间歇投喂添加蛋氨酸硒饲料对仿刺参（Apostichopus japonicus Selenka）幼参生长和免疫指标的影响

在水温9℃～13℃下,将平均体质量0.745±0.3 g的仿刺参（Apostichopus japonicus Selenka）随机投放到50cm×40cm×30cm的塑料水槽内,每箱10头,共分为五组,每组3个平行,采用不同间隔时间投喂每kg添加0.5 mg蛋氨酸硒的饲料：第1、2、3、4组分别间隔0、5、10和15 d投喂一次,第5组投喂不含硒的饲料（对照组）。60d的饲养结果表明：间歇投喂含硒饲料各组仿刺参的成活率和特定生长率差异不显著,但都明显高于对照组;每隔5 d投喂一次含硒饲料的刺参体腔液中SOD活力（78.34U/ml）显著高于其他组（P〈0.05）;谷胱甘肽的浓度（2.87×10-5mol/L）对照组差异不显著,但显著高于其它组（P〈0.05）;连续投喂含硒饲料的仿刺参体内的酸、碱磷酸酶活性（2.42U/ml,5.76U/ml）显著高于其他组（P〈0.05）。建议在生产中宜每日或最多间隔5 d投喂含硒饲料。     

不同形状的附着基对仿刺参（Apostichopus japonicus Selenka）幼参生长的影响

在水温9.0-16.0℃下,将体质量0.5g±0.2g的仿刺参（Apostichopus japonicus Selenka）放养在放置了混凝土制的中空型（A类）、楼层型（B类）和井字型（C类）附着基的塑料水槽（45cm×31cm×30cm）中,投喂配合饲料,采用每周清洗一次附着基（A’组、B组’和C’组）和不清洗附着基（A组、B组和C组）的方法饲养80d,研究了3种形状附着基对仿刺参生长的影响。结果表明,清洗对仿刺参特殊增长率有极显著影响（P〈0.01）,清洗与附着基形状的交互作用对仿刺参特殊增长率有显著影响（P〈0.05）。清洗的楼层型附着基组（B’组）特殊增长率最高,不清洗的楼层型（B组）最低,两者之间差异显著。饲养的前60d,放置不同形状附着基的水槽水中亚硝酸、氨氮和COD等的含量低而稳,各组间差异不显著。但后期各组上述水化学指标急剧上升;定期清洗的水中均低于不清洗组。放置附着基而不清洗的水槽中的仿刺参体腔液中超氧化物歧化酶（SOD）、酸性磷酸酶（ACP）和溶菌酶（LYS）的活性分别比冲洗的水槽中高32.28%、9.17%和5.71%。A组仿刺参体腔液中SOD的活性与A’组差异极显著（P〈0.01）,B组与B’组差异显著（P〈0.05）,C组与C’差异极显著（P〈0.01）。文中从生态作用和空间面积比例等讨论了附着基结构与功能对仿刺参生长影响的机理。     

蛋氨酸硒含量对食用仿刺参生长和体壁营养成分的影响

在水温10.2~12.4℃、p H 7.8~8.0、盐度24~28条件下,将平均体质量为(45±5)g的仿刺参Apostichopus japonicus饲养在室内养殖池的网箱中,投喂蛋氨酸硒添加量分别为0mg/kg、0.2mg/kg、0.4mg/kg、0.6mg/kg、0.8mg/kg和1.0mg/kg的6组饲料。饲养60d后,测定仿刺参的特定生长率(SGR)和体壁中常规营养成分含量。结果表明:当蛋氨酸硒添加量为1.0mg/kg饲料时,仿刺参的特定生长率、粗蛋白、粗灰分含量最大,较对照组分别高155.56%、5.65%和2.9%(P0.05),而仿粗脂肪含量最低,较对照组低10.61%(P0.05)。     

不同饲料搭配及投喂量对仿刺参稚、幼参生长和成活的影响

水温(22.8±1.5)℃,将体长1.0~2.0 mm的仿刺参稚参放养到容水40 L的塑料槽中,每槽150头,研究不同饲料搭配及投喂量对稚、幼参生长和成活的影响。在前一试验中,给幼参分别投喂含鼠尾藻、酵母和配合饲料98.0%、2.0%、0%(1组),95.0%、0%、5.0%(2组),30.0%、5.0%、65.0%(3组),60.0%、5.0%、35.0%(4组),90.0%、5.0%、5.0%(5组);投喂量为360.7%~107.1%;在后一试验中,采用第4组的搭配比例,6、7、8、9、10组的投喂量分别为第4组的1/4、1/2、1.0、5/4、3/2。每组4个平行。试验结果表明,稚、幼参摄食不同搭配饲料时,第1个月生长和成活率差异不显著;中期,第1、2组的幼参生长显著快于其他组;后期,第3组生长显著快于其他组。稚、幼参的成活率与配合饲料的添加量呈正相关。在后一试验中,前期稚参的生长速度随投喂量的增加而加快;中、后期,各水槽稚参的总质量随投喂量的增加而增加,但平均每头质量与投喂量不呈正相关,第9组的稚参增长最快,第8组成活率最高,第6、7组的成活率最低。中、后期换水前水中氨氮含量显著高于换水后。文中提出了仿刺参苗种培育期间的适宜投喂模式。     

梭子蟹粉代替鱼粉和大豆蛋白对仿刺参幼参生长的影响

在水温25.6～27.0℃、盐度31、光照2000lx条件下饲育仿刺参苗种,研究了鱼粉、大豆蛋白与梭子蟹粉3种蛋白源对仿刺参幼参生长的影响。在饲料中分别按海藻质量的1‰、2‰、3‰分别添加鱼粉、大豆蛋白与梭子蟹粉。在27个容积为56L的玻璃钢水槽中分别放入一片30cm×40cm的波纹板和200头(0.1g/头)幼参,适量充气进行培育。试验结果表明,鱼粉试验组中以1‰的添加量效果最好,20d内质量增加175.0%,平均每头幼参质量日增加(3.75±0.9)mg;大豆蛋白试验组中以1‰的添加量效果最好,20d内质量增加165.0%,平均每头幼参质量日增加(3.25±0.3)mg;梭子蟹粉试验组中以3‰的添加量效果最好,20d内质量增加203.5%,平均每头幼参日质量增加(5.17±0.7)mg。3种蛋白源的1‰添加量中,效果依次为:鱼粉>蟹粉>大豆蛋白>空白组,空白组与添加蛋白源组之间差异极显著(P<0.01);2‰添加量中,效果依次为:蟹粉>鱼粉>大豆蛋白>空白组,蟹粉与鱼粉和大豆蛋白之间差异显著(P<0.05),空白组与添加蛋白源组之间差异极显著(P<0.01);3‰添加量中,效果依次为:蟹粉>鱼粉>大豆蛋白>空白组,蟹粉与鱼粉和大豆蛋白之间差异极显著(P<0.01),空白组与添加蟹粉试验组之间差异极显著(P<0.01)。试验结果证明,用梭子蟹粉作蛋白源效果显著好于鱼粉和大豆蛋白。     

饲料中添加精氨酸对仿刺参幼参生长、免疫能力及消化酶活力的影响

为研究精氨酸对仿刺参幼参生长、免疫能力及消化酶活力的影响,在基础饲料中添加0、1.00%、2.00%、3.00%和4.00%的包膜精氨酸(精氨酸含量为40%),配制精氨酸含量为0.32%、0.73%、1.16%、1.61%和1.99%的5种实验饲料(命名为D1,D2,D3,D4和D5),饲喂初始体质量9.10 g的仿刺参幼参60 d。结果表明,精氨酸显著提高了仿刺参的增重率、特定生长率和蛋白质效率,且在D4组达到最高;D3、D4和D5组仿刺参的脏壁比、肠壁比及肠长比显著低于D1和D2组,但3组之间差异不显著;精氨酸显著提高了体壁粗蛋白的沉积,但对水分及粗脂肪含量影响不显著;精氨酸显著提高了体壁谷氨酸、精氨酸、亮氨酸、组氨酸、羟脯氨酸、必需氨基酸及总氨基酸的含量,降低了赖氨酸含量;体腔液中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)活力随着精氨酸含量的增加而显著提高;肠道蛋白酶活力与饲料精氨酸含量呈二次负相关关系(Y酶活=-3.228X2精氨酸+2.865X精氨酸+26.24,R2=0.934),D3、D4和D5组纤维素酶活力显著高于D1和D2组,淀粉酶及脂肪酶活力不受精氨酸含量的影响。以增重率为评价指标,一元二次回归分析表明,体质量9.10 g的仿刺参饲料中精氨酸适宜含量为1.55%(7.10%饲料粗蛋白)。     

土池网箱培育仿刺参Apostichopus japonicus(Selenka)幼参的试验

2006年8月～11月,在面积33亩的土池塘中,放置10个用60目筛绢围成的6m×6m网箱,每个网箱中放置115、145、175或200个网吊,每个网吊由6个50cm×50cm的聚乙烯网片串成。每个网箱放入体重5.0mg(20万头/kg)或12.5mg(8万头/kg)的稚仿刺参(Apostichopus japonicus)0.3～0.5kg。经85d的饲养,培育出幼刺参19.39kg,平均每个网箱1.9kg,规格为540～702mg,成活率4.1%～9.6%。文中讨论了土池网箱培育幼刺参的技术关键,强调应在水温8℃～15℃下尽早放养、适时投喂、加大水交换量。     

饲料中添加浒苔对仿刺参幼参生长、消化酶活性和免疫力的影响

在水温17~18℃和盐度30条件下,将初始体质量为(4.09±0.26)g的仿刺参饲养在15个循环水玻璃缸(容积100L)中,投喂在基础饲料中添加0%、3%、6%、9%和12%浒苔的饲料,于投喂后第7、14、28d和42d分别检测仿刺参的生长指标、消化酶(蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和褐藻酸酶)和体腔液免疫酶(溶菌酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶)的活性。试验结果表明,投喂试验饲料后第14、28d和42d:(1)饲料中添加6%和9%浒苔组仿刺参的特定生长率显著增加(P0.05),在不同取样时间其他添加组仿刺参的的特定生长率与对照组差异不显著(P0.05);(2)饲料中浒苔添加量为6%和9%试验组仿刺参的4种消化酶比活力显著高于对照组(P0.05),其中6%组仿刺参的消化酶比活力最高;(3)饲料中浒苔添加量为6%时,仿刺参溶菌酶活力显著高于对照组及其他试验组(P0.05);饲料中浒苔添加量为6%和9%时,仿刺参碱性磷酸酶活力和超氧化物歧化酶活力显著高于对照组及其他试验组(P0.05);添加浒苔可以显著提高酸性磷酸酶活力,至第42d,试验组酸性磷酸酶活力高于对照组(P0.05),且浒苔添加量为6%时活力最高。在本试验条件下,饲料中添加浒苔可以提高仿刺参的特定生长率、消化酶活力及免疫力,浒苔的最适添加量为6%~9%。     

饲料中不同脂肪酸搭配对仿刺参幼参生长和体组分的影响

在水温13．0～23．0℃下,将平均质量1.45g的仿刺参Apostichopus japonicus幼参放养在容量50L（45cm×31cm×30cm）的水槽中,投喂以鱼粉、虾糠和玉米蛋白为蛋白源,添加马尾藻粉、海泥、贝壳粉和黄原胶等粗蛋白12．70％和粗脂肪5．48％的饲料。在饲料中含有不同比例的亚油酸（LA）、α-亚麻酸（LNA）、二十二碳六烯酸（22：6n-3）（DHA）和二十碳五烯酸（20：5n-3）（EPA）,以橄榄油平衡脂肪含量,以贝壳粉平衡其他成分,配制成LA和LNA的比例分别为20：0（S1）;20：1（S2）;1：2（S3）和2：1（S4）;LA、LNA、DHA和EPA的比例分别为6：1：5：0（S5）;10：1：30：5（S6）和10：5：6：1（S7）的膏状饲料。80d的饲养表明,幼参摄食只添加橄榄油（S1）、添加橄榄油和亚油酸（S2）的饲料时生长最慢,显著低于其他各组的幼参（P〈0．05）;摄食只添加亚麻酸（S3）或亚油酸和亚麻酸（S4）的饲料时,生长较慢,二者差异不显著（P〉0．05）,但均显著低于摄食添加DHA（S5）和EPA＋DHA（S6）的幼参（P〈0．05）;摄食添加上述4种脂肪酸（S7）饲料时,生长最快,即LA,LNA,DHA和EPA的比例为10：5：6：1时,体壁最厚,肠道中淀粉酶和蛋白酶的有效活力最高,对饲料脂肪和蛋白质的消化率显著高于其他各组（P〈0．05）。摄食实验饲料的仿刺参体内蛋白＋脂肪十灰分的含量之和（平均85．79％）远大于初始刺参（79．70％）的相应之和,由高至低依次为：S2（90．57％）〉S1（87．97％）〉S3（85．78％）〉S4（85．29％）〉S7（84．19％）〉S5（83．79％）〉S6（82．97％）。仿刺参摄食后体内18碳脂肪酸含量呈负增长,而体内EPA的含量均呈正增长,且恒定变化在4．36％～6．83％之间,表明饲料中的18碳脂肪酸能转化为仿刺参体内的EPA。添加了4种脂肪酸的S4、S5、S6和S7组幼参肠过氧化氢?     

饲料添加半乳甘露寡糖对刺参幼参生长、体壁营养组成及免疫力的影响

以初始体质量为(1.79±0.06) g的刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象, 进行为期8周养殖实验, 研究饲料中添加半乳甘露寡糖对刺参生长、消化、体壁营养组成及免疫力的影响。以基础饲料(E0)为对照组, 在基础饲料中分别添加0.2% (E1)、0.4% (E2)、0.8% (E3)、1.2% (E4)和1.6% (E5)的半乳甘露寡糖, 共配制5种实验饲料。结果表明: (1) 饲料中添加不同浓度的半乳甘露寡糖对幼参增重率及特定生长率具有显著影响, 各处理组均显著高于对照组(P<0.05), 而对脏壁比及肠壁比无显著影响(P>0.05), 1.2%(E4组)添加水平下, 刺参增重率及特定生长率最高。(2) 饲料中添加不同浓度的半乳甘露寡糖对幼参肠道蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶活力均无显著影响(P>0.05)。(3) 饲料中添加不同浓度的半乳甘露寡糖对幼参体壁酸性黏多糖及糖醛酸含量无显著影响(P>0.05)。添加半乳甘露寡糖比例0.2%(E1)、0.4%(E2)、0.8%(E3)、1.2%(E4)的处理组, 刺参体壁氨基酸总量及谷氨酸、甘氨酸、精氨酸含量显著高于对照组(P<0.05), 而1.6%(E5)组体壁氨基酸总量及Glu、Gly、Arg含量与对照组无显著差异(P>0.05)。(4) 饲料中添加半乳甘露寡糖对体壁及体腔液超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶及溶菌酶活性具有显著影响(P<0.05), 同时对体腔细胞溶菌酶活性影响显著(P<0.05)。实验可以得到以下结论: (1) 饲料中添加半乳甘露寡糖不仅可以提高刺参免疫力, 并且可以提高特定生长率, 并改善体壁氨基酸组成; (2) 刺参饲料中半乳甘露寡糖的合适添加比例为1.2%。     

Effects of differently processed diets on growth,immunity and water quality of the sea cucumber,Apostichopus japonicus (Selenka, 1867)

The type of formulated diet used in aquaculture systems affects the feed efficiency and water quality. In this study, the water quality, growth performance and immunity of the sea cucumber, Apostichopus japonicus (Selenka, 1867), fed diets produced using four different processing methods (extruded pellet diet, cold‐bonded pellet diet, flake diet and mash diet) were quantified for 60 days to identify the optimal feed type for culturing of this species. Sea cucumbers grew faster, the feed conversion ratio was much lower, and immunity indicators were higher when fed the extruded pellet diet compared to the other diets. Sea cucumbers fed the extruded pellet diet had the highest specific growth rate (0.96), whereas A. japonicus fed the cold‐bonded pellet diet had the lowest specific growth rate (0.51). The lysozyme activity of sea cucumbers fed the extruded pellet diet was higher (57.52) than that of A. japonicus fed the cold‐bonded pellet diet (39.22), flake diet (37.32) and mash diet (32.68). When animals were fed the mash diet, the ammonia–nitrogen, nitrite–nitrogen and phosphate productions were higher than in animals fed the other diets. These results indicate that the extruded pellet diet is the optimum feed type for use in the culture of A. japonicus.     

Cryopreservation of sea cucumber Apostichopus japonicus (Selenka) sperm

A simple and convenient method for the cryopreservation of sea cucumber Apostichopus japonicus (Selenka) sperm was tested in the present study. The highest motility (76.7±2.9%) of post‐thawing sperm was obtained in 15% dimethyl sulphoxide (DMSO) with a 1:9 dilution (semen volume to DMSO volume) when 0.5 mL semen–DMSO mixture was frozen at 6 cm above liquid N₂ in a closed styrofoam box. After thawing, sperm cryopreserved in glycerol almost lost motility entirely. Although there was no significant difference in percentage of motile sperm between 15% and 20% DMSO, the duration of sperm motility of 15% DMSO group was longer than that of 20% DMSO group. The motility of post‐thawing sperm enhanced when the dilution ratio of semen increased from 1:1 to 1:9. Morphological changes such as the loss of mitochondria, swollen plasma membrane and broken or rolled‐up tails were observed in post‐thawing sperm using an eosin–nigrosin staining. The fertility of cryopreserved sperm was significantly lower than that of unfrozen sperm. The 10‐fold increase in sperm to egg ratio resulted in double fertility for cryopreserved sperm, and about 70% fertility relative to the control.     

Optimum dietary protein and lipid levels for growth of juvenile sea cucumber Apostichopus japonicus

A feeding trial of three protein (200, 300 and 400 g kg⁻¹) and two lipid levels (20 and 100 g kg⁻¹) was conducted to determine the proper dietary protein and lipid levels for growth of juvenile sea cucumber Apostichopus japonicus. Dietary protein and lipid levels were adjusted by adding with different levels of soybean meal, squid liver oil and soybean oil, respectively. Three replicate groups of sea cucumbers (average weight of 1.3 g) were fed the experimental diets for 12 weeks. At the end of the feeding trial, survival was not affected by dietary protein and lipid levels (P > 0.05). Weight gain (WG) and specific growth rate (SGR) of sea cucumbers were significantly affected by dietary protein (P < 0.006) and lipid levels (P < 0.001). The highest WG and SGR were observed in sea cucumbers fed the 200 and 400 g kg⁻¹ protein diet with 20 g kg⁻¹ lipid (P < 0.05). WG and SGR of sea cucumbers fed the diet containing 20 g kg⁻¹ lipid were higher than those of sea cucumbers fed the 100 g kg⁻¹ lipid diets (P < 0.05) at each dietary protein level. Apparent digestibility coefficients of dry matter, crude protein, carbohydrate and gross energy of sea cucumbers fed the 20 g kg⁻¹ lipid diets were significantly higher than those of the 100 g kg⁻¹ lipid diets at 200 and 400 g kg⁻¹ protein (P < 0.05). Moisture, crude protein, crude lipid and ash contents were not significantly different among the groups. The results of this study indicate that the diet containing 200 g kg⁻¹ protein (170 g kg⁻¹ digestible protein) with 20 g kg⁻¹ lipid (13 g kg⁻¹ digestible lipid) may be sufficient for optimum growth of juvenile sea cucumber.     

棉子糖对刺参幼参生长、生理指标及糖代谢的影响

为研究饲料中添加棉子糖对刺参生长、消化与糖代谢的影响,实验以初始体质量为(11.46±0.06) g的刺参幼参为对象,在基础饲料中添加包膜棉子糖,配制成棉子糖含量分别为0.00%(D1)、0.02%(D2)、0.03%(D3)、0.06%(D4)、0.08%(D5)和0.11%(D6)的6组实验饲料,进行为期67 d的生长实验。结果显示：(1)随着棉子糖含量的增加,刺参的增重率及特定生长率均先升后降,D2～D5组显著高于D1组,D4组达最大值,体壁基本营养成分不受棉子糖含量的影响。(2)肠道蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和超氧化物歧化酶活性均先升后降,D3、D4组显著高于D1组;丙二醛含量先降后升,D4组达最低值;D3～D5组肠道皱襞高度显著高于D1组,D5、D6组出现炎症细胞浸润。(3)葡萄糖激酶、果糖磷酸激酶和丙酮酸激酶活性先升后降,葡萄糖激酶和果糖磷酸激酶活性在D4组达最大值,丙酮酸激酶活性在D3组达最大值;磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性先上升后平稳,D4～D6组显著高于其他组。(4)葡萄糖激酶、果糖磷酸激酶和丙酮酸激酶基因表达量均先升后降,D2～D6组均显著高于D1组,葡萄糖激酶和果糖磷酸...     

益倍康对刺参生长、消化和免疫相关指标的影响

以刺参为试验对象,在其基础饲料中分别添加1、5、10、20g/kg的微生态制剂益倍康,进行60d的饲养试验,研究益倍康对刺参生长、消化和免疫功能的影响。结果表明,益倍康具有一定的促长作用,20g/kg组的特定生长率显著高于对照组(P<0.05)。益倍康对提高刺参消化酶活性、免疫功能具有积极作用,其中20g/kg组的淀粉酶、蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05);5g/kg组的淀粉酶、蛋白酶、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等活性均显著高于对照组(P<0.05);统计分析表明,5g/kg为益倍康最适添加量。     

饲料中不同碳水化合物水平对刺参幼参生长和能量收支的影响

通过设置不同碳水化合物水平(25.61%,34.55%,45.31%,55.82%,66.09%),探讨对刺参幼参[体重(1.67±0.06)g]生长、饲料利用、体组成和能量收支的影响。实验周期为60 d,每组设3个重复,每个重复40头幼参。结果表明:(1)随着摄食碳水化合物水平的升高,特定生长率和饲料转化率均呈现先上升后下降的趋势。基于SGR和FCE的二次回归模型估算幼参碳水化合物的最适需求量为50.15%~53.95%;(2)蛋白质效率和摄食能在45.31%~66.09%碳水化合物水平组均显著高于25.61%~34.55%组,说明碳水化合物为幼参获得蛋白质节约效应提供了能量;(3)饲料中碳水化合物水平对幼参摄食率、排粪率和表观消化率均有显著性影响,适宜的碳水化合物水平会提高机体对营养物质的利用效率;(4)全参、体壁及消化道中粗脂肪含量均随摄食碳水化合物水平的升高而有所增加,表明摄食过量碳水化合物会造成幼参体组织脂肪的沉积;(5)在66.09%碳水化合物水平下,幼参生长能占摄食能的比例显著降低,粪能、排泄能及呼吸能占摄食能的比例有所升高,说明过高的碳水化合物水平会造成机体能量利用效率的降低。综上,适宜的碳水化合物水平可以促进幼参生长,提高饲料利用效率,而摄食过量碳水化合物会造成其体组织脂肪的沉积,并影响机体能量代谢水平。     

低盐胁迫对刺参存活、摄食和生长的影响

采用实验生态学的方法设置包括自然海水在内的4个盐度组,分别为31(自然海水,对照组A)、26(B组)、22(C组)、18(D组)。按逐步降盐(DG)与盐度突变(DS)两种盐度变化模式对各组刺参进行盐度胁迫实验。结果表明,B组仅个别较小个体出现死亡现象,C组和D组刺参个体的DG与DS实验组的成活率均出现显著差异(P<0.05),DS-D组的成活率最低,仅为45.67%。不同盐度胁迫的各实验组之间,摄食率与食物转化率存在显著差异(P<0.05);而各实验组内,DG处理和DS处理的刺参个体的FR和FCR差异均未见显著(P>0.05)。B组内的两种降盐方式在降盐后的前10d生长有显著差异(P<0.05),之后20d内差异不显著(P>0.05)。C组和D组的刺参个体在实验中均出现体重负增长,与其余各组的SGR差异显著(P<0.05)。