不同氧化应激模式下仔猪血细胞参数变化的比较研究

本试验旨在研究不同氧化应激源对仔猪血细胞参数变化的影响.试验采用单因子试验设计共分3个处理,每个处理8个重复,每个重复1头仔猪,处理Ⅰ为基础日粮组(含有5%新鲜鱼油),处理Ⅱ的日粮中添加5%的过氧化物值(POV)为786.50 meq/kg的氧化鱼油,处理Ⅲ的仔猪在饲喂基础日粮的同时,于腹腔注射12 mg/kg的敌快死(diquat).结果表明,试验第14天,处理Ⅱ的红细胞记数(red blood cell count,RBC)和处理Ⅲ的血红蛋白含量(hemoglobin,HGB)显著低于处Ⅰ(P<0.05),处理Ⅱ的HGB和处理Ⅲ的RBC极显著低于处理Ⅰ(P<0.01);试验第26天.处理Ⅱ和处理Ⅲ的RBC、HGB均较处理Ⅰ极显著下降(P<0.01).处理Ⅱ在第26天和处理Ⅲ在第14天时血小板数量分别较处理Ⅰ显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)的下降.第14天时,处理Ⅲ的白细胞数量比处理Ⅰ显著上升(P<0.05);第26天时,处理Ⅲ的白细胞数量和中性粒细胞相对百分比显著高于处理Ⅰ(P<0.05).综合分析认为,氧化鱼油和敌快死可使断奶仔猪红细胞参数、血小板参数和淋巴细胞数量下降,而中性粒细胞数量上升.与氧化鱼油引起的氧化应激程度相比,由diquat引起的应激程度更强一些.     

氧化应激对断奶仔猪生产性能和养分利用率的影响

试验选用24头断奶仔猪随机分为4组,每组6个重复,每个重复1头猪,将过氧化物值(POV)为11.78meqO2/kg的新鲜鱼油(FFO)和POV分别为399.81、701.62、1065.74meqO2/kg的氧化鱼油(OFO)以3%的比例加入到断奶仔猪日粮中,饲喂4周,旨在建立以氧化油脂为氧化应激源的氧化应激动物模型,初探氧化应激对断奶仔猪生产性能和养分利用率的影响。结果表明,氧化应激降低试验猪只生产性能和养分利用率。与FFO组相比,以POV为1065.74meqO2/kg的氧化鱼油作用效果最明显。该过氧化程度的氧化鱼油可使平均日增重降低8.16%,饲料增重比提高9.22%(P<0.05);氮表观消化率和表观利用率分别下降21.91%(P<0.001)和30.55%(P<0.001);干物质和粗脂肪表观消化率分别降低13.05%(P<0.05)和35.18%(P<0.05)。结论:在断奶仔猪日粮中添加3%的POV为1065.74meqO2/kg的氧化鱼油可诱导氧化应激,引起生产性能和养分利用率的下降。     

添加硒对氧化应激仔猪抗氧化能力和组织细胞超微结构的影响

本试验采用已建立的氧化应激模型,进一步研究添加硒对氧化应激仔猪抗氧化能力和组织细胞超微结构的影响。试验采用2×3＋1因子试验设计,84头（26±2）d断奶仔猪随机分配到7个处理中,每个处理6个重复,每个重复2头猪。检测血清抗氧化酶活力、MDA含量和组织细胞超微结构。结果发现：与非应激组相比,氧化应激引起血清抗氧化酶活力降低和MDA含量上升,肝脏和脾脏发生细胞凋亡;对应激试猪,随着硒添加水平的升高,氧化损伤的程度减弱。表现为GSH、GPx、SOD和CAT活性提高,MDA降低,细胞结构损伤减弱。当硒添加量上升到0.6mg/kg时,其抗氧化酶活力可达到与非应激组差异不显著的水平。结果表明,氧化应激会降低机体抗氧化能力,损伤细胞结构,补充硒有助于维持机体氧化还原稳衡动态的正常,减轻细胞的过氧化损伤;在本试验条件下,在氧化应激仔猪日粮中添加0.6mg/kg硒可获得较好的抗应激效应。     

壳寡糖对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化能力及空肠养分消化和转运能力的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究饲粮添加壳寡糖(COS)对正常饲养和氧化应激仔猪生长性能、抗氧化能力及空肠养分消化和转运能力的影响。选择24日龄、平均体重(7.34±0.09)kg的健康"杜×长×大"断奶仔猪24头,按照2×2双因子试验设计,随机分为对照组、COS组、敌草快(diquat)组和COS+diquat组,每组6个重复,每个重复1头仔猪。试验期28 d。饲粮COS添加量为50 mg/kg,饲喂贯穿试验全程,于试验第22天进行一次性腹腔注射10 mg/kg BW diquat,不注射diquat试验猪腹腔注射等量生理盐水。于试验第18~21天采用内源指示剂法进行消化试验,第22天早上试验猪空腹前腔静脉采血后再进行diquat处理,第29天早上试验猪前腔静脉采血后屠宰取空肠黏膜样品待测。结果表明:1)注射diquat前,饲粮添加COS对仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)无显著影响(P>0.05),但有降低料重比(F/G)的趋势(P=0.09);显著升高仔猪对饲粮干物质、有机物、粗蛋白质、粗脂肪、能量、粗灰分、钙和磷的表观消化率(P<0.05);显著升高血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05)。2)注射diquat极显著降低仔猪的ADG和ADFI(P<0.01),极显著升高F/G(P<0.01);饲粮添加COS显著抑制因注射diquat导致的ADG的下降(P<0.05)。3)注射diquat极显著降低仔猪的血浆过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.01),显著降低空肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶的活性和葡萄糖转运载体2(GLUT2)、钠/葡萄糖转运载体1(SGLT1)的mRNA表达量(P<0.05);饲粮添加COS显著升高氧化应激仔猪的血浆SOD活性和T-AOC(P<0.05),显著缓解空肠黏膜二糖酶活性的降低及GLUT2和SGLT1 mRNA表达量的下调(P<0.05)。由此可见,正常饲养条件下,饲粮添加50 mg/kg COS可显著改善仔猪对饲粮的养分消化率和机体的抗氧化能力,有降低F/G的趋势;氧化应激条件下,COS可通过改善机体的抗氧化能力,缓解diquat诱导的氧化应激,提高应激仔猪的空肠养分消化和转运能力,缓解氧化应激导致的增重下降。     

壳寡糖对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化能力及空肠养分消化和转运能力的影响

本试验旨在研究饲粮添加壳寡糖(COS)对正常饲养和氧化应激仔猪生长性能、抗氧化能力及空肠养分消化和转运能力的影响。选择24日龄、平均体重(7.34±0.09)kg的健康"杜×长×大"断奶仔猪24头,按照2×2双因子试验设计,随机分为对照组、COS组、敌草快(diquat)组和COS+diquat组,每组6个重复,每个重复1头仔猪。试验期28 d。饲粮COS添加量为50 mg/kg,饲喂贯穿试验全程,于试验第22天进行一次性腹腔注射10 mg/kg BW diquat,不注射diquat试验猪腹腔注射等量生理盐水。于试验第18~21天采用内源指示剂法进行消化试验,第22天早上试验猪空腹前腔静脉采血后再进行diquat处理,第29天早上试验猪前腔静脉采血后屠宰取空肠黏膜样品待测。结果表明:1)注射diquat前,饲粮添加COS对仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)无显著影响(P0.05),但有降低料重比(F/G)的趋势(P=0.09);显著升高仔猪对饲粮干物质、有机物、粗蛋白质、粗脂肪、能量、粗灰分、钙和磷的表观消化率(P0.05);显著升高血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)(P0.05)。2)注射diquat极显著降低仔猪的ADG和ADFI(P0.01),极显著升高F/G(P0.01);饲粮添加COS显著抑制因注射diquat导致的ADG的下降(P0.05)。3)注射diquat极显著降低仔猪的血浆过氧化氢酶(CAT)活性(P0.01),显著降低空肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶的活性和葡萄糖转运载体2(GLUT2)、钠/葡萄糖转运载体1(SGLT1)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加COS显著升高氧化应激仔猪的血浆SOD活性和T-AOC(P0.05),显著缓解空肠黏膜二糖酶活性的降低及GLUT2和SGLT1 mRNA表达量的下调(P0.05)。由此可见,正常饲养条件下,饲粮添加50 mg/kg COS可显著改善仔猪对饲粮的养分消化率和机体的抗氧化能力,有降低F/G的趋势;氧化应激条件下,COS可通过改善机体的抗氧化能力,缓解diquat诱导的氧化应激,提高应激仔猪的空肠养分消化和转运能力,缓解氧化应激导致的增重下降。     

饲粮添加山竹醇对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化功能及肝脏脂质合成的影响

本试验旨在研究饲粮添加山竹醇对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化功能及肝脏脂质合成的影响。选择30头健康状况良好、胎次相近的35日龄三元杂交(杜×长×大)断奶仔猪,随机分为5个组,每组6个重复,每个重复1头仔猪。对照组和应激组仔猪饲喂基础饲粮,山竹醇组仔猪饲喂在基础饲粮中分别添加200、400、600 mg/kg山竹醇的试验饲粮,预饲7 d后开始正式试验,试验期28 d。在试验第15天早晨进行前腔静脉采血,采血后应激组和山竹醇组仔猪按照10 mg/kg BW的剂量腹腔注射敌草快(diquat)溶液,对照组仔猪腹腔注射相同剂量灭菌生理盐水。在试验第29天试验猪空腹进行前腔静脉采血并采取所需肝脏样品,检测血清和肝脏生化指标以及肝脏脂质合成相关基因mRNA的表达量。结果表明:1)注射diquat后(第15～28天),应激组仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)显著低于对照组(P0.05),料重比(F/G)显著高于对照组(P0.05),各山竹醇组的ADG和ADFI均显著高于应激组(P0.05),400 mg/kg山竹醇组的F/G显著低于应激组(P0.05)。2)注射diquat前(第15天),饲粮添加400、600 mg/kg山竹醇显著提高了仔猪血清超氧化物歧化酶(SOD)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)(P0.05)。注射diquat后(第29天),与对照组相比,应激组血清和肝脏SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P0.05),血清和肝脏丙二醛(MDA)含量显著增加(P0.05);饲粮添加200、400和600 mg/kg山竹醇均显著提高了氧化应激仔猪血清和肝脏SOD、GSH-Px活性(P0.05),显著降低了血清和肝脏M DA含量(P 0. 05),其中以山竹醇添加量为400 mg/kg时效果最好。3)肝脏组织病理学观察发现应激组仔猪肝脏组织结构受到损伤,且肝脏内脂质沉积明显增加,与应激组相比,各山竹醇组的肝脏组织结构有一定程度恢复,除此之外,脂质沉积也明显减少。4)注射diquat后,应激组血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量显著高于对照组(P0.05)。饲粮添加400、600 mg/kg山竹醇可显著降低氧化应激仔猪血清TG和TC含量(P0.05),且以山竹醇添加量为400 mg/kg时血清TG和TC含量最低。5)与对照组相比,应激组肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1) mRNA的表达量显著上调(P0.05)。饲粮添加200、600 mg/kg山竹醇可以显著降低氧化应激仔猪肝脏中SREBP-1c、ACC mRNA的表达量(P0.05);饲粮添加400 mg/kg山竹醇可以显著降低氧化应激仔猪肝脏中SREBP-1c、FAS、ACC、SCD1 mRNA的表达量(P0.05)。由此可见,氧化应激条件下,饲粮添加山竹醇可通过改善仔猪的抗氧化能力,缓解diquat诱导的氧化应激,改善应激仔猪的生长性能以及应激导致的脂质合成增多,保护肝脏,其中以山竹醇添加量为400 mg/kg时效果最佳。     

构建Diquat诱导断奶仔猪氧化应激模型的研究

试验通过观察断奶仔猪一次性腹腔注射Diquat后生长性能、血液生化及抗氧化指标的变化,验证氧化应激模型是否构建成功,并进一步探明用来评价氧化应激的敏感指标。选用DLY断奶仔猪10头,体重10.64±1.08kg,随机分配到2个组中,每组5个重复,每个重复1头猪。处理组按体重一次性腹腔注射10mg/kg Diquat溶液,对照组腹腔注射相同剂量的灭菌生理盐水。试验期21d,在试验第3、10、21天空腹前腔静脉采血,检测血清生化及抗氧化指标。结果表明,Diquat显著降低仔猪ADG和ADFI(P0.01),显著提高血液中ALT、AST活性和COR含量(P0.05),显著降低血液中GSH-Px活力(P0.05)。试验表明,一次性腹腔注射10 mg/kg Diquat溶液可以诱导断奶仔猪氧化应激,应激效应可持续21d以上,血液中ALT、AST、GSHPX活力以及COR含量可作为评价氧化应激的指标。     

氧化应激对断奶仔猪肌体氧化还原状态的影响

本试验旨在研究氧化应激对断奶仔猪机体氧化还原状态的影响。选用24头28日龄断奶仔猪,随机分为3个处理组,每组8个重复,每个重复1头猪,采用单因子试验设计。基础日粮为玉米-豆粕型,以饲喂基础日粮为对照组,饲喂氧化鱼油和腹腔介入12mg/kg体重敌草快(Diquat)为应激组,试验期26d。结果表明:(1)与对照组相比,氧化鱼油和Diquat都造成了脾脏损伤,使脾脏和胸腺指数降低(P<0.05);(2)饲喂氧化鱼油显著增加了脾脏MDA(丙二醛)含量(P<0.05),降低血浆抑制羟基自由基的能力(P<0.05),极显著降低脾脏GST(谷光苷肽-S转移酶)的活力(P<0.01),降低血浆中SOD(超氧化物岐化酶)、GSH-PX(谷胱苷肽过氧化物酶)的活性(P<0.01)和抑制羟基自由基的能力(P<0.05);(3)Diquat极显著增加脾脏MDA的含量(P<0.01),降低脾脏GST的含量(P<0.01),降低血浆中SOD、GSH-PX的活性和抑制羟基自由基的能力(P<0.01),提高MDA的含量(P<0.01)。氧化鱼油和Diquat可诱导断奶仔猪产生氧化应激,并导致了脾脏和胸腺的氧化损伤。     

镰刀菌毒素对断奶仔猪血清酶、肝脏抗氧化功能及组织病理学的影响

试验旨在研究镰刀菌毒素污染日粮对断奶仔猪血清酶、肝脏抗氧化功能及组织病理学的影响。选择35日龄体重为(8.45±0.94) kg的健康三元杂交(杜×长×大)断奶雌性仔猪40头,随机分为2组,每组20个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂用霉变玉米和霉变玉米蛋白粉替代基础日粮中50%的玉米和玉米蛋白粉配制而成的镰刀菌毒素污染日粮(玉米赤霉烯酮(ZEN) 0.90 mg/kg,呕吐毒素(DON) 1.43 mg/kg,烟曲霉毒素(FUM) 5.85 mg/kg)。仔猪单栏饲喂,预试期7 d,正试期35 d。结果表明:①与对照组相比,试验组断奶仔猪血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性均显著升高(P<0.05),肝脏相对重显著降低(P<0.05);②与对照组相比,试验组断奶仔猪血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著降低(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);③病理组织学观察发现,试验组断奶仔猪肝脏出现一定程度的组织损伤,部分肝小叶边缘发生明显的炎性细胞浸润,肝细胞发生局部空泡变性。由此可知,镰刀菌毒素污染日粮(0.90 mg/kg ZEN,1.43 mg/kg DON,5.85 mg/kg FUM)饲喂断奶仔猪可引起仔猪血清酶活性改变,肝脏抗氧化功能降低,肝脏组织出现一定程度的病理损伤,从而影响肝脏功能的发挥。     

八角和杜仲叶提取物对断奶仔猪生长性能、血清酶活性及肝脏肿瘤坏死因子-α分布和表达的影响

本试验旨在研究饲粮中添加八角和杜仲叶提取物对断奶仔猪生长性能、血清酶活性及肝脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分布和表达的影响。采用单因子试验设计,选择健康的"杜×长×大"断奶仔猪48头,随机分为4个组,每组3个重复,每个重复4头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮的基础上分别添加八角提取物(500 mg/kg)、杜仲叶提取物(250 mg/kg)和金霉素(50 mg/kg)。预试期7 d,正试期42 d。结果表明:与对照组相比,饲粮中添加八角提取物、杜仲叶提取物和金霉素显著提高了断奶仔猪平均日增重(P0.05),饲粮中添加八角和杜仲叶提取物显著降低了血清谷丙转氨酶、碱性磷酸酶活性和肝脏TNF-αmRNA相对表达量(P0.05)。TNF-α免疫阳性结果主要见于肝脏的肝小叶间及肝血窦。由此可见,在饲粮中添加八角、杜仲叶提取物可提高断奶仔猪生长性能,并具有抵抗肝脏炎症反应及氧化应激的能力。