培养温度对里氏木霉合成木聚糖酶和纤维素酶的影响

以里氏木霉（Trichoderma reesei)Rut C-30为产酶菌，研究了不同培养温度对木聚糖酶和纤维素酶合成的影响。培养温度（25-26℃）较低时有利于木聚糖酶和纤维素酶的合成，但产酶时间较长；培养温度（35-36℃）较高时产酶时间缩短，但木聚糖酶的合成受到一定的影响，且严重抑制纤维素酶的合成。采用变温培养，前期（24h）培养温度为35-36℃，中后期培养温度为25-26℃，能有效地促进木聚糖酶的合成，而抑制纤维素酶的合成，致使木聚糖酶与纤维素酶活的比值提高，从而有利于选择性合成木聚糖酶，木聚糖酶活和纤维素酶活力在72h达到最高值，分别为161.69和0.359IU/mL。     

碳氮比对里氏木霉合成木聚糖酶的影响

以里氏木霉（Trichoderma reesei）Rut C-30为产酶菌，研究了不同碳氮比对木聚糖酶合成的影响。结果表明，低碳氮比有利于促进内切-β-木聚糖酶的合成，抑制外切-β-木糖苷酶的合成，有利于选择性合成低外切-β-木糖苷酶活的内切-β-木聚糖酶。高碳氮比使得木聚糖酶的合成滞后，能够有效地抑制纤维素酶的合成，提高木聚糖酶活与纤维素酶活的比值，有利于选择性合成低纤维素酶活的木聚糖酶。     

氮源对里氏木霉木聚糖酶和纤维素酶生物合成的影响

研究了氮源种类和比例、碳氮比(C／N)等因素对里氏木霉木聚糖酶和纤维素酶生物合成的影响。在各种氮源中，蛋白胨是最好的氮源。复合氮源中当硫酸铵N和尿素N的比例为1：3时，木聚糖酶活力最高，达93．3IU／mL；当比例为1：1时，滤纸酶活力和羧甲基纤维素(CMC)酶活力达到最大值，分别为0．263FPIU／mL和0．026IU／mL。当控制培养基的C／N为8．0和6．0时，它们对木聚糖酶和纤维素酶的诱导作用最强，分别为95．1IU／mL和0．310FPIU／mL。     

木聚糖相对分子质量分布对里氏木霉合成木聚糖酶的影响

以里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30为产酶茵,研究了相对分子质量(Mw)分布不同的木聚糖对木聚糖酶合成的影响。通过SephadexG一100凝胶过滤色谱分级分离发现木聚糖A中低Mw组分较多,木聚糖B中低Mw组分较少,木聚糖C中低Mw组分最少。分别以这3种木聚糖为碳源合成木聚糖酶,最高木聚糖酶活力分别为153．64、120．84和110.84IU／mL,产酶时间分别为60、72和96h。用这3种碳源合成的木聚糖酶酶解粗木聚糖,酶解2h时,产物中低聚木糖分别占总糖的80．70％、68．56％和66．92％。这表明低Mw组分较多的木聚糖不仅有利于促进木聚糖酶的诱导合成,而且有利于促进内切-1,4-木聚糖酶的合成。     

里氏木霉选择性合成木聚糖酶的研究(Ⅰ)

在一定条件下,里氏木霉可选择性地合成木聚糖酶,选择性合成程度与碳源种类、碳源浓度及碳氮比大小有关。以低纤维素污染的木聚糖为碳源,适当降低碳源的浓度,提高碳氮比可以提高木聚糖酶选择性合成的程度。以玉米芯粗木聚糖为碳源,采用添加碳源和氮源的方法控制发酵过程中的碳源浓度在５ｇ／Ｌ下,碳氮比在１１２以上时,产生的木聚糖酶和纤维素酶酶活分别为３５５Ｕ／ｍＬ、０．２Ｕ／ｍＬ,两种酶活的比值为１１７     

里氏木霉选择性合成木聚糖醇的研究（Ⅰ）

在一定条件下,里氏木霉可选择性地合成木聚糖酶,选择性合成程度与碳源种类,碳源浓度及碳氮比大小有关。以低纤维素污染的木聚糖为碳源,适当降低碳源的浓度,提高碳氮比可以提高木糖糖酶选择性合成的程度。     

纤维素和木聚糖复合诱导合成木聚糖酶的研究

以里氏木霉（Rrichoderma reesei)为产酶菌，分别对纤维素、纤维素和木聚糖诱导产酶的功能进行了研究。研究发现，纤维素具有诱导木聚糖酶合成的功能；纤维素和木聚糖混合对木聚糖酶合成具有促进作用，可大幅度提高木聚酶活力。与纯木聚糖（5g/L)产酶相比，纯木聚糖（4g/L)和纸浆（1g/L)混合产酶木聚糖酶活可以提高45％。研究成果为采用富含木聚糖的植物纤维料作碳源制备木聚糖酶提供了理论依据。     

内切木聚糖酶的选择性纯化及酶解制备低聚木糖的研究

研究了超滤分离除去里氏木霉木聚糖酶中的外切-β-木糖苷酶,以及酶解制备低聚木糖。研究结果表明:用超滤的方法能完全除去外切-β-木糖苷酶,透过液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定为单带,酶解产物全部是低聚木糖,当酶解时间从2 h延长到10 h时,低聚木糖的得率从26.83%增加到54.22%;而用粗木聚糖酶酶解制备低聚木糖时,当酶解时间从2 h延长到10 h时,低聚木糖得率从17.97%下降到11.12%。因此,采用该技术可以大幅度增加总糖中低聚木糖所占的比例,显著提高木聚糖原料的有效利用率。     

培养基组成对里氏木霉合成纤维素酶的影响

研究了碳源种类及比例、氮源种类及比例、碳氮比和添加物等对里氏木霉合成纤维素酶的影响.里氏木霉以含纤维素质量比为4:6的蒸汽爆破玉米秸秆和微晶纤维素为碳源,含氮素质量比为5:2的硫酸铵-尿素为氮源,C/N为6,添加4g/L黄豆粉和10g/L麸皮为主要成分的培养基合成纤维素酶,纤维素酶活力在培养132 h达到最大,滤纸酶活...     

选择性控制酶水解玉米芯木聚糖制备低聚木糖

对采用选择性控制木聚糖酶水解条件制备低聚木糖进行了研究，并同时探讨了以两种木聚糖形式——干粉和湿浆为原料造成的酶解结果差异及其原因。结果表明，目前较适宜的低聚木糖制备工艺为：以木聚糖湿浆为底物，底物质量浓度20～40g／L，酶用量1％（体积分数，下同），pH值4、8，温度50℃，酶解时间4h。造成干粉与湿浆酶解制备低聚糖结果差异的原因，可能是由于这两种底物自身结构特性的差异导致了底物可及度，以及酶与底物吸附作用的不同。结果显示当以干粉为底物，酶用量10％，酶解时间12h，低聚木糖得率最高可达40％（质量分数）左右，而以湿浆为底物，达到同样低聚糖得率的酶用量和酶解时间分别仅需1％和4h。     

选择性控制酶水解玉米芯木聚糖制备低聚木糖

对采用选择性控制木聚糖酶水解条件制备低聚木糖进行了研究,并同时探讨了以两种木聚糖形式--干粉和湿浆为原料造成的酶解结果差异及其原因.结果表明,目前较适宜的低聚木糖制备工艺为以木聚糖湿浆为底物,底物质量浓度20～40g/L,酶用量1%(体积分数,下同),pH值4.8,温度50℃,酶解时间4 h.造成干粉与湿浆酶解制备低聚糖结果差异的原因,可能是由于这两种底物自身结构特性的差异导致了底物可及度,以及酶与底物吸附作用的不同.结果显示当以干粉为底物,酶用量10%,酶解时间12 h,低聚木糖得率最高可达40%(质量分数)左右,而以湿浆为底物,达到同样低聚糖得率的酶用量和酶解时间分别仅需1%和4 h.     

里氏木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的研究

研究了利用里氏木霉和黑曲霉混合培养的形式产纤维素酶,以两个菌种的不同接种比和延迟黑曲霉的接种时间来寻找两个菌种发挥最大协同作用的结合点.以农林废弃物之一的玉米秸秆为底物,经过蒸汽爆破预处理后,用作产酶碳源.以里氏木霉单一培养与黑曲霉单一培养为参照进行对比研究.结果表明,黑曲霉接种较里氏木霉延迟48h,里氏木霉与黑曲霉接种量比为5: 1时,滤纸酶活最高,达3.295IU/mL,高于里氏木霉单一培养(2.480IU/mL),β - 葡萄糖苷酶活达1.010IU/mL,也远远高于里氏木霉单一培养(0.243IU/mL).本实验充分证明里氏木霉与黑曲霉混合培养产酶是可行的,并优于单一菌种培养.     

酶的选择性纯化及酶解制备木低聚糖的研究

采用沉淀剂的Ｈ处理木聚糖酶及纤维素酶以除去大部分β－木糖苷酶,以及酶解制备木低聚糖的研究结果。研究表明,当酶液中沉淀剂Ｈ的孢和度为５０％时,处理效果最佳。