耐酸性α-淀粉酶的研究进展

概述了耐酸性α-淀粉酶的产生菌的来源、先进的粗酶分离纯化技术以及酸性α-淀粉酶的特性,介绍了国内外获得高产酶菌株的研究进展并阐述了耐酸性α-淀粉酶的应用潜力和开发前景。     

耐高温α-淀粉酶的研究进展

耐高温仪α-淀粉酶是一种重要的工业用酶制剂。概述了耐高温α-淀粉酶的酶学性质、产生菌及其高产菌株的选育,并介绍了其发酵生产以及分离纯化方法等方面的研究进展。     

α-淀粉酶固定化的研究

综述了固定化酶的优越性,酶的固定化的方法分类以及不同方法的优点和缺点。以甘蔗纤维素衍生物为载体,用共价键结合法固定α-淀粉酶。根据温度、pH值、α-淀粉酶的浓度以及α-淀粉酶与甘蔗纤维素衍生物载体的配比对α-淀粉酶固定的影响,通过正交试验得到最佳固定条件为:温度60℃,pH值为6.0,α-淀粉酶的浓度为60U/ml,α-淀粉酶与甘蔗纤维素衍生物载体的配比为50ml∶1g。缓冲溶液为柠檬酸-磷酸氢二钾缓冲液。通过吸光度法测定所得固定化酶的活力为34.77U/g固定剂。测得米氏常数为12.88g/L,半衰期为3.17h,固定化酶在使用过程中没有α-淀粉酶脱离在产品中,所以可以减少额外的加工费用,同时可以循环使用。     

应用α-淀粉酶水解城市生活垃圾的研究

摘要用α-淀粉酶水解城市生活垃圾,研究了水解过程中α-淀粉酶添加量、水解温度、水解时间和底物浓度对水解度的影响。结果表明,α-淀粉酶水解城市生活垃圾的适宜条件为：α-淀粉酶添加量80IU／g,水解时间60min,水解温度80℃,底物浓度10％．     

利用α-淀粉酶和β-淀粉酶制备缓慢消化淀粉

以普通玉米淀粉为原料,分别利用α-淀粉酶和β-淀粉酶制备缓慢消化淀粉(SDS),并通过正交试验优化了制备SDS的最佳工艺条件.通过正交试验确定α-淀粉酶法制备SDS的最佳条件为:pH 6.5,酶反应时间50min,温度50℃,α-淀粉酶用量240 U,在此条件下SDS最高产率为7.11%;通过正交试验确定β-淀粉酶法制...     

江西红壤α-淀粉酶分离株的多态性研究

[目的]从分子生物学角度探索江西红壤α-淀粉酶分离株的多态性。[方法]以江西红壤中分离的产α-淀粉酶的菌株为研究对象,通过16S rDNA的通用引物进行PCR扩增,并对扩增产物进行酶切,研究产α-淀粉酶菌株的多态性。[结果]从江西红壤中共分离到33个产α-淀粉酶的菌株,用HhaI酶对这些菌株的16S rDNA进行酶切,共得7种酶切类型。这些菌株存在表型差异,而且呈现丰富的多样性。菌株间遗传背景有很大相似性,但个别谱带之间存在不同程度差异,具有丰富的生态多样性。[结论]该研究从分子水平上揭示了产α-淀粉酶的菌株在红壤中具有丰富的多态性。     

α-淀粉酶基因表达的调控

α-淀粉酶是一种非常重要的内生淀粉酶，其调控机制极其复杂，赤霉素对α-淀粉酶的调控是研究激素调控基因表达的一种模式。综述了赤霉素(GA)的信号传导途径，GA对α-淀粉酶基因转录水平的调控及其组织特异性调控，同时概述了糖类调控α-淀粉酶基因表达的最新研究进展，特别是针对禾谷类作物而言。提出了几个有待于解决且具有重要挑战性的问题。     

普洱茶化学成分及对α-淀粉酶抑制作用的研究

从普洱茶中分离并鉴定了2个单体化合物,分别为尿嘧啶和没食子酸,其中尿嘧啶为首次从普洱茶中获得。同时,研究了尿嘧啶和没食子酸对α-淀粉酶的影响。结果表明,没食子酸对α-淀粉酶有较强的抑制作用。此结果可为普洱茶降糖降脂作用机理提供一定理论参考。     

家蚕丝素固定化α-淀粉酶的制备及其理化特性

脱胶蚕丝用稀碱溶液处理后制成多孔的碱化丝素,经物理吸附方法固定α-淀粉酶,制得碱化丝素固定化酶.每克碱化丝素固定化酶的总活力为439.81 U,固定化酶活力回收率为48.33%,活力表现率为74.18%.同样,蚕丝经高浓度氯化钙溶液溶解、脱盐等处理后制成丝素粉末,经吸附后用戊二醛为交联剂固定了α-淀粉酶,制成粉末状丝素固定化酶.每克粉末状丝素固定化酶的总活力为509.09 U,活力回收率为58.33%,活力表现率为83.45%.经对固定化酶性质的研究表明:碱化丝素和丝素粉末均能较好地固定α-淀粉酶;最适温度比游离酶升高了10 ℃;最适pH降低了0.8～1.0个单位,固定化酶具有较长的操作半衰期(26～38 d)、较强的抗蛋白质变性剂(8 mol/L尿素溶液中的活力在80%以上)和贮存稳定性(贮存60 d后,其活力大于50%);实验还发现:在制备固定化淀粉酶时,酶的最适浓度为2.8～3.2 g/L,戊二醛的最适浓度为0.25%.     

基于耐高温α-淀粉酶处理面条制作最佳配方的研究

为研究耐高温α-淀粉酶与面条品质的关系,通过考察耐高温α-淀粉酶对面粉糊化特性以及制成面条烹煮损失的影响,找出合适的该酶添加水平和制作面条的工艺参数。结果表明,随着酶添加量的增大,面粉的峰值粘度、谷值黏度、回生值以及最终黏度都呈降低趋势,破损值一直增大。此外,酶添加量与面条的表观、透明性以及光滑性呈负相关,当加酶量为0.1U/g(面粉)时,面条的烹煮损失及面汤的浊度最小,品质较好。添加耐高温α-淀粉酶生产面条的最佳配比为:加酶量0.1U/g、加盐量1%、加碱量0.15%(均以面粉质量计)。     

耐酸性α-淀粉酶产生菌的发酵条件优化

[目的]优化耐酸性α-淀粉酶产生菌的发酵条件。[方法]在筛选出的耐酸性α-淀粉酶产生菌的基础上,对其培养基C、N含量、接种龄、接种量、初始pH值、摇瓶转速及温度等发酵条件进行优化。[结果]耐酸性α-淀粉酶产生菌最佳发酵条件为接种龄14 h,接种量8%,初始pH值5.5,发酵温度35℃,转速150 r/min,接种菌液量25 ml,培养基中C、N的含量分别为1.0%。[结论]在优化条件下,酶活力达到31.4 U/ml,比未优化时提高了65.3%。     

α- 淀粉酶产生菌的分离筛选及酶学性质研究

[目的]获得在某些方面性能优良（如耐高温、耐强酸、耐强碱等）的α-淀粉酶产生菌。[方法]对α-淀粉酶产生菌进行分离筛选,并对其酶学性质进行了研究。[结果]从稀释样品涂布的淀粉筛选平板上筛选出10株有明显淀粉水解圈的单个菌株,又从中得到3株α-淀粉酶酶活力较高的菌株：X6、X8和X10。这3株菌的最适pH值均在中性范围内,最适温度均为60℃。Ca2＋能提高酶的热稳定性,X6和X8在Ca2＋浓度为0.02～0.04 mol/L时,酶的热稳定性最高;X10在Ca2＋浓度为0.03～0.04 mol/L时,酶的热稳定性最高;当Ca2＋浓度继续增大时,酶的热稳定性反而降低。[结论]为满足不同行业对不同特征α-淀粉酶的需求提供了理论依据。     

不同药剂浸种对燕麦种子α-淀粉酶活力的影响

以牧民自留燕麦种子为材料,研究不同药剂浸种对其萌发时α-淀粉酶活力的影响。试验采用不同浓度赤霉素、抗坏血酸、水杨酸、硫酸铜对燕麦种子进行24 h浸种处理。测定燕麦种子发芽的第1、3、5、7天α-淀粉酶活力。结果表明:0.1 mmol/L水杨酸处理对燕麦α-淀粉酶活力的提高效果最佳,高浓度水杨酸(>0.2 mmol/L)对燕麦α-淀粉酶活力有抑制作用;0.3 mmol/L赤霉素对燕麦α-淀粉酶活力提高效果次之;抗坏血酸溶液对燕麦α-淀粉酶活力提高作用不明显;在一定浓度范围内Cu SO4对燕麦α-淀粉酶活性提高作用随浓度增大而增强。     

种子活力与发芽环境对玉米种子蛋白酶α-淀粉酶活性的影响

为探讨不同活力玉米种子田间发芽成苗率存在明显差异的生理原因,测定了不同环境条件下玉米种子发芽期间蛋白酶和α-淀粉酶的活性.结果表明,种子活力对玉米籽粒蛋白酶和α-淀粉酶活性的影响因发芽环境条件而异.高活力种子胚乳的蛋白酶活性在较低的温度下发芽比低活力种子的高,且在不同温度条件下的变化较小.胚乳蛋白酶活性在10℃和25℃下的比值与种子活力密切相关.玉米种子胚中蛋白酶的活性比胚乳的高,且高活力种子胚的蛋白酶活性较高.α-淀粉酶的活动开始于吸水约5 h时的种子中,发芽5～6 d时活性达最高.在10℃发芽时,高活力种子α-淀粉酶活性显著地高于低活力种子,但在25℃发芽时两者差异不显著.在不良环境条件下发芽,玉米种子的蛋白酶活性增高,α-淀粉酶的活性降低.高活力种子的蛋白酶和α-淀粉酶的稳定性和协调性较好.     

紫外线诱变选育酸性α-淀粉酶高产菌株

研究了紫外线处理对枯草芽孢杆菌BF7658产酸性α-淀粉酶的影响。结果表明：采用30W紫外线照射90s获得较好的突变效果;利用变色圈法初筛结合摇瓶发酵复筛,筛选得到1株理想的突变株UV-12,其酶活为3418.8U/mL,比出发菌株提高了59.7%;对UV-12进行紫外线二次诱变,酶活提高不显著,表现出一定的＂抗性＂。     

甘肃滩羊血清酯酶和α-淀粉酶多态性分析

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE)对甘肃滩羊产区皋兰、景泰及靖远3293只滩羊的血清酯酶(Es)、α-淀粉酶(α-Amy)基因座多态性进行了检测分析。结果表明:甘肃滩羊Es基因座存在3种基因型Es++ 、 Es+- 、 Es-- ,它们由Es+、Es-两个共显性等位基因控制,其中Es+-基因型在3个群体中均占优势,频率分别为0.620 0(皋兰)、0.666 6(景泰)、0.730 0(靖远);在皋兰群体和景泰群体中,Es-基因占优势,基因频率分别为0.540 0和0.548 4,而在靖远群体中优势基因则为Es+,其基因频率为0.525 0。在α-Amy基因座上没有检测到多态性。     

抗坏血酸、谷胱甘肽及半胱氨酸对α-淀粉酶及其光谱性质的影响

研究抗坏血酸、谷胱甘肽及半胱氨酸3种还原性化合物对α-淀粉酶及其光谱性质的影响。结果表明:在0.025-0.25mg/L范围内,谷胱甘肽对淀粉酶具有激活作用;在0.1-1.6 mg/L范围内,半胱氨酸和抗坏血酸对淀粉酶具有激活作用。紫外光谱表明,3种化合物与淀粉酶的相互作用均使淀粉酶波峰发生蓝移,改变了淀粉酶的微环境和空间结构。     

绿豆饮料制备中α-淀粉酶解工艺优化研究

[目的]以绿豆为原料,研究α-淀粉酶对绿豆粉酶解工艺.[方法]以离心沉淀率作为指标,通过对料液比、酶解时间、加酶量进行单因素试验和正交试验设计,测定饮料沉淀率以确定酶解绿豆饮料的最佳工艺参数.[结果]结果表明:料液比1∶11,酶解时间110 min,温度65℃,中温α-淀粉酶添加量200 U,绿豆谷物饮料酶解效果最佳,在该条件下离心沉淀率为29.68％.[结论]酶解后饮料的沉淀率降低,产品口感爽滑,稳定性较好.     

不同浸泡条件对小麦发芽前后α-淀粉酶活力的影响

[目的]优化小麦发芽前浸泡条件。[方法]采用L(934)正交试验进行优化,通过分光光度法测定α-淀粉酶活力。[结果]各因素对小麦发芽前浸泡对α-淀粉酶活力影响的主次顺序依次为:浸泡温度>浸泡方式>加碱量。小麦发芽前最适浸泡条件为15℃,"浸4断10",加碱(生石灰)量0.015%。[结论]最佳的浸泡条件对发芽产生了积极的影响,使发芽过程中的α"淀粉酶活力有较大的增强。     

耐高温α-淀粉酶航天诱变菌株H-HTAA-340的选育及耐高温α-淀粉酶的研制

以美国引进的耐高温α－淀粉酶HTAA—340菌株为出发菌株,利用空间各种诱变因素对其进行航天诱变处理,成功地选育出一株性能优良的H－HTAA－340菌株。该菌株用于工业化生产比出发菌发酵单位平均提高了13％。对发酵、提取工艺进行了革新,降低了生产成本,缩短发酵周期30小时,高效回收了产品,提高了产品质量和档次,同时还对耐高温α－淀粉内的辞学特性进行了试验研究,为该酶应用提供理论依据。