猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪圆环病毒2型感染、猪伪狂犬病与猪附红细胞体病的诊断

应用RT-PCR、PCR、ELISA和染色镜检的方法,对甘肃省11个市州16个规模场及26户散养户送检的247份病料,同步进行了猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪圆环病毒病2型感染、猪伪狂犬病与猪附红细胞体病的检测,结果检出率分别为36.4%、8.6%、79.4%、57.1%、28.6%。     

华南地区猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析

为了解华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的最新流行情况,采集了华南地区11个规模猪场各饲养阶段猪血清807份,用套式PCR(nPCR)检测猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2);采集了若干猪场2010年1月至2011年8月期间有咳嗽、喘气、消瘦及疑似PDNS等临床症状的猪血清312份,以及无临床症状猪血清104份,以nPCR检测PCV-2,以一步法反转录PCR(RT-PCR)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。结果发现,所调查的11个规模猪场中只有5个检出PCV-1,所有猪场均检出PCV-2。PCV-2阳性率为30.61%,而PCV-1阳性率仅为4.21%;经产母猪和7周龄以上保育猪PCV阳性率最高;有临床症状的猪血清PCV-2阳性率为58.65%,PRRSV阳性率为37.82%,PCV-2阳性猪群中有39.89%的猪同时感染PRRSV;有症状猪群7月～9月的PCV-2感染率最高,而1月～3月最低;无临床症状猪血清PCV-2阳性率为27.9%,PRRSV阳性率为0.96%,PCV-2与PRRSV无混合感染。证明PCV尤其是PCV-2在华南地区仍广泛传播并流行,而且PCV-2与PRRSV混合感染致病情况较多。PCV-2的感染率与季节有一定的相关性,种猪带毒情况严重。     

同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒的多重PCR技术

本试验设计了一种多重聚合酶链反应（PCR）技术,可用于同时检测与猪繁殖和呼吸衰竭相关的3种病毒一猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒2型（PCV2）。根据3种病毒的靶序列设计引物,     

多重PCR检测猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒

根据GenBank上公布的猪瘟病毒UTR基因、猪圆环病毒2型ORF2基因、猪伪狂犬病毒gE基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因,使用生物学软件PrimerExpress2．0设计并合成了4对特异性的引物。通过对反应体系的优化,建立了可同时检测CSFV、PCV-2、PRV、PRRSV的多重PCR方法。灵敏度试验显示,该方法对4种病原的核酸浓度检测极限分别为1．31pg／μl、2．25pg／μl、9．86pg／μl、4．63pg／td;特异性试验中,能够将目标检测病原同其他病原区分开来。     

多重PCR检测猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒

应用Primer3.0和Omega2.0,根据猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪流感病毒(SIV)保守基因设计了3对多重PCR引物,建立PRRSV,SIV和PRV单项PCR检测方法,并在优化单项PCR反应条件(引物浓度、Mg2 浓度、退火温度等)基础上,初步建立了PRRSV-PRV-SIV多重PCR检测方法,并分别用多重PCR和单项PCR/RT-PCR检测10份临床病料,两者符合率为96.6%,表明该多重PCR检测方法有较高的敏感度,可以用于临床病料的检测。     

猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的混合感染

2005年以来,贵州省一些猪场发生以母猪流产、产弱仔、死胎,仔猪腹泻、消瘦、行动障碍等为特征的疾病,剖检病猪可见心肌、肾、淋巴结等出血,肺水肿,肝脏表面有灰白色坏死点,脾脏边缘有出血性梗死,发病率和死亡率较高。运用荧光抗体技术检测猪瘟（CSF）,设计套式引物用RT PCR或PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2),并进行了细菌分离培养。综合临床症状、病理变化、实验室检验,确诊为猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV-2）混合感染。     

猪瘟病毒猪细小病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒猪伪狂犬病病毒多重PCR方法的建立以及初步应用

猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪伪狂犬病病毒均能导致猪繁殖障碍,对养猪生产影响很大。本研究通过设计4对针对这4种病毒的特异引物建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明:其敏感性可达到CSFV 10 TCID50,PPV 10TCID50,PRRSV 1 TCID50,PRV 100 TCID50 CSFV 10TCID50,PPV 10TCID50,PRRSV 1 TCID50,PRV 100 TCID50。同时具有较好的特异性,对猪瘟病毒石门株、猪瘟病毒兔化弱毒株、PRV闽南A株、PPV弱毒疫苗株、PRRSV KY 35株及PRRSV B13株6个毒株均能扩增出相应的片段,而BVDV、BDV均未扩增出相应的片段。本方法的建立对于这4种病毒病的早期快速检测具有十分重要的意义。     

猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染病例的实验室诊断

为确诊贵阳市某养猪场生猪发病死亡的原因,采集3头病猪的血液、肺脏、肾脏、脾脏、淋巴结病料,采用PCR、qRT-PCR方法进行猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒核酸检测.结果:在血液及组织样品中猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,猪瘟病毒核酸检测均为阴性;在血液样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测结果为阴性,而...     

多重PCR检测猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒

根据猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)3种病原体的基因保守序列，分别设计了与CSFV的E2基因、PPV的VP2基因和PRV的gⅡ基因序列互补的3对引物。用这3对引物对人为混合的样品中的PPV和PRV的DNA模板及CSFV反转录后的cDNA模板进行多重PCR扩增和多重PCR反应奈件的优化，结果同时得到3务与试验设计相符的288bp(CSFV)、575bp(PPV)700bp(PRV)特异性条带；敏感性检测结果表明，该多重PCR可以检测到14．5ng／L的CSFV、27．1pg／L的PPV、31．4ng／L的PRV的核酸模板。     

河南省部分地区猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒和猪瘟病毒核酸检测分析

为了解河南省部分地区猪群中猪伪狂犬病(PR)、猪圆环病毒病(PCVD)和猪瘟(CSF)3种伴有神经症状的免疫抑制性疫病的感染情况,本研究应用RT-PCR、PCR方法对近期采集的豫西地区84份伴有神经症状的病料进行猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒检测分析。结果显示,PRV、PCV-2和CSFV的阳性率分别为75%、60.71%和32.14%;总单感率为32.14%,各自单感率分别为25.00%、3.57%、3.57%;总混感率为60.71%,PRV/PCV-2、PRV/CSFV、PCV-2/CSFV和PRV/PCV-2/CSFV 4种混感型的混感率分别为32.14%、3.57%、10.71%和14.29%。结果表明,河南省部分地区存在这3种伴有神经症状的猪免疫缺陷性疫病的流行,包括单感流行和混感流行;单感中以PRV流行为主,混感中以PRV/PCV-2这种混感型流行为主;混感复杂,具有PRV/PCV-2、PRV/CSFV、PCV-2/CSFV和PRV/PCV-2/CSFV四种混感型;总混感率比总单感率高,而PRV的单感率比PRV/CSFV、PCV-2/CSFV和PRV/PCV-2/CSFV 3种混感型的混感率却都要高。以上结果为该地区猪群神经症状疫病的诊断和防控积累了资料。     

猪口腔液中伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸稳定性研究

猪口腔液作为一种生物检材,在猪群疫病监测和诊断中受到越来越广泛的应用.目前尚不清楚病毒核酸在口腔液中的稳定性.利用猪伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒,采用荧光定量PCR技术,评估核酸保护剂和保存温度对病毒核酸在口腔液中稳定性的影响.结果显示,在4 ℃或室温条件保存1d后,核酸保护剂组病毒核酸含量比对照组分别高10倍...     

猪流感病毒与繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、圆环病毒、伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌混合感染的情况调查

应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混合感染的情况。结果发现：猪群中SIV感染率为11.9%(15/126),而在所检测的15份阳性病料中,SIV混合感染十分严重,感染率为73.3%(11/15)。混合感染病毒种类最多达四重感染（SIV+PRRSV+CSFV+PCV-2）,占6.67%(1/15);三重感染(SIV+PRRSV+PCV 2、SIV+PRRSV+CSFV) 占40%(6/15);二重感染（SIV+PRRSV,SIV+PCV-2）占26.6%(4/15)。调查结果表明广西发病猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2混合感染普遍存在。     

江苏省高邮市猪圆环病毒病和猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查

为了解江苏高邮市农户散养健康仔猪群猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染和带毒情况,本研究自2003年1月至2008年9月,随机选择并采集68个农户105窝母猪的372头2～5周龄仔猪血清,分别用ELISA和PCR方法检测PCV2和PRRSV抗体和病毒核酸,结果为,PCV2和1PRRSV感染率分别为17.5%(65/372)和32.3%(120/372),其中PCV2和PRRSV混合感染阳性率为12.9%(48/372),占PCV2感染猪的73.9%(48/65),而PRRSV感染率逐年提高,2008年达43.3%,从而为该病防制提供了理论依据。     

猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪伪 狂犬病病毒混合感染的检测分析

本研究采用RT-PCR方法对2010年12月至2011年11月采集于豫西地区的170份疑似PRRSV感染猪病料进行病原检测,得到102份高致病性PRRSV阳性样本,在此基础上应用PCR方法检测PCV2和PRV的感染情况,并计算混合感染率。试验结果显示,豫西地区PRRS发病猪主要疫病的总混合感染率为58.52%,二重混合感染率为39.21%,三重混合感染率为19.61%,其中PRRSV/PCV2型二重混合感染最严重,混合感染率达33.33%;春夏和秋冬总混合感染率分别为48.57%、81.25%,而且不管是二重还是三重混合感染,秋冬均比春夏更严重,尤其是PRRSV/PCV2/PRV型三重混合感染,秋冬与春夏季节的混合感染率相差较大,分别为37.50%、11.43%;PRRS发病猪从哺乳期到育肥期都有混合感染,混合感染率分别为42.10%、50.00%、100.00%,混合感染程度逐渐加重,主要集中在育肥期;不同发病时期的最高混合感染型也有所不同,其中哺乳期最高混合感染型为PRRSV/PCV2,混合感染率为42.10%,保育期最高混合感染型为PRRSV/PCV2、PRRSV/PCV2/PRV,混合感染率均为22.73%,育肥期最高混合感染型为PRRSV/PCV2/PRV,混合感染率为50.00%。本研究反映了豫西地区PRRS发病猪群与猪圆环2型及猪伪狂犬病的混合感染情况和规律,为该地区PRRS及其混合感染的临床诊治和区域性防控工作的进行提供了理论依据和指导。     

猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序设计

选择猪繁殖与呼吸综合征病毒和抗体阴性、猪伪狂犬病抗体阴性、猪瘟抗原阴性的20头仔猪,随机分成4组,分别为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组,分别设计3种猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序,首免后第2周开始每隔2周分别采血检测抗体。试验结果表明只有试验Ⅰ组的免疫程序可行,即:21日龄进行猪瘟疫苗首免,60日龄加强免疫1次,母猪分娩前10日龄进行猪伪狂犬疫苗首免,35日龄加强免疫1次,35日龄进行猪繁殖与呼吸综合征疫苗首免,60日龄加强免疫1次。     

多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的多重PCR方法（mPCR）。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。     

猪瘟猪繁殖与呼吸综合征猪圆环病毒2型混合感染

2005年底江苏某猪场饲养的商品肉猪群中部分猪只陆续发生高热、皮肤发绀、呼吸困难等症状，病程一般持续5～7天，发病猪一般以死亡为转归，发病猪在濒死前发生全身抽搐等神经症状。不同年龄段的猪群中均有不同程度的发生，临床表现基本相似。通过临床病理剖检和实验室诊断相结合的方法，诊断为猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征，猪圆环病毒2型混合感染。     

唐山市规模养猪场猪瘟、猪伪狂犬病等主要疫病免疫效果评估报告

<正>为掌握唐山市规模养猪场猪瘟、伪狂犬病等几种主要疫病免疫效果及防控现状,设计、调整并推广合理的免疫程序,2014年4月至6月,对唐山市8个规模养猪场开展了主要猪病的免疫效果评估,先将评估结果分析报告如下:1样本量的确定与采样方式1.1采样数量的确定按存栏量为4000~5000头/场,置信度为95%,预期病原感染率为5%,以为发现疫病进行抽样的样本量估算公式     

规模化猪场母猪猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸综合征、猪圆环病毒病和猪伪狂犬病的病原及其抗体检测与分析

<正>猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒(PCV-2)是导致猪繁殖障碍疾病的主要病原体,它们均可以引起种猪的持续性感染,造成母猪的带毒综合征,表现为繁殖障碍。母猪感染上述病毒后,可以通过垂直传播和水平传播的方式将疾病传染给仔猪,造成仔猪生长发育受到抑制,甚至死亡;并且它们均能引起猪的免疫抑制,造成免疫缺陷,机体免疫力下降,导致机体对其他病原体的易感性增强,接种疫苗后不易产生免疫应答,猪群抗体水平整齐度差,保护     

猪瘟、猪伪狂犬病及猪繁殖与呼吸综合征的免疫试验

选择20日龄仔猪分组后于不同日龄应用猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)及猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗进行免疫,检测猪群免疫前后的抗体水平。结果显示,仔猪免疫猪瘟活疫苗的日龄有待进一步探讨,猪瘟抗体ELISA检测方法比IHA方法可靠;仔猪于20、30、40日龄时免疫猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗,均不会对母源抗体造成干扰;猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗以及高致病性猪蓝耳病灭活疫苗如何使用尚需探讨。