12例ANCA相关性小血管炎肺部影像学分析

目的分析抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性小血管炎肺部表现的临床及影像学特点,总结其诊断及鉴别诊断的要点。方法对2001年10月至2006年3月在我院住院治疗经实验室检测ANCA均为阳性的12例患者的肺部表现的诊断过程进行分析,并总结其临床及影像学特点。结果12例患者均确诊为ANCA相关性小血管炎,表现为多系统多脏器损害,其肺部损害临床以发热、咳嗽、咯血及呼吸困难为主要表现,X线主要表现为双肺野弥漫性点片状或斑片状阴影。结论肺是ANCA相关性小血管炎最常累及的脏器之一,其肺部影像学表现并无特异性改变,对有肺受累的多系统损害的患者,要考虑到本病的可能。     

抗中性粒细胞胞浆抗体在原发狼疮性肾炎中的表达及临床意义

目的 了解抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）在原发性狼疮性肾炎中的表达及其意义。方法分别应用ELISA及免疫荧光法检测36例狼疮性肾炎患者血浆及肾组织中的ANCA表达。结果原发性狼疮性肾炎患者血浆ANCA表达的阳性率为36．1％（13／36），肾脏组织ANCA表达阳性率为47．2％（17／36），两者差异无统计学意义（X^2=0．914，P〉0．05），但血浆和肾组织中的ANCA阳性表达有密切关系（P〈0．01）。伴有高血压的狼疮性肾炎患者肾脏组织ANCA表达的阳性率（71．4％，15／21）明显高于无高血压者（13．3％，2／15）（P〈0．01），不同年龄、尿蛋白的高低则与ANCA的表达无明显关系（P〉0．05）。结论熟悉ANCA在狼疮性肾炎表达特点，有利于对原发性狼疮性肾炎患者临床活动状态的判别。     

佛波酯对猪中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1的作用及有关信号机制研究

【目的】研究佛波酯诱导猪中性粒细胞黏附分子巨噬细胞表面分子抗原-1表达的作用及有关信号机制。【方法】采用密度梯度离心法分离纯化猪外周血中性粒细胞,以流式细胞术检测中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1表达,分别以实时荧光定量PCR、Western Blot法检测信号蛋白p38丝裂原活化蛋白激酶、胞外信号调控激酶的基因表达和磷酸化活性。【结果】20、30 nmol/L的佛波酯能极显著促进猪中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1的表达(P<0.01)。与对照相比,佛波酯在0.5、6 h可明显增加猪中性粒细胞p38丝裂原活化蛋白激酶的基因表达量(P<0.05,P<0.01);在0.5、3和6 h可极显著增加猪中性粒细胞胞外信号调控激酶的基因表达量(P<0.01)。与对照相比,佛波酯在1、5和30 min可极显著促进p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化活性(P<0.01);在0.5、1、5和30 min可明显促进胞外信号调控激酶磷酸化活性(P<0.05,P<0.01)。【结论】佛波酯能诱导猪中性粒细胞黏附分子巨噬细胞表面分子抗原-1的表达,其机制至少与上调p38丝裂...     

围产期相关激素对奶牛中性粒细胞功能调控及其与免疫抑制的相关性分析

围产期奶牛要经历妊娠、分娩和泌乳等生理过程，激素分泌模式和营养代谢模式均发生剧烈变化。由此导致的中性粒细胞功能低下是造成乳房炎、子宫炎等炎症性疾病高发的重要原因。妊娠末期、奶牛生殖相关激素分泌模式变化明显，而围产期相关激素如雌二醇、孕酮、催乳素等对奶牛中性粒细胞活化、趋化黏附、跨膜迁移、呼吸爆发、吞噬杀菌和胞外诱捕网形成等不同功能表型的影响和作用途径尚未完全明确。围绕这一科学问题，明确围产期相关激素对奶牛中性粒细胞不同功能表型的影响及相关调控机制，为全面认识围产期奶牛免疫抑制的形成机制、有效保障围产期奶牛健康提供研究基础和决策参考。     

支气管哮喘治疗过程中痰液细胞变化分析

目的：探讨支气管哮喘（哮喘）治疗过程中痰液细胞的变化及其与疗程之间的关系。方法：收集支气管哮喘患者32例发作之初、病情好转以及病情缓解时期的痰液,比较哮喘病程不同时相之间以及不同时相与13例正常自愿者之间痰液细胞成分的差异。结果：哮喘急性发作初期痰液脱落上皮细胞明显增多,而嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞与正常对照组无明显差别;随着病情好转,脱落上皮细胞数显著下降,而嗜酸性粒细胞数和（或）中性粒细胞数显著升高,淋巴细胞与正常对照组仍无明显差别;当病情缓解时,脱落上皮细胞的数量接近正常对照组,嗜酸性粒细胞和（或）中性粒细胞数也显著下降,而淋巴细胞明显增多。结论：支气管哮喘从起病到治疗后病情缓解这一连续过程中,上皮细胞由多到少,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞则由正常到增多,然后恢复正常,淋巴细胞则由正常到不变至增多,这可能与不同病期各种细胞所发挥的作用不同有关。     

咯利普兰对猪中性粒细胞表达Mac-1的作用及有关信号机制

【目的】阐明咯利普兰为代表的磷酸二酯酶4抑制剂的抗炎新机制。【方法】采用密度梯度离心法分离猪中性粒细胞,流式细胞术检测猪中性粒细胞表达巨噬细胞表面分子抗原-1(Macrophage surface molecular antigen-1,Mac-1);Real-time qPCR和Western blot技术检测猪中性粒细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p65核转录因子(p65 NF-κB)mRNA表达和磷酸化活性。【结果】佛波酯(phorbol myristate acetate, PMA)可显著上调中性粒细胞表达Mac-1(P<0.01),咯利普兰对PMA上调的中性粒细胞表达Mac-1有一定抑制作用,其中,5μmol/L咯利普兰可极显著抑制中性粒细胞表达Mac-1(P<0.01);PMA可极显著上调中性粒细胞p38 MAPK、ERK和p65 NF-κB mRNA表达和磷酸化活性(P<0.01),5μmol/L咯利普兰对PMA升高的中性粒细胞p38 MAPK、p65 NF-κB mRNA表达有极显著抑制作用(P<0...     

猪李氏杆菌病的组织病理变化

近年猪李氏杆菌病发生较多且易被误诊为猪伪狂犬病、传染性脑脊髓炎.对病猪的大脑、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、淋巴结作病理组织切片并观察,为相似疾病的鉴别诊断和猪李氏杆菌病理学研究提供依据.结果发现,猪李氏杆菌病引起脑膜水肿,化脓性脑膜炎,血管周围多量单核细胞,形成管套;心外膜增厚坏死,多量单核细胞和中性粒细胞增生浸润;肝血管和血窦中有多量中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞;间质性肺炎,多量单核细胞和中性粒细胞增生;肾血管中多量单核细胞和中性粒细胞;脾大面积出血梗死,大量单核细胞和中性粒细胞增生;淋巴结出血坏死,单核细胞比例增多,中性粒细胞增生浸润.     

咯利普兰通过MAPK/ERK信号通路抑制中性粒细胞的黏附

【目的】研究磷酸二酯酶4(PDE4)特异性抑制剂咯利普兰抑制中性粒细胞黏附的有关分子机制,明确其抗炎的主要信号通路,为PDE4选择性中药抑制剂的药理研究提供参考。【方法】猪中性粒细胞的提取采用密度梯度离心法,中性粒细胞与猪内皮细胞的黏附采用虎红比色法,中性粒细胞黏附分LFA-1和Mac-1表达量的检测采用流式细胞技术,中性粒细胞p38MAPK、ERK等磷酸化活性检测采用western blot法。【结果】咯利普兰可显著抑制fMLP刺激的中性粒细胞和内皮细胞的黏附(P0.05),极显著抑制fMLP刺激的中性粒细胞LFA-1和Mac-1的表达(P0.01),阻断fMLP刺激的中性粒细胞ERK磷酸化活性(P0.01),而对p38MAPK磷酸化活性无显著影响。【结论】咯利普兰可抑制中性粒细胞和内皮细胞黏附,其机制与阻断中性粒细胞ERK磷酸化进而抑制LFA-1和Mac-1表达有关。     

正常人外周血单核细胞对人胃癌细胞系裸鼠移植瘤生长及转移的影响

正常人外周血非激活单核细胞可促进人癌细胞株ＭＧＣ—８０３裸鼠移植瘤生长，且随Ｅ／Ｔ比例提高而潜伏期缩短及出瘤率增高。经ＭＡＦ激活者，经过一段时间后也能促进移植瘤生长。激活组、非激活组及对照组的转移率分别为４／７、３／６及１／９，提示激活或非激活单核细胞均有促进转移的作用，但激活组发生转移时间较晚，且程度较轻。     

斑马鱼幼鱼嗜中性粒细胞对副溶血弧菌清除的动态变化

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是人-兽-鱼共患的致病菌,严重威胁食品安全和人类的健康。为了研究宿主嗜中性粒细胞清除细菌感染的动态变化过程,利用红色荧光蛋白标记的副溶血弧菌Vp57~(RFP)菌株感染受精后48 h(hours post fertilization,hpf)的斑马鱼(Danio rerio)幼鱼耳泡,建立局部感染模型,并以大肠杆菌(Escherichia coli)Ec01菌株为对照,系统比较了副溶血弧菌和大肠杆菌的半数致死剂量(median lethal dose,LD_(50))、存活曲线以及和嗜中性粒细胞相互作用的动态过程,RT-qPCR验证炎症相关基因il1b和il10在感染前后的表达量变化。结果显示副溶血弧菌和大肠杆菌感染斑马鱼幼鱼的LD_(50)分别为7.90×10~8 CFU/mL和1.14×10~(11) CFU/mL,与感染大肠杆菌相比,斑马鱼感染副溶血弧菌后招募嗜中性粒细胞的速度更快,且数量更多。RT-qPCR结果发现斑马鱼感染副溶血弧菌后在相同时间点能够激活更高的il1b和il10基因的表达,引起强烈的炎症反应。基于以上研究,我们建立的副溶血弧菌-斑马鱼幼鱼耳泡局部感染模型,为进一步研究嗜中性粒细胞清除副溶血弧菌感染的动态过程,以及深入揭示天然免疫应答机制提供了依据。     

长吻鮠血细胞的显微、亚显微结构及细胞化学研究

光镜下长吻鮠外周血中可区分出红细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和血栓细胞,未见嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞,其中.红细胞数量最多,其次是血栓细胞和淋巴细胞.单核细胞和中性粒细胞数量最少;同时还发现幼稚红细胞、直接分裂的红细胞.电镜下,个别红细胞可见到少量线粒体;中性粒细胞表面有短而钝的伪足样突起.颗粒有3种类型;单核细胞内有较多的溶酶体样颗粒;小淋巴细胞有细长的伪足样突起,大淋巴细胞内质网丰富.细胞化学染色显示:所有白细胞PAs反应呈阳性;SBB染色只有嗜中性粒细胞呈阳性;单核细胞及嗜中性粒细胞和个别淋巴细胞中舍有ACP,只有粒细胞舍有POX;单核细胞、嗜中性粒细胞均含有ANAE,部分淋巴细胞含有ANAE.     

fMLP诱导猪中性粒细胞LFA-1表达的信号机制研究

【目的】研究致炎因子f MLP诱导中性粒细胞黏附分子淋巴细胞功能相关抗原G1(LFAG1)表达的信号机制,为相关中药及其有效成分的抗炎机制研究提供依据.【方法】猪中性粒细胞的提取采用密度梯度离心法,c AMP含量检测采用ELISA法,信号蛋白p38 MAPK、ERK、PI3K、JAK磷酸化活性检测采用Westernblot法.【结果】不同浓度f MLP可呈剂量依赖性抑制培养中性粒细胞上清液中的c AMP含量(P0.01),对中性粒细胞p38MAPK磷酸化活性有一定的促进作用,但无显著性差异(P0.05),可呈剂量依赖性显著升高中性粒细胞ERK磷酸化活性(P0.05,P0.01);f MLP在不同时间对中性粒细胞培养上清液c AMP含量均有显著的抑制作用(P0.01),对中性粒细胞p38 MAPK磷酸化活性有一定的促进作用,但无显著性差异(P0.05),在1min和5min可显著促进中性粒细胞ERK磷酸化活性(P0.05);未检测到猪中性粒细胞PI3K、JAK磷酸化活性.【结论】f MLP诱导猪中性粒细胞LFAG1表达与其抑制c AMP含量、促进ERK磷酸化活性有关.     

白芍制剂对中性粒细胞相关功能及磷酸二酯酶活性的影响

 【目的】以猪中性粒细胞为靶细胞,研究白芍制剂对其相关功能（呼吸爆发和弹性蛋白酶释放）及磷酸二酯酶活性的影响。【方法】中性粒细胞分离纯化后,以细胞色素C还原法检测中性粒细胞呼吸爆发,以弹性蛋白酶底物的减少反映弹性蛋白酶的释放量,以HPLC检测底物cAMP的变化反映磷酸二酯酶的活性等。【结果】白芍制剂呈剂量依赖性抑制中性粒细胞的呼吸爆发（P＜0.001）,3个不同浓度的抑制率分别为33.15%、45.96%和62.22%;对弹性蛋白酶的释放在低浓度时表现抑制作用（P＜0.05）,抑制率为23.22%,在高浓度时表现促进作用;对中性粒细胞磷酸二酯酶活性具有抑制作用,低、高浓度抑制率分别为13.24%和25.87%（P＜0.01）;HPLC指纹图谱分析表明白芍制剂主要存在5种成分。【结论】白芍制剂对猪中性粒细胞呼吸爆发具有明显的抑制作用,对弹性蛋白酶释放在低浓度有显著抑制作用,其作用机制可能与白芍制剂对磷酸二酯酶活性的抑制有关。     

银翘散对炎症小鼠中性粒细胞吞噬力影响的试验研究

通过试验研究银翘散汤剂对于细菌感染的小鼠中性粒细胞吞噬力产生的影响,旨在探究银翘散对中性粒细胞吞噬率的影响效果。随着不断给药,用药组小鼠血液中的中性粒细胞吞噬率不断增强,远高于模型对照组,并且高于正常水平。这表明,银翘散可以促进血液中性粒细胞对细菌的吞噬能力,进而改善机体的免疫功能。     

防御素研究进展

防御素主要是由嗜中性粒细胞产生的一类富含精氨酸的阳离子多肽,除有广泛的杀伤微生物活性外,还可能有趋化、调理、引起过敏及抑制甾醇激素分泌等活性。本文扼要介绍了防御素的分布、纯化、分子结构、生物学功能及其作用机理,为防御素研制奠定基础。     

条石鲷外周血细胞的显微结构

以Wright′s和Giemsa双重染色法对条石鲷外周血液有形成分的形态进行观察研究,观察到的外周血细胞可分为红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞和血栓细胞,未发现嗜酸性和嗜碱性粒细胞.各类血细胞从大到小依次为:单核细胞、嗜中性粒细胞、红细胞、淋巴细胞、血栓细胞.白细胞中,淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞和血栓细胞所占百分比分别为36.03%、26.97%、11.86%和25.14%.在外周血液中还观察到核影、未成熟和正在分裂、降解的红细胞以及正在分裂的血栓细胞.     

乙酰乙酸抑制脂多糖诱导的奶牛中性粒细胞炎症信号通路的激活

为研究乙酰乙酸(Acetoacetic acid,AcAc)对奶牛中性粒细胞炎症信号通路的影响,以脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的奶牛中性粒细胞炎症模型为研究对象,利用qRT-PCR、生化和酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-1β、IL-6、TNF-α和IKKβ激酶活性。结果表明:1)qRT-PCR结果显示,与对照组相比较,LPS处理组IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达显著增强(P0.01)。与LPS处理组比较,LPS+AcAc混合处理组,其表达量显著下调(P0.05);2)生化检测结果显示,与对照组相比较,LPS处理组中性粒细胞IKKβ激酶活性显著增强(P0.01)。与LPS处理组比较,LPS+AcAc混合处理组IKKβ激酶活性则显著降低(P0.05);3)ELISA结果显示,与对照组相比较,LPS增加促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β的释放。相对于LPS处理组,LPS+AcAc混合处理组促炎因子的释放则显著降低(P0.01)。综上,AcAc可以抑制LPS诱导的奶牛中性粒细胞炎症信号通路的激活,具有一定的抗炎功能。     

中药复方制剂对奶牛免疫机能的影响

选取30头健康奶牛和30头隐性乳房炎奶牛进行中药复方制剂饲喂试验,对奶牛的B淋巴细胞EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数和T淋巴细胞转化率进行测定,观察中药复方制剂对奶牛免疫机能的影响.结果显示,健康奶牛的EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数、T淋巴细胞转化率均显著高于隐性乳房炎奶牛(P＜0.01或P＜0.05);中药复方制剂可以显著提高健康奶牛和隐性乳房炎奶牛的EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数、T淋巴细胞转化率(P＜0.01或P＜0.05).试验表明,中药复方制剂可以增强奶牛机体的体液免疫和细胞免疫功能,促使隐性乳房炎奶牛免疫机能的恢复.     

麦冬皂苷生物活性研究进展

综述近年来麦冬皂苷在改善学习记忆障碍、抗衰老、延长存活时间、抑制中性粒细胞呼吸暴发、保护心脑血管、促进细胞增殖、抗组织损伤、自由基清除、抑菌作用、降血糖作用以及抗肿瘤作用等多方面的生物活性研究进展,以期为今后对麦冬及其皂苷类活性成分的深入研究和开发利用提供参考。     

温度对鲤鱼口服免疫后免疫应答的影响

为研究温度对鲤鱼(Cyprinus carpio)口服免疫后免疫应答规律的影响,试验设定了两个温度梯度,并测定了各温度梯度下鲤鱼口服免疫迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)药饵后,鱼体内血清抗体效价、血清γ球蛋白含量和血清γ球蛋白百分比、血液嗜中性粒细胞吞噬活性、溶菌酶活性和超氧化物歧化酶的活性的变化。结果表明:25℃低温组抗体效价自第28天显著高于30℃高温组,低温组γ球蛋白含量第14天高于高温组,在56d有极显著差异。温度能显著影响鲤鱼嗜中性粒细胞的吞噬、溶菌酶和SOD活性,低温组除嗜中性粒细胞的吞噬活性显著低于高温组外,溶菌酶和SOD的活性均显著高于高温组。