鸡新城疫、产蛋下降综合症病毒血凝抑制试验抗原的研制

新城疫病毒（ＮＤＶ）鸡胚尿囊液和产蛋下降综合症病毒（ＥＤＳＶ）鸭胚尿囊液在不同保护剂和保存条件下血凝（ＨＡ）试验结果表明，以１０％甘油做保护剂制备的抗原，在－１８℃、４～８℃和常温条件下可保存一年，其ＨＡ效价稳定。抗原制备方法简单，成本低廉，适合基层生产单位使用。     

应用酶联免疫吸附试验检测牛肺疫血清抗体的研究

本文用普通ELISA和BA--ELISA检测牛肺疫血清抗体并与间接血凝试验和补体结合试验作比较,结果表明阳性检出率BA--ELISA(86.7%,13/15)>普通ELISA(80%,12/15)>间接血凝(53.3%,8/15)>补反试验(40%,6/15)。8种类症鉴别血清中6种呈现ELISA阴性。故认为ELISA是一种特异、敏感、快速、简便的血清学检测牛肺疫的方法,适于在现地检验时应用。     

应用酶联免疫吸附测定检测鸡血液中抗新城疫病毒抗体的动力学研究

应用新城疫ＬａＳｏｔａ系疫苗接种１日龄雏鸡并在２１日龄用ＬａＳｏｔａ系疫苗及油佐剂灭活苗联合接种。应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）和血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡血液中抗体水平，并在３０，６０日龄进行攻毒试验。结果表明：ＨＩ效价与攻毒保护率之间没有相关性，不能真正反映出机体的免疫水平，而ＥＬＩＳＡ用于检测其抗体水平具有很高的敏感性，ＥＬＩＳＡ滴度与攻毒保护率具有相关性，可作为评定机体免疫力的可靠指标。     

应用酶联免疫吸附测定检测鸡血液中抗新城疫病毒抗体的动…

应用新城疫ＬａＳｏｔａ系疫苗接咱１日龄雏鸡并在２１日龄用ＬａＳｏｔａ系疫苗及油佐剂灭活苗联合接种。应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）和血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡血液中抗体水平，并在３０，６０日龄进行攻毒试验。结果表明：ＨＩ效价与攻毒保护率之间没有相关性，不能真正反映出机体的免疫水平，而ＥＬＩＳＡ用于检测其体水平具有很高的敏感性，ＥＬＩＳＡ滴度与攻毒保护率具有相关性，可作为评定机体免疫力的可靠指标。     

鸡产蛋下降综合症的诊治

介绍了鸡产蛋下降综合症的流行病学、临床症状、诊断要点及防治措施。     

鸡产蛋下降综合症(EDS—76)灭活油乳剂苗的研究 Ⅰ.灭活油乳剂苗的制备

在本试验中,司本-80和硬脂酸铝加入油相,吐温-80加入灭活的EDS-76尿囊毒为水相制备成油乳剂苗。福尔马林灭活病毒制备的疫苗其免疫效果高于热灭活病毒制备的疫苗,免疫后三周,前者的HI抗体水平达9.5log_2,而后者仅为4.0log_2.福尔马林灭活病毒制备的疫苗于腹腔、皮下注射小白鼠、豚鼠、兔子和10倍剂量接种产蛋鸡,结果均无不良反应;该疫苗为完全油包水剂型、不导电,滴于冷水表面不扩散,亲水亲油平衡值(HLB)为6.67;镜下所见疫苗颗粒为0.5μ直径大小。4℃存放6个月稳定,有效期至少6个月。     

鸡产蛋下降综合症的治疗

产蛋下降综合症简称减蛋综合症,是青年母鸡的一种传染病。本病的特点是鸡的临诊症状不明显,主要是引起产蛋母鸡的产蛋量下降和蛋的质量降低,是危害养鸡业的重要传染病之一。     

Dot-ELISA间接法检测鸡产蛋下降综合症的研究

常规方法分离纯化鸡ＩｇＧ,免疫山羊制备羊抗鸡ＩｇＧ二抗,以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记制备酶标记物的工作浓度为１∶１０００,选用硝酸纤维素膜（ＮＣ）作固相载体,建立检测ＥＤＳＶ抗原的斑点间接酶联免疫吸附试验诊断方法。检测ＥＤＳＶ鸭胚毒４０份,阳性检出率１００％;人工感染发病鸡的卵巢、输卵管、泄殖腔拭子各５０份,阳性检出率分别为１００％、１００％、９４％。与传染性支气管炎、新城疫、传染性法氏囊病无交叉反应,试验显示该方法简便、特异、快速、结果直观、便于生产应用。     

陕西关中地区鸡产蛋下降综合征的调查

对陕西省宝鸡市等９个市（县、区）的３５个ＥＤＳ－７６非免疫鸡群和某大型养鸡场的１４个ＥＤＳ－７６免疫鸡群进行了流行病学调查，并采集５０５份血清（其中非免疫鸡群３２３份，免疫鸡群１８２份）用微量血凝抑制试验进行了ＥＤＳ－７６抗体监测。首次确定陕西省确有ＥＤＳ－７６的发生与流行，其非免疫鸡群的阳性率为３５．０９％，有６０％的鸡群受到感染，发病情况和病程与国内外报道的基本一致。调查结果还表明：红壳蛋鸡比白壳蛋鸡对该病更为易感；疫苗注射对该病的发生具有很好的预防作用     

鸡减蛋综合征、新城疫二联灭活油的免疫比较试验及临床应用

本课题组研制的ＥＤＳ／ＮＤ二联灭活苗乳剂苗，免疫接种后产生的ＥＤＳ和ＮＤ的抗体效价分别达到国外进口的ＥＤＳ灭活苗和ＮＤ灭活苗的水平。用本课题组研制的ＥＤＳ／ＮＤ二联灭活苗、Ｉｎｔｅｒｖｅｔ公司和ＴＡＤ公司的ＥＤＳ／ＮＤＭ联灭活苗接种２０周龄的蛋鸡后，ＥＤＳ抗体和ＮＤ抗体的增长曲线无明显差异。在协作场免疫接种了１９群商品蛋鸡，共２０．６万羽，ＨＩ抗体抽测结果为ＥＤＳ抗体峰值达８．０ｌｏｇ２～９．３ｌｏｇ２，ＮＤ抗华峰值达９．０ｌｏｇ２～１０．２ｌｏｇ２，无一群免疫鸡发生副反应，产蛋率正常，有效地控制了ＥＤＳ和ＮＤ的流行。     

用全血平板凝集抑制试验快速诊断鸡减蛋综合症(EDS_(76))

利用鸡产蛋下降综合症(EDS_(76))病毒具有凝集红细胞的特性,建立了全血平板凝集试验。用各种不同血凝价的病毒制备平板抗原,通过方阵试验,确定了全血平板凝集抑制试验抗原的测试单位。该法具有较高的阳性检出率,而且具有比现有的血凝抑制试验(HI)和琼脂扩散沉淀试验(AGP)更快速、更简便易行的优点,适用于基层单位的推广应用,尤其适于净化种鸡群,淘汰阳性种鸡。     

鸡减蛋综合征、新城疫二联灭活苗的免疫性试验

在本试验中，比较了每头份疫苗含不同血凝单位病毒的免疫效果，结果每头份合ＥＤＳ病毒２０００血凝单位、ＮＤ病毒分别含２５０血凝单位和３６０血凝单位的疫苗，免疫后ＮＤ抗体峰值分别达１１．５ｌｏｇ２和１１．８ｌｏｇ２，ＥＤＳ抗体峰值达９．５ｌｏｇ２和９．８ｌｏｇ２。用每头份合ＥＤＳ病毒２０００血凝单位和ＮＤ病毒２５０血凝单位的疫苗，免疫接种不同ＮＤ抗体水平的三群试验鸡，结果各试验鸡群的ＮＤ抗体峰值无明显差别，ＥＤＳ抗体峰值也无明显差别。     

鸡减蛋综合征、新城疫二联灭活油乳剂苗的研制

在本试验中，司本－８０、吐温－８０和硬脂酸铝作为乳化剂，复合乳化剂的亲水亲油平衡值（ＨＬＢ）为６．６７，用高压均质机乳化和匀乳各一次制备出减蛋综合征、新城疫二联灭活油乳剂苗。该疫苗为完全油包水剂型，在４℃至少可存放６个月，而且安全可靠，接种小白鼠、豚鼠和兔子，以及大剂量接种产蛋鸡均无不良反应。免疫接种试验鸡后，减蛋综合征和新城疫的ＨＩ抗体峰值分别达８．３ｌｏｇ２和１２．０ｌｏｇ２，接种２０周后仍达４．０ｌｏｇ２和６．３ｌｏｇ２。     

脱落酸间接酶联免疫检测法的建立

用混合酸苷法将脱落酸(ABA)与卵清蛋白(OA)连接,形成的ABA-OA复合物用于包板,利用兔抗ABA抗体与样品中或标准品中的ABA及板上的ABA反应。建立了ABA间接酶联免疫检测法(ELISA)。本法的检测范围为0.122～125pmol,检测灵敏度为0.02pmol,并具有良好的健全性。植物材料的激素提取液经初步纯化即可用于测定。用本法对正常供水及缺水1周的鸭趾草叶片中的ABA含量进行了检测,干旱处理的(26pmol/gFW)为正常供水(9.3pmol/gFW)的3倍,而且干旱处理的叶片下表皮的ABA含量(37.5pmol/gFw)比上表皮的(17.7pmol/gFW)高2倍。     

酶联免疫吸附试验检测鸭瘟抗体的研究和应用

应用提纯的鸭瘟病毒作为包被抗原，建立了用于检测鸭瘟抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）间接法。试验结果表明，该法特异性高（与鸭病毒性肝炎等１３种病的阳性血清不发生交叉反应），与血清中和试验的符合率为１００％但其敏感性比血清中和试验至少要高１０００倍，且重复性好，结果可靠，用于大批量样品的检测大约经６小时即可获得结果，是一种适合于血清流行病学调查、进出口鸭对鸭瘟的检疫和对鸭群进行免疫抗体水平检测的敏感、快速、准确性高、特异性强、重复性好且简便实用的方法。     

用重组HN蛋白建立新城疫抗体检测的ELISA方法

用T4噬菌体表达的重组新城疫病毒HN蛋白(rHN)为包被抗原,建立新城疫抗体检测的酶联免疫吸附实验(rHN-ELISA).结果表明,抗原最适包被浓度为1.6μg/100μL,待检血清最适稀释度为1:80,鸡血清样品的光吸收值OD450大于0.126可判定为阳性结果,而SPF鸡血清,非免疫鸡血清以及MD,IBD,IB,ILT,AI阳性血清的检测结果均为阴性.对批内和批间样品重复检测的变异系数分别为3.7%～8.5%和3.1%～7.4%.人工感染NDV的SPF鸡第3 d即可用rHN-ELISA检测到抗体,灵敏度明显高于HI和AGP试验.因此,rHN-ELISA是1种特异、敏感、快速的ND抗体检测方法.     

用重组HN蛋白建立新城疫抗体检测的ELISA方法

用T4噬菌体表达的重组新城疫病毒HN蛋白（rHN）为包被抗原,建立新城疫抗体检测的酶联免疫吸附实验（rHN-ELISA）.结果表明,抗原最适包被浓度为1.6μg/100μL,待检血清最适稀释度为1：80,鸡血清样品的光吸收值OD450大于0.126可判定为阳性结果,而SPF鸡血清,非免疫鸡血清以及MD,IBD,IB,ILT,AI阳性血清的检测结果均为阴性.对批内和批间样品重复检测的变异系数分别为3.7%～8.5%和3.1%～7.4%.人工感染NDV的SPF鸡第3 d即可用rHN-ELISA检测到抗体,灵敏度明显高于HI和AGP试验.因此,rHN-ELISA是1种特异、敏感、快速的ND抗体检测方法.     

双夹心ELISA检测鸡EDS-76病毒抗原的研究

应用鸡抗EDS-76病毒、兔抗EDS-76病毒抗体和羊抗兔抗体,建立了检测EDS-76的双夹心ELISA方法,本试验确定的鸡抗EDS-76病毒抗体、兔抗EDS-76病毒抗体和HRP-羊抗兔抗体的最佳工作浓度分别为1∶160、1∶300和1∶1000。本法对纯化EDS-76病毒的最低检出量约为5 ng/孔。通过对EDS-76病毒试验感染鸡脏器带毒、排毒情况和临床样本的检测,表明双夹心ELISA方法对EDS-76病毒的检测特异性强、敏感度高、适合于成批样本的检测。     

应用ELISA间接法检测抗IBDV单克隆抗体

本文用 ELISA 间接法,研究并建立了抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的检测体系。实验证明,该法具有简便、灵敏、迅速、特异性强、准确性高及重复性好的优点。是研究筛选抗 IBDV单抗杂交瘤细胞的可靠方法。