三红蜜柚体细胞胚胎的诱导

为建立三红蜜柚体细胞胚胎途径的组培快繁技术体系,采用带腋芽的无菌茎段为外植体,利用正交设计的方法,研究不同的基本培养基与植物生长调节剂对体细胞胚胎的诱导、分化、增殖与生根等关键环节的影响。结果表明,胚性愈伤组织诱导的最适宜培养基为MS+2,4-D 1 mg·L^-1+6-BA 0.5 mg·L^-1;在附加6-BA 0.1 mg·L^-1的MS培养基上淡黄色的胚性愈伤组织块可诱导形成胚状体;胚状体试管苗在1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1培养基上生根率可达90%,移栽成活率达85%。     

梵净山石斛无菌播种及快繁技术

以梵净山石斛成熟的蒴果为外植体,研究不同培养基、激素浓度处理对梵净山石斛种子萌发、原球茎增殖、不定芽分化与生根的影响。结果表明,梵净山石斛无菌播种最佳的培养基为KN+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+10%CM+AC 1.0 g·L^-1,萌发率达到95.5%;原球茎增殖最优培养基为B5+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+AC 0.5 g·L^-1;筛选出不定芽分化最适培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1,不定芽增殖最适培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1;小苗生根适宜的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1。     

费菜组织培养体系的探讨

研究不同浓度6-BA和NAA对费菜嫩叶愈伤组织诱导分化的影响。结果表明,费菜叶片愈伤组织诱导最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1,丛生芽诱导最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.6 mg·L^-1,壮苗培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,生根培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg·L^-1,幼苗移栽到经灭菌处理的等体积混合的草炭土、蛭石、珍珠岩基质中,成活率为90%。     

粳恢35成熟胚的再生体系

以粳恢35成熟胚为外植体,研究粳恢35成熟胚在不同培养基中的诱导和分化,建立最佳的粳恢35再生体系培养方法。结果表明,不同培养基的诱导率和分化率不同;愈伤组织在NMBD2培养基增殖效果较好;分化培养基是加入6-BA 2 mg·L^-1、NAA 1 mg·L^-1、脯氨酸 500 mg·L^-1、谷氨酰胺500 mg·L^-1和 水解酪蛋白 300 mg·L^-1 的NMB培养基,分化效果最佳。并且无菌干燥处理 1 d 更利于愈伤组织的分化。     

浙江金线莲组织培养体系的建立

通过对类原球茎诱导、增殖、分化和生根条件的探索,建立了浙江金线莲(ZJJ)的快速繁殖体系。结果表明:在液体培养基中,类原球茎诱导的最佳条件为TDZ 0.6 mg·L^-1+NAA 0.4 mg·L^-1,诱导率为62.5%;在固体培养基中,类原球茎诱导的最佳条件为TDZ 0.6 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1,诱导率为59.3%;类原球茎增殖的最佳条件为稀效唑1.5 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1,增殖系数为8.4,其中稀效唑是类原球茎增殖的主要因子;类原球茎分化的最佳条件为6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,分化率为87.3%;植株生根诱导的最佳培养条件为1/2 MS+NAA 1.0 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1,生根率达100%。     

微型月季快繁技术体系

以微型月季为材料,研究其组织培养体系。结果表明:以微型月季幼嫩茎尖为外植体,75%乙醇灭菌30 s,用无菌水清洗,再用0.1% HgCl₂+体积分数0.5%吐温20灭菌6 min,具有较好的灭菌效果。MS培养基+6-BA 1 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.8 g·L^-1条件下,微型月季茎尖出芽诱导率可达到83.3%,培养22 d左右,诱导出的小苗生长健康、发育迅速。增殖培养最佳培养基为MS+6-BA 1 mg·L^-1+NAA 0.06 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.8 g·L^-1。生根培养基宜选用1/2 MS+IBA 0.3 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.8 g·L^-1。生根1个月后炼苗移栽,种植于穴盘中。待主根粗壮、植株生长健壮后转移至营养钵,基质采用草炭∶珍珠岩体积比3∶1。     

金丝皇菊离体培养技术

以金丝皇菊嫩茎为外植体,进行无菌系建立、芽分化等试验,探讨金丝皇菊离体繁殖技术。研究了不同浓度的6-苄氨基嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)对芽的诱导和增殖培养的影响。结果表明,金丝皇菊茎段诱导培养适宜的培养基为基本培养基(MS)+6-BA 0.1 mg·L^-1+NAA 0.10~0.15 mg·L^-1;增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA 0.3 mg·L^-1+NAA 0.05~0.1 mg·L^-1。     

兰州百合组培快繁体系的构建

以兰州百合新鲜鳞茎为外植体,选择MS和1/2 MS培养基为基本培养基,采用正交设计研究不同消毒剂组合对外植体存活率、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导率和发芽率的影响;并用响应面法优化不同激素组合对生根率的影响。结果表明:(1)最佳消毒剂组合为75%乙醇消毒20 s+2%次氯酸钠溶液浸泡10 min,外植体成活率可达96.30%。(2)愈伤组织诱导最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,诱导率可达96.33%。(3)促进发芽的最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,发芽率可达98.00%。(4)促进生根的最佳培养基配方为1/2 MS+0.5 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA+2 mg·L^-1活性炭,生根率可达94.00%。本研究建立的组培快繁体系可用于兰州百合的快速大量繁殖,可为兰州百合组培苗的工厂化生产提供参考。     

一叶萩组培快繁技术

采用不用浓度激素配比对一叶萩组培快繁进行研究果表明,一叶萩最适外植体为茎段,接种成活率为96%,最佳初代培养基为6-BA 0.50 mg·L^-1+IBA 0.20 mg·L^-1;最佳增殖培养基为6-BA 0.50 mg·L^-1+IAA 0.20 mg·L^-1+GA₃0.10 mg·L^-1,增殖系数达8.7;生根率最高的培养基为1/2MS+NAA 0.10 mg·L^-1,培养30 d左右,生根率达88%,平均根长1.7 cm;最佳移栽基质是蛭石,成活率达90%。     

几种三叶青组织培养快繁体系的比较及其优化

从已报道的文献中共获得11种三叶青的组织培养快繁技术体系,从外植体选择和灭菌、腋芽诱导、不定芽增殖和不定根诱导等方面对这11种体系进行评价和优化,建立了一个较佳的三叶青组织快繁技术体系。即三叶青腋芽茎段为最好的外植体材料,外植体采用75%乙醇浸泡1 min,再用含3滴吐温(吐温20)的0.1% HgCl₂消毒15 min,其成活率高达97%;适合腋芽诱导的培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+25%活性炭;适合不定芽增殖的培养基为MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA;适合不定根诱导的培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1 IBA,开始生根天数为7 d,14 d后生根率可达90%,平均生根数为8.6个。     

花椰菜雪剑4号合子胚增殖体系的建立

为建立花椰菜合子胚增殖体系,本研究采用花椰菜种子为外植体,经表面消毒后,刻伤并接种到不同胚状体诱导培养基上;将诱导出的胚状体转接到不同的增殖培养基上进行增殖培养。结果显示,花椰菜种子在MS+8.0 mg·L^-1 BA+2.0 mg·L^-1 2,4-D+0.5 mg·L^-1 NAA+8%蔗糖的培养基上可诱导出松散的花椰菜胚状体;将花椰菜胚状体接种到MS+4.0 mg·L^-1 BA+0.5 mg·L^-1 2,4-D+3%蔗糖的培养基上,胚状体继续增殖生长,增殖效果良好。     

甜樱桃砧木吉塞拉12号组培快繁技术体系探讨

以甜樱桃砧木吉塞拉12号当年生茎尖或茎段为试材,建立相应的组培快繁技术体系。以氯化汞、消毒灵、84消毒液、次氯酸钠溶液等不同消毒剂对外植体进行消毒处理;以MS(蔗糖30 g·L^-1,琼脂6.0 g·L^-1)为基本培养基,添加不同浓度的6-BA和IBA进行诱导培养和增殖培养;以1/2MS(蔗糖20 g·L^-1,琼脂6.0 g·L^-1)培养基添加IBA、IAA用于组培苗的生根培养。结果表明,0.1%氯化汞处理10 min的综合消毒效果较优,诱导率可达90%;MS+0.5 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 IBA为最佳增殖培养基,增殖系数达4.1;1/2MS+0.5 mg·L^-1 IAA+0.9 mg·L^-1 IBA为最佳生根培养基,生根率达92.3%,平均生根数4.00条,平均根长4.62 cm。     

甜樱桃砧木吉塞拉6号组织培养体系优化

以吉塞拉6号为试验材料,进行组织培养体系优化。结果表明:以75%乙醇灭菌30 s,0.1% HgCl₂灭菌10 min效果较优,MS+0.2 mg·L^-1 IBA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖为初代培养基,MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖为最佳增殖培养基,1/2 MS+0.3 mg·L^-1 IBA+0.3 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖为最佳生根培养基。其中,活性炭含量是影响生根的关键因素。以椰糠和草炭为介质,能增强根系韧性,提高移栽成活率。     

外源激素对台闽苣苔叶片分化及再生的影响

为了大规模繁殖以保存和保护台闽苣苔,以台闽苣苔无菌苗叶片为外植体,研究了NAA和6-BA,NAA和TDZ,NAA和KT,2,4-D和6-BA组合对叶片分化再生的影响。结果显示,6-BA、KT对于台闽苣苔叶片外植体的影响主要是诱导不定芽,但KT效果不如6-BA;当6-BA浓度为0~0.8 mg·L^-1,附加NAA 0~1.2 mg·L^-1时,不定芽诱导率最高为100%,在不添加激素或只添加6-BA 0.2~1.2 mg·L^-1的培养基中台闽苣苔叶片外植体可直接再生成植株;TDZ、NAA、2,4-D主要诱导愈伤组织,但3种激素诱导愈伤组织的质和量均不同,当NAA为0.2~1.2 mg·L^-1,2,4-D为0.1~0.5 mg·L^-1时,愈伤诱导率最高为100%,TDZ为3.0 mg·L^-1时,诱导率最高为96%。     

掌叶覆盆子诱导培养的抗褐化研究

以掌叶覆盆子(Rubus chingii Hu)外植体为供试材料,研究不同外植体部位、基础培养基、抗褐化剂以及不同黑暗低温处理时长对其诱导阶段抗褐化的影响。研究表明,在1/2MS+6-BA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1培养基中,不同部位外植体当年生茎段褐化率低,为14.8%,长势较佳;同等激素水平下,最佳基础培养基配方为1/2MS,其褐化率为15.0%;不同抗褐化剂处理水平下,掌叶覆盆子茎段对Vc 100 mg·L^-1的培养基抗褐化效果最好,出芽率92.5%;而PVP处理为1 g·L^-1时,相对其他浓度抑制褐化效果较好,褐化率15%,继续增加浓度则不利生长;4 ℃低温黑暗处理的最佳时间为24 h,褐化减轻明显,褐化率为5%,出芽率达到95%,超过处理时间则对其生长势有影响。由此可知,将掌叶覆盆子当年生茎段进行4 ℃低温黑暗处理24 h,接种在1/2MS+6-BA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+Vc 100 mg·L^-1或聚乙烯吡咯烷酮1 g·L^-1的培养基中进行培养,抗褐化效果最佳。     

南方地区樱桃砧木吉塞拉6号的组培快繁技术

以南方樱桃砧木吉塞拉6号为试验材料进行组培快繁技术研究。用75%乙醇和0.1%HgCl₂溶液对外植体进行消毒,以MS培养基为基本培养基,添加不同浓度的激素,观察诱导效果。结果表明:75%乙醇溶液处理30 s+0.1%HgCl₂处理8 min消毒效果较好,诱导成活率可达90%;增殖培养基以MS+0.8 mg·L^-1 KT+0.1 mg·L^-1 NAA为宜,增殖率达95%;生根培养基以1/2MS+0.1 mg·L^-1 IAA+0.5 mg·L^-1 IBA为宜,生根率达93%。     

菜心和芥蓝种间杂交创制异源四倍体蔬菜种质

通过菜心和芥蓝的种间杂交可丰富遗传背景,创新种质资源,但由于受精合子发育障碍,需对种间杂种进行胚挽救,才能获得后代。以菜心作为母本,芥蓝作为父本,进行种间杂交,于杂交后取种间杂种胚进行人工培养,设置5种不同胚挽救培养基,6个不同取材时间,4种不同生根培养基,3种不同染色体加倍方式,筛选适合的种间杂种胚挽救方式、增殖扩繁方式、染色体加倍方式,提高种间杂种获得率。结果显示,ERM₄(MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 KT+1 g·L^-1 AC)出胚率为10.47%,为最佳胚挽救培养基;授粉后12 d为最佳取材时间,出胚率为26.32%;RM₄(1/2MS+0.5 mg·L^-1 IBA)生根率最高、生根时间最短,为最佳生根培养基;秋水仙碱涂抹生长点5次,染色体加倍率可达62.26%,为最佳染色体加倍方式。通过形态学鉴定、染色体分析、倍性鉴定等方法,对F₁代杂种植株进行鉴定,结果显示,所得杂种为真杂种,可育株为异源四倍体。异源四倍体蔬菜种质的成功创制为后续育种研究奠定了基础。     

杭菊灭菌方式与再生植株体系的探讨

以药用植物杭菊为材料,运用植物组织培养技术,筛选杭菊茎尖进行灭菌方法,优化培养条件。以75%乙醇和0.1% HgCl₂溶液为灭菌试剂,探讨杭菊适宜的灭菌时间;以MS为基本培养基添加不同浓度的6-BA、NAA和IBA,研究杭菊增殖培养过程中植株生长情况。结果表明:75%乙醇浸泡25 s,0.1% HgCl₂溶液灭菌7 min,杭菊植株生长状况良好,成活率较高,污染率仅为18%;杭菊增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1;生根最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.05 mg·L^-1。本研究的灭菌方式和诱导方法为后期杭菊组织培养的研究提供了一定的理论依据。     

不同品种矾根组培快繁生长对比试验

以矾根金秋和黑曜石2个品种的顶芽为外植体材料,通过不同外植体采摘时间,以及添加不同种类浓度的激素,初步研究了适合这2个矾根品种生长的组培快繁体系。试验结果表明,4月下旬至5月上旬为外植体采摘的最佳时间;金秋芽增殖的最适培养基配方为基本培养基(MS)+0.1 mg·L^-1 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.1 mg·L^-1萘乙酸(NAA),黑曜石增殖的最适培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA;2个品种矾根的生根配方均为:1/2MS+0.5~1.0 mg·L^-1 NAA。     

不同甜橙品种胚性愈伤组织的诱导

胚性愈伤组织是柑橘利用珠心胚脱毒及原生质体融合等生物技术育种的重要材料,本研究以赣南早脐橙、纽荷尔脐橙和哈姆林甜橙不同发育时期果实的珠心胚作为外植体进行离体培养,研究不同成熟期、不同激素对3个品种未受精胚珠愈伤组织诱导率的影响,旨在建立一个高效的柑橘胚性愈伤组织诱导体系。结果表明:6-BA对柑橘愈伤组织诱导效果显著,3个品种在果实发育中期取样可以获得高质量的胚性愈伤组织,取材太早或太迟都不利于胚性愈伤组织的诱导。赣南早脐橙、纽荷尔脐橙和哈姆林甜橙诱导胚性愈伤的最佳取样时间分别为105、95和95 d,胚性愈伤率分别可达到35.90%、56.21%和65.08%。赣南早脐橙胚性愈伤组织的最佳诱导培养基是在MT培养基基础上添加7.5 mg·L^-1 6-BA,纽荷尔脐橙和哈姆林甜橙的最佳诱导培养基是在MT培养基基础上添加5.0 mg·L^-1 6-BA。