等四因素、三水平进行正交试验,该菌株的产纤维素酶最优发酵条件:以9 mL为接种量,培养基pH值7,培养温度35℃和培养时间40 h,其产生酶活力达到26.76 U/mL;其中培养时间、接种量、培养温度、和培养基酸碱条件对菌株发酵产纤维素酶影响依次增大。     

低温预处理和低温预培养对苜蓿新品系花药愈伤组织诱导的影响

对低温预处理和低温预培养苜蓿新品系花药培养的效应进行研究,4℃低温预处理和15℃低温预培养小孢子发育处于单核中期到单核靠边期的花药,以提高苜蓿花药愈伤组织诱导率。结果表明,4℃低温预处理2～4d和15℃低温预培养3d,均可以显著提高愈伤组织诱导率。     

百合的组织培养

将百合鳞片的不同部位接种于加油不同激素和不同浓度BA和NAA的6种培养基上,一周后接种的百合鳞片开始变绿,2周后,鳞片的受伤部位出现绿色的愈伤组织,再经2-3周培养,产生愈伤组织的部位逐渐形成小鳞茎,并开始有叶片长出.其中2号培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L的分化率最高.实验结果表明,鳞片的不同部位分化能力也有差异,其中下部分化效果最好;激素6-BA和NAA浓度的配比,与鳞片分化小鳞茎的速度、数量和质量有着重要的关系.     

黑麦草幼穗离体培养及植株再生

以多年生黑麦草和一年生黑麦草的适宜发育期(1～3 mm)的幼穗为外植体,在附加适宜浓度2,4-D (1 mg/L)的改良MS培养基上诱导愈伤组织发生,诱导率可达95%.一些愈伤组织在诱导培养基上直接发生不定芽,另一些愈伤组织能多次继代培养并保持高分化能力.后类愈伤组织在转入含有0～0.5 mg/L 6-BA和0～0.5 mg/L 2,4-D的分化培养基后产生大量丛生芽,部分小芽发育成苗.幼穗发育时期、培养基的激素组成明显影响愈伤组织的继代培养和植株再生能力,基因型对愈伤组织诱导率和植株再生能力也有影响.该体系适用于黑麦草基因工程和细胞工程研究,且具有实验周期短、基因型制约小、植株再生率高等优点.     

LaCl_3、IAA及植物体液对荧光标记根瘤菌生长和增殖的影响

以标记根瘤菌及其原始菌株为试验材料,研究LaCl3、IAA及植物体液对荧光标记根瘤菌生长和增殖的影响。分别将荧光标记根瘤菌Sinorhizobium meliloti.12531f、Rhizobium meililoti.GNf及其原始菌株Sinorhizobium meliloti.12531、Rhizobium meliloti.GN5接种于含50mg/L LaCl3溶液、0.08mg/L IAA溶液及甘农5号苜蓿植株体液的YMA固体及液体培养基中,于22h及46h后测定各培养基上的菌落直径或D600nm值,以此判断植物体液对荧光标记根瘤菌及其原菌株生长和增殖的影响。结果表明,标记根瘤菌及其原始菌株在含几种外源物质的培养基上均能正常生长并增殖,且外源物质对各菌株的生长有不同程度的促进作用。培养22h时,R.GNf、S.12531及R.GN5在含几种外源物质的固体培养基上增殖速度较快,R.GN5在不同物质处理下生长速度最快,为对照的233%～250%;苜蓿植株体液较其他3种物质更能促进菌株的生长和增殖。     

影响紫花苜蓿花药培养因素的探讨与分析

从外植体的选取时期及处理、培养基及激素组合、培养条件等多方面分析,影响紫花苜蓿花药培养的因素,并对花粉植株倍性鉴定、驯化移栽和花粉植株的遗传稳定性进行了初步探讨.     

青蒿花序轴离体培养的初步研究

以不同基因型(青蒿素含量1.3%以上)的花序轴为外植体进行离体培养,初步建立了不同基因型的再生体系.结果表明,以MS基本培养基进行诱导培养时,附加6-BA 1.0～3.0 mg/L+NAA 0.1～0.5 mg/L能直接从愈伤组织块诱导出不定芽,且不同基因型诱导的激素浓度不同.再生植株的株系培养,附加低浓度的6-BA 0.1～0.3 mg/L+NAA 0.05～则有利于快速生长成苗,同时附加IAA或GA3对其生长也有一定好处,但主要与基因型相关.     

黑曲霉液体发酵产植酸酶条件的研究

试验以黑曲霉(Aspergillusniger)30132为材料,研究了碳源、氮源、培养基、起始pH值、接种量、温度对该菌株产植酸酶活力的影响。结果表明:黑曲霉30132的最适发酵温度为28℃,产酶pH值为5,最佳接种量为10%;在此条件下,以8%麸皮为碳源、0.5%硫酸铵为氮源时,产酶活力最高,发酵3d后发酵液中植酸酶活力高达35.5U/ml。