显微操作针的制作

显微操作技术如今已广泛应用于胚胎生物工程,如体细胞核移植、显微受精、胚胎性别鉴定和胚胎分割等。完成这些工作,首先必须有符合要求的显微操作针,由国外购买成品针用于显微操作人员培训其成本太高。本实验室主要从事牛、羊的体细胞克隆工作,所以由国外购买了拉针仪、煅针仪和磨针仪。经过一年的学习摸索,显微操作针的制作已很熟练,而国内做显微操作针的相关资料还很少,现将实验中摸索出来的一些方法和技巧总结出来与同行共享。1做针用材料实验室购买的是NIKON和LEICA公司的显微操作系统,因此使用的是与其相匹配的外径为1mm,壁厚0.1mm…     

哺乳动物胚胎细胞核移植显微操作用针的制备与应用

本文阐述了利用拉针仪、断针仪和磨针仪制备动物胚胎细胞核移植显微操作用针的具体操作方法、注意事项、可用针的评定标准并给出了部分实验用针的长度、内外径的参考数据.     

牦牛异种核移植显微操作针的制备

结合制备用于牦牛异种核移植显微操作针的经验,介绍了制备显微操作用针的具体方法,并对一些在显微操作针制作过程中可能出现的影响因素及其注意事项加以总结。     

转基因家畜研究概况(续)

微注射转基因操作的一般程序1、所需仪器设备三维或二维的显微操纵仪(micromanupulator)、微型电拉针仪(microelectrodepuller)、微锻炉(microforge)、干涉差物镜(differentialinterference contrast optics)、高速离心机(high speed centrifuge)等。     

山羊早期胚胎切割技术的比较研究

为了探求在生产实践中可行、对胚胎损伤较小的切割技术以获得同卵双生后代,研究采用简易显微切割技术和玻璃针透明带内切割技术,分别对山羊桑葚期胚胎进行切割。结果表明,利用显微切割刀进行山羊早期胚胎切割不仅可获得较高的移植产羔率(显微刀简易切割有效率为97.6%,产羔率为55.0%;玻璃针简易切割有效率为96.7%,产羔率为58.3%;玻璃针带内切割有效率为94.4%,产羔率为37.5%),而且不需要精密的显微操作装置,便于在基层生产中推广应用。     

显微注射针对猪ICSI胚胎的发育和EGFP表达效率的影响

本实验以猪体外成熟卵子以及冷冻解冻后失活的精子为材料,以无BSA且成分明确的TL-HEPES溶液为操作液,探讨显微注射过程中分别使用钝口针和磨口针进行注射,对猪卵子的激活、ICSI胚胎的发育及EGFP表达效率的影响。结果表明:成熟后的猪卵子在不进行精子注射和电激活的情况下,使用钝口针空注射后,卵裂率显著高于磨口针(P<0.05)。分别使用钝口针和磨口针对成熟后的猪卵子进行精子注射,不论进行或不进行电激活,使用钝口针注射,卵子的卵裂率、囊胚率和胚胎EGFP的表达效率均显著高于磨口针(P<0.05)。本实验研究发现,使用钝口针进行注射有利于猪ICSI卵子的激活,胚胎的发育以及胚胎中EGFP表达效率。     

胚胎分割技术在奶牛生产中的应用研究

本研究在于通过大群牛体试验探索出一种更适用于大规模奶牛生产的高效简便切割程序和方法。因此,试验采用了简易的单臂显微操作仪配上一根微玻璃针,在立体显微镜下连同胚胎透明带,从上而下进行切割,减去了分割胚胎再装透明带这一工序。对酶化处理、切割环境和裸半胚培养是否影响     

显微注射法制备转基因鼠和转基因猪的技术特点此较

本文采用显微注射技术制作转基因鼠和转基因猪并对共进行比较,阐明了用显微注射方法制作两种转基因动物的技术原理和实验方法.对两者相似点进行了归纳和总结,同时也对两种转基因动物制作过程中的不同之处进行了比较和分析.根据两种不同的实验动物,描述了它们各自不同的实验特点,技术方法和实验要求.本文同时也在理论上和实践中对转基因动物的制作进行了探索.     

简易三维显微操作仪的制备及其应用

本文介绍简易三维显微操作仪的自制，并检验其应用于哺乳动物卵母细胞内源物的吸出或外源物的注入。     

用精子微注射技术研究获得的对哺乳动物受精过程的新认识

精子微注射技术就是借助显微操作仪,将精子或精子成分直接注入卵母细胞的细胞质或卵周隙中去,使卵子受精。它是体外受精的一种新的操作技术,可将体外受精研究和胚胎的显微操作技术相结合,因而,比常规体外受精研究更有发展前途。首先,它避免了正常受精过程中精子穿透卵子胶膜、卵丘细胞一透明质酸基质和透明带,进而和卵浆膜融合的过程,因而可以对精卵互作的某些特征进行探讨。比如可用以研究受精的准确时间、     

显微注射法制备转基因鼠和转基因猪的技术特点比较

本文采用显微注射技术制作转基因鼠和转基因猪并对其进行比较，阐明了用显微注射方法制作两种转基因动物的技术原理和实验方法。对两者相似点进行了归纳和总结，同时也对两种转基因动物制作过程中的不同之处进行了比较和分析。根据两种不同的实验动物，描述了它们各自不同的实验特点，技术方法和实验要求，本文同时也在理论上和实践中对转基因动物的制作进行了探索。     

新式人工授精仪——简易、灵活、左右手均可操作的SchleyII型人工授精仪

人工授精仪能控制蜂王交配 ,提高蜜蜂经济性状 ,减少病虫害。今天 ,通过对授精仪进行技术改造 ,制造出易学易用的新型人工授精仪。Ｓｃｈｌｅｙ型授精仪是继最早的Ｒｕｔｔｎｅｒ装置之后制作的 ,是唯一对Ｒｕｔｔｎｅｒ进行革新的仪器 ,ＰｅｔｅｒＳｃｈｌｅｙ教授又经过 2 5年不断地设计改进 ,Ｓｃｈｌｅｙ型授精仪更接近自然交尾的状态 ,操作更容易。它为方便移动提供精确控制 ,为细微操作提供简便把手和可重复的操作 ,功能多、选择性强。新的简便易用的ＳｃｈＩｅｙＩＩ型人工授精仪这种新型人工授精仪功能非常多 ,左、右手使用者均可操…     

KMC57F1小鼠卵丘细胞核的注射及其成功率观察

本文用在自制简易三维显微操作仪上,对KMC57F1小鼠卵丘细胞的核注射方法进行了研究,并对其注射成功率进行观察与分析.     

胚胎干细胞显微注射对小鼠和猪胚胎发育影响的研究

旨在为小鼠和猪多能性干细胞嵌合体制作提供参考,探讨胚胎干细胞(Embryonic stem cells或Embryonic germ cells,ES/EG)显微注射及受体胚胎发育时期等对胚胎发育的影响。对小鼠ES细胞和猪EG细胞分别进行研究:(1)将小鼠ES细胞分别注入小鼠桑椹胚和囊胚,比较不同发育时期受体胚胎体外培养的发育率和孵化率,以及注射胚胎和未注射胚胎体外培养的发育率和孵化率。结果表明,显微注射后的桑椹胚体外培养发育率和孵化率分别为94.7%和70.2%,囊胚率分别为84.6%和80.8%,注射后桑椹胚体外培养发育率极显著高于囊胚(P0.01),但注射后囊胚体外培养孵化率极显著高于桑椹胚(P0.01);未注射胚胎(注射胚胎)的体外培养发育率和孵化率分别为96.6%(89.9%)和67.8%(75.2%),未注射胚胎发育率极显著高于注射胚胎(P0.01),但注射胚胎孵化率极显著高于未注射胚胎(P0.01)。(2)将猪EG细胞分别注入猪桑椹胚、早囊、囊胚及孵化囊胚,比较不同发育时期受体胚胎移植后妊娠率以及注射胚胎和未注射胚胎体外培养的孵化率,并对猪EG细胞显微注射针和固定针的规格进行了探讨。结果表明,显微注射的桑椹胚、早囊及囊胚移植后妊娠率为67%,而显微注射的孵化囊胚移植妊娠率为0,桑椹胚、早囊及囊胚移植后受体母猪妊娠率极显著高于孵化囊胚(P0.01),由桑椹胚、早囊及囊胚注射后移植获得了两头嵌合体仔猪;显微注射和未显微注射的猪胚胎其孵化率分别为47.54%和72.97%,未注射胚胎孵化率极显著高于注射胚胎(P0.01)。确定猪EG嵌合体制作过程中,注射针外径约为30μm,内径约为25μm;固定针外直径约为130~150μm,内径约为40μm。嵌合体制作时,胚龄宜早不宜迟,桑椹胚显微注射更易操作,而且导入的时期较早,ES/EG细胞在嵌合体组织中可以有很高的贡献率,故选择桑椹胚进行注射。在本试验条件下,显微注射对小鼠胚胎发育影响不大,对猪胚胎影响较大,说明猪胚胎显微注射条件需要进一步优化。     

简易透镜合成演示仪的制作及应用

在中学物理实验教学中,光学实验器具繁多、保管和使用十分麻烦,且透镜特性演示实验需更换不同焦距、不同类型透镜。为此,笔者改装制作的简易透镜合成演示仪。用水透镜代替原实验玻璃透镜,可在同一装置上实现透镜特性实验,增加实验对比度,减少操作繁琐度。同时制作材料环保、廉价。     

猪病针灸治疗的用具与方法

1针灸用具在猪的针灸治疗中所使用的用具有针具、灸疗用具、电针仪器和激光针灸仪4种。治疗猪病的针具有毫针、三棱针、注射器和手术缝合针。毫针是针灸治疗中白针疗法较常用的针具,特点是针尖圆锐,针体细长。三棱针是血针治疗中常用的针具,其特点是针头部分呈三棱锥状,针体为圆柱形。注射器是用于水针疗法治疗的工具。手术缝合针主要在埋线疗法     

巧用巢框丝制作育王移虫针

对于业余养蜂和初次养蜂者来说,看到经验老到的养蜂人育王换王,总是羡慕不已.但由于相关技术的缺乏,在使用网购的专业移虫针移虫育王时,不是铲破巢脾,就是弄死了幼虫.笔者现向大家介绍一种简易的移虫针,不仅取材容易、制作简单,而且操作十分方便.     

犬前肢横断面滴胶包埋教具制作的研究

本文主要从实验动物选材、前期处理、制作标本、标本保存等方面来阐明犬肌肉横断面滴胶包埋教具制作的流程。该方法制作流程简单易于操作,实验设备和试剂价格便宜,制作出来的犬前肢横截面包埋教具解剖层次构造清晰,为后续解剖学实践教学提供支持。     

前进中的兰州兽医研究所

中国农业科学院兰州兽医研究所是我国著名的兽医科研机构。创建于1957年。座落在兰州市黄河北岸徐家坪,占地24hm~2。交通便利,环境优美.适于进行科研活动。 本所设有病毒病、寄生虫病、传染病三大研究室和农业部重点实验室,以及情报室、中心仪器室和实验动物场。各室均有实验大楼和配套的实验动物舍,科研及其辅助用房12800m~2;中心仪器室拥有电子显微镜、DNA合成仪、显微注射仪、高效液相色谱仪、冻干机、超速离心机等精密仪器设备,图书情报资料室藏有29499册中、外文专业书刊和文献资料。1993年又新增添了全国唯一的畜牧和兽医专业情报资料微机光盘检索系统软盘。     

显微操作液中添加抗氧化剂对延边黄牛体细胞克隆效率的影响

在延边黄牛体细胞克隆显微操作液中添加了维生素E,L-半胱氨酸,牛磺酸3种抗氧化剂,分别测定它们对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育的影响,以确定显微操作液中添加的最佳浓度的最佳抗氧化剂,从而提高体细胞克隆的效率。结果显示,维生素E,L-半胱氨酸,牛磺酸3种抗氧化剂的最佳浓度分别为100μmol/L,0.9 mmol/L,14 mmol/L。适宜延边黄牛体细胞克隆显微操作液中添加的抗氧化剂为14 mmol/L的牛磺酸。结论:显微操作液中添加抗氧化剂能够提高延边黄牛体细胞克隆效率。