油松花粉离体萌发培养基及花粉贮藏条件研究

花粉生活力对油松杂交育种至关重要。为筛选油松花粉离体萌发培养基,探讨不同温度贮藏下花粉的生活力,采用正交试验设计,研究不同水平蔗糖、硼酸和pH值对油松花粉离体萌发的影响;测定不同温度贮藏下油松花粉萌发率随时间的动态变化。结果表明:油松新鲜花粉在蔗糖100 g·L~(-1)、硼酸0.10 g·L~(-1)、琼脂8 g·L~(-1)、pH值6.5的培养基上萌发效果最好,萌发率高达93.12%。不同贮藏温度下油松花粉生活力存在明显差异,-80℃贮藏15 d和30 d的花粉萌发率分别为92.93%和91.27%,萌发率下降不显著;-20℃和4℃贮藏15 d,花粉萌发率下降不显著,但贮藏30 d的花粉萌发率与初始萌发率相比均极显著下降,萌发率分别为88.65%和86.84%;常温25℃贮藏15 d、30 d的花粉萌发率分别为90.27%、82.66%,与初始萌发率均达到极显著差异;由此可见,贮藏温度越低,越有利于花粉生活力的保持。此研究可为油松花粉生活力检测提供一种可靠方法,并为花粉贮藏提供参考依据。     

翠竹花粉的活力及储藏效果研究

[目的]以南京林业大学竹种园内开花的翠竹花粉为试验材料,研究在不同条件下花粉的活力和储藏效果,为翠竹杂交育种的生产实践提供基础理论数据。[方法]利用花粉离体培养法研究花粉在不同培养基组分、不同采样时间、不同温度及储藏条件下的萌发特性。[结果]翠竹花粉在不同浓度配比的培养基中萌发率差异显著,以10%蔗糖+0.01%H3BO3+0.06%CaCl_2·2H_2O培养基上培养2.5 h花粉萌发率最高;一天之中以上午9:00的花粉萌发率最高;翠竹花粉离体萌发适合的温度范围较宽,在26 30℃内花粉都有较高的萌发率。随着储藏时间的延长,翠竹花粉萌发率逐渐下降;不同储藏方式对花粉的萌发率有较大的影响,在储藏过程中未经干燥处理的花药的花粉萌发效果好于干燥后的,4℃低温保存下花粉萌发率相对较好,可延长花粉的储藏寿命,96.0 h后仍保有活力。[结论]翠竹花粉在10%蔗糖、0.01%H3BO3、0.06%CaCl_2·2H_2O的培养基中萌发效果最好,萌发适宜的温度范围是2630℃,在储藏过程中低温不干燥的环境有利于延长花粉寿命。     

小菊花粉生活力及贮藏力的研究

采用液体培养基法对几种小菊花粉生活力及贮藏力进行了研究。结果表明,小菊花粉在常规的硼、钙培养基上很难萌发,添加PEG后可显著提高花粉萌发率,在15%蔗糖+20mg/L硼酸+10mg/L CaCl2+15%PEG6000培养基上萌发率最高,可达38.4%。小菊花粉贮藏时不宜干燥,贮藏时间随着温度的降低而延长,在-80℃不干燥条件下,花粉活力可以保持60d以上。     

金花茶花粉贮藏特性

采用花粉离体培养法,研究不同含水量、贮藏温度对金花茶花粉生活力的影响。结果表明:花粉生活力随贮藏时间的延长而降低,随贮藏温度的降低而延长。在室温条件下,花粉干燥处理萌发率高于非干燥处理,室温非干燥条件下,花粉生活力下降最快,10 d左右基本丧失生活力;在4℃和-20℃低温条件下,贮藏一定时间的花粉活力仍可达50%以上。花粉最佳的贮藏条件为冷冻干燥(-20℃)。     

不同贮藏条件下锥栗花粉生活力研究

为了解决锥栗杂交育种中的花期不遇问题,以‘华栗4号’花粉为试材,研究了在室温和4、-20、-80℃这4个贮藏温度条件下干燥处理和非干燥处理对锥栗花粉生活力的影响情况。结果表明:在不同贮藏温度条件下‘华栗4号’的花粉生活力和耐贮藏能力不同;花粉适宜的贮藏条件为非干燥、低温环境。花粉生活力随贮藏时间的延长而下降,室温干燥条件下贮藏的花粉其生活力下降最快,贮藏27 d后花粉活力基本丧失;4℃的温度条件较利于花粉的短期贮藏,贮藏30 d后其萌发率仍为32.6%;而-20和-80℃的温度条件均较利于花粉的长期贮藏,且-80℃下贮藏的效果最佳,-80℃下贮藏270 d后花粉仍有一定的生活力,而在-20℃下贮藏210 d后花粉的生活力已基本丧失。     

牛角瓜花粉离体萌发研究

为了探讨牛角瓜花粉离体萌发的最适条件及培养基成分,以2年生牛角瓜新鲜花粉为试材,研究了不同溶液对牛角瓜花粉块壁解离效果的影响情况;还采用离体培养法,研究了不同培养温度和培养时间、不同培养基组分对牛角瓜花粉萌发率和花粉管生长的影响情况。结果显示:以10%的Na OH溶液将牛角瓜花粉块处理10 min的解离效果最好;牛角瓜花粉离体萌发的最适温度为30℃,在此温度条件下培养6 h后其花粉萌发率基本稳定,培养12 h后其花粉管生长最好;蔗糖对牛角瓜花粉萌发率及花粉管长度的影响均较大,硼酸对花粉萌发率及花粉管长度的影响均较小;牛角瓜花粉萌发和花粉管生长的最适培养基为20%蔗糖+0.1%硼酸+5 mg/L氯化钙+15 mg/L 6-BA,在此培养基上并在30℃的温度条件下培养6 h,其花粉萌发率达到94.77%,花粉管长度为11.07 mm。     

香椿花粉离体萌发与花粉生活力研究

[目的]探究香椿花粉最佳离体培养条件,花药大小、含水率与花粉萌发率的关系及花粉生活力随低温贮藏时间的变化的规律。[方法]以3个不同基因型(XC5、XC22、ZJ26)香椿花粉为试验材料,观测不同培养温度(20、22、25、28℃)、培养时间(4、6、12、18、30、42 h)下,花粉离体培养的萌发率,获得香椿花粉最佳培养条件。对香椿的花药含水率、花药长、宽进行测量,分析其与花粉萌发率的关系。基于最佳培养条件,检测香椿花粉-20℃低温贮藏10、25、40 d的萌发情况,分析花粉生活力随低温贮藏天数的变化趋势。[结果]香椿花粉在20℃的萌发率均显著高于其余3个培养温度,花粉萌发率随培养时间的延长而增大,培养30 h后,花粉萌发率均无显著变化。低温贮藏10 d的花粉萌发率与花药长度显著正相关,与花药宽度显著负相关,相关系数分别为0.529 6、-0.739 9。随着低温贮藏时间的延长,香椿花粉萌发率显著降低,含水率高的XC22降幅最大,低温贮藏10、25 d的花粉萌发率分别为89.2%、3.3%。[结论]检测香椿花粉生活力的最佳离体培养条件为20℃培养30 h;香椿花粉萌发率与花药长度、宽度以及含水率可能作为筛选花粉高萌发率的指标;低温贮藏可能对含水率高的香椿花粉生活力影响大。     

马银花花粉萌发和贮藏特性

采用不同培养液、不同培养温度不同贮藏时间和温度、-80℃超低温贮藏花粉不同解冻方法对马银花(Rhododendron ovatum)的花粉萌发特性及贮藏特性进行研究,结果表明:在25℃下,用100 g/L蔗糖+100 mg/L硼酸+100 mg/L GA3的离体培养液,培养4h花粉萌发率高,可达80%,GA3能促进花粉萌发和花粉管生长;各贮藏温度下的花粉贮藏15 d萌发率都保持在高水平,但室温贮藏花粉45 d失活,3.3℃贮藏花粉45 d萌发率可保持在36.11%,可作为生产应用的贮藏温度;-80℃贮藏的花粉采用30℃水浴解冻2 min效果较好。     

贴梗海棠花粉生活力的测定

以贴梗海棠初开花朵为试验材料,研究了TTC、碘-碘化钾2种染色剂测定花粉生活力的效果,离体培养时葡萄糖对花粉萌发的影响和3种不同温度(15、20、25℃)条件下的花粉萌发的变化规律,3种贮藏条件(常温、4℃、-23℃)对花粉贮藏的影响。结果表明:不同染色剂测定的花粉生活力差异显著,TTC染色法(76.26%)显著优于碘-碘化钾染色法(42.46%)。在一定范围内,培养基葡萄糖浓度和萌发温度提高能促进花粉的萌发,超出范围后抑制萌发。试验证明:最佳的葡萄糖浓度为10%,最佳的萌发温度为20℃。贮藏温度对花粉生活力的影响显著,其中最佳的贮藏条件是冷冻干燥,但综合考虑成本、便捷性等因素,实际应用中一般选择4℃。     

‘高原红’海棠花粉特性与生活力测定研究

以5年生观赏海棠‘高原红’嫁接苗为试验材料,采用扫描电镜、花粉离体培养、荧光显微技术等研究了‘高原红’花粉的形态、生活力及贮藏特性,分析了花粉离体培养基成分、离体与活体萌发的区别及花粉贮藏过程中活力的变化。探讨了花粉萌发及贮藏特性,旨在为揭示花粉萌发特性、建立花粉贮藏体系提供理论依据。结果表明:硼酸与蔗糖溶液均对‘高原红’花粉萌发有显著的影响,单因素最佳培养基为10%蔗糖溶液;离体与活体花粉在萌发时间上有一定程度的差异,离体萌发较快于活体萌发,且活体萌发中花粉管在授粉后第8—12 h为快速伸长期;花粉贮藏过程中,室温(17—20℃)下贮藏的花粉活力急速下降,花粉管长度与4,-20℃及-70℃时差异显著,4℃下贮藏的花粉离体萌发率同样呈急速下降的趋势,与-20,-70℃时差异显著,而-20℃与-70℃下贮藏的花粉其离体萌发率之间与花粉管长度之间差异均不显著。     

杜鹃红山茶花粉保存及其生活力测定

以5 a生盆栽杜鹃红山茶嫁接苗的花粉为试材,研究了不同培养基配方、不同培养时间对花粉发芽的作用,并探讨了不同保存条件和保存时间下花粉生活力的差异。结果表明：杜鹃红山茶花粉发芽率呈抛物线型,在2.5%琼脂＋10%蔗糖的培养基上发芽率最高,8 h的培养时间为杜鹃红山茶花粉发芽的最适观测时间,4℃和-20℃保存都是适合杜鹃红山茶花粉长期保存的条件,但4℃保存更具有实践意义。     

中华槭花粉活力探究

以中华槭为研究对象,研究了中华槭花粉离体培养萌发最佳测定时间,中华槭花粉活力快速测定的方法,蔗糖、硼酸、氯化钙浓度以及不同贮藏温度(室温、4℃、-20℃)对中华槭花粉活力的影响。试验结果表明:中华槭花粉离体培养16h后,再进行其花粉活力的测定较为适宜;用离体培养萌发法测定的花粉活力,最接近于中华槭花粉的真实活力。适于中华槭花粉萌发的蔗糖、硼酸、氯化钙浓度分别为:100g/L、50mg/L、50mg/L。中华槭花粉在4℃下可以存活60d,在-20℃下可以保存120d,在室温下仅可以存活7d。     

香水莲花花粉的采集、干燥和贮藏特性研究

【目的】研究香水莲花Nymphaea hybrid花粉活力和贮藏特性,以期为香水莲花有性繁殖和杂交育种的生产实践提供理论基础和技术指导。【方法】以黄、粉、紫3种不同花色的香水莲花品系为试材,采用花粉离体萌发培养基法测定不同开花天数(开花1、2、3、4、5 d)的香水莲花花粉活力、同一天不同时间段的香水莲花花粉活力、3个不同品系的香水莲花花粉活力、不同干燥方法(室内通风自然干燥、烘箱干燥和硅胶干燥)的香水莲花花粉活力及不同贮藏条件(室温、4、-20、-80℃)下贮藏不同时间(5、10、30、50、70、90、120、180 d)的香水莲花花粉活力。【结果】1)3种花色香水莲花的花粉活力均随开花时间呈现先升高后降低的变化规律,开花2 d的花粉活力最高;2)在一天7:30-17:30中,9:30-11:30的花粉活力较强;3)3个香水莲花品系间花粉活力存在差异,其中‘黄花型’香水莲花的花粉活力(60.61%)最高,‘紫花型’香水莲花的花粉活力(48.15%)最低;4)硅胶干燥法是香水莲花花粉干燥的最佳方式;5)4℃适于香水莲花花粉的短期贮藏,-20℃和-80℃适于香水莲花花粉的长期贮藏。【结论】在香水莲花开花2 d的9:30-11:30采集花粉,采用硅胶干燥法干燥后短期贮藏于4℃,长期贮藏于-20℃或-80℃条件下,可有效延长香水莲花花粉的寿命。     

毛竹花粉活力测定及其适宜保存条件研究

试验立足于毛竹花粉种质的保存,得出毛竹花粉萌发的适宜条件为25℃、15%蔗糖+0.001%硼酸培养1 h,萌发率可达92.5%。适合毛竹花粉较长时间保存的条件为:新采集的花药,室内阴干1 h,离心管密封保存于4℃冷藏室,可维持80 h的活力。零下低温保存毛竹花粉技术需要进一步探索。     

马尾松花粉萌发性状和不同林分马尾松花粉生活力的初步研究

通过对马尾松花粉萌发性状的观测及不同林分花粉生活力的测试,结果表明:花粉在培养液里萌发时首先是花粉萌发沟呈透明状,然后萌发沟两端突起,继而其中一端伸长成为花粉管。成熟花粉采后立即测定,染色率达90.6%、萌发率达77.2%;在低温(约6℃)贮藏120 d后测定,染色率与萌发率分别为85.2%与89.9%。不同林分中以全同胞无性系幼林的染色率与萌发率最高,分别为95.6%与93.8%;其次是半同胞无性系幼林,分别为91.2%与79%。说明马尾松无性系幼林的花粉是高生活力的花粉。     

楸树、灰楸花粉离体萌发特性及其保存方法

以灰楸、楸树花粉为试材,在固体培养基上离体培养,研究花粉萌发的最适温度、适温下的最佳培养时间及外源钙离子浓度对花粉萌发的影响。结果表明,30～35℃是灰楸花粉发芽的最适温度,25～35℃是楸树花粉发芽的最适温度;2种楸树花粉的最佳培养时间均为3h。外源钙离子能促进楸树、灰楸花粉的萌发,灰楸花粉以1.36～2.04 mmol／L CaCl2·2H2 O作用最为显著,楸树花粉以3.4 mmol／L CaCl2·2H2 O作用最为显著。贮藏条件对花粉的贮藏时间起决定作用。其中在常温常湿条件下,灰楸、楸树的花粉贮藏10天时完全失活;在－20℃、－80℃冷冻条件下灰楸、楸树花粉的活力分别可保持120天、90天以上。表明灰楸、楸树花粉适宜的贮藏条件依次为－20℃、－80℃冷冻。此研究可为楸树、灰楸生产上的花粉贮藏和人工授粉提供参考依据。     

贮藏温度和贮藏时间对垂柳种子生活力的影响

以成熟的垂柳种子为材料,测定了不同贮藏温度和不同贮藏时间下垂柳种子发芽率、发芽势、活力指数等生活力指标的变化,以探索贮藏温度和贮藏时间对垂柳种子生活力的影响。结果表明:适当的低温-10℃、-5℃、4℃可以延缓垂柳种子的劣变,延长其贮藏时间;常温20℃与极低温-20℃条件下会降低种子的生活力,表现为活力指数降低;随贮藏天数的增加,发芽率、发芽势、发芽指数表现出先升高后降低的趋势,发芽速则是先降低后升高。常温20℃贮藏7天种子发芽率显著下降,在-5℃贮藏3天的条件下种子生活力最强,可应用于垂柳种子萌发及人工种苗培育的实践中。     

贮藏温度和时间对木棉与美丽异木棉种子活力的影响

利用木棉 Bombax ceiba 和美丽异木棉Chorisia speciosa混合种子,在0、4、和8℃条件下贮藏135d,每隔45 d测定一次种子场圃发芽率和活力指标,用2,3,5-三苯基氯化四氮唑法(TTC法)测定种子的初始和贮藏135 d的生活力。结果如下:木棉种子在相同贮藏温度条件下,随贮藏时间的延长,发芽率、发芽势、活力指数存在显著差异(P<0.05),贮藏温度和贮藏时间有极显著的交互作用,种子活力逐渐下降,贮藏135 d后种子发芽率在8.33%以下,基本失去发芽能力;美丽异木棉种子在不同温度下,随着贮藏时间延长,发芽率、发芽势、活力指数没有显著差异,贮藏温度和贮藏时间没有显著的交互作用,种子发芽率为新鲜种子发芽率的67.46%以上;利用TTC染色法(1.0%浓度)能反映出木棉的种子生活力;木棉种子0℃贮藏90 d发芽率好于4和8℃,可在生产中推广应用TTC染色法检测木棉的种子生活力;美丽异木棉种子0、4、8℃贮藏135 d的发芽率差异很小,0℃贮藏发芽率和活力指数较优。     

杉木花粉发芽试验研究

以18a生种子园采集的杉木花粉为试验对象,在花粉发芽试验中,培养基按不同的蔗糖浓度和pH值进行了9种处理,接种24～36h以后在低倍显微镜下观察。根据调查结果分析,培养基不同,花粉的发芽率高低也不一样,杉木的花粉发芽最佳培养基是蔗糖浓度为20％、pH为5．5的培养基。     

贮藏温度对南川百合花粉萌发率的影响

研究不同贮藏温度和时间对南川百合花粉生命力的影响,结果表明:贮藏温度对百合花粉萌发率影响很大,冷冻条件有利于保持花粉萌芽率,4℃次之,常温条件最差;随着花粉贮藏时间的延长,萌发率呈下降趋势,直至失去生命力。