黑果腺肋花楸原生质体分离研究

为建立有效的原生质体分离体系,研究了黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)原生质体酶解分离纯化条件。结果表明:黑果腺肋花楸愈伤组织在20g/L纤维素酶+0.5g/L果胶酶+13%甘露醇+5mmol/LMES酶解液中黑暗静置酶解10h,可获得高产量高活力的原生质体;采用500r/min离心8min分离纯化效果最好;愈伤组织比组培苗叶片分离获得的原生质体产量与活力更高。     

志贺毒素B(ShT-B)亚单位基因的克隆、表达与纯化

用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEM—TB3克隆质粒，得到为225bp成熟ShT—B基因片段，将其插入到经同样双酶切的pQE30表达载体中，构建了ShT—B的重组表达质粒pQE30-B2，转化到E．coli M15，经IPTG诱导后，重组质粒目的蛋白均得到表达表达蛋白约占菌体总蛋白的16％，主要为可溶性形式，约9．2％。为重组抗原的制备提供了必要的物质基础。     

枯草芽孢杆菌bioW基因在大肠杆菌中的表达及其对宿主生长的抑制作用

【目的】克隆枯草芽孢杆菌(B.subtilis)生物素基因(bioW),在bioW基因缺陷型大肠杆菌中进行表达,探讨其对bioW基因缺陷型大肠杆菌的遗传互补作用和对宿主的生长抑制作用,为生物素基因工程菌的构建奠定基础。【方法】用大肠杆菌表达载体pEXT20和枯草芽孢杆菌bioW基因构建表达载体pEXT20-bioW,并将其转化到大肠杆菌DH5α和生物素基因缺陷型大肠杆菌株R876中,构建重组菌DH5α(pEXT20-bioW)和R876(pEXT20-bioW)。分别将R876、DH5α(pEXT20-bioW)、R876(pEXT20-bioW)在不同培养基和不同IPTG浓度下进行培养,检测bioW基因对bioW基因缺陷型大肠杆菌株的遗传互补和生长抑制作用。【结果】在生物素限制性培养基中,只有同时加入庚二酸和IPTG时,R876(pEXT20-bioW)才能生长。在不含IPTG的LB培养基中,R876(pEXT20-bioW)生长正常;在添加不同浓度IPTG的LB培养基中,DH5α(pEXT20-bioW)和R876(pEXT20-bioW)生长均受到不同程度的抑制。【结论】bioW基因对bioW基因缺陷型大肠杆菌有遗传互补作用。在大肠杆菌中,bioW基因的表达对宿主有生长抑制作用。     

大蒜紫斑病菌的分离及培养条件研究

从田间具有典型病斑的发病大蒜叶片上分离病菌并培养,形态和致病性鉴定结果表明,得到的病菌为大蒜紫斑病病菌,属葱链格孢(Alternaria porri(Elliott)Cif.)。培养条件研究表明,病菌在马铃薯葱汁琼胶培养基上生长速率最快,产孢量也最多;菌丝生长的适宜温度范围为22~30℃,低于18℃或者高于37℃均不适宜生长,菌丝培养的最适温度为26℃;病菌产孢的适宜温度范围为20~26℃,产孢培养的最适温度为22℃。菌丝在光暗交替条件下生长最快,在连续黑暗条件下产孢最多;在pH5~12范围内均能生长和产孢,以pH8产孢最多。     

大肠杆菌内毒素对肉鸡腹水症的影响

试验选用１日龄商品肉鸡５０只,随机分成对照组２０只,试验组３０只。从第４周龄起,试验组肉鸡腹腔注射大肠杆菌内毒素（８ｍｇ／ｋｇ／只）,每周攻毒一次,共３次,每次攻毒后第７ｄ称重,宰杀对照组５只,试验组１０只以供检测,试验结果如下：大肠杆菌内毒素（Ｏ１１１Ｂ４）对肉鸡心,肝造成明显的病理变化,随着攻毒次数的增多,心脏病变种类由２种增加到４、５种,肝脏病变种类由２种增加到３、４种,以心脏的病变更为明显     

穿梭表达载体pYG43的构建及碱性纤维素酶基因的分泌表达

用枯草杆菌强启动子P43构建了大肠杆菌 -枯草杆菌穿梭表达载体pYG43 ,其可在大肠杆菌胞内高效表达β 半乳糖苷酶 (最高达92 0 0U)。利用该载体分泌表达了枯草杆菌碱性纤维素酶 (最高达 60U/ml) ,在原宿主菌 (B .subtilis 1A747)的基础上提高了 5～ 7倍。     

Neurobiology. Death leads to brain neuron birth

Although scientists have provided mounting evidence in the past few years that new neurons can be produced in some areas of the adult brain, the neocortex--the region most concerned with such higher brain functions as memory and learning--did not seem capable of such regeneration. Now, in the 22 June issue of Nature, neuroscientists report that when they induced certain neurons in the neocortex of adult mice to self-destruct, the loss triggered the formation of replacement neurons by brain stem cells. If similar regeneration of brain neurons can be triggered in humans, the findings could open the door for treatments that might restore memory in Alzheimer's disease, for example, or undo the damage wreaked by spinal cord injury.     

FMDV非结构蛋白3A和3B的表达与反应活性分析

根据已测得的O/China/99口蹄疫病毒(FMDV)基因组序列,设计两对特异性表达引物,以带有O/Chi-na/99 3ABC基因片段的重组质粒pGEM-3ABC为模板,扩增得到了3A、3B基因,通过两端的BamHI和SalI酶切位点插入原核表达载体pET28a,将重组表达质粒转化宿主菌BL21,用IPTG诱导表达目的蛋白.表达产物经SDS-PAGE检测表明,3A和3B基因成功的在大肠埃希氏菌中得到了表达;通过Western blotting分析和斑点ELISA分析表明,纯化后的蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应.