亚慢性铝暴露对雏鸡大脑组织氨基酸类神经递质的影响

以1周龄海兰白蛋鸡为试验对象,采用连续腹腔注射等体积不同浓度梯度AlC13的方法,建立不同程度亚慢性铝暴露模型,研究铝暴露对鸡大脑组织氨基酸类神经递质的影响.试验雏鸡分为对照、低、中、高4个试验组,铝暴露剂量分别为0、18.31、27.47、36.62 mg/kg·dAl3+,暴露60 d后,用高效液相色谱(HPLC)法检测鸡大脑组织中氨基酸类神经递质含量,原子吸收分光光度法检测鸡血清和大脑组织中铝的含量.结果表明,随染铝剂量的加大,谷氨酸( Glu)的含量呈升高趋势,但与对照组相比差异不显著(P＞0.05);血清和大脑组织中铝的含量、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)、牛磺酸(Tau)含量均高于对照组,与对照组比较差异显著(P＜ 0.05;P＜0.01);低剂量组天门冬氨酸(Asp)含量低于对照组,中高剂量组高于对照组,与对照组比较差异显著(P＜ 0.05;P＜0.01).结果提示,铝暴露可通过影响雏鸡氨基酸类神经递质的含量而产生兴奋性神经毒性作用.     

镉对体外培养大鼠大脑皮质神经元钙稳态的影响

选用原代培养大鼠大脑皮质神经元为模型,用神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体经免疫组织化学染色技术鉴定神经元.用不同浓度(0、5、10、20 μmol/L)醋酸镉染毒大鼠大脑皮质神经元12h,利用流式细胞仪检测细胞内[Ca2-]i,ATPase酶试剂盒测定Na-K+ ATPase和Ca2-Mg2--ATPase活性的变化,荧光定量PCR法测定钙调蛋白(CaM) mRNA转录水平.结果表明,免疫组化染色证实培养细胞呈现NSE阳性染色,证明是神经元.与对照组相比,各镉染毒组细胞内[Ca2+]i显著或极显著升高(P＜0.05或P＜0.01),Na--K--ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01),20 μmol/L组CaM mRNA转录水平极显著降低(P＜0.01).说明镉可能通过影响CaM的转录水平与维持钙稳态相关的酶(Na+-K-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase)活性,干扰神经元细胞内钙稳态,进而造成神经元细胞损伤.     

敌百虫对体外培养大鼠大脑皮质神经细胞凋亡的影响

为探讨敌百虫对大鼠大脑皮质神经细胞的毒性作用及机理,本研究在建立体外培养新生24h内SD大鼠大脑皮质神经细胞模型的基础上,在细胞培养液中添加0、5、20、80mg/L敌百虫染毒,在染毒后的不同时间测定细胞凋亡率、线粒体膜电位、细胞内[Ca2＋]i、ROS含量和ATP酶的变化。结果显示：①染毒12h,细胞凋亡率明显增加;②染毒12h,各染毒组线粒体膜电位逐渐降低,其中80mg/L组与对照组存在极显著差异（P〈0.01）;③染毒0.5h,各染毒组细胞内[Ca2＋]i显著高于对照组（P〈0.01）;染毒12h,各染毒组细胞内[Ca2＋]i呈下降趋势,但仍显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;④染毒12h和24h,细胞内ROS水平显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;⑤染毒12h,细胞Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-Mg2＋-ATPase活性逐渐降低,20、80mg/L组与对照组有极显著差异（P〈0.01）;上述指标的变化呈显著的剂量-效应关系。结果表明,低质量浓度敌百虫暴露可致大鼠大脑皮质神经细胞凋亡率和细胞内ROS含量升高,线粒体膜电位下降,细胞内钙离子超载且ATPase活性降低,提示细胞凋亡在敌百虫所致的大脑皮质神经细胞损伤过程中发挥主导作用。     

铝对体外培养鸡脾淋巴细胞IC50的测定

铝(Aluminum,Al)是地球上蕴藏量最多的金属元素,铝的免疫毒性作用近来已受到国内外学者的关注,已明确高剂量铝对实验动物的免疫功能有明显抑制.Synzvnys[1]研究表明,氯化铝具有明显的免疫毒性.铝暴露对鸡大脑组织钙稳态将产生失调影响[2].目前,国内外铝埘体外培养鸡脾淋巴细胞毒性作用的研究未见有文献.本试验以体外培养的鸡脾脏淋巴细胞为试验对象,研究不同浓度铝对免疫细胞毒性作用.     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇暴露对仔猪海马神经细胞神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对体外培养的仔猪海马神经细胞中神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响,探讨DON的神经毒性作用。以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng/m L)处理仔猪海马神经细胞24 h后,检测细胞中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACH)、γ-氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)含量,总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,钙离子(Ca2+)、钙调蛋白(Ca M)含量以及Ca M m RNA相对表达量。结果表明:与对照组相比,1)当DON浓度为1 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量显著升高(P0.05),GABA含量极显著升高(P0.01),而NE含量显著降低(P0.05);当DON浓度为2 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量极显著升高(P0.01)。2)当DON浓度为250 ng/m L时,SOD活性和T-AOC极显著降低(P0.01);当DON浓度为1 000 ng/m L时,GSH-Px活性显著降低(P0.05),NO含量极显著降低(P0.01),而MDA含量极显著升高(P0.01);当DON浓度为2 000 ng/m L时,CAT活性显著降低(P0.05),GSH-Px活性极显著降低(P0.01)。3)当DON浓度为125 ng/m L时,Ca M含量极显著升高(P0.01);当DON浓度为250 ng/m L及以上时,Ca2+含量和Ca M m RNA相对表达量极显著升高(P0.01)。综上,DON暴露可改变仔猪海马神经细胞神经递质的分泌及脂质过氧化,并影响钙稳态,对仔猪海马神经细胞具有一定的神经毒性作用。     

铝中毒对雏鸡大脑和小脑金属元素含量的影响

采用连续腹腔注射固定体积不同浓度梯度三氯化铝法建立不同程度的雏鸡铝中毒动物模型,利用火焰原子吸收法检测雏鸡大脑、小脑组织中金属元素铝、钙、铁、铜、锌和锰的含量.结果表明,染铝组雏鸡脑组织中铝含量高于对照组,铜、锌、锰、钙、铁含量低于对照组,组间差异显著(P<0.05,P<0.01),且存在剂量一效应关系.提示铝中毒致雏鸡大脑和小脑金属元素代谢紊乱.     

亚慢性铝中毒对雏鸡大脑神经细胞凋亡的影响

采用连续腹腔注射固定体积、不同浓度梯度三氯化铝(AICl3)水溶液法,建立不同程度的亚慢性铝中毒雏鸡模型,通过吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞术对雏鸡大脑神经细胞凋亡进行观测.结果表明:①荧光显微镜下可见,染铝组雏鸡大脑神经细胞发生典型的凋亡和坏死变化,细胞凋亡指数增加,极显著高于对照组(P<0.01),且随AlCl3浓度增加而加重.②染铝组雏鸡大脑神经细胞G0/G1期细胞数量增加,G2/M和S期细胞数量减少,细胞增殖指数降低,细胞凋亡率升高,且随染铝剂量的增多而加重,与对照组比,组间差异均极显著(P<0.01).③各染铝组雏鸡大脑琼脂糖凝胶电泳检测出现典型的DNA梯形带.上述结果说明,铝可引发雏鸡大脑神经细胞DNA损伤,抑制其增殖,诱导其凋亡.     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇暴露对仔猪海马神经细胞神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对体外培养的仔猪海马神经细胞中神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响,探讨DON的神经毒性作用。以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng/m L)处理仔猪海马神经细胞24 h后,检测细胞中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACH)、γ-氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)含量,总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,钙离子(Ca2+)、钙调蛋白(Ca M)含量以及Ca M m RNA相对表达量。结果表明:与对照组相比,1)当DON浓度为1 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量显著升高(P<0.05),GABA含量极显著升高(P<0.01),而NE含量显著降低(P<0.05);当DON浓度为2 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量极显著升高(P<0.01)。2)当DON浓度为250 ng/m L时,SOD活性和T-AOC极显著降低(P<0.01);当DON浓度为1 000 ng/m L时,GSH-Px活性显著降低(P<0.05),NO含量极显著降低(P<0.01),而MDA含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为2 000 ng/m L时,CAT活性显著降低(P<0.05),GSH-Px活性极显著降低(P<0.01)。3)当DON浓度为125 ng/m L时,Ca M含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为250 ng/m L及以上时,Ca2+含量和Ca M m RNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。综上,DON暴露可改变仔猪海马神经细胞神经递质的分泌及脂质过氧化,并影响钙稳态,对仔猪海马神经细胞具有一定的神经毒性作用。     

钙对成骨细胞活性、[Ca~（2＋）]_i及GJIC的影响

在体外培养4日龄SD大鼠成骨细胞（OB）的基础上,添加不同浓度钙（0、1、2、4mmol/L）,钙作用2d后,观察细胞活性、间隙连接通讯（GJIC）,测定钙离子（[Ca2＋]i）浓度;钙作用2、5、8d测定OB内总蛋白及Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）含量。与对照组比较,钙作用2d后,OB内线粒体增多,内质网扩张,细胞内[Ca2＋]i浓度增加,GJIC的荧光扩散距离缩小。总蛋白含量,在2d,钙1、4mmol/L组高于（P〈0.05或P〈0.01）对照组,在5、8d低于对照组,但仅在8d差异显著（P〈0.05或P〈0.01）。第2天后,钙抑制Col-Ⅰ分泌（P〈0.01）,在5、8d均促进（P〈0.05或P〈0.01）其分泌。结果表明,添加钙作用2d后,促进OB代谢及[Ca2＋]i沉积,抑制细胞间通讯,促进总蛋白分泌,抑制Col-Ⅰ分泌,促进了细胞增殖。增殖期过后,则抑制总蛋白分泌,促进Col-Ⅰ分泌,使OB较早的进入基质成熟期,利于骨骼的重建。     

铝对体外培养鸡脾淋巴细胞钙稳态的影响

本研究通过对体外培养的鸡脾淋巴细胞进行染铝处理,检测细胞内游离钙离子浓度和CaM mRNA表达水平,以探讨铝对淋巴细胞钙稳态的影响,为探讨铝的免疫毒性机制提供基础资料.