大口黑鲈鱼皮胶原蛋白肽的制备及抗氧化活性研究

罗非鱼皮富含胶原蛋白,是一种制备生物活性肽的理想原料。以罗非鱼皮为原料,采用酶解法制备罗非鱼皮胶原酶抑制肽 (Tilapia skin collagenase inhibitory peptide, TSCIP),并对其胶原酶抑制活性与金属离子结合活性的相关性进行研究,以期为罗非鱼加工副产物的高值化利用与食物蛋白源胶原酶抑制剂的研发提供参考。结果表明,罗非鱼皮经碱性蛋白酶酶解4 h后的产物具有最高的胶原酶抑制活性和锌离子 (Zn²⁺)、镁离子 (Mg²⁺) 结合活性,并探明其主要由小分子肽 (<1 000 D占85.65%) 组成。紫外、傅里叶变换红外光谱以及圆二色谱分析显示,TSCIP与Zn²⁺、Mg²⁺以及胶原酶结合后其二级结构发生了变化,β-折叠含量明显增加;Zn²⁺、Mg²⁺ 主要通过羧基氧、氨基氮原子以及羰基与TSCIP结合,胶原酶主要通过氨基氮原子以及羰基与TSCIP结合。

     

罗非鱼皮胶原肽的酪氨酸酶抑制活性与铜离子结合活性研究

为探明罗非鱼(Oreochromis)鱼皮胶原蛋白肽能否有效抑制黑色素的生成,采用酶解法制备出罗非鱼皮酪氨酸酶抑制肽(Tilapia skin tyrosinase inhibitory peptides,TSTIP),并开展其酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)抑制活性与铜离子(Cu²⁺)结合活性的相关性研究。结果显示,罗非鱼皮经碱性蛋白酶酶解4 h后的产物具有最高的TYR抑制活性和Cu²⁺结合活性,且两者呈极显著正相关(R=0.856)。荧光光谱分析显示,TSTIP与TYR或Cu²⁺结合后其内源荧光吸收强度的下降趋势一致,同时紫外吸收增强,且最大吸收波长发生红移。傅里叶变换红外光谱分析显示,TYR与Cu²⁺主要通过羰基及氨基与TSTIP结合。圆二色谱分析显示,两种结合物中β-转角及无规则卷曲含量相对减少,β-折叠含量相对增多,该现象在TSTIP-Cu²⁺结合物中更加明显。结果表明,TSTIP结合TYR产生的结构变化与结合Cu²⁺相似,TSTIP可通...     

尼罗罗非鱼鱼皮胶原蛋白中游离基清除肽的制备及其抗氧化活性

采用菠萝蛋白酶和Alcalase酶依次对尼罗罗非鱼皮胶原进行复合酶解.研究了该酶解产物的体外抗氧化活性.实验表明,该酶解产物具有较强的超氧阴离子/羟基自由基清除活性和还原能力.采用不同截留分子量的超滤膜将该酶解物分离成5个组分,即TGH-Ⅰ(＞10 ku),TGH-Ⅱ(10～5 ku),TGH-Ⅲ(5～3 ku),TGH-Ⅳ(3～1 ku)和TGH-Ⅴ(10 ku).其中TGH-Ⅴ组分显示出最强的超氧阴离子自由基清除活性,因此采用凝胶过滤、离子交换和反向高压液相色谱技术对该组分进一步分离纯化.纯化得到的肽具有很强的超氧阴离子自由基清除活性,其IC50值为4.6 μg·mL-1.通过质谱分析可知,该肽的分子量位于311.3～932.8 u之间.     

牡蛎酶解液的抗氧化活性

检测了牡蛎(Crassotera gigas)木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性。由Sephadex G-15葡聚糖凝胶柱层析分析牡蛎酶解液,得到具抗氧化活性组分的分子量分布。分子量为1191 D和826 D左右的木瓜蛋白酶酶解活性肽组分的自由羟基清除活性最强,当其质量浓度分别为0.184 mg/mL和0.673 mg/mL时,体外自由羟基清除活性分别为53.6%和66.5%;分子量分别为1074 D和735 D左右的中性蛋白酶酶解活性肽的自由羟基清除活性最强,当其质量浓度分别为0.166 mg/mL和0.830 mg/mL时,体外自由羟基清除活性分别57.6%和70.5%。HPLC分析结果表明,木瓜蛋白酶与中性蛋白酶酶解的活性肽组分分别由几种抗氧化肽组成。抗氧化活性最强的木瓜蛋白酶与中性蛋白酶酶解的肽组分在质量浓度为2.5 mg/mL时,活性分别可达83.6%和80.8%。用牡蛎原浆与各酶解液灌胃昆明小白鼠。研究结果表明,用木瓜蛋白酶与中性蛋白酶酶解原液及经超滤纯化的酶解液对小白鼠实施灌胃,其肝脏组织的SOD活力都显著提高(P<0.05);灌胃经超滤纯化的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解液,小白鼠肝脏组织GSH-PX活力、GSH含量显著提高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。     

罗非鱼肉双酶分步控制酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽的研究

本实验以罗非鱼肉为材料，利用Trypsin、Alcalase2．4L、Pratamex两两复合后，分步控制酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽（ACEIP）。以ACE抑制率（Ⅰ值）、氨基酸态氨含量（Cn值）、和TCA可溶性蛋白（短肽）含量（Cp值）为指标对酶解过程进行分析，说明双酶分步控制酶解过程以及产物的特点，指出以单酶控制酶解为基础的双酶分步控制酶解法优于单酶控制酶解法。Trypsin与Alcalase2．4I．、Trypsin与Protamex及Alcalase2．4L与Protamex双酶分步控制酶解产物经稀释40倍后对ACE的最大抑制率分别可达到82．9％、82．9％和91．91％，具有较好的抑制效果。     

鲢鱼鱼皮蛋白肽的制备与抗氧化活性评价

为制备抗氧化活性良好的鲢鱼鱼皮蛋白肽,采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶等4种常见的商业酶对鲢鱼鱼皮进行酶解,测定酶解物的ABTS自由基清除力和Fe2+螯合力来评价其抗氧化活性,并用超滤及凝胶层析对酶解物进行分离,以期得到活性更好的酶解物分离组分。酶解后产物的抗氧化活性均有所提高,其中碱性蛋白酶酶解2 h产物活性较强。对此酶解物用截留分子量为10 k Da、5 k Da和3 k Da的中空纤维超滤膜进行超滤,得到的4个组分中,分子量越小的组分抗氧化活性越强。分子量小于3 k Da的组分经Sephadex G-15凝胶层析得到3个组分,其中分子量最大的组分活性较好,在0.51 mg/m L质量浓度下测定其ABTS自由基清除率和Fe~(2+)螯合力分别为(79.65±0.87)%和(93.40±0.20)%。该研究成果对鲢鱼鱼皮抗氧化肽的开发具有较好的指导作用。     

罗非鱼碎肉酶法制备蛋白胨的工艺研究

为探讨罗非鱼碎鱼肉酶法制备蛋白胨的加工工艺,采用正交试验的方法,分别研究了木瓜蛋白酶、AS.1398中性蛋白酶、复合蛋白酶水解罗非鱼碎肉制备蛋白胨的工艺条件。结果表明:木瓜蛋白酶的最佳水解工艺条件为pH6.5,温度65℃,水解时间4h,加酶量1250 U/g,蛋白胨得率达12.63%;AS.1398中性蛋白酶最佳水解工艺条件为pH 7.5,温度55℃,水解时间4 h,加酶量750 U/g,蛋白胨得率达13.25%;复合蛋白酶的最佳水解工艺条件为pH 7.0,温度50℃,水解时间4.5 h,加酶量850 U/g,蛋白胨得率达11.43%。     

复合酶提取牡蛎抗氧化肽的工艺研究

以牡蛎为原料,首先从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中筛选出胰蛋白酶为内切酶,以水解度为指标,得到最佳的酶解工艺条件:时间4h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％(7 500 U/g),水解度为49.50％;同时以水解度为指标,得到外切酶风味蛋白酶的最佳酶解工艺:时间5h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％ (450 U/g),实际水解度50.95％.最后,以清除羟自由基能力和水解度为指标,探讨内切酶(胰蛋白酶)和外切酶(风味蛋白酶)不同复合酶解方式的抗氧化能力.最终确定,复合酶解制备牡蛎抗氧化肽效果最好,其酶解条件为胰蛋白酶为3％(7 500 U/g)、风味蛋白酶加酶量为3％ (450 U/g),pH8.0,时间5h,料水比1∶2,温度50℃时,水解度高达53.94％,体外清除·OH的EC50为0.56 mg/mL.     

混合乳酸菌发酵改善罗非鱼蛋白酶解液风味的研究

通过嗜热乳链球菌（Streptococus thermophilus）和保加利亚乳杆菌（Lactococcus bulgarcus）混合发酵,改善罗非鱼（Oreochromis niloticus）下脚料蛋白酶解液风味,采用响应面设计试验考察乳酸菌发酵时间（X1）、温度（五）及接种量（恐）对酶解液风味感官评分值（Y）的影响,并利用同时蒸馏萃取与气相色谱-质谱（GC—MS）联用技术测定挥发性成分。结果表明,响应面分析法（RSM）优化的乳酸菌发酵条件为时间9h,温度45℃,接种量16％,预测风味感官评分值为4．1;酶解液发酵后的挥发性成分由原来的27种增加至33种,增加的主要是酯类物质,另外产生了辛酸及十六醛等风味物质。乳酸菌发酵能减弱罗非鱼酶解液的腥味,但脱苦效果不明显。     

添加外源酶类对腌制罗非鱼品质的影响

该研究利用中性蛋白酶、Protamex1.5L和碱性蛋白酶酶解罗非鱼 (Oreochromis mossambicus) 鱼皮,研究了各种酶解产物对钙离子 (Ca²⁺) 的结合能力,比较了酶解物结合Ca²⁺后的抗氧化能力,并分析了结合物的傅里叶红外光谱 (FT-IR)。结果显示,Protamex1.5L水解罗非鱼皮2 h的酶解产物具有最高的Ca²⁺结合率 (87.79%);3种罗非鱼皮酶解产物均存在抗氧化性,其中Protamex1.5L酶解罗非鱼皮产物的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、·OH自由基清除率和还原力最高分别为51.46%、17.26%和0.09;罗非鱼皮酶解物 (TSH) 结合Ca²⁺后,钙离子结合物 (TSH-Ca) 的DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率减弱,还原力增强;FT-IR分析结果表明了Ca²⁺与TSH中氨基氮原子和羰基氧原子发生了结合。

     

尼罗罗非鱼肠道淀粉酶高产菌株的筛选及耐酸、耐高温特性的研究

研究了从健康罗非鱼肠道中筛选出的活力为195 U/ml的淀粉酶高产菌株的耐酸耐高温能力。结果表明,该菌株最高耐受温度为80℃,20 min;在50~60℃时稳定性强,可保持正常生长,维持高菌体量;最适生长pH值为6,在强酸性条件下能存活,并维持缓慢生长。由此表明,该菌株在微生态饲料添加剂生产上具有重要潜在价值。     

琼胶寡糖体外清除自由基活性的研究

在不同条件下对琼胶进行酸水解,得琼胶寡糖A1(以二、四糖为主)和A2(以己糖、辛糖为主)采用化学发光法和DPPH体系分别研究A1、A2对O2·-、·OH和DPPH3种自由基的清除作用。结果表明,A1、A2对3种自由基都有较好的清除作用,而且清除活性随糖浓度的增加而加强。在O2·-体系中,A2的IC50为0.54mg/mL,效果要好于A1(IC50为0.8mg/mL)。在·OH体系中,A2对·OH的清除作用比A1效果好,IC50分别为1.2和2.3mg/mL。2个体系比较发现A1、A2对O2·-的清除作用高于对·OH的清除作用。在DPPH体系中,A1、A2对DPPH有一定的清除,但A1较A2效果好,IC50分别为4和6 4mg/mL。由此可见,琼胶寡糖在不同体系中清除自由基的活性不同。琼胶寡糖在抗氧化方面具有很好的应用价值。     

Gel Forming Ability of Tropical Tilapia Surimi as Compared with Alaska Pollock and Pacific Whiting Surimi

Abstract

Setting and thermal treatment effects on texture and color of tropical tilapia surimi gels were compared to Alaska pollock and Pacific whiting gels. Heat treatments that most favored intrinsic gelling factors of a fish species exhibited strong gel formation. Whiteness values increased as total thermal inputs increased, which reflect the increasing opacity of the gels. Pollock gels were generally the strongest and whitest. Tilapia gel quality was generally second to pollock gels, however, in heat treatments using setting temperatures ≥ 40 °C, tilapia gels were comparable (60 °C setting) or superior (40 °C setting) to pollock gels. The optimum heat treatment for tilapia surimi appeared to be a 40° C setting for 1 hr followed by a 90 °C cook for 15 min. SDS-PAGE patterns of gels prepared with 60°C setting followed by 90 °C cooking elucidated the various degree of protein degradation depending upon the species in a descending order of whiting, tilapia, and pollock.     

广西地区罗非鱼寄生车轮虫形态分类的研究

采用银染色方法对广西地区奥尼罗非鱼鱼苗体表寄生的车轮虫进行抽样检测,运用国际通用的方法“统一定位法”和“齿体定位描述法”对检测的车轮虫进行形态学描述,发现寄生于广西奥尼罗非鱼幼鱼体表的车轮虫有两种：异齿车轮虫（Trichodina heterodentata Duncan 1977）与紧密车轮虫（Trichodina compacta Van As＆Basson,1989）,其中紧密车轮虫为国内首次报道,而罗非鱼是国内发现异齿车轮虫的新寄主。     

Purification and Identification of Antioxidant Peptides from Fermented Fish Sauce (Budu)

This study aimed to isolate antioxidant peptides from Budu extract and identify novel antioxidant peptides using high-performance liquid chromatography (HPLC) and electrospray ionization-time-of-flight mass spectrometry (ESI-TOF MS/MS). An amino acid analyzer was used to analyze the amino acid composition of peptides. Two novel peptides, Lue-Asp-Asp-Pro-Val-Phe-Ile-His (LDDPVFIH) and Val-Ala-Ala-Gly-Arg-Thr-Asp-Ala-Gly-Val-His (VAAGRTDAGVH), were identified. The synthesized peptide of LDDPVFIH showed higher antioxidant activity. The presence of hydrophobic amino acids (Ile and Leu), acidic (Asp) and basic (His) amino acids in the peptide sequences is believed to contribute to the high antioxidant activity of the fermented anchovy fish (Budu) extract. Thus, the two peptides may have potential application as functional foods and could also be used as nutraceutical compounds.     

罗非鱼寄生嗜丽鱼虫的形态描述及系统发育研究

2018年11月至2019年5月,在乌鲁木齐市周边市场及养殖场进行鱼类寄生虫调查过程中发现,不同地域的罗非鱼鳃部有大量锚首虫寄生,经染色观察,对后吸器及交接器等结构进行绘图、测量,同时选用28S、18S-ITS1-5.8S和COⅠ3个分子标记进行扩增、克隆和序列测定,利用核糖体RNA与相关物种进行系统发育分析.研究结果...     

罗非鱼行业协会在产业发展中的作用探析

本文总结了我国罗非鱼行业协会的现状和特征,探讨了罗非鱼行业协会在罗非鱼产业发展中的地位和作用;针对我国目前罗非鱼行业协会在发展中存在的不足,提出了促进罗非鱼行业协会发展的几点建议。     

中国罗非鱼产业的国际地位及对外贸易评价

分析我国罗非鱼产业在国际上的比较优势和竞争优势,通过分析近年贸易数据特点及走势,总结我国罗非鱼外贸特征。在此基础上,提出如何稳定增加罗非鱼产品出口,规避贸易风险的建议。     

Geosmin and Off-Flavor in Nile Tilapia (Oreochromis niloticus)

Abstract

The concentration of geosmin (1,10-trans-dimethyl-trans-9-decaol) in fresh tilapia were analyzed by applying high-vacuum distillation, extraction and gas chromatography techniques. The distribution of geosmin in the fish was determined by examining tissues from various parts of tilapia, along with the rates of geosmin absorption and purging. Analysis showed that when geosmin was added to fish flesh at concentrations ranging from 2.8 to 390 μg per kg of flesh, the rate of recovery was 51 to 89%. Sensory evaluation detected muddy flavor in freshwater tilapia with geosmin content ranging from 7.55 to 9.85 μg/kg of fish flesh. However, panelists failed to detect muddy flavor in brackish water tilapia that contained geosmin only in the range of 1.5 to 2.6 μg/kg. Among various tissues of the fish, the intestines contained the highest geosmin concentration, and appeared in descending order in the abdominal, skin and muscle tissues. After holding for 2 h in water with 5 and 50 μg/l geosmin, tilapia absorbed 17.6 and 42.2 μg/kg geosmin in the flesh, respectively. Holding the fish over longer periods in water with higher geosmin content resulted in a greater amount of absorption. In contrast, transferring muddy-flavored fish to static clean water purged geosmin from the fish but it required at least 16 days to eliminate the muddy flavor.     

Economic and Risk Analysis of Tilapia Production in Kenya

Commercial production of tilapia in Kenya has potential for expansion, but growth and development of the tilapia industry in Kenya will depend upon its profitability and the effect of associated risks. Data from pond experiments, on-farm trials, and farm surveys were used to develop enterprise budgets and a risk analysis for nine production scenarios. The nine scenarios include: 1) monoculture of sex-reversed male tilapia fed either rice bran, a pelleted experimental diet, or a pelleted pig finisher diet; 2) clarias monoculture fed with each of the three diets; and 3) tilapia-clarias (sex-reversed male fingerlings) polyculture fed with each of the three diets. Net returns/ha were highest for production with the pig finisher diet, with clarias in monoculture the highest followed by tilapia in monoculture and then the polyculture system. The lowest net returns/ha were obtained with clarias fed rice bran. Profitability was affected by feed cost and tilapia survival. Tilapia monoculture systems had lower probabilities of financial losses than either clarias monoculture or the polyculture system. Use of the pelleted diets also resulted in lower probabilities of financial losses. Lower yields from the rice bran feed scenario resulted in its greater sensitivity to fluctuating costs of rice bran and survival of tilapia.