仔猪副伤寒活疫苗生产工艺的改进

在仔猪副伤寒活疫苗生产中,通过改进大种的生产工艺,使菌液冻干前菌数和冻干后活菌数明显提高,几批产品都达到30头份/瓶以上,为及时生产出质量可靠的疫苗提供了保障。     

分段补料法生产猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗(EO630株)的试验研究

为了改进猪多杀性巴氏杆菌病（亦称猪肺疫）活疫苗抗原制备工艺,提高生产效率和产品质量,本试验使用分段补料发酵工艺制备猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗（EO630株）抗原,培养第12~13小时,EO630株的活菌数达到高峰期,最高活菌数可达1.31×1010CFU/ml。按分段补料法共生产抗原5批,培养12小时后收获抗原,平均活菌数为1.17×1010CFU/ml,进行配苗和冻干疫苗5批,冻干后的平均存活率为69%。进行安全和效力检验,均合格,达到预期效果。与传统方法相比,该方法培养的活菌数有大幅度的增长,优势明显。     

猪丹毒活疫苗合成培养基中B族维生素对培养菌数影响试验

为使猪丹毒活疫苗在合成培养基生产中的细菌培养效果更为理想,通过对自行研制合成的培养基中B族维生素含量的进行调整,以提高丹毒杆菌培养后的菌数,并在大规模生产中能够在一定范围内实现菌数可控,降低批与批之间的菌数差异,从而稳定丹毒疫苗生产。本试验在不改变其他培养基成分的前提下,通过3种不同B族维生素含量培养基进行比较发酵培养试验,同时设制传统肉肝胃酶消化汤作为对照,通过比对发现,配方2在培养后及冻干后最为稳定。     

仔猪副伤寒活疫苗(C500株)生产工艺关键技术研究

仔猪副伤寒活疫苗(C500株)生产过程中,存在培养菌数低,冻干死亡率高等问题,影响产品的产量。本文针对仔猪副伤寒活疫苗(C500株)生产工艺关键技术进行研究,通过筛选接种量、培养基配方与通气量的参数关系;优化发酵培养工艺,采用自动添加40%葡萄糖补充碳源并作为调节p H值的手段;使用分光光度法与冻干工艺结合作为收获标准,从而达到提高培养菌数,降低冻干死亡率。本研究为生产高效、安全、稳定的仔猪副伤寒活疫苗产品提供有力地技术支持。     

蛋白胨对仔猪副伤寒疫苗培养菌数和冻干后活菌率的影响

细菌生长的好坏与培养基的质量密切相关。在仔猪副伤寒疫苗的生产中，使用不同的蛋白胨，培养菌液的菌数和疫苗冻干后活菌率差异明显。从结果看，以月示蛋白胨效果最好。     

有关冻干布氏杆菌苗的一些问题的研究

引言在冻干过程和在储藏阶段中,活菌稳定与否,是衡量布氏杆菌活苗冻干质量的重要尺度。本文着重探讨有关影响冻干布氏杆菌苗活菌数的几个问题。分析了一部分生产材料,同时结合生产作了若干试验,已经明确了一些问题。兹将各项结果报告于下。     

猪丹毒弱毒菌苗增菌“105”培养基的研究

猪丹毒弱毒菌苗是文化大革命中培育出的产品,全国不少生物药厂都在生产。但在生产实践中猪丹毒弱毒菌株在培养中,菌数比较低,现用的GC42弱毒株,我厂按试行规程规定的肉肝胃膜配比的培养基进行试生产,1976年年初共生产10批,平均菌数只达39亿/毫升,冻干后只有23.6亿/毫升,按每瓶分装8毫升原苗、按口服头剂出厂,     

用不同培养基生产猪多杀性巴氏杆菌活疫苗的试验研究

用马丁干粉和马丁肉汤培养基培养猪多杀性巴氏杆菌,分别生产3批猪多杀性巴氏杆菌活疫苗.结果用马丁干粉培养基生产的制苗用茵液的活菌数分别为1.80×1010 CFU/mL、1.75×1010 CFU/mL、1.80×1010 CFU/mL;冻干后的存活率分别为64%、69%、67%.用马丁内汤培养基生产的制苗用菌液的活菌数分别为1.20×1010 CFU/mL、1.50×1010 CFU/mL、1.10×1010 CFU/mL,冻干后的存活率分别为50%、49%、54%.用两种培养基制备的疫苗按<兽用生物制品检验标准>(以下简称<标准>)检验6批疫苗均合格.     

布氏菌病活疫苗（Rev.1株）冻干保护剂工艺的研究

布氏菌病活疫苗(Rev.1株)的冻干工艺借鉴、采纳布氏菌病活疫苗(S2株)成熟的冻干工艺及菌液的配比,对冻干保护剂的选择进行了优化。我们选择蔗糖明胶保护剂和蔗糖脱脂乳保护剂,保护剂与布鲁氏菌Rev.1株菌液以16的比例混合,冻干后测定其活菌含量。结果显示,3批使用蔗糖脱脂乳保护剂的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12×10^9CFUmL、12.44×10^9CFUmL、12.65×10^9CFUmL;使用蔗糖明胶再加入终浓度约1%硫脲的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12.34×10^9CFUmL、12.62×10^9CFUmL、12.91×10^9CFUmL;使用蔗糖明胶的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12.22×10^9CFUmL、12.64×10^9CFUmL、12.8×10^9CFUmL。3种冻干保护剂对冻干疫苗的活菌含量影响无明显差异,但使用蔗糖明胶保护剂制备冻干疫苗时加入适量硫脲可适当增加冻干疫苗的耐热性,因此我们选择10%明胶、20%蔗糖冻干保护剂与菌液以1∶6配比比例混合,再加入终浓度约为1%的硫脲作为布氏菌病活疫苗(Rev.1株)的冻干工艺。     

仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗C500株生产工艺的优化

为优化仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗生产工艺,对细菌生长曲线、耐热保护剂和冻干曲线进行了研究,建立了发酵体积1%、2%和3%的二级种子接种量下分别发酵12 h~20 h的细菌生长曲线,检测3个配苗比例、4种耐热保护剂和3条冻干曲线下成品疫苗的冻干菌存率、活菌存活率和安全性,确定了接种3%二级种子液发酵培养17 h为最佳发酵培养条件,发酵菌数达到428×108CFU/m L;最佳配苗比例为菌液︰耐热保护剂1∶1(V∶V),优化保护剂B作为最佳耐热保护剂,设定冻干程序3#作为最佳冻干曲线。基于此,仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗抗原含量达到40头份/瓶,冻干菌存率和活菌存活率均达到95%以上,大幅度降低了猪体免疫副反应,极大提升了疫苗的产品品质。     

试用马丁干粉培养基生产猪肺疫活疫苗

在猪肺疫活疫苗生产中,通过对马丁干粉培养基和自制马丁汤进行比较,表明马丁干粉培养基的活菌数较高。猪肺疫活疫苗冻干后活菌数达到1.46×1010CFU/ml,其成品的安检、效检均一次通过。使用马丁干粉培养基,可降低成本,增加效益。     

鸡毒支原体活疫苗的保存期测定

将鸡毒支原体弱毒冻干疫苗和湿苗分别在不同温度下保存,然后分别在不同时间内测定其活菌数和鸡体内免疫效力测定。活菌数测定结果表明：鸡毒支原体冻干疫苗在－２５℃的条件下保存１１．５个月,活菌数维持不变;在－１５℃保存９．５个月,活菌数下降一个滴度;在４℃～１０℃条件下保存８．５个月,活菌数不变。湿苗（培养物）的室温２４℃保存４ｄ,活苗数不变,保存５ｄ活菌数下降两个滴度;在３２℃保存４８ｈ活菌数不变,保存     

用不同培养基生产猪多杀性巴氏杆菌活疫苗的试验研究

用马丁干粉和马丁肉汤培养基培养猪多杀性巴氏杆菌,分别生产3批猪多杀性巴氏杆菌活疫苗。结果用马丁干粉培养基生产的制苗用菌液的活菌数分别为1．80×10^10CFU／mL、1.75×10^10CFU／mL、1.80×10^10CFU／mL：冻干后的存活率分别为64％、69％、67％。用马丁肉汤培养基生产的制苗用菌液的活菌数分别为1．20×10^10CFU／mL、1．50×10^10CFU／mL、1．10×10^10CFU／mL,冻干后的存活率分别为50％、49％、54％。用两种培养基制备的疫苗按《兽用生物制品检验标准》（以下简称《标准》）检验6批疫苗均合格。     

一株鸡白痢沙门菌噬菌体的发酵及后处理工艺研究

为探究1株鸡白痢沙门菌噬菌体STP98-a的液体发酵条件及噬菌体发酵液的后处理工艺,本试验在100 mL液体增殖体系下,通过对STP98-a培养时间、噬菌体与宿主菌接种比例及起始宿主菌活菌数进行优化,确定STP98-a的液体发酵工艺;发酵液离心后收集上清液,以0.22μm滤膜过滤后加不同冻干保护剂,以冷冻干燥法制备噬菌...     

用豆腐黄浆液制造培养基试制仔猪副伤寒弱毒冻干苗

用豆腐黄浆液制造培养基试制仔猪副伤寒弱毒冻干苗,得到与《规程》标准一致的结果。培养菌数可达到或超过牛肉汤培养菌数;试制的3批苗分别作锥黄素、因子血清、醋酸铊肉汤培养、菌落形态观察及家免检验等,证明试制苗性质不变。     

猪丹毒疫苗效力检验攻毒冻干培养物的制备与应用研究

为提高猪丹毒疫苗效力检验结果的稳定性、一致性及工作效率,冻干制备了效力检验攻毒用猪丹毒丝菌培养物,对性状、纯粹、真空度、剩余水分、活菌计数、均一性等进行检测,测定在不同温度下短期存放的活菌数,监测在低温下长期保存的活菌数和毒力,并将其应用于猪丹毒活疫苗和灭活疫苗的效力检验。结果显示,该攻毒培养物性状良好,纯粹生长,真空度合格率98.2%,剩余水分小于3.5%,活菌数均值为3.8×10~9 CFU/瓶,瓶间活菌数变异系数(C.V)为10.0%,37℃以下温度存放2.5～3.0 h活菌数稳定,变异系数(C.V)为4.9%,-20℃保存36个月活菌数为3.0×10~9 CFU/瓶,每只小鼠注射6 CFU活菌5/5死亡,应用于猪丹毒灭活疫苗和活疫苗效力检验结果与常规方法一致。结果表明,该猪丹毒丝菌冻干培养物状态良好,活菌数和毒力较为稳定,能够满足猪丹毒疫苗效力检验攻毒使用,且提高了检验结果的一致性、稳定性及工作效率。     

猪丹毒丝菌C43-5株菌种毒力检定标准再评价

为进一步完善猪丹毒疫苗毒力检定标准，对猪丹毒丝菌C43-5株在肉肝胃消化汤中的生长规律进行了分析，测定了菌株对猪的最小致死剂量，并对1986、1996、2006、2015年4个冻干代次菌种进行了毒力和免疫原性测定。结果显示：C43-5株在肉肝胃消化汤中培养16 h时活菌数最高，而后进入稳定期，培养19 h后活菌数迅速下降，菌体大量死亡；以3.5×10¹⁰ CFU活菌静脉注射56～63日龄健康易感猪，2只试验猪在4 d内全部死亡；1986、1996、2006、2015年4个冻干代次的C43-5株菌种毒力和免疫原性检定结果均符合要求。同时提出了猪丹毒丝菌C43-5株毒力检定标准的修改建议，为延长菌种的保存期限提供了数据支撑。     

猪三联苗配制中猪瘟苗抑菌监测试验

我厂生产猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗(以下简称猪三联苗)36批,有9批因冻干后菌数低而报废,占投产批次的25％。笔者就猪瘟牛睾丸细胞苗(以下简称猪瘟苗)是否对猪丹毒、猪肺疫菌有抑制作用进行了试验,现报告如下。材料与方法一、猪瘟苗:本厂猪瘟组生产。二、猪丹毒(G_4T_(10))、猪肺疫(E_0630)二联菌液的制备:将冻干保存的猪丹毒、猪     

捕食线虫性真菌-少孢节丛孢菌冻干生物制剂的制备

通过在含有0.05%琼脂粉的沙氏葡萄糖肉汤培养基中培养少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora)再转接到玉米粒培养基的方法,对少孢节丛孢菌分生孢子进行培养。在不同时间点,将培养好的分生孢子从培养基上洗脱并进行计数,然后制成冻干制剂,并观察其复苏情况,从而为少孢节丛孢菌冻干制剂的临床应用提供基础数据。结果显示:通过对少孢节丛孢菌冻干制剂在萌发率、生长率和捕食率三方面的复苏情况观察,少孢节丛孢菌冻干后的分生孢子在接种后4d,萌发率达到最大值79.5%,平均生长率为3.4mm/d,加入虫体后7d捕食率最高,为95.8%,平均每天捕食率为74.0%;少孢节丛孢菌冻干制剂在平均生长率和捕食率方面与对照组相比,差异均不显著(P>0.1)。结果表明,冻干制剂材料易得,方法简单易行,复苏效果良好,进一步优化后将具有产业化应用的前景。     

仔猪副伤寒活疫苗半合成培养基的配方筛选试验

研制了一种适用于仔猪副伤寒活疫苗生产的半合成培养基，解决了培养基质量不稳定的问题。选用几种营养成分配比，制成半合成培养基进行细菌培养并冻干，结果冻前菌数超过普通肉汤培养基，冻干存活率略低于普通肉汤培养基，安全性检验合格，证明该培养基替代现用培养基生产疫苗是可行的。