藏獒细粒棘球绦虫感染调查

为了更进一步了解高寒牧区藏獒细粒棘球绦虫感染的情况,并以事实忠告养犬农牧民犬类寄生虫对环境的污染以及对人畜健康的危害。调查采用民众参与和现场宣传,从中取得群众对犬类疫病防治工作的支持。     

细粒棘球绦虫miRNAs的鉴定及分析

细粒棘球绦虫具有复杂的基因调控模式,在中间宿主和终末宿主体内具有截然不同的生物学特性。miRNA是真核生物内存在的非常重要的调控因子,本研究采用Solexa高通量测序技术,对G1株原头蚴mi-croRNAs进行了鉴定和分析,总共发现了108条miRNAs,其中26条属于保守家族,82条是细粒棘球绦虫特有。     

细粒棘球绦虫宫卵发育时限观察

本试验采用绵羊肝棘球蚴人工感染新疆农家犬,从感染后第20天起至第50天,每隔5天剖检感染犬,采出虫体作形态学观察.结果,至第45天,发育最快的虫体形成5个节片,末节已孕卵,其分枝的子宫发育良好,含卵200枚以上,六钩清晰,有典型的卵壳、卵膜结构,人工孵化卵膜消失,六钩活跃,表明已具感染性.     

细粒棘球绦虫成虫表膜糖抗原的免疫性分析

 【目的】探索细粒棘球绦虫成虫表膜糖抗原的免疫性。【方法】细粒棘球绦虫成虫虫体冻融产物,经蛋白酶K消化,离心上清作为粗提表膜糖抗原,SDS-PAGE鉴定糖抗原成分,硫酸-蒽酮法测定多糖浓度,ELISA、Western- blot 和IFA法分别检测免疫小鼠抗血清抗体效价和特异性以及确定抗原在虫体组织中的位置。【结果】SDS-PAGE图谱显示无蛋白条带出现,表明成虫膜蛋白被蛋白酶K完全降解;制备的糖抗原浓度为2.54mg•mL-1,初步确定为糖抗原。ELISA结果显示,随着免疫次数增加,抗血清中特异性抗体(IgG 、IgM 和IgA)效价也随之升高。与阴性血清相比,IgG 、IgM 和IgA的P/N值分别为4.9、3.2和6.4。未检测到特异性IgE。Wenstern-blot检测结果显示,抗血清与原头蚴粗提虫体蛋白、细粒棘球绦虫成虫表膜蛋白、表膜糖抗原有效识别。IFA显色结果显示糖抗原在细粒棘球绦虫虫体表膜中有表达。【结论】经蛋白酶K消化后提取的细粒棘球绦虫表膜糖抗原具有良好的的免疫原性和免疫反应性,有望用于包虫病的诊断和免疫。     

吡喹酮脂肪/淀粉药饵驱除犬25日龄细粒棘球绦虫试验

本试验以2.5,5.0和7.5mg/kg剂量吡喹酮,采用脂肪/淀粉药饵对25日龄犬细粒棘球绦虫进行驱除试验,结果三种剂量均获得了100％的驱虫效果。     

细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备

【目的】克隆细粒棘球绦虫( Echinococcus granulosus , E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】 从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件。并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下多点注射免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blotting检测血清效价和特异性。【结果】 RT-PCR扩增获得EgHsp70基因的cDNA,酶切和测序结果表明EgHsp70基因已克隆入pMAL-p2x。表达条件优化实验结果筛选出Hsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件为：当A600为0.6时,以0.3 mmol•L-1 IPTG于30℃条件下诱导表达4 h。SDS-PAGE显示Hsp70融合蛋白相对分子质量约为68.6kD,经麦芽糖亲和层析法纯化获得了Hsp70融合蛋白,其表达量为2.5 mg•L-1。Western blotting 检测证明制备的抗血清与EgHsp70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、E.granulosis虫体蛋白和E.granulosis虫体表面蛋白均能特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到 1﹕256 000。【结论】在大肠杆菌中表达并纯化获得了EgHsp70融合蛋白,并制备了高效价的兔抗EgHsp70蛋白抗血清,为研制包虫病疫苗及相关诊断试剂奠定了基础。     

牛羊棘球蚴病调查

为了掌握贵南地区的牛、羊棘球蚴病的感染程度,为正确制定防治措施提供依据,2008年9～10月份对该地区的牛、羊包虫病感染情况进行了全面调查,结果表明：牛羊棘球蚴感染率为41.67%,感染强度为5.88,由此可见该地区棘球病发病高,应采取有效防治措施,控制包虫病的发生和流行。     

青海动物棘球绦虫感染及防治措施

近年来,随着科学技术越来越成熟,对寄生虫等微小生物的研究有了深入的发展。一些调查显示,在未执行包虫病长期防治规划之前,在青海省动物群体中棘球绦虫病情感染的情况呈现上升趋势,并且这种病情常见于牛羊等动物之间,发病率非常高。调查还表明,青海省动物之间的棘球绦虫生物链结构复杂,生存环境广泛,极其容易在生物之间交叉感染,对人体健康存在潜在伤害。因此,笔者认为:应及时采取合理的解决方案,对棘球绦虫加以严格控制。     

棘球蚴病控制实验报告

本实验选定新疆呼图壁县圆户村和二十里店两个乡为棘球蚴病控制实验区,选用特制吡喹酮药饵对控制区内家、牧犬年驱虫12次,一年后现场效果考核,犬细粒棘球绦虫感染率由18.5%降至2.3%,绵羊棘球蚴病感染率由88.8%降至57.8%,人间棘球蚴病手术病例由58.4/10×10~4居民降至54.5/10×10~4居民.作者认为,一年12次高频度驱虫是当前我国棘球蚴病高发区特别是恶性流行区控制本病的有效途径.     

细粒棘球绦虫锌指蛋白基因的克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达分析

旨在分析并预测细粒棘球绦虫锌指蛋白(Echinococcus granulosus zinc finger peotein,Eg-ZFP)结构、功能及其在细粒棘球绦虫发育过程中的表达模式,预测其在细粒棘球绦虫防治中潜在的作用。通过对前期细粒棘球绦虫原头蚴(protoscolex,PSC)转录组高通量测序结果中Unigene进行筛选,克隆Eg-ZFP基因并进行序列分析,实时荧光定量PCR(Realtime fluorescence quantitative PCR,qPCR)分析Eg-ZFP在原头蚴及成虫中的表达特征,利用全量组织原位杂交(Whole mount in situ hybridization,WISH)检测该蛋白mRNA在原头蚴和成虫组织中的分布情况。结果显示,细粒棘球绦虫Eg-ZFP基因的CDS序列长852bp,具有完整的开放阅读框(852bp),编码283个氨基酸,预测表明Eg-ZFP分子质量大小及等电点为31.6ku和8.89;qPCR检测发现,Eg-ZFP在原头蚴及成虫阶段均有表达,且在成虫阶段表达量高;全量组织原位杂交检测结果表明,Eg-ZFP mRNA在原头蚴及成虫中分布广泛,且在成虫的生殖系统中丰度较高,提示Eg-ZFP与虫体生殖发育有关。结果表明Eg-ZFP在细粒棘球绦虫发育过程中具有重要作用,为进一步研究Eg-ZFP在E.granulosus防治中的作用奠定基础。     

细粒棘球蚴病的诊断与防治

对细粒棘球蚴病的诊断与防治进行了综述,以期为该病的进一步研究提供参考。     

石渠棘球绦虫Es95基因克隆及序列分析

[目的]首次克隆获得石渠棘球绦虫Es95基因,并进行序列分析,为研究抗包虫病候选疫苗提供理论指导。[方法]从高原鼠兔肺脏包囊上获得石渠棘球绦虫原头蚴,提取全基因组,并根据NCBI上6种棘球属绦虫95基因序列设计引物,以基因组DNA为模板扩增到Es95基因,并克隆到T载体上,测序后进行序列分析。[结果]以石渠棘球绦虫全基因组DNA为模板扩增出Es95基因长为1 330 bp,序列分析含有3个外显子和2个内含子,有1个糖基化位点,N端有一信号肽序列(16个氨基酸),C端有跨膜区(23个氨基酸),亲水性低,B细胞抗原表位预测有ES95潜在抗原表位6个。[结论]ES95是一个分泌性糖蛋白,在包虫病的预防上具有重要意义。     

尿素溶液对兔球虫卵囊作用效果对比试验

利用尿素溶液、饱和食盐水、硫酸镁溶液和砂糖溶液作漂浮液,通过漂浮、离心方法收集兔球虫卵囊,在相同条件下进行3个试验比较。其一,不同漂浮液对浮集兔球虫卵囊作用比较;结果表明利用尿素溶液浮集效果最好(2.872 51×105个),其次是硫酸镁溶液(2.184 25×105个),最低的是砂糖溶液(1.792 81×105个)。其二,不同漂浮液对兔球虫卵囊破坏作用比较;结果表明20 m in时硫酸镁溶液对卵囊破坏率最低,破坏率最大的是饱和食盐水,随着时间延长各种破坏作用增大,60 m in时饱和食盐水和尿素溶液中有极少卵囊破损和卵囊变形现象。其三,不同漂浮液对兔球虫卵囊发育影响作用比较;结果表明硫酸镁溶液影响率最小(4.94%)最大的是饱和食盐水(7.47%)。     

绵羊绦虫蚴病的防治措施

绵羊绦虫蚴病是羊群中常见的一种高发高危害性寄生虫病．该病包括棘球蚴病、细颈囊尾蚴病、脑多头蚴病，病原体分别是带科细粒棘球绦虫、泡状带绦虫、多头绦虫的中绦期幼虫。羊感染后不易发现，一经察觉畜群几乎全部受染，导致羊只生长发育迟缓，抗病力差，生产性能下降，饲料空耗，毛肉减产．出栏率屠宰率低下，也是春季羊乏弱死亡的主要原因。     

细粒棘球蚴RTN4基因的克隆及序列分析

【目的】克隆细粒棘球蚴(Eg)内质网膜蛋白4(Reticulon-4,RTN4)抗原基因,对其序列进行生物信息学分析。【方法】采集感染Eg的绵羊肝脏和肺脏,提取Eg头节总RNA为模板,对RTN4基因进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体后测序,对其核苷酸序列及氨基酸序列进行生物信息学分析。【结果】Eg RTN4cDNA全长654bp,编码217个氨基酸,蛋白质分子质量为25.3ku,等电点为8.83。编码氨基酸序列中含有1个N端酰基化位点、2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和4个蛋白激酶C磷酸化位点。经生物信息学软件预测,RTN4蛋白的抗原表位区主要集中在第1-47位、第71-147位和第171-217位区域;含有2个高度疏水区,2个跨膜区,膜外区分别位于第1-47位和第171-217位。【结论】成功克隆了Eg RTN4基因,预测了其编码蛋白抗原的结构和表位。     

阿拉善右旗骆驼、羊棘球蚴病的调查

骆驼、羊的棘球蚴病（称：包虫病）是细粒棘球绦虫（Ecinococous,granulosus）的幼虫,寄生于绵羊、山羊、牛、骆驼、猪等中间宿主的肺、肝、脾等脏器而引起的一种慢性寄生虫病。在其流行区域内人也易感染,对我旗人体健康和畜牧业生产的发展造成了严重的危害。     

包虫(棘球蚴)病在我国的流行情况

本文概述了我国包虫(棘球蚴)病的发病省区、流行特点和当前发病状况.原发性包虫病已在21个省区(台湾省除外)发现,发病面积占全国总面积86.9%,全国人间包虫病手术病例每年超过1000例.全国11种有蹄家畜都不同程度地发病,其中以绵羊感染最严重,猪包虫病流行面积最广.包虫病在我国对人、畜危害造成的经济损失巨大.     

羊细粒棘球蚴全血金标渗滤检测方法的建立

为建立一种快速、高效的诊断家畜细粒棘球蚴病方法,提取羊细粒棘球蚴包囊的新鲜囊液,盐析囊液抗原,点样于硝酸纤维膜上,以胶体金-驴抗羊IgG和胶体金-兔抗鼠IgG为检测标记物,采用垂直流渗滤装置检测羊与人工感染细粒棘球蚴小鼠的血清和全血特异性抗体.患病羊阳性血清及全血检出率在90.91％ ～94.4％,细粒棘球蚴感染小鼠的血清及全血检出率均为100％;细粒棘球蚴阴性羊血清和全血假阳性率为4.00％～4.59％;与脑多头蚴病血清交叉反应率为28.57％(2/7).研究结果表明,细粒棘球蚴全血金标渗滤法可应用于羊棘球蚴病的诊断与检疫.     

共和地区牦牛棘球蚴情况与建议

<正>棘球蚴病是由寄生于犬狼小肠内的细粒棘球绦虫的幼虫引起的人畜危害严重的一种人畜共患寄生虫病。家畜被感染棘球蚴侵害后,引起幼畜发育迟缓,成畜生产性能急剧下降,严重时引起家畜死亡。笔者于2009年8月～10月对共和县屠宰场收购的屠宰牦牛随机抽取牦牛327头,结果检查出阳性牛71头,感染率21.71%。通过调查发现牦牛棘球蚴病感染率很高,这为今后防治工作提供了依据。     

棘球蚴病在我国流行及防治

棘球蚴(包虫)病是由带科绦虫中绦期幼虫感染中间宿主而引起的一种严重的人畜共患寄生虫病,受到世界各国的普遍关注和深入研究。自80年代以来,棘球蚴病的流行及危害也引起我国政府的高度重视,棘球蚴病高发流行的省份还将其例为地方病,广泛、深入地开展研究和防治工作。现就我们掌握的一些情况汇报如下。1 我国人、动物棘球蚴病发生概况