植源性蜕皮激素对家蚕后部丝腺谷氨酸—丙酮酸转氨酶活力的影响(初报)

<正> 家蚕丝腺的成长受到内分泌环境的支配。据国外学者研究认为,“在保幼激素(简称JH)诱导幼虫蜕皮的体内环境下,丝腺的发育受到限制,只有蜕皮激素(简称MH)加强作用的环境下,丝腺、丝素和丝胶的造成急速增加”(赤井弘1980)。“JH能抑制蛋白质的合成”(佩特尔等1969)。“MH能促进蛋白质的合成”(福田等1971)。这些论点说明丝物质的大量合成与MH的分泌作用有关。但是,广东农林学院蚕桑系1975年报道和许廷森等1979年报道认为,“五龄中期喷布JH类似物能促进家蚕后部丝腺谷-丙转氨酶     

昆虫外源激素对家蚕生长发育的影响及其相互关系的研究

用昆虫保幼激素(JH),蜕皮激素(MH)和抗保幼激素(AJH)给家蚕添食、体涂或注射,进行调控其生长发育的试验。结果表明:(1)2龄、3龄和4龄蚕应用外源激素处理,AJH与MH之间存在明显的拮抗关系;而AJH与JH间未表现出拮抗关系。(2)第5龄蚕应用外源激素处理,JH与MH间的拮抗关系明显。(3)AJH(YA_(20))对家蚕生长发育的影响,主要表现为抗蜕皮激素和类似保幼激素的生理效应。在第4龄添食AJH诱导3眠蚕的情况下,利用JH延长3眠蚕的龄期经过,是提高3眠蚕茧丝产量的技术途径之一。     

蜕皮激素对家蚕几个器官蛋白质合成活性的影响

用3H-甘氨酸参入法研究了家蚕五龄幼虫丝腺、脂肪体和中肠等器官白质合成活性的动态变化及蜕皮激素(简称MH)的影响。研究结果表明,五龄前期一次添食和每天连续添食MH能显著提高后部丝腺丝心蛋白和脂肪体蛋白质的合成活性,而抑制中肠蛋白质和五龄中后期中部丝腺丝胶蛋白的合成活性。此结果,为阐明MH对蚕体蛋白质合成的调控作用提供了直接的证据。     

外源蜕皮激素和保幼激素类似物对家蚕丝腺蜕皮激素受体基因表达活性的影响

为了进一步探讨外源蜕皮激素（Moulting hormone,MH）和保幼激素类似物（Juvenile hormone analogue,JHA）处理家蚕的增丝机理,本试验分别于5龄24h注射植源性MH和5龄72h注射JHA,采用半定量RT-PCR方法,测定了蜕皮激素受体（ecdysone receptor,EcR）（BmEcR-B1型）基因在家蚕5龄不同发育时期在中部丝腺和后部丝腺中表达量的变化。结果表明,正常对照家蚕丝腺中,EcR基因的表达均在5龄前期表达量较低,中后期表达量较高,但丝腺不同部位,表达模式不同。5龄24h用MH处理后,无论是中部丝腺还是后部丝腺,EcR基因的表达活性与对照组相比,总体上均是先上调后下降;而5龄72h用JHA处理,EcR基因的表达一直到对照熟蚕前均低于对照区;但两种处理区在对照区熟蚕之后仍有不同程度的表达。说明外源激素可通过影响MH受体基因的表达,从而影响了MH信号转导,进一步影响丝蛋白的合成。     

用保幼激素和蜕皮激素处理离体培养家蚕丝腺对丝蛋白基因表达的影响

蜕皮激素(20E)和保幼激素(JH)具有共同调控家蚕丝蛋白合成的作用。将家蚕5龄第3天幼虫的中部和后部丝腺置于含不同浓度20E或JH的培养基中进行离体培养,于培养不同时间通过定量PCR检测丝素蛋白基因及丝胶蛋白基因的表达变化。结果表明,蜕皮激素处理对丝蛋白基因表达的影响,因激素使用剂量和作用时间不同而异;保幼激素处理会抑制丝蛋白基因的表达,尤其对丝素蛋白重链基因Bmfib-H的表达抑制作用更为明显,50 ng/m L JH处理48 h后Bmfib-H的表达水平下调1倍左右;蜕皮激素和保幼激素共同处理比单一激素处理更有助于丝蛋白基因的表达,但用保幼激素先处理丝腺24 h后再用蜕皮激素和保幼激素共同处理,会显著抑制丝素蛋白轻链基因Bmfib-L的表达。试验在排除蚕体内源激素干扰的条件下,从转录水平初步分析了保幼激素和蜕皮激素对家蚕丝蛋白基因表达的调控机制。     

保幼激素和蜕皮激素对桑蚕后部丝腺核酸合成的影响

JHA和MH对桑蚕后部丝腺核酸合成的影响,因蚕儿的发育时期及使用剂量不同而异;在5龄前期,JHA抑制后部丝腺的核酸合成,MH促进合成;而在5龄后期,JHA的促进作用大于MH;若用JHA和MH连续处理或一次性高剂量注射,则两种激素均具有强烈的抑制作用。     

保幼激素和蜕皮激素混合使用对家蚕发育和产丝量的影响

<正> 保幼激素(JH)和蜕皮激素(MH)单独使用,对家蚕的生物活性效应及其在养蚕生产上的应用研究报道很多,但关于两种激素混合使用对家蚕的生理效应尚未进行系统研究。为进一步探讨外源JH和MH对家蚕发育的相互作用及用于养蚕增丝的新方法,本试验在4—5龄期应用保幼激素类似物(JHA)和植源性MH混合处理,调查了其对生长发育和产丝量的影响。现将两年试验结果简报如下。     

昆虫保幼激素和蜕皮激素对家蚕丝腺生长的影响

外源性JHA和MH对家蚕丝腺生长的影响,因蚕儿的发育时期及使用剂量不同而异;在5龄前期,JHA抑制丝腺生长,MH促进生长;而在5龄后期,JHA的促进作用大于MH;若进行激素连续处理或一次性高剂量注射,则两种激素均具有强烈的抑制作用。     

家蚕5龄添食咪唑类化合物的生物效应

<正> 昆虫激素中,保幼激素(JH)和蜕皮激素(MH)已在蚕业生产中普遍应用,起到调节家蚕生长发育和增产茧丝等作用。美国 Bowers于1967年报道了从植物中提取到能诱导昆虫早熟变态的生理活性物质,称作抗保幼激素(AJH)。近10年来,利用这种生理活性物质对家蚕作试验,能使4眠蚕诱导3眠化。这类生理活性物质大多是咪唑类化合物,其中生理活性较高的有 KK—42和 SSP—11等几种。木内等(1985)、赤井等(1987)报道,人工饲料育和桑叶育的5龄期添食 SSP—11,表现出增丝作用。笔者用 KK—42和 SSP—11多次进行5龄添食试验,以谋求新的增产增丝途径,结果认为眯唑类化合物5龄添食具有明显的增丝效应。本文就家蚕5龄添食咪唑类化合物对5龄发     

多效唑对家蚕生理影响的研究初报

家蚕的生长发育,直接受到由咽侧体分泌的保幼激素(JH)和前胸腺分泌的蜕皮激素(MH)的调节控制,关于这两类激素的生物化学性质以及在蚕体内的生理作用都有详细的研究和报道.近年来发现,某些动物能够合成植物激素,更重要的是植物体内含有大量的动物激素或激素类似物,使人们对动物和植物之间的关系有了进一步的了解.但植物激素对动物影响的研究报道较少,对昆虫的影响研究更少.柯叶艳等系列研究表明异黄酮植物雌激素对动物的肌肉生长、乳腺发育、免疫功能和产蛋率等有积极的促进作用;植物激素添加饲料对肉猪生长也具有促进作用.本文以植物生长调节剂多效唑进行家蚕添食实验,进一步探讨植物激素对昆虫的影响,以期为植物激素的应用提出新的思路.     

伴性不结茧蚕的遗传研究

以137及苏8为材料,配制两亲原种、正反交F_1、F_2及8种回交种共14种交配方式,1980年春期在同一条件下饲养,5龄进行幼虫性别鉴别,分性别饲养和上簇,调查各种交配方式的不结茧蚕发生率、不结茧蚕的丝腺形态及变态、产卵情况。根据已有研究报道,对实验资料进行了分析认为:(1)伴性不结茧蚕的发生,既受遗传基因的支配,又受环境条件的影响,一般只在环境条件优越、生长发育良好的春期条件下大量发生,秋期不发生;同在春期,不同年份也有差异。(2)伴性不结茧蚕,系由于137品种所携带的、位于Z染色体上的伴性隐性早熟基因Lm~e所引起。Lm~e基因在雌体中能得到表现,雄体中在纯合情况下也能表现其作用。Lm~e能促使脑大量分泌脑激素,从而抑制咽侧体分泌JH的机能,降低幼虫体内的JH水平,引起内分泌失调,导致丝腺畸形,产生不结茧蚕。(3)不结茧蚕发生率的高低,既取决于Lm~e基因是否有表现的机会,又取决于幼虫的体重,咽侧体分泌JH的能力是一定的,体重重的,单位体重的JH水平低,不结茧蚕多发,体重轻的,JH水平相对增高,不结茧蚕相应减少。(4)对于Lm~e基因能表现其作用,体内JH水平低,容易成为不结茧蚕的个体,在壮蚕期给与一定剂量的合成保幼激素,可以提高幼虫体内的JH水平,减少不结茧蚕的发生。(5)不结茧蚕的中部丝腺都有程度不同     

蚕用蜕皮激素的科学使用方法

蚕用蜕皮激素目前在蚕茧生产上应用广泛,它能促进壮蚕成熟整齐,节约桑叶和劳力,并可在一定程度上减轻蚕病和因缺叶造成的损失,故深受广大蚕农的欢迎。 试验表明,越近上蔟期喷施蜕皮激素,叶丝转化率越高。在5龄蚕上蔟前适时喷施蜕皮激素,比正常老熟蚕上蔟,万头蚕茧量和茧层量分别增加5．84％和8．44％。在生产应用中,由于对蜕皮激素的作用有偏见,不少养蚕户过早、过量地盲目添食蜕皮激素,催蚕提早成熟,     

家蚕添食~(15)N-尿素的增丝机理

应用稳定性同位素~(15)N示踪及质谱分析技术,探讨尿素液给家蚕添食后的增丝机理。结果表明:~(15)N—尿素液喷布于桑叶喂蚕后,蚕体、丝腺、茧壳、蚕蛹内所含的~(15)N丰度值均高于对照,且丝腺与茧壳中占的比例远远超过蚕体组织与蚕蛹。示踪法证明:尿素经水解产生氨基进入蚕体,而借转氨酶的作用促使非蛋白质氮化物转变成蛋白态氮,参与蚕体蛋白和丝蛋白质的合成,从而提高了蚕茧的产丝量。     

保幼激素和蜕皮激素对家蚕离体后部丝腺吸收核酸和蛋白质标记前体的影响

用后部丝腺离体培养和示踪原子法,研究了保幼激素类似物和植源性蜕皮激素对家蚕后部丝腺吸收核酸和蛋白质标记前体的影响。离体后部丝腺对~3H-胸腺嘧啶核苷、~3H-尿嘧啶和~3H-甘氨酸的吸收活性均受培养液中激素的影响。在本试验培养时间内,总吸收量均以两种激素同时加入高于单种激素加入;在加入其中一种激素时,吸收活性还因供试幼虫发育时期的不同(五龄前期或后期)而表现出相反的趋势;吸收的~3H-甘氨酸参入后部丝腺蛋白质合成的比率,以加入保幼激素类似物时较低,加入蜕皮激素和两种激素同时加入时较高。因此认为,不同发育时期接受过不同内源激素作用了的后部丝腺,在短期的体外条件下对激素的反应是不同的;但五龄任何时期的后部丝腺,均是在两种激素共同作用下,比单种激素作用更有利于核酸和蛋白质的合成。     

蜕皮激素氧化酶基因在家蚕丝腺中的表达特征及重组表达分析

昆虫蜕皮激素氧化酶(EO)是分解蜕皮激素的关键酶之一，该酶通过蜕皮激素3位异构化途径将蜕皮激素分解成3异构化蜕皮激素，从而调控蜕皮激素的滴度。课题组前期通过家蚕转录组学分析发现一个在丝腺组织特异表达的蜕皮激素氧化酶基因(EOs),为了研究该基因的时空表达模式及蛋白质功能，对丝腺蜕皮激素氧化酶基因的表达谱进行了分析，同时利用原核表达系统对其进行重组表达及分离纯化。RT-PCR和qRT-PCR检测表明，EOs在家蚕幼虫5龄期的丝腺组织特异表达，且主要在中部丝腺的前部表达；免疫荧光实验结果表明，EO不仅存在于家蚕中部丝腺细胞，而且还会分泌到丝腺腺腔中。将EOs全长cDNA克隆到pMD-19T载体中，再进一步亚克隆到原核表达载体PET-28a,然后将构建好的pET28-BmEOs质粒转入大肠埃希菌BL21中进行表达，通过SDS-PAGE检测发现在1 mmol/L IPTG诱导后的上清中有一条大小约60 kD的蛋白质条带，经Western blot检测该蛋白质可与抗体发生特异性结合，表明BmEOs被成功表达。将大量上清经过Ni亲和柱纯化后，获得了纯化的目的蛋白质。研究结果为进一步分析丝腺中蜕皮激...     

家蚕几种组织中谷丙转氨酶活力的测定

<正> 谷丙转氨酶(GPT)是蚕体中一种重要的氨基酸代谢酶,由于GPT能使丙酮酸转变为家蚕丝蛋白质中主要的组分——丙氨酸,所以国内对该酶的研究比较多,尤其主要集中在后部丝腺这一器官。一般认为GPT活力的提高,可促进丝蛋白的合成,从而提高蚕茧量;在调节GPT活力方面的工作,主要是添加外源性保幼激素类似物和蜕皮激素;但对家蚕其他组织中GPT的分布和变化情况了解甚少。本试验旨在分析GPT在家蚕几种主要器官中的分布及含量变化,为以后的研究提供实验依据。     

蜕皮激素在种茧育中的实用性研究

蜕皮激素(MH)在丝茧育中的应用效果已为养蚕经营者熟知,即能促使熟蚕齐一,提早上簇,从而节省桑叶和劳力.但另一方面,也存在着产茧量减少,干壳量下降的缺点,使用方法稍有不当,会降低养蚕的经济效益.在种茧育中MH的实用效果如何呢?赵瑞华(1991)对几对原蚕品种按常规方法使用MH,调查了茧质和产卵量,结果表明不同蚕品种的实用效果有所不同,有的使用MH后,体质、茧质、产卵量均与对照无明显差异,但有的表现出或茧质下降或体质下降或产卵量下降的倾向.赵祖康等(1992)试验表明,     

昆虫保幼激素研究新进展

昆虫的生长发育、变态主要是受脑神经分泌细胞产生促前胸腺激素（Prothoracicatropic hormone;PTTH);前胸腺分泌的蜕皮激素（Ecdysteroids)及咽侧体分泌的保幼激素（Juvenile hormone;JH)街3种激素所控制。PTTH顾名思义是一种刺激前胸腺分泌蜕皮激素的激素，而JH和蜕皮激素是直接控制昆虫生长、变态的重要激素，近年来，随着分子生物学的发展，从分子水平研究昆虫激素也取得了较大的进展，虽然JH的研究较蜕皮激素的研究水平稍许滞后，但也有了长足进行，特别是咽侧体抑制素的种类、氨基酸序列结构分析和JH运载蛋白分子生物学的研究等取得了可喜的进展。     

VB_6对家蚕氮代谢的影响

用人工饲料无菌饲育方式 ,分析维生素B6(VB6)对家蚕丝腺生长、血淋巴蛋白质浓度、血淋巴游离氨基酸组成变化及氮代谢终产物尿酸形成的影响。结果表明 :5龄期家蚕在缺乏VB6条件下 ,丝腺生长严重受阻碍 ,血淋巴蛋白质不能正常合成 ,使体内氨基酸转化利用率下降 ,氮代谢终产物尿酸的排泄量增加 ,血淋巴中部分游离氨基酸浓度下降 ,特别是合成丝蛋白质主要成分的Ala、Ser和Tyr等蚕体非必需氨基酸的组成比率显著减少 ,而Gly、Orn和Cysta等的浓度增加异常 ,导致血淋巴中游离氨基酸组成动态平衡破坏 ,显示蚕体内因VB6缺乏引起氨基酸代谢失调。     

蜕皮激素蚕业应用试验简报

蜕皮激素在蚕业上应用的研究,近年来在全国各省蚕区广泛开展,我组在1974—1975年与中国科学院上海有机化学研究所协作,对从植物提取的蜕皮激素进行了试验。二年来,在各级党委的领导和在广大贫下中农的积极支持下,通过反复多次试验,找出了有效地应用蜕皮激素的时间、剂量和实用方法,得出应用蜕皮激素能促使5龄蚕提早成熟且