口服猪肺疫弱毒菌株(G165)的试验研究

1975年,我们将G30菌株继续通过鸡体传至165代,培育出一株免疫原性良好,毒力较为稳定的口服猪肺疫弱毒菌株(简称G165)。现将本菌株的培育过程、毒力、免疫原性、稳定性和免疫持续期等项试验报告如下: 一、G165弱毒菌株的培育过程将G30菌株划线接种于含0.1—0.2%裂解全血的马丁琼脂平皿上、37℃培养16—24小时,在显微镜下选择5个以上Fg型菌落,接种于马丁汤内,在37℃培养20—24小时,取培养液5—10毫升,经静脉接种2—3月龄的雏鸡。接种后鸡只呈     

鸡霍乱口服弱毒菌株的选育及其性能的研究IR1－23菌株的筛选

试验以本所历年来分离、收集、保存的多株禽源多杀性巴氏杆菌菌种为选种素材，以各菌株的培养特性、菌落形态、菌落虹彩、生化反应及其在历次传代过程中的稳定性为选种依据，初步筛选出四个菌株，代号为：ＲＩ—２３、ＲＩ—２４、ＲＩ—３９和ＲＩ—６５、经过皮下注射安全量、口服耐受量、近期免疫效力和毒力稳定性比较测试后，筛选出一株既适应鸡口服免疫又具有良好免疫原性的自然弱毒菌株──Ｒ１－２３菌株（５：Ａ）。该菌株的皮下注射安全量为每只５０亿个活菌，一次性口服的耐受量每只在２０００亿个活菌以上，活体继代６代次、人工培养继代５０代次后均未见有毒力增强表现，两次口服免疫后的近期保护率达８０—１００％。     

鸡霍乱口服弱毒菌株的选育及其性能的研究：I R1—23菌株的筛选

试验以本所历年来分离、收集、保存的多株禽源多杀性巴氏杆菌菌种为选种素材，以各菌株的培养特性、菌落形态、菌落虹彩、生化反应及其在历次传代过程中的稳定性为选种依据，初步筛选出四个菌株，代号为：Ｒ１－２３、Ｒ１－２４、４１－３９和Ｒ１－６５。经过皮下注射安全量、口服耐受量、近期免疫效和毒力稳定性比较测试后，筛选出一株既适应鸡口服免疫又具有良好免疫原性的自然弱毒菌株－Ｒ１－２３菌株（５：Ａ）。该菌株的皮下     

BALB/c鼠口服免疫猪水肿病大肠杆菌基因突变菌株的免疫效果

为了研究猪水肿病(ED)大肠杆菌SLT-Ⅱe基因突变菌株作为口服疫苗的免疫效果,本实验用已构建的猪ED大肠杆菌SLT-Ⅱe基因突变菌株口服免疫BALB/c小鼠,检测其血清中的IgG抗体及粪便和肠黏液中的slgA抗体水平,并进行淋巴细胞增殖检测及攻毒保护实验.结果表明该基因突变菌株具有良好的免疫性,能诱导小鼠体内产生IgG和sIgA抗体,并且能引起T淋巴细胞增殖反应.攻毒保护实验结果显示,口服免疫突变菌株能对小鼠提供良好的保护,保护率为75%(15/20).本研究结果证明,该大肠杆菌基因突变菌株在小鼠体内能激发体液免疫和细胞免疫反应,可作为猪ED口服疫苗的候选菌株.     

G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备及其免疫保护效果的评价

为研制G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗,本研究将G型产气荚膜梭菌菌株(7a9-2、D3-2)增菌培养后接种产毒培养基高效产毒,除菌后获得外毒素,经粗提后进行SDS-PAGE检测。结果显示：制备的G型产气荚膜梭菌外毒素含有α、NetB两种毒素蛋白。将两株G型菌株所产外毒素经2倍倍比稀释后经腹腔注射小鼠,检测外毒素的致病性,结果显示7a9-2菌株所产外毒素毒力较强,可作为疫苗候选株。因此选择7a9-2菌株制备外毒素,并经甲醛灭活后制备G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗,经检验合格后免疫三黄鸡。免疫后5周内,每周随机选取10只鸡采血分离血清,采用ELISA方法检测鸡血清中的抗体效价。结果显示,免疫组鸡血清稀释100倍后,一免组鸡的抗体效价最高可达6.83log2,二免组鸡抗体效价最高可达8.34log2,免疫后鸡体内可产生较高水平的抗G型产气荚膜梭菌的抗体。免疫后实验鸡通过口服鸡球虫卵囊和G型产气荚膜梭菌菌液进行攻毒试验,结果显示,攻毒后免疫组鸡肠道病变程度和发病率均显著低于对照组(P<0.05)。在整个实验过程中观察各组鸡的生长情况,计算鸡平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F...     

不同毒力猪丹毒菌的生长特性以及变异的观察

对60个强毒及11个弱毒猪丹毒菌株生长形态观察的结果,发现强毒与弱毒菌株在明胶平板及明胶试管穿刺培养的生长形态有明显差异。强毒菌株的菌落呈云絮状,放大后看不到结构;弱毒菌株的菌落呈小毛球状、树枝状或絮丝状,放大后能看到结构。在明胶试管穿刺培养,强毒菌株生长呈试管刷状,弱毒菌株呈线状。这一结果对判断猪丹毒菌株毒力的强弱有一定参考意义。 根据不同毒力猪丹毒菌在明胶平板上菌落形态有差异这一方法,我们观察了菌种保存过程中的自发变异现象,并从强毒菌株分离到了5个自发变异产生的弱毒菌株。 对弱毒菌株G4T10在明胶平板上菌落形态的观察以及不同形态菌落的遗传稳定性、免疫原性试验,证明树枝状菌落占绝大多数,并具有比较好的免疫原性。 生化试验结果与前人报道的稍有差异,在83个菌株中有1个变异菌株能发酵麦芽糖、糊精、水杨素、甘油、甘露醇,有39个菌株能发酵蔗糖,未发现与毒力有何联系。 部分菌株的血清型鉴定证明,菌种发生变异以后,有的血清型也发生了变化,1a型可变的1b及2型,2型也可变为1a及1b型。     

完成牛沙门氏菌病保护免疫的方法

静注或口服非致死量感染的都柏林沙门氏菌或长期接触排沙门氏菌动物的牛,经静脉攻毒后只有一半残存。灭活菌两次皮内注射的免疫牛,攻毒后得到较好的保护;同一方法免疫的犊牛,能抵抗口服感染并优于用灭活苗皮下注射的牛。如皮内注射灭活苗,3周后再静注都柏林沙门氏菌所制的活菌苗,能抵抗强菌剧烈的静脉攻毒。     

鸡霍乱口服弱毒菌株的选育及其性能的研究

应用选育的禽多杀巴氏杆菌自然弱毒菌株──Ｒ１－２３菌株经固体培养方法制备鸡霍乱口服弱毒活苗。试验测得该口服活苗每羽一次性饮水安全量在１００００亿个活菌以上，至少相当于正常饮水免疫剂量的２００倍。试验测得该苗口服免疫的近期保护车（二次饮苗间隔４８小时组）分别是：浅层静置培养弱毒活苗平均为７６．２％（６批次），深层通气培养弱毒活苗平均为８４．４％（１０批次），因体培养弱毒活苗平均为９３．３％（３批次）。     

鸭病毒性肝炎A_66弱毒苗免疫产生期及免疫持续期试验

用鸭肝炎A_(66)弱毒疫苗,经不同途径免疫1日龄雏鸭。结果,皮下注射组在免疫后2天即对ATCC强毒攻击达100％的保护率;口服组和滴鼻组在免疫后5天才能全部保护;一次饮水免疫组和二次饮水免疫组在6日龄时对强毒攻击的保护率分别为60％和90％。用该弱毒苗免疫1日龄雏鸭和成年鸭,免疫期分别至少达45天及6个月。     

一种灭活鸡败血霉形体疫苗的效力试验

一种鸡场用美国进口的灭活鸡败血霉形体疫苗对童鸡进行效力试验:第一组40只鸡,在45日龄时肌肉注射、88日龄时又皮下注射一次。第二组40只鸡88日龄时仅皮下注射一次。40只鸡作为对照组。免疫后第133天用来自加里弗尼亚的鸡败血霉形体S6—208菌株攻毒结果:对照组与仅免疫一次的鸡有轻微症状及温和的鼻窦炎。免疫后快速凝集与血凝抑制试验均为阳性。试验中第二次免疫皮下注射后局部有短时的肿胀。     

猪丹毒弱毒菌苗(G_4T_(10))对不同血清型菌株的免疫性试验

猪丹毒杆菌的血清型目前已确认的有22个,还有一个亚型及N型。经猪丹毒菌苗免疫的动物对这些血清型菌株是否有保护力,这是生产上急需解决的问题。我们以猪丹毒弱毒菌株G4T10制成的菌苗免疫动物,以不同的血清型参考菌株攻击,测其保护率;并用未免疫动物测各菌株的致病性。现将试验结果报告于后。     

鸡毒支原体SC克隆致弱株免疫原性测试—开放动物模型的建立？…

对罗斯鸡和ＳＰＦ来航鸡用鸡毒支原体强毒攻击时，以鸡致病性大肠杆菌Ｏ７８血清型菌株１６小时培养物０．２ｍｇ／羽皮下注射作人工诱导发病，试验鸡出现明显气囊病变，初步建立了以鸡致病性大肠杆菌为诱导因子的ＭＧ野外环境人工发病的动物模型。     

鸭病毒性肝炎A66弱毒苗免疫产生期及免疫持续期试验

用鸭肝炎A66弱毒疫苗，经不同途径免疫1日龄雏鸭。结果，皮下注射组在免疫后2天即对ATCC强毒攻击达100％的保护率，口服组和滴鼻组在免疫后5天才能全部保护；一次饮水兔疫组和二次饮水免疫组在6日龄时对强毒攻击的保护率分别为60％和90％，用该弱毒苗免疫1日龄雏鸭和成年鸭，免疫期分别至少达45天及6个月。     

禽腺病毒4型SD2015株对SPF鸡的致病性研究

2015年从临床发病肉鸡鸡群中分离到1株禽腺病毒,经PCR鉴定及同源性比对确定为血清Ⅰ群4型禽腺病毒,对其肝组织毒及适应SPF鸡胚与鸡胚肝细胞的细胞毒进行致病性研究。结果显示:肝组织毒毒力最强且传代稳定;肝组织毒经肌肉注射途径攻毒,试验鸡发病率及死亡率略高于皮下注射而远高于口服感染途径;随攻毒鸡日龄的增长,其对腺病毒的感染力下降;肝组织毒攻毒量为108.0TCID50/只,可引起攻毒鸡8/10以上死亡,10/10感染,感染鸡剖检有典型的心包积水、肝脏肿大、肾脏肿大等病变。本试验结果对Ⅰ群4型禽腺病毒灭活疫苗免疫效力评价具有重要意义。     

猪丹毒杆菌强毒株和弱毒株在电子显微镜下的初步观察

猪丹毒杆菌是引起猪丹毒热性传染病的病原菌。有关对该菌的超微结构的研究,目前在国内还未见有正式报道。为了给今后的菌株鉴定及免疫工作提供依据,将一株强毒菌 C43—5和我国自行培育的两株弱毒菌 T60—10、G4T(10),在电子显微镜下进行了菌体超微结构的观察,并对强毒与弱毒不同菌株的形态,进行了比较研究。     

水貂肉毒梭菌(C型)透析培养菌苗

本试验采用透析培养法生产高价毒素的菌液制成的菌苗有很强的免疫原性。试验结果表明:取8801批原苗10倍稀释,用1ml给水貂皮下注射,21天后攻毒,结果能抗2000个水貂致死量毒素的攻击;口服可抗10个致死量攻击。8805批原苗10倍稀释后,以1ml剂量免疫水貂,4个月攻毒,能抗1万个水貂致死量毒素的攻击;口服抗100个致死量毒素的攻击。注苗水貂均未发生过肉毒中毒。     

广东省猪多杀性巴氏杆菌血清学分型研究 Ⅲ、不同血清型猪多杀性巴氏杆菌与口服猪肺疫弱毒菌苗(6∶B)的交互免疫试验

本试验概述了广东省猪多杀性巴氏杆菌的主要血清型5:A、8:A、6:B、2:D代表菌株与我国广泛使用的口服猪肺疫弱毒菌苗(6:B)进行了小白鼠、猪体(指5:A)的交互免疫试验的过程。试验结果表明,口服猪肺疫弱毒菌苗与5:A、8:A菌株没有交互免疫。前者纯保护10.3％,后者纯保护-4.2％;与6:B菌株则有交互免疫,纯保护77.8％,与2:D菌株似有一定交互免疫,纯保护38.2％。用猪进行的5:A菌株与该菌苗交互免疫试验,其结果也无明显交互免疫,纯保护15.6％。     

鸡毒支原体HS株病原性研究

鸡毒支原体ＨＳ株（ＭＧ－ＨＳ）是作者从湖北省某场场的一只患支原体病鸡心包膜中分离的，用该菌株传代６次的液体培养的接种健康的５周伊莎小公鸡，接种途径分别以气囊，气管，皮下及口服＋滴鼻等四种方法，攻毒８天后以１０个剂量的传染性支气管弱毒疫苗（Ｈ１２０）作为激发感染，结果，攻毒后试验鸡全部感染，并出现临床症状，激发感染后发病严重，气囊组，气管组及口服＋滴鼻组１００％发病，皮下攻毒组发病变达８０％，病鸡表     

口服猪肺疫弱毒菌苗在广西试验情况

为了使内蒙古口服猪肺疫弱毒菌苗尽快地在广西地区推广应用,我厂于1971年派人到内蒙厂学习,在该厂研究工作的基础上,我厂于1971—1973年对165代口服猪肺疫弱毒菌种特性、免疫原性、稳定性、免疫期、保存期等方面进行了一些试验,现将有关试验情况总结如下。     

口服猪肺疫弱毒菌种稳定试验

为进一步了解内蒙厂和黑龙江厂、富裕兽研所所培育的口服猪肺疫弱毒菌种的稳定性,我们对该二系弱毒菌种作了口服及皮下复归猪体的试验。首先对该二系菌种的毒力用小动物进行测定,然后在传代的同时分别用小动物测毒,以了解传代过程中菌株毒力