黄瓜白粉病生防菌H_1、H_2的种类鉴定

通过形态特征、培养条件及生理生化指标,结合16SrDNA分子序列测定,对黄瓜白粉病生防菌H1、H2进行了鉴定.结果表明:生防菌H1、H2的形态特征及22项生理生化指标与枯草芽孢杆菌相符;生防菌H1、H216SrDNA序列与Genbank数据库中枯草芽孢杆菌的相似性高于99.5%,因此,H1、H2均为枯草芽孢杆菌亚种(Bacillus subtilis subsp.ubtilis).综合上述结果,最终确定生防菌H1、H2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).     

黄瓜苗期主要根部病害生防菌筛选及应用研究

为减轻和控制黄瓜苗期根部病害的发生,以黄瓜苗期立枯病、猝倒病和枯萎病为防治对象,进行生防细菌的筛选及应用研究。结果表明:枯草芽孢杆菌KC1、KC6和KC20对黄瓜苗期根部3种病原菌具有较好的拮抗作用;将3种生防菌制成混合的粉剂,保存13个月后有效含量低保持在较高水平;生防菌剂使用剂量在10g·m-2对黄瓜苗期根部病害防治效果最佳达到64.12%。     

一株压砂甜瓜采后病害生防菌的筛选及鉴定

[目的]从甘草内生细菌中筛选拮抗压砂甜瓜采后病害病原菌的生防菌.[方法]以初步检测具有抑菌活性的19株乌拉尔甘草内生细菌为供试菌株,以甜瓜采后病害病原菌粉霉病菌（Trichothecium roseum）、白霉病菌（Fusaium sp.）、黑腐病菌（Alternaria alternata）和软腐病菌（Rhizopus stolonifer）为指示菌株,经过离体和活体筛选测定内生细菌对甜瓜采后病原菌的抑制作用;应用16S rDNA序列分析,结合生理生化指标对1株拮抗活性较强的菌株进行鉴定.[结果]从19株供试内生细菌株中筛选出5株菌株对4种指示病菌的抑制能力较强,其中菌株S0806082的拮抗能力最强,鉴定为Delftia tsuruhatensis.[结论]内生细菌S0806082具有一定的生防应用潜力.     

生防菌菌株LDB1对植物病原真菌的抑菌谱

以枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)菌株LDB1为试验材料,研究其固体、液体培养条件下的抑菌谱情况,明确该菌株对植物病原真菌[水稻纹枯病菌(Rhizoclonia solani)、苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)、腐霉病菌(Pythium)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、小麦全蚀病菌(Gaetanannomyces graminis)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.Vasinfectum)、小麦根腐病菌(Helminthosporium sorokianum),番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers)]的抑制效果。结果表明,两种培养条件下对供试的8种植物病原真菌均有较好的抑制效果;除水稻纹枯病菌和苹果轮纹病菌外,液体培养对其他5种病原菌的抑制作用优于固体培养,比较分析显示两种培养方式处理差异显著。     

生防菌XM-10抑菌活性测试及鉴定

[目的]针对生防菌XM-10进行抑菌活性测试及鉴定,为该菌株开发成环境友好型生物制剂奠定基础。[方法]采用对峙培养法测试了其对小麦赤霉病、黄瓜枯萎病、苹果轮纹病、大豆菌核病等9种病原菌的抑菌活性,并根据其个体形态特征、培养性状以及16s rRNA序列分析进行了鉴定。[结果]结果表明XM-10菌株对供试的9种致病菌均有不同程度的抑制作用,抑菌率在47.8%~87.6%之间,其中对小麦赤霉病菌和黄瓜枯萎病菌的抑制率分别达到了87.6%和83.7%,抑菌带在4.9~6.9 mm之间;经形态观察和16s rRNA序列分析将该菌株初步鉴定为黄灰链霉菌。[结论]生防菌XM-10的抑菌谱较广,为放线菌中的链霉菌属,在病害生物防治中具有良好的应用潜力和前景。     

薄皮甜瓜采后病害生防菌株的筛选及鉴定

[目的]从薄皮甜瓜体表分离筛选对引起薄皮甜瓜采后病害主要病原真菌具有拮抗作用的生防菌株,并对其进行鉴定确定分类地位,为薄皮甜瓜采后病害的防治提供高效菌株.[方法]采用活体生测的方法从甜瓜瓜表筛选生防菌株,利用非寄养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）API 20 NE自动鉴定系统测定菌株C3的生理生化指标.[结果]从甜瓜表面分离筛选出2株对粉红单端孢（Trichothecium roseum）防治效果达80％以上的生防菌株C3、B3;通过平板对峙试验表明,菌株C3对引起采后病害的2种病原菌粉红单端孢（Trichothecium roseum）和镰刀菌（Fusarium spp.）的抑菌能力均优于B3;菌株C3对粉红单端孢（Trichothecium roseum）的抑菌效果较好,达到67.7％;对镰刀菌（Fusarium spp.）的抑菌率次之,为27.9％;应用API 20 NE系统分析,通过形态学观察、革兰氏染色将菌株C3初步鉴定为浅黄假单胞菌Pseudomonas luteola.[结论]从甜瓜表面分离筛选获得1株生防菌株C3,该菌株对引起薄皮甜瓜采摘后病害的主要病原菌粉红单端孢（Trichothecium roseum）具有较强的拮抗作用,并初步鉴定为浅黄假单胞菌（Pseudomonas luteola）.     

蔬菜病害生防菌株的室内筛选

采用2004年从土壤中分离出来的4个菌株11号、15号、16号、圆和从俄罗斯引进的2个菌株25K、PHT-M,以及春雷霉素、荧光菌、多抗霉素、百抗共10个菌株采用紫外光照法做抗利福平和硫酸链霉素的双标记菌株的筛选。筛选出的双标记菌株继续采用含菌平板抑菌圈法进行拮抗试验,共筛选出抗镰刀菌的菌株4种,最高抑菌率达78%。     

水葫芦生防菌的分离筛选及初步鉴定

【目的】分离筛选对水葫芦具有强致病性菌株,为水葫芦生物防治奠定理论基础。【方法】利用组织分离法,从自然发病水葫芦叶片上分离获得对水葫芦有强致病性的菌株并纯化培养;用玻片保湿法观察菌株分生孢子与分生孢子梗形态特征;根据柯赫氏法则对自然发病与接种叶片发病情况进行验证对比;通过查阅《真菌鉴定手册》对菌株进行形态学鉴定。【结果】经组织分离法提取纯化得到菌株BG11,该菌在PDA上生长较好,菌落紧密,表面灰白色,呈绒毛状;分生孢子合轴产生,2～5个分生孢子着生在分生孢子梗上,分生孢子为短圆柱形,单胞无色,有油球,长度为12．50～17．50μm,大多数为13．75～17．00μm,宽度为4．50～5．50μm;将BG11菌株接种到健康水葫芦叶片上表现为自然发病叶片类似症状,且两者分生孢子梗及分生孢子形态一致。【结论】初步鉴定BG11菌株为水葫芦炭疽菌Colletotrichum sp．,对水葫芦具有强致病性。     

瓜类作物枯萎病生防菌BS-2000和JK-2的分子鉴定

采用生理生化和16SrDNA两种不同的方法对生防菌BS-2000和JK-2进行鉴定。生理生化鉴定显示,BS-2000属于地衣芽孢杆菌,JK-2属于短短芽孢杆菌；16S rDNA基因的测定与分析表明,BS-2000与B．licheniformis(地衣芽孢杆菌)的同源性达99.9％,JK-2与B．brevis(短短芽孢杆菌)的同源性达99.9％,故推定BS-2000属于地衣芽孢杆菌,JK-2属于短短芽孢杆菌。     

内生生防菌P1抑菌物质对马铃薯环腐病菌的抗性及鉴定

通过平板对峙法发现菌株P1对马铃薯环腐病菌有很强的抑制作用。经分析,抑菌成分是蛋白质,忍受温度80℃,活性成分在280 nm处有最大吸收峰,分子质量大于10 kDa;通过对菌株形态、生理生化特征以及16S rDNA序列系统发育树分析发现,菌株P1与巨大芽孢杆菌相似度达到100%,确定P1菌株为巨大芽孢杆菌(B.megatherium)。电泳图谱检测该序列由1 391个碱基构成,已在GenBank登录(登录号:FJ823003.1)。     

作物病害高效生防菌株的定向快速筛选及其种类鉴定

[目的]筛选和鉴定能产Bacillomycin D的芽孢杆菌。[方法]通过PCR技术对36株具有抑菌活性的芽孢杆菌进行检测,筛选出具有Bacillomycin D合成酶基因的菌株,并利用快速蛋白液相色谱技术(FPLC)对筛选出的菌株进行检测,最后通过16S rDNA和gyrB基因序列对这些菌株进行分子鉴定。[结果]共筛选出4株能产生Bacillomycin D的菌株,其中2株为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus),2株为解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)。[结论]该研究为高效微生物农药的开发奠定了基础。     

人参土传病害生防菌株的筛选及抑菌活性研究

[目的]筛选获得对人参土传病害具较好防治作用的生防菌株。[方法]采用稀释平板法和平板对峙培养法从患病人参根际土中分离筛选生防菌,并对菌株进行形态学、生理生化特征和16S rDNA鉴定。[结果]以立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、尖镰孢菌（Fusari-um oxysporum）和腐皮镰孢菌（Fusarium solani）为指示菌株,从黑龙江铁力农场患病人参根际土中筛选获得2株具较强拮抗作用的生防菌株B59和X1,鉴定为枯草芽孢杆菌。2株生防菌对8种不同真菌的抑菌率平均达90%以上,初步研究表明B59和X1菌株可分泌抗菌活性物质。[结论]2株生防枯草芽孢杆菌B59和X1菌株对人参土传病原菌具较强的拮抗作用,具有一定的开发应用潜力。     

2株植物促生芽孢杆菌的多向筛选及鉴定

通过小白菜盆栽试验、甜瓜种子平皿促发芽试验和马铃薯田间促生试验从供试7株芽孢杆菌中筛选出2株具有稳定和高效促生作用的芽孢杆菌B04和B06。菌株B04的促生作用较强,生长30d和60d的小白菜总干质量比对照分别增加27.3%和44.3%;甜瓜种子发芽率比对照提高7.41%~93.3%;马铃薯地上干质量和根干质量比对照分别提高19.0%和53.8%。菌株B06的促生作用次之,生长60d小白菜苗干质量比对照增加24.5%;甜瓜胚轴和胚根分别提高15.6%~59.9%和4.9%~26.8%;马铃薯株高和产量提高21.4%和15.3%。通过形态学鉴定、生理生化鉴定和16SrDNA序列分析,B04被鉴定为Bacillus tequilensis,B06被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。     

离子注入选育枯草芽孢杆菌生防菌B-916高效菌种

为进一步提高枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)生防菌B 916的生长速度和拮抗性能 ,获得生防效果更好的高效菌种 ,利用不同剂量N 对生防菌B 916 ,进行离子注入处理。结果表明 :采用剂量为 1cm2 90× 2 6× 10 13 N 诱变生防菌B 916 ,其存活率最高 ;从诱变效果看 ,离子注入生防菌B 916的最适剂量为 1cm2 15 0× 2 6× 10 13 N ～2 5 0× 2 6× 10 13 N ;生防菌B 916经离子注入获得的突变菌株再次进行离子注入 ,其存活率和诱变效果可明显提高。本研究获得了 13个拮抗能力比生防菌B 916提高 10 %以上且遗传性较稳定的突变菌株     

马铃薯茄镰孢菌干腐病生防菌株的筛选、鉴定及其防效

以茄镰孢菌(Fusarium solani)为指示菌,利用平板对峙法从120株内生细菌中筛选出30株抑菌率高于70.00%的菌株,其中265ZY1、265ZY3和265XY6对茄镰孢菌具有较强的拮抗能力,其抑菌率分别为72.20%、73.00%和72.80%,按1∶1∶1复配的菌肥对马铃薯干腐病防效达79.75%,表明265ZY1、265ZY3和265XY6具有良好的抑菌防病作用,具有开发为马铃薯干腐病生防菌剂的潜力;经形态观察及16S rDNA基因序列分析,将265ZY1鉴定为死谷芽孢杆菌(Bacillus vallismortis),265ZY3鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),265XY6鉴定为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。     

七株抗青枯病菌生防菌的初步鉴定

为了有效地利用有益微生物，对从湖南省23个烟草区62块烟地烟草根际和根表土壤以及苎麻土中分离筛选的7个抗青枯病菌而相互之间无颉抗作用的生防细菌菌株进行了细菌学性状的研究和DNA（G＋C）含量测定。初步鉴定出这7个菌株分别为：23－3为真养产碱菌（Alcaligene eutrophus)；湘1－2为不动杆菌（Acinetobactersp.)；湘2－3为蜡质芽胞杆菌（Bacillus cereus)；弯2－2为欧文氏菌属的一种（Erwinia sp.)；弯2－4为气单胞菌属的一种（Aeromonas sp.)；2－轻－9为侧胞芽孢杆菌（Bacillus.laterosporus)；1－1－8为黄杆菌属的一种（Flavobacter sp.)。     

烟蚜生防菌的筛选、鉴定及生物学特性

【目的】进一步丰富烟蚜(Myzus persicae)生防菌资源。【方法】从烟田采集带菌烟蚜分离得到致病菌株进行室内测定和分子鉴定,并探究其菌丝和孢子的最适生长条件。【结果】从7株致病菌中筛选出感染效果较强的菌株YMJqx-3,室内测定第7天校正感染率达到81.48%。经鉴定,菌株YMJqx-3为米根霉(Rhizopus oryzae),菌丝最适生长条件为温度32℃和pH 7,在周期性光暗交替中生长良好,孢子最适萌发温度为30℃,紫外照射能够显著影响孢子萌发,湿度90%孢子萌发最高。【结论】米根霉对烟蚜具有较好的感染致死作用且生防潜力较大。     

生防枯草芽孢杆菌B579芽孢形成关键基因的研究

[目的]克隆生防菌芽孢形成关键基因spo0A启动子Pspo0A,并检测其特性.[方法]从生防菌B579 DNA中,经PCR扩增芽孢形成关键基因spo0A启动子Pspo0A,插入载体pGFP,构建重组表达质粒pGFP-Pspo0A.[结果]重组表达质粒经双酶切和PCR鉴定,证明构建正确,测序,结果与GenBank中的序列同源性为98％.[结论]该方法获得了含有绿色荧光蛋白基因和芽孢形成关键基因Spo0A的重组质粒,为进一步研究生防菌B579芽孢形成规律奠定了基础.