降糖中药的筛选

以PNPG为底物,α-葡萄糖苷酶为靶标,对48味常用中药进行筛选,找出降糖活性最高的中药作为研究对象,提取其活性单体,以期带动我国中药的产业化发展.     

马齿苋活性成分中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选

[目的]观察马齿苋活性成分对兔小肠黏膜α-葡萄糖苷酶活性的影响,筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。[方法]提取分离马齿苋活性成分,在体外建立微量酶反应体系,pNPG作为底物,以阿卡波糖为参照,检测马齿苋活性成分对α-葡萄糖苷酶活性的影响。[结果]马齿苋总提取液、粗多糖和总生物碱对α-葡萄糖苷酶具有明显抑制作用,抑制效果接近于阿卡波糖,不饱和脂肪酸和总黄酮无抑制作用。[结论]马齿苋防治糖尿病的主要成分是生物碱和多糖,可能具有阿卡波糖样的降糖机制。     

虎杖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

[目的]筛选虎杖（Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.）α-葡萄糖苷酶抑制活性物质。[方法]对中药虎杖的α-葡萄糖苷酶抑制活性进行测定,并对其活性物质进行了初步分离。[结果]虎杖水提物浓度为50 mg（生药）/ml时,对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率达68.5%,IC50约为37 mg/ml。虎杖水提物是α-葡萄糖苷酶的非竞争性抑制剂,抑制常数Ki为33 mg/L。采用层析分离得到了虎杖α-葡萄糖苷酶抑制剂,初步鉴定为多糖物质。[结论]该研究为植物源α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发奠定了基础,对发现高效、安全的降低餐后血糖新药物具有重要作用。     

β-葡萄糖苷酶高产菌株的筛选及其性质研究

从腐败的纤维质中分离筛选得到10株β-葡萄糖苷酶产生菌,与实验室保存的9株菌株一起做产酶发酵,其中B2酶活性最高,为24.4 U·mL﹣1,经菌种鉴定为黑曲霉,其β-葡萄糖苷酶最适合的pH值为4.5,最适温度为65℃,在pH值3.0～10.0较稳定;温度稳定性较好,在65℃保温120 min后仍有61.6%的相对活性;终浓度为5 mmol·L﹣1的Fe2+和Mn2+对酶活性有较强的促进作用.该酶较好的热稳定性和pH值稳定性使其显示出较好的应用潜力.     

国家新药筛选中心国际合作工作取得新的重要进展

由上海药物所等单位承担科技部重大科技专项“创新药物与中药现代化”“新药筛选及关键技术平台研究”课题的国家新药筛选中心，应用先进的高通量和高内涵药物筛选技术，对我国特有的化合物样品库(包括中药在内的天然产物)实施大规模随机筛选。在对筛选发现的活性化合物进行结构优化改造的基础上，开发治疗肿瘤、中枢神经系统疾病和代谢性疾病的原创新药。作为我国创新药物研究体系的重要组成部分，     

降解桑树枝条中纤维素优良菌株的筛选

通过羧甲基纤维素钠琼脂平板培养基结合刚果红染色法,从14个样品中筛选出11株具有较好降解纤维素能力的菌株,它们都能利用羧甲基纤维素作为生长碳源.将菌株分别接种在以桑树枝条粉末为主要碳源的固体复筛培养基上,11株菌株均能够生长,但0-18、9-9、13 -2、13 -3和12 -1生长缓慢,其余6株生长良好.将生长良好的6株菌株接种在液态复筛培养基上,30℃恒温培养发酵,7d后测定发酵液中纤维素酶活,结果显示7-7、0 -8和0 - 10具有较高的产纤维素酶能力,其中7-7和0-8菌株具有较高的产滤纸酶和羧甲基纤维素酶活力,0-8和0 - 10表现出较高的产β-葡萄糖苷酶活力.这3株菌株均为酸性菌,最适生长pH值为5～7,0-8和0- 10号菌株最适生长温度在32℃,而7-7号菌株最适生长温度在30 ～32℃.     

高产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及产酶条件优化

通过七叶苷平板法从腐殖质土壤中筛选得到高产β-葡萄糖苷酶的2个菌株(H_2和H_5),并利用单因素法对这2个菌株的产酶条件进行了优化。经形态学特征初步鉴定,菌株H_2和H_5均为黑曲霉(Aspergillus niger)。H_2的最优发酵条件为:以蔗糖为碳源,以硫酸铵+尿素(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.0。H_5的最优发酵条件为:以红糖为碳源,以硫酸铵+硝酸铵(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.5。在优化的各因素中,以培养温度对菌株H_2和H_5所产β-葡萄糖苷酶活力的影响最大。     

高产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及产酶条件优化

通过七叶苷平板法从腐殖质土壤中筛选得到高产β-葡萄糖苷酶的2个菌株(H_2和H_5),并利用单因素法对这2个菌株的产酶条件进行了优化。经形态学特征初步鉴定,菌株H_2和H_5均为黑曲霉(Aspergillus niger)。H_2的最优发酵条件为:以蔗糖为碳源,以硫酸铵+尿素(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.0。H_5的最优发酵条件为:以红糖为碳源,以硫酸铵+硝酸铵(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.5。在优化的各因素中,以培养温度对菌株H_2和H_5所产β-葡萄糖苷酶活力的影响最大。     

QHL3对α-葡萄糖苷酶活力影响及降糖机理研究

QHL3(全蚕粉)浸提物影响α-葡萄糖苷酶活力实验及大鼠麦芽糖耐量测试结果表明,QHL3浸提物对α-葡萄糖苷酶具有明显抑制作用,抑制率为46.33%;QHL3还能降低高血糖大鼠血糖值或延缓大鼠血糖峰值出现时间。其降糖机理主要是通过抑制大鼠体内小肠粘膜上α-葡萄糖苷酶活性、降低或延缓麦芽糖被分解的速度来实现的。     

高产碱性β-葡萄糖苷酶的产纤维素酶菌株的筛选

为获得高产碱性β-葡萄糖苷酶的产纤维素酶菌株,利用碱性羧甲基纤维素钠平板筛选和β-葡萄糖苷酶平板筛选法相结合,从植物腐败堆积土壤中分离到1株高产碱性β-葡萄糖苷酶的产纤维素酶克雷伯氏杆菌,并对其进行初步酶学鉴定。结果表明:该菌胞外分泌液具有内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶及β-葡萄糖苷酶的活性,其中以β-葡萄糖苷酶活性最高,为48.9U/mL。其所产纤维素酶的最适反应pH值为10.0,最适反应温度为35℃,且Ca2+、Mg2+、Zn2+和Mn2+等金属离子对该酶具有较强的抑制作用。     

水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化工艺及体外降糖活性研究

为考察水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化静态和动态吸附解吸效果,同时探究水晶冰菜作为天然降血糖药物的潜力,对水晶冰菜总黄酮粗提物(以下简称粗提物)进行大孔树脂纯化,以吸附率和解吸率为指标,对6种不同极性大孔树脂(D101、AB-8、NKA-9、HPD-100、X-5、S-8)进行筛选,再通过静态与动态吸附与解吸试验,探讨粗提物质量浓度、pH值、洗脱液体积分数、上样流速与上样体积、洗脱流速与洗脱体积对水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化的影响;在此基础上,以对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制率为评价指标,阿卡波糖为对照,考察纯化前后体外降糖活性变化。结果表明,D101型大孔树脂吸附和解吸效果较好。当粗提物质量浓度0.30 g·L~(-1)、pH值4、上样流速60 mL·h~(-1)、上样体积56 mL、洗脱液为体积分数80%乙醇溶液、洗脱液pH值6、洗脱流速60 mL·h~(-1)、洗脱体积128 mL时,通过D101型大孔树脂纯化后水晶冰菜总黄酮纯度为57.67%,较粗提物提高了2.98倍。水晶冰菜总黄酮通过抑制α-葡萄糖苷酶活性和α-淀粉酶活性发挥不同程度的降血糖作用,粗提物、纯化物和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果均显著高于对α-淀粉酶活性的抑制效果,其中纯化物对2种酶活性的抑制效果与阿卡波糖相比无显著性差异,但显著高于粗提物。     

α- 淀粉酶产生菌的分离筛选及酶学性质研究

[目的]获得在某些方面性能优良（如耐高温、耐强酸、耐强碱等）的α-淀粉酶产生菌。[方法]对α-淀粉酶产生菌进行分离筛选,并对其酶学性质进行了研究。[结果]从稀释样品涂布的淀粉筛选平板上筛选出10株有明显淀粉水解圈的单个菌株,又从中得到3株α-淀粉酶酶活力较高的菌株：X6、X8和X10。这3株菌的最适pH值均在中性范围内,最适温度均为60℃。Ca2＋能提高酶的热稳定性,X6和X8在Ca2＋浓度为0.02～0.04 mol/L时,酶的热稳定性最高;X10在Ca2＋浓度为0.03～0.04 mol/L时,酶的热稳定性最高;当Ca2＋浓度继续增大时,酶的热稳定性反而降低。[结论]为满足不同行业对不同特征α-淀粉酶的需求提供了理论依据。     

产α-葡萄糖苷酶菌株的筛选及其培养条件的研究

以6株霉菌为出发菌株发酵提取α-葡萄糖苷酶,以麦芽糖为底物进行转苷试验,用高压液相色谱法分析,筛选出1株产酶活力较高的菌株黑曲霉41873,并对其液体培养产酶条件进行了优化.单因素试验发现最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为豆饼粉,钙离子对产酶有促进作用.为进一步优化产酶条件,采用Plackett-Burman试验设计,从8因素中选出影响产酶的3个重要因素:麦芽糖浓度、接种量和培养时间.利用响应面分析法预测了当麦芽糖浓度为19.8 g/L,培养时间为18.2 h,接种量为0.2 ml时酶活达最大,为549.65 U/ml,通过试验验证,实际酶活分别为529、544U/ml,该模型有较好的预测性.     

基于体外降糖活性的桑葚渣水提物的超声辅助工艺优化

以桑葚渣为原料,采用超声辅助提取方法获得水提物并对其α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性进行检测,通过L₉(3⁴)正交试验优化了桑葚渣水提物的超声辅助工艺。结果表明:在最佳的提取工艺,即提取时间1.5 h、料液比1∶40(g·mL^-1)、超声温度50 ℃、超声功率350 W条件下,提取液对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制率分别为76.4%、81.4%。     

α-淀粉酶产生菌分离筛选及酶学性质研究（摘要）

[目的]为了获得在某些方面性能优良（如耐高温、耐强酸、耐强碱等）的α-淀粉酶产生菌。[方法]对α-淀粉酶生菌进行分离筛选,并对其酶学性质进行了研究。[结果]从稀释样品涂布的淀粉筛选平板上筛选出10株有明显淀粉水解圈的单个菌株,从中又测定得到3株α-淀粉酶酶活力较高的菌株即为：X6、X8和X10。这3株菌的最适pH值都在中性范围内,最适温度均为60℃。Ca^2＋能提高酶的热稳定性,X6、X8在Ca^2＋浓度为0.02～0.04mol/L时,酶的热稳定性最高,X10在Ca^2＋浓度为0.03～0.04mol/L时,酶的热稳定性最高;当Ca^2＋浓度继续增大时,酶的热稳定性反而降低。[结论]该研究为满足不同行业对不同特征的α-淀粉酶的需求提供了理论依据。     

中药药物抗兔大肠杆菌的筛选

兔大肠杆菌病是危害养兔业的主要传染病,试验分别选取黄连、黄芩、白头翁等五种中药,观察其对兔源致病性大肠杆菌抑制作用。结果表明,黄连、黄芩和白头翁具有良好的抑菌效果,且具有相互协同作用,为开发抗兔源致病性大肠杆菌的中药提供了有益参考。     

山茱萸不同部位提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

[目的]测定山茱萸果肉和果核提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为山茱萸资源的药用开发提供参考。[方法]采用乙醇和水分别对山茱萸果肉和果核进行提取,并测定其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。[结果]山茱萸果核提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为20倍醇提99.23%、30倍醇提98.96%、40倍醇提99.29%、20倍水提99.36%、30倍水提99.32%、40倍水提99.17%。山茱萸果肉提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为20倍醇提52.10%、30倍醇提60.77%、40倍醇提21.67%、20倍水提11.88%、30倍水提0.53%、40倍水提1.59%。[结论]山茱萸不同部位的水提取物和乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,其中山茱萸果核部位对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最为显著,其抑制率可高达99%以上,可见山茱萸果核中含有丰富的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物质,可作为药用资源予以开发利用。     

α-半乳糖苷酶产酶菌种的定向筛选及诱变选育

从土壤样品分离、实验室保藏菌种及引进菌种共200多个菌株中，经纸层析定向筛选，获得20株具有显著产α-半乳糖苷酶活性特性的菌株。进一步以R15^#菌株为出发菌株，经^60Co诱变处理，及紫外-亚硝基胍复合诱变，得到产廿半乳糖苷酶性能稳定、活力较高的变异菌株3个，其产酶活力达231U／g以上，平均比出发菌株提高190．9％。其中RM48^#菌株经连续传代7代，产酶性能未出现较大的变异，具有较好的遗传稳定性。该菌株经鉴定为黑曲霉变种（Aspergillus niger v．Tiegh）。     

治疗奶牛乳腺炎中药透皮制剂处方的筛选

文章研究了蒲公英、金银花、连翘、大黄、芙蓉花、黄芪、黄芩7味中药对奶牛主要致病菌的体外抗菌活性及其透皮制剂的抗炎效果。筛选出4种药物组成中药复方,按不同的配伍剂量设计了9个复方组合,分别研究了体外抗菌活性和抗炎效果,从抑菌和抗炎试验结果可以看出,复方4和8的综合效果最好。     

高产纤维素酶菌株的筛选

该研究从农田土壤中分离得到67株细菌,并从中选出一株高产纤维素酶菌株。将这些菌株接种到纤维素培养基上,在p H 5.5和28℃的条件下,利用刚果红染色溶液进行染色后,测其水解透明圈与菌落的比值的大小,进行初步筛选。将这些初筛的菌株接种到培养基中进行摇床培养后,制得粗酶液,并分析羧甲基纤维素酶(CMC)活力测定和滤纸酶(FP)活力及β-葡萄糖苷酶(BG)。在不同温度的条件下,对纤维素酶活力测定,最终筛选出曲霉A25(Aspergillus sp.)这一株菌株,最适酶活温度为50℃。产纤维素酶酶活力分别为:CMC酶活达2 340.92 U/m L;FP酶活达2.66U/m L;BG酶活达164.72U/m L。