云南省中西部地区东方蜜蜂形态特征研究

 为了研究不同地理环境下东方蜜蜂的特征规律,测定了云南省中西部的武定、永胜、大姚、祥云和姚安5个地区的16群东方蜜蜂(Apis cerana)的第6背板覆毛长度、第3背板长、翅钩数和小盾片颜色等38个形态特征指标,并同云南省其他地方的东方蜜蜂形态数据进行比较。结果表明,云南省中西部地区的东方蜜蜂为一个小类群,与德钦、宾川和丽江的亲缘关系较近。在云南省范围内,德钦的东方蜜蜂体型最大,云南省中西部地区的东方蜜蜂体型蜂次之,东南低纬区的东方蜜蜂体型最小。该地区的东方蜜蜂形态特征呈现广泛性,是云南省镜内两大东方蜜蜂类群的中间过渡带。     

山西东方蜜蜂形态类群的研究

研究从山西4个地区采集214群样本,按照国际蜜蜂研究者认可的蜜蜂形态测定指标对东方蜜蜂样本进行41个形态特征的系统测量和分析,利用SPSS10.0进行一系列因子分析、判别分析、聚类分析、变异分析以及与环境因子的相关分析。结果表明:山西东方蜜蜂形态特征呈现两个主因素,第一因素与经度和纬度呈显著正相关,与海拔呈极显著正相关,与年均气温呈显著负相关,与年均降雨量不呈相关关系;第二因素只与年均气温有显著正相关,与海拔、经度、纬度和年均降雨量没有明显相关关系,41项形态特征中有16项与环境因子以不同程度和不同形式相关。肘脉b、肘脉指数以及第三腹板蜡镜间距离在晋城、运城、长治和离石四地区间有显著差异,第一基跗节长、前翅长、前翅宽、第六腹板长、第六腹板宽、第三背板长、第四背板长、第四背板绒毛带宽度1、第四背板绒毛带宽度2、小盾片Sc区色度以及上唇色度在四地区间差异极显著。Q型层次聚类分析结果是山西四地区东方蜜蜂聚为三类,各地区间东方蜜蜂交叉聚类,晋城东方蜜蜂聚在同一类里,而长治、运城和离石东方蜜蜂却分散聚在三类里。山西东方蜜蜂与山东、河北、河南以及北京东方蜜蜂一同进行聚类分析发现山西东方蜜蜂与纬度相近的河南及山东几个地区东方蜜蜂遗传距离较近,而与北京房山以及河北兴隆遗传距离较远。为我国东方蜜蜂资源的研究提供科学的理论基础数据,并为开发和保护我国濒危的东方蜜蜂资源奠定坚实基础。     

河南东方蜜蜂形态多样性研究

从河南4个地区采集43群东方蜜蜂样本,按照国际蜜蜂研究者认可的蜜蜂形态测定指标对东方蜜蜂样本进行41个形态特征的系统测量和分析,利用SPSS10．0进行一系列因子分析、判别分析、聚类分析、变异分析以及与环境因子的相关分析。结果表明：河南省东方蜜蜂形态特征共提出6个主因子,与蜜蜂形态特征相关的第一主因子与海拔、纬度和年均降雨量呈显著正相关,与蜜蜂体色相关的第二主因子与经度、年均降雨量以及年均气温呈显著正相关,与纬度呈显著负相关,41项形态特征中有24项与环境因子以不同程度和不同形式相关。方差分析结果显示：胫节长等6个指标在河南四地区间差异显著（P〈0．05）;第三腹板蜡镜斜长等12项形态特征在四地区间差异极显著（P〈0．01）。Q型层次聚类分析结果是河南四地区东方蜜蜂聚为三类。河南东方蜜蜂与山东、河北、山西以及北京东方蜜蜂一同进行聚类分析发现河南东方蜜蜂与纬度相近的山西几个地区东方蜜蜂遗传距离较近,而与北京房山以及河北兴隆遗传距离较远。该研究为我国东方蜜蜂资源的研究提供科学的理论基础数据,并为开发和保护我国濒危的东方蜜蜂资源奠定坚实基础。     

贵州东方蜜蜂形态遗传分析

利用32个形态遗传标记,采用逐步判别分析-聚类分析、主成分分析以及单因素方差分析,对贵州省的8个样点和2个临近的广西省、重庆市的样点,共600只东方蜜蜂工蜂进行形态遗传分析.研究结果表明,未发现贵州省的东方蜜蜂发生种群分化,贵州省各样点的东方蜜蜂与广西南宁样点和重庆万州样点发生明显分化.与广西南宁、重庆万州的东方蜜蜂相比,贵州东方蜜蜂个体和吻、翅和足等指标均较大.     

四川平武地区东方蜜蜂形态特征研究

 测定四川平武地区5个不同样点的15群东方蜜蜂（Apis cerana）的38个形态特征。同该地区的四川九寨沟、冕宁、西昌、会理以及甘肃岷县、临潭的东方蜜蜂的形态数据进行因素分析、主成分分析、聚类分析以及相关性分析。结果表明：这些地区的东方蜜蜂呈现3个主要类群。该地区东方蜜蜂的个体大小与海拔和纬度相关性显著,喙的颜色、小盾片的颜色和绒毛覆毛长度与海拔相关性显著。     

九寨沟-岷山山脉地区东方蜜蜂形态特征研究

通过测定九寨沟-岷山山脉地区的6个不同样点21群东方蜜蜂的38个形态特征，采用计算机进行数据分析，得出了该地区的东方蜜蜂的形态学数据，通过对这些形态学数据的研究发现，该地区的东方蜜蜂可分为三个类群；与邻近的甘肃省定西、平凉、奉安的东方蜜蜂作对比，同我国部分地区的东方蜜蜂形态数据进行分析发现，九寨沟的东方蜜蜂与甘肃的岷县、临潭县的东方蜜蜂亲缘关系较近。而甘肃定西、平凉、奉安的东方蜜蜂则与河南、陕西等省份的东方蜜蜂的亲缘关系及较近，在九寨沟-岷山山脉地区这一小的生态区域内，东方蜜蜂的形态特征较为特别，与其它生态区域的东方蜜蜂相比，个体体色差异较大，体型较大。     

河南东方蜜蜂的形态特征研究*

 通过测定河南8个不同样点的20群东方蜜蜂,每群15只工蜂,每只工蜂共有38个形态特征,测定的性状特征数据进行因素分析、聚类分析和区辨分析;形态性状与环境因子相关性分析;并与其它省份的相关数据进行比较,发现:河南东方蜜蜂种群内遗传变异较为丰富,其形态性状特征表现出较明显的地理变异性。河南东方蜜蜂种群形态性状的多态性、多型性及其地理变异式样,均具有生态适应意义。     

蜜蜂属内蜂种的分类、地理分布、形态特征和生物学特性

中国已明确记录的蜜蜂属有6个种：小蜜蜂(Apis florea)、黑小蜜蜂(Apis andreniformis)、大蜜蜂(Apis dorata)、黑大蜜蜂(Apis laboriosa)、东方蜜蜂(Apis cerana)和西方蜜蜂(Apis mellifera)。小蜜蜂、黑小蜜蜂、大蜜蜂和黑大蜜蜂几乎完全分布在亚洲国家。东方蜜蜂按地理分布可分为南亚类群、海岛类群和东亚类群。西方蜜蜂分布在除南极以外的各大洲。本文详述了各种蜜蜂的形态特征和生物学特性。     

亚洲部分地区东方蜜蜂mtDNA多态性研究

 就云南省7个不同样点共7群东方蜜蜂蜂群开展mtDNA内切酶位点测试和分析研究,并与菲律宾的东方蜜蜂作对比分析。内切酶DraI分析7个蜂群,共发现4个内切酶位点;云南东方蜜蜂mtDNA的tRNAleu-COII基因的序列没有长度多态性,EcoRI内切酶位点共有4个,与菲律宾的吕宋岛的东方蜜蜂属于同一单倍型。另外,对来自尼泊尔、泰国、越南、老挝以及我国北京、云南等地的共13群蜜蜂mtDNA COII基因的420个碱基对进行测序分析,发现13群东方蜜蜂分析的420个碱基序列里,位点变异从0个到5个不等,变异率从0到1.19％. 用邻接法(neighbor-joining)构建的分子系统树可以看出分枝树主要分为两个类群:高纬度或高海拔的蜂群为一个类群,它们主要来自撒营盘（2）（China 4）、丽江(China 7)、北京(1)（China 1）、尼泊尔（Nepal）、北京（2）（China 2）、河口（1）（China 8）和越南（2）（Vietnam 2）。另一个类群的主要来自低纬度或低海拔的蜂群,它们主要来自撒营盘（1）（China 3）、景洪（China 5）、越南（1）（Vietnam 1）、泰国（Thailand）、河口(2) (China 6)和老挝(Laos)。该实验为我国东方蜜蜂资源的保护和开发研究提供了重要的信息和手段。     

江西省中华蜜蜂形态差异分析

为探究江西省中华蜜蜂的形态差异,采用逐步判别与聚类分析联用的方法对江西省11个样点330只中华蜜蜂工蜂样本的32个形态遗传标记数据进行了分析。结果表明,江西省中华蜜蜂在南、北区域出现明显的形态差异,赣中北地区较赣南地区的中华蜜蜂个体和器官偏大。本研究可为江西省中华蜜蜂资源的保护与利用提供参考。     

东方蜜蜂与西方蜜蜂酯酶同工酶的比较研究

酯酶（esterase）是一组多态性很高的同工酶，常用于昆虫种属鉴定和遗传变异研究。本试验采用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳（IEF-PAGE）技术，分析了浙农大Ⅰ号意蜂（A.m. lingustica）、东北黑蜂（A.m.ssp）和卡尼鄂拉蜂（A.m.carnica）等西方蜜蜂与中华蜜蜂（A.cerana cermama）酯酶同工酶及蜜蜂不同发育阶段酯酶同工酶的变化，以便为酯酶同工酶在蜜蜂遗传变异、种属鉴定及品种选育研究中的应用，提供基础资料。 　　1　材料与方法 　　1.1　材　料　浙农大Ⅰ号意蜂和中华蜜蜂来自浙江大学实验蜂场，东北黑蜂和卡尼鄂拉蜂来自吉林省蜜蜂研究所种蜂场。 　　1.2　方　法　每种蜂各取外勤蜂、内勤蜂和幼蜂20只，剪取头部，以1∶2（W/V）加入提取液, 在1.5 mL Eppendrof 管中，用玻棒研磨（冰浴中），离心（4 ℃，12 000 r/min,10 min）,取上清用于电泳。参照Nunamaher等的方法，用IEF-PAGE技术在LKB多相电泳系统中检测酯酶同工酶，酶活性染色液为0.1 mol/L pH6.5的磷酸缓冲液，含33.33%α-乙酸萘酯，33.33%β-乙酸萘酯，66.67%坚牢兰RR。……     

武夷山中华蜜蜂形态特征与微卫星DNA标记的相关分析

利用18个微卫星标记对武夷山中华蜜蜂群体进行多态性检测,同时测定个体的前翅长、前翅宽、前翅面积、肘脉指数、吻长和第3、4背板总长等形态特征,采用方差分析法对微卫星DNA标记与形态性状进行相关性分析.结果表明,位点A088对前翅宽、前翅面积有显著影响;位点Ag005 a对第3、4背板总长有显著影响;AP043、AT101对前翅长有显著影响;AP297对吻长有显著影响(P<0.05).     

东方蜜蜂研究——重新评价中国阿坝地理种群

杨冠煌等(1986)发表蜜蜂阿坝亚种Apis cerana abansis,其亚种学名并没有拉丁化,应为Apis cerana abaensis,因多种原因未得到认可,但形态测定和分子数据分析认可中国阿坝地理种群Aba cerana。笔者介绍蜜蜂种下分类时,测评了38个形态学指标的测量方法、阿坝地理种群研究历史和背景、青藏高原分化出阿坝地理种群的环境条件,以及该种群个体形态特征、生物学和分布;中国是世界东方蜜蜂多样性热点地区之一,提出了中国东方蜜蜂(工蜂)中华亚种Apis cerana cerana、印度亚种Apis cerana indica、海南地理种群Hainan cerana及阿坝地理种群Aba cerana的形态鉴定表,肯定中国东方蜜蜂的多样性;从中国蜂业生产实际出发,首次较好地解决了东方蜜蜂种和种下阶元(亚种和地理种群)的关系,提出保护东方蜜蜂阿坝地理种群的措施。     

东方蜜蜂研究——重新评价中国阿坝地理种群

杨冠煌等（1986）发表蜜蜂阿坝亚种Apis cerana abansis,其亚种学名并没有拉丁化,应为Apis cerana abaensis,因多种原因未得到认可,但形态测定和分子数据分析认可中国阿坝地理种群Aba cerana。笔者介绍蜜蜂种下分类时,测评了38个形态学指标的测量方法、阿坝地理种群研究历史和背景、青藏高原分化出阿坝地理种群的环境条件,以及该种群个体形态特征、生物学和分布;中国是世界东方蜜蜂多样性热点地区之一,提出了中国东方蜜蜂（工蜂）中华亚种Apis cerana cerana、印度亚种Apis cerana indica、海南地理种群Hainan cerana及阿坝地理种群Aba cerana的形态鉴定表,肯定中国东方蜜蜂的多样性;从中国蜂业生产实际出发,首次较好地解决了东方蜜蜂种和种下阶元（亚种和地理种群）的关系,提出保护东方蜜蜂阿坝地理种群的措施。     

云南威信、镇雄与蒙自东方蜜蜂形态对比分析

威信、镇雄年均日照时间较少,降水量较多,采集威信东方蜜蜂3群蜂群蜜蜂样本和镇雄东方蜜蜂1群蜂群样本,与蒙自东方蜜蜂6群蜂群样本进行对比分析,每群测定分析15只,每只工蜂共有38个测定的形态指标。结果表明,镇雄东方蜜蜂形态特征上与威信和蒙自东方蜜蜂存在显著性差异,这对进一步揭示威信、镇雄东方蜜蜂的生物学特性具有重要价值,为建立保种区域奠定基础。     

长白山东方蜜蜂形态特征研究*

 通过测定长白山6个不同样点17群东方蜜蜂的38个形态特征并采用计算机进行数据分析,得出长白山东方蜜蜂可分为3个类群。同邻近国家(日本、韩国)及中国部分地区的东方蜜蜂形态数据进行分析发现,长白山东方蜜蜂与日本、韩国的东方蜜蜂归于1个类群,由于长白山的气候及自然地理条件而形成多个小的生态区域,长白山东方蜜蜂在小区域内自成繁殖体系,各个生态区域间蜜蜂个体体色差异较大,体型大小差异不大。     

云南东方蜜蜂Apis cerana Fabricius的研究

 本文通过对云南省17个地(州、市)92个县124个点的东方蜜蜂进行形态测定及生物学特性观察,论述了东方蜜蜂在云南的地理分布、形态分化、地理变异和生产性能等方面的问题,确立了云南省的东方蜜蜂有3个亚种:印度亚种Apis cerana indica Fabricius,西藏亚种Apis cerana skorikovi Maa和指名亚种Apis cerana cerana Fabricius,同时提出了资源的利用意见。     

东方蜜蜂采集行为初步观察

 分析了东方蜜蜂发生采集行为的基本条件,研究了采集粉蜜的同一性,并初步测定了采集范围.结果表明:东方蜜蜂具有调整蜂群结构以最大生态效率来利用自然资源的特性.     

意大利蜜蜂响应东方蜜蜂微孢子虫胁迫的免疫应答

【目的】通过对意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica,简称意蜂）工蜂中肠响应东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）胁迫的差异表达基因（differentially expressed gene,DEG）及免疫通路进行深入细致的分析,揭示宿主的细胞和体液免疫应答,为关键免疫应答基因的筛选及功能研究打下基础。【方法】基于前期获得的正常及东方蜜蜂微孢子虫胁迫的意蜂7日龄和10日龄工蜂中肠（Am7CK、Am7T、Am10CK、Am10T）转录组数据,按照FDR≤1,P≤0.05和|log₂ fold change|≥1的标准筛选出各组的DEG,利用相关生物信息学软件对DEG进行Pearson相关性分析、Venn分析、GO分类和KEGG代谢通路富集分析,进而对免疫通路富集基因进行统计和分析,利用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）验证转录组数据的可靠性。【结果】 差异分析结果显示,Am7CK vs Am7T比较组包含472个上调基因和385个下调基因;Am10CK vs Am10T比较组包含611个上调基因和360个下调基因。Venn分析结果显示,两个比较组特有的DEG分别为739和853个,共有的DEG为118个。GO分类结果显示,Am7CK vs Am7T比较组中上调和下调基因分别涉及23和29个功能条目,其中富集上调基因数最多的前5位分别为结合、催化活性、代谢进程、细胞进程和单组织进程;富集下调基因数最多的前5位分别为代谢进程、单组织进程、催化活性、细胞进程和结合。Am10CK vs Am10T比较组中上调和下调基因分别涉及36和26个功能条目,其中富集上调基因数最多的前5位分别为单组织进程、结合、细胞进程、催化活性和代谢活性;富集下调基因数最多的前5位分别为结合、细胞进程、催化活性、代谢进程和单组织进程。KEGG代谢通路富集分析结果显示,Am7CK vs Am7T比较组中上调和下调基因分别富集在38和33条代谢通路,富集上调基因数最多的前5条分别为胆汁分泌、内质网蛋白加工、泛素介导的蛋白水解、PI3K-Akt信号通路和神经营养因子信号通路;富集下调基因数最多的前5条分别为胞质DNA传感通路、嘌呤代谢、嘧啶代谢、RNA聚合酶和核糖体;涉及泛素介导的蛋白水解等3条细胞免疫通路,以及PI3K-Akt信号通路等7条体液免疫通路。Am10CK vs Am10T比较组中上调和下调基因分别富集在54和43条代谢通路,富集上调基因数最多的前5条分别为Hippo信号通路、药物代谢-细胞色素P450、P450对外源物质的代谢、泛素介导的蛋白水解和鞘脂类代谢;富集下调基因数最多的前5条分别为mRNA监测、鞘脂类信号通路、果糖和甘露糖代谢、半乳糖代谢和鞘脂类代谢;涉及泛素介导的蛋白水解等7条细胞免疫通路,以及NF-κB信号通路等2条体液免疫通路。RT-qPCR验证结果显示6个随机挑选的DEG的表达量变化趋势与测序结果一致,证实了本研究中测序数据的可靠性。进一步分析发现意蜂7日龄和10日龄工蜂中肠的NF-κB信号通路均被东方蜜蜂微孢子虫激活,随即启动了3种抗菌肽apidaecin、defensin-1和hymenoptaecin的合成,体现了它们在宿主抵御东方蜜蜂微孢子虫入侵中的重要性。【结论】在转录组水平解析了意蜂工蜂中肠对东方蜜蜂微孢子虫的免疫应答,揭示宿主在胁迫前期同时作出细胞和体液免疫应答,前者可能在抵御病原入侵方面发挥主要作用;宿主的细胞免疫在胁迫后期持续增强,但体液免疫较大程度地减弱;泛素介导的蛋白水解通路及富集DEG,NF-κB信号通路及富集DEG,以及抗菌肽编码基因apidaecin、defensin-1和hymenoptaecin可能在意蜂工蜂对东方蜜蜂微孢子虫的免疫应答中起到关键作用。