中华猕猴桃遗传转化受体系统的建立

以中华猕猴桃伏牛95-2的组培苗叶片为外植体,研究不同浓度生长调节剂对其愈伤组织、不定芽诱导和生根的影响及其对卡那霉素的敏感性,从而建立高效稳定的中华猕猴桃伏牛95-2的受体系统.结果表明,中华猕猴桃伏牛95-2的最佳愈伤组织及不定芽诱导培养基为MS+ 1.0 mg/L ZT+0.3 mg/L NAA,在此培养基条件下,其不定芽分化率、每个叶盘不定芽的分化数均较高,分别为87.50％、4.2个;最佳生根培养基为1/2MS +2.0 mg/L NAA,生根率达100.00％.当卡那霉素浓度大于10 mg/L时,能够明显抑制愈伤组织的生长,且随着浓度的增加,愈伤组织死亡率逐渐增大;当卡那霉素浓度为20 mg/L时,愈伤组织及不定芽的分化率均为0,因此20 mg/L卡那霉素浓度为中华猕猴桃伏牛95-2叶片遗传转化的最佳筛选浓度.     

葡萄风信子基因转化受体系统的建立

以葡萄风信子(Muscari botryoides Mill)品种"紫葡萄"(Cantat)的鳞茎和叶片为外植体,通过植物组织培养再生系统的建立和抗生素敏感性试验,建立了稳定的葡萄风信子基因转化受体系统。结果表明,葡萄风信子的鳞茎和叶片均可被诱导形成大量的愈伤组织;叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA,其诱导频率可达100%;鳞茎诱导愈伤组织的最适培养基为MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA,其诱导频率达91.2%;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,生根最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1%AC;筛选卡那霉素的临界质量浓度为60 mg/L,羧苄青霉素的适宜质量浓度为300 mg/L。     

百合基因转化直接分化受体系统的建立

以东方百合(Lilium seberia)为研究对象，通过高频再生系统的建立和抗生素敏感性试验建立了稳定高效的鳞片及小叶离体直接分化基因转化受体系统，为下一步的百合基因转化工作奠定了基础。结果表明：鳞片诱导分化培养基以MS l．0mg/L BA 0．5mg/L NAA (0．1-1．0)mg/L2，4—D为宜，小叶分化最佳培养基为MS 1．0mg/L IAA 0.5mg/L BA；确定了不同外植体适宜的抗生素筛选浓度，卡那霉素筛选浓度为鳞片75mg/L、小鳞片叶为120mg/L、小叶柄为75mg/L、小叶片为50mg/L，头孢霉素或羟苄青霉素选择压可用250mg/L。     

农杆菌介导的百合遗传转化受体系统的研究

[目的]研究农杆菌介导的百合遗传转化受体系统。[方法]选取改进MS培养基为基本培养基,以百合的鳞片为材料进行外植体再生和抗生素筛选试验,确定农杆菌介导的百合遗传转化受体系统。[结果]MS改进培养基中添加0.5 mg/L2,4-D、1.0 mg/L BA最有利于鳞片不定芽的分化,分化率为59.1%。小叶块在添加0.1 mg/LBA、1.0 mg/L2,4-D的MS改进培养基中的分化率最高,达94.4%,且生根情况较好。以百合的鳞片和小叶块作为农杆菌介导的基因转化的受体材料时,所用头孢霉素的浓度以400 mg/L最好,鳞片和小叶块周围几乎没有农杆菌菌斑。潮霉素筛选鳞茎的亚致死浓度为14 mg/L,潮霉素筛选小叶块的亚致死浓度为18 mg/L。[结论]该研究为百合农杆菌介导的转基因研究奠定了基础。     

苹果高效遗传转化受体系统的建立与优化

以嘎拉（Gala）和长富2号（Nagafu No.2）组培苗离体叶片为外植体,进行了不同生长调节剂浓度、叶片成熟度、暗培养时间、叶片极性及抗生素筛选研究。结果表明,嘎拉叶片适宜的再生培养基为MS＋TDZ0.5 mg/L＋NAA 0.4 mg/L,叶片近轴面接触培养基;长富2号叶片适宜的培养基为MS＋TDZ 4.0 mg/L＋NAA 0.6 mg/L,叶片远轴面接触培养基。经过21 d的暗培养后,嘎拉和长富2号叶片再生频率分别可达100%和60%。抗生素筛选浓度为卡那霉素5 mg/L,头孢霉素200-300 mg/L。     

百合农杆菌介导的遗传转化受体系统的建立

以东方百合品种"西伯利亚"作为研究材料建立了百合农杆菌介导的受体系统。鳞片块不定芽的分化以MS培养基中添加0.5mg/L2,4-D和0.5mg/LBA为最好;试管苗小叶块和小鳞茎块的不定芽分化均以MS培养基中添加1.0mg/LBA和0.05mg/LIAA为最好;卡那霉素的筛选浓度小叶块确定为100mg/L,而小鳞茎块确定为125mg/L;羧苄青霉素抑菌浓度确定为300～400mg/L。     

百合遗传转化高频直接分化受体系统的构建

以东方百合西伯利亚和索蚌为试材,通过对鳞片分化成苗、小叶离体再生、生根和抗生素敏感性试验等研究,建立了稳定、高效的以无菌苗叶片为外植体的高频直接分化基因转移受体系统。在含有BA2mg/L+ZT1mg/L的MS培养基上,对供试品种无菌苗小叶片进行离体分化培养,再生率达100%,其适宜的生根培养基为MS+NAA0.75mg/L。同时,对小叶片外植体再生体系的抗生素及除草剂筛选浓度进行试验,结果显示:小叶片对G418和PPT较敏感,适宜的G418筛选浓度为80mg/L,PPT筛选浓度为1.75mg/L;而羧苄青霉素适宜浓度范围较宽,为300～400mg/L。     

灯盏花遗传转化中组织培养受体系统的研究

对灯盏花遗传转化中组织培养受体系统进行了研究,结果表明:使用MS+BA 0.2(mg/L,单位下同)+NAA 2.0的培养基,播种10 d的幼苗,0.5 cm×1.5 cm大小的真叶作为外植体,能在2周内形成愈伤组织;使用MS+BA0.5+NAA0.5培养基,附加30 g/L蔗糖,以真叶为外植体,能在2周内诱导不定芽形成;使用75μg/ml的氯霉素(Chl.)作为土壤农杆菌转化培养的选择压力,使用50μg/ml的庆大霉素(Gent.)作为转基因植株的选择压力,使用300μg/ml的头孢霉素(Cef.)作为土壤农杆菌转基因的抑菌抗生素,对灯盏花遗传转化效果最佳。     

乙酰丁香酮对不同糯玉米受体系统遗传转化的影响

乙酰丁香酮(AS)对农杆菌介导的遗传转化有着重要的影响,为提高糯玉米遗传转化率,本试验以菜农糯38的茎尖和幼胚愈伤组织为受体材料,比较悬浮培养基的pH,乙酰丁香酮添加方式及浓度对糯玉米遗传转化的影响.结果表明:悬浮培养基pH为5.2,在伤口处滴加2μl浓度为150 μmol/L的AS能显著提高糯玉米茎尖转化的效率.玉米愈伤转化中,在侵染液中添加5 mg/L的AS能显著提高抗性愈伤率.     

不同抗生素对刺槐遗传转化受体系统的影响

本试验研究了卡那霉素(Kana)、头孢霉素(Cef)、氨苄青霉素(Amp)、羧苄青霉素(Carb)、红霉素(E)对刺槐形成层为外植体的遗传转化受体系统的影响。结果表明:刺槐形成层诱导愈伤时Cef对受体材料伤害最小,抑菌效果最好,浓度为200 mg/L时能完全抑制农杆菌生长;用Kana作为刺槐转基因植株的筛选,刺槐形成层愈伤组织分化时选择剂浓度为100~125 mg/L最佳,生根培养时选择剂浓度为75 mg/L最佳。     

菊花2个品种高效再生体系的建立

以地被菊花2个品种‘铺地金’和‘北林红’的叶片为外植体,以MS为基本培养基,以不同浓度配比的6-BA,NAA为生长调节物质进行离体培养,直接分化出不定芽获得再生植株.试验表明:‘铺地金’叶片外植体再生的最适培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 1.0 mg/L,再生率高达96%,其叶柄在此培养基上的再生率为90%;‘北林红’再生的最适宜培养基为MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L,再生率为96%,但其茎段和叶柄在此培养基上不能高效再生.‘铺地金’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.01 mg/L,每腋芽外植体平均增殖不定芽数达到5.5个.‘北林红’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05mg/L和MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.01mg/L,腋芽外植体平均增殖不定芽数达到6.3个和5.6个,二者之间的差异不显著.     

光周期不敏感切花菊种质创新研究进展

菊花是短日性植物,多数为秋菊,这给切花菊的周年生产带来很多困难.选育光周期不敏感、在自然条件下可周年生产的切花菊新品种,是国家863计划中切花菊育种的攻坚目标,也是切花菊生产大国日本的主攻目标之一.辽宁省农业科学院花卉研究所从1994年开始,应用花粉管通道法进行外源总DNA转导和杂交育种等方法,经过前后10余年的探索试验,选育出光周期不敏感的绿化菊(地被菊)和切花菊创新种质资源,为新品种选育奠定了基础.     

切花菊育种问题探讨

 在育种方法上,有性杂交育种目前仍是切花菊育种最基本、最有效的途径,常规育种与基因工程技术手段结合的复合育种途径将是今后发展的方向;还对切花菊育种原始材料的选择和应用、切花菊优良性状标准等问题进行了探讨。     

地被菊‘北林黄’再生体系的建立及其抗生素敏感性研究

采用地被菊‘北林黄’叶片为外植体进行愈伤组织的诱导和植株再生,并对25 d苗龄的幼嫩叶片进行抗生素敏感性实验,结果表明,不同的激素配比影响叶片的再生能力,其中以MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.6 mg/L诱导叶片再生率最高。幼苗的最佳增殖培养基为1/2MS+NAA 0.05 mg/L。叶片对G418十分敏感,G418的适宜使用浓度以10 mg/L为宜,羧苄青霉素的浓度以250 mg/L为宜。     

杭菊和怀菊主要功能成分的比较

[目的]对2种不同产地菊花中的天然活性物质进行探索性研究,以期为菊花的开发利用提供理论依据。[方法]采用HPLC法和紫外分光光度计法测定2种不同产地菊花中活性物质的含量。[结果]杭菊和怀菊的绿原酸含量的绿原酸含量分别为3.44±0.17、6.74±0.20（DW）mg/g,RSD值分别为4.87%、2.97%;杭菊和怀菊的游离氨基酸总量分别为50.54±0.27、46.28±1.55（DW）mg/g,RSD值分别为0.53%、3.34%;杭菊和怀菊的总糖含量分别为195.24±1.65、161.95±2.61（DW）mg/g,RSD值分别为0.84%、1.61%。[结论]该研究比较分析了2种不同产地菊花主要功能成分的含量差异,为菊花的开发利用提供了理论依据。     

拟南芥HsfA2基因转化地被菊的研究

利用农杆菌介导法将从哥伦比亚生态型拟南芥中克隆得到的热激转录因子A2基因导入地被菊‘北林黄’中,经抗生素筛选和分子检测,获得了8株阳性转化株系。利用RT-PCR方法对阳性转化株检测表明,其中7个株系中外源基因得到表达;高温胁迫处理结果也显示,转基因植株耐热胁迫能力显著高于非转基因植株。本文通过将外源AtHsfA2基因导...     

小菊育种研究现状及趋势

综述了近年来小菊育种的研究进展和成果.传统育种方法仍是小菊育种工作的主要方法,而分子育种为培育小菊新品种开辟了新途径,并获得了丰硕的成果.针对当前小菊育种的现状,对今后的育种途径进行了展望.     

菊花脑栽培技术

菊花脑别名菊花叶、路边黄等,为菊科菊属多年生宿根草本植物,常见的栽培方式有种子育苗、分株栽植、扦插繁殖。抗性强,很少发生病虫害。