泌乳中期荷斯坦奶牛瘤胃细菌群落组成与多样性变化

本研究旨在探究泌乳中期荷斯坦奶牛瘤胃细菌群落组成及其多样性的变化。共设置2个试验：试验1，选取20头泌乳中期健康高产荷斯坦奶牛，饲喂相同饲粮，持续8周，分别在第0、4、7周的第7天采集瘤胃内容物；试验2，选取30头泌乳中期健康高产荷斯坦奶牛，在基础饲粮的基础上补充20 g/d瘤胃保护蛋氨酸，持续8周，分别在第0、8周的第7天采集瘤胃内容物。分析2个试验在不同时间点采集到的瘤胃内容物的细菌群落组成与多样性变化，以及功能稳定性差异。结果发现：2个试验中，瘤胃细菌的α多样性、β多样性、功能稳定性在不同时间点之间都不存在显著差异（P>0.05）。试验1在高丰度细菌的门和属水平上分别发现6个与1个差异细菌，分别是放线菌门、变形菌门、蓝菌门、绿弯菌门、互养菌门、纤维杆菌门与Lachnospiraceae＿NK3A20＿group；试验2在高丰度细菌的门和属水平上分别发现3个与1个差异细菌，分别为放线菌门、螺旋体门、迷踪菌门与unclassified＿f＿Lachnospiraceae。由此可见，在相同的饲粮条件下，泌乳中期荷斯坦奶牛瘤胃细菌组成随时间变化的程度有限，其多样性与功能稳定性均未发...     

瘤胃真菌的营养功能及最新应用前景

目的利用ITS高通量测序分析技术研究果寡糖对奶牛瘤胃真菌菌群的影响。方法采用两阶段交叉设计,选择泌乳阶段相近、胎次相同、健康状况良好的泌乳期奶牛4头。随机分为2组,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加果寡糖,添加量为60 g/(cow·d)。结果本试验条件下,在日粮中添加果寡糖并未显著影响奶牛瘤胃真菌的多样性(P>0.05),但优势菌属的相对丰度在两组之间存在差异,其中接合菌门(Zygomycota)仅存在于对照组,新丽鞭毛菌门(Neocallimastigomycota)相对丰度试验组比对照组增加了628.28%,但差异不显著(P=0.21)。试验组假丝酵母属(Candida)和平革菌属(Phanerochaete)相对丰度极显著高于对照组(P=0.001、P=0.003),试验组毛壳属(Chaetomidium)相对丰度显著增加(P=0.037),试验组瘤胃壶菌属(Piromyces)相对丰度较对照组增加1 205.71%,但差异不显著(P=0.135)。试验组柄孢壳属(Zopfiella)和德巴利氏酵母属(Debaryomyces)相对丰度比对照组分别降低99.08%和64.14%,但差异不显著(P=0.523、P=0.671)。结论日粮中果寡糖的添加对奶牛瘤胃真菌菌群的多样性并未产生明显的影响,但优势菌比例发生变化,瘤胃中瘤胃壶菌属、平革菌属等纤维降解菌的相对丰度提高,增强了瘤胃真菌菌群对纤维的降解能力。     

奶牛阴道菌群的多样性与产后子宫内膜炎的相关性研究

[目的]探讨奶牛阴道菌群的多样性与奶牛产后子宫内膜炎发病之间的关联性.[方法]随机采集30头牛的阴道分泌物,对其分泌物进行16S rDNA测序,将测序的数据进行除杂等处理后,使用UPARSE软件对不同样本细菌的丰度及多样性进行分析,记录所采集的30个样本产后子宫内膜炎的发病情况.[结果]4头奶牛产后患有子宫内膜炎,发病率为13.33％.不同样本的阴道菌群差异显著但在患病样本中却有一定的相似性.产前阴道菌群的OTU(operational taxonomic unit)个数均在100以上且丰度也较大,且菌群中多以短小芽孢杆菌(Bacillus_pumilus)为主的奶牛产后易患子宫内膜炎.[结论]奶牛产前阴道菌群的多样性变化可为产后子宫内膜炎的发病提供早期预警,对奶牛子宫内膜炎的防治具有一定的参考价值.     

奶牛瘤胃功能概述

奶牛有瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃4个胃室,该文着重阐述了奶牛瘤胃的功能,以为奶牛养殖者提供参考。     

应用PCR-DGGE比较奶牛瘤胃中不同粗饲料固相粘附细菌的多样性

为了比较奶牛瘤胃中不同粗饲料粘附细菌菌群结构,选择3头体况相近、健康、装有永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛,将苜蓿与全株玉米青贮混合粗饲料日粮(MF)和单一玉米秸秆日粮(CS)分别装入尼龙袋,在瘤胃中孵育24h后取出,用磷酸缓冲液洗脱获得饲料固相粘附部分,剩余的饲料残渣是固相超紧密粘附部分,提取总DNA,最终获得固相紧密粘附细菌和固相超紧密粘附细菌,利用PCR-DGGE分析细菌群落结构.结果表明:不同粘附程度的固相细菌的DGGE图谱条带数目和颜色深浅存在较大的差异,而粘附程度相同的不同粗饲料的DGGE图谱条带相似.2种饲料的瘤胃固相紧密粘附细菌的Shannon-Wiener多样性指数,CS高于MF(P<0.05),相比于固相紧密粘附细菌,固相超紧密粘附细菌的Shannon-Wiener多样性指数更高(P<0.01).不同粘附程度的固相细菌差异条带近源种分别归属于Brevundimonas,Prevotella,Pseudobutyrivibrio,Clostridium.因此认为,粗饲料类型和粘附程度影响细菌多样性,其中固相超紧密粘附细菌的多样性较高.     

不同精粗比日粮对奶牛瘤胃真菌菌群结构变化的影响研究

【目的】研究不同精粗比日粮下奶牛瘤胃真菌菌群结构的变化。【方法】选取24头健康、体重相近,胎次相同、产犊后约3周的中国荷斯坦奶牛为研究对象,随机分为2组,分别饲喂高精粗比日粮(HC组,精粗比为60∶40)和低精粗比日粮(LC组,精粗比为40∶60),试验期45 d,通过口腔采集瘤胃液,运用ITS高通量测序技术分析奶牛瘤胃真菌菌群结构。【结果】(1) HC组聚类的OTU数较LC组极显著降低(P<0.01);HC组Ace和Chao1指数较LC组极显著降低(P<0.01),而Simpson指数较LC组显著增加(P<0.05)。(2)在门水平上,HC组中子囊菌门和担子菌门丰度均极显著高于LC组(P<0.01),而被孢霉亚门丰度极显著低于LC组(P<0.01)。(3)在属水平上,HC组中5个酵母菌属以及与纤维降解有关的瘤胃壶菌属、新美鞭菌属、菌生格孢菌和瘤胃真菌属丰度均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于LC组,但根囊鞭菌属、枝梗鞭菌属、厌氧鞭菌属、曲霉属和念珠菌属均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)低于LC组。【结论】...     

不同pH对瘤胃细菌数量和菌群结构的影响

【目的】试验旨在研究瘤胃不同pH下瘤胃酸中毒相关细菌数量和瘤胃细菌菌群结构的变化。【方法】选取5头干奶期荷斯坦奶牛作为瘤胃液供体,调节瘤胃液pH分别为6.5、5.8、5.5、5.2和5.0。培养3 h后,采用qPCR技术测定瘤胃酸中毒相关细菌数量,采用16S rDNA高通量测序技术研究瘤胃细菌菌群结构的变化。【结果】（1）瘤胃pH对白色瘤胃球菌（Ruminococcus ablus）的相对数量没有影响（P>0.05）,但显著影响了乳酸产生菌和乳酸利用菌的相对数量（P<0.05）。其中牛链球菌（Streptococcus bovis）相对数量随着pH的下降而升高,在pH 5.0处极显著高于其余各组（P<0.05）;埃氏巨型球菌（Megasphaeraelsdenii）、反刍兽新月单胞菌（Selenomonas ruminantium）及乳酸杆菌（Lactobacillus species）随pH下降呈现先升高后下降的趋势,pH分别在pH 5.5或pH 5.2处达到最大值（P<0.05）;(2)α多样性结果显示,瘤胃细菌数量和菌群的丰富度及多样性呈现随瘤胃pH下降先...     

不同饲粮类型对内蒙古绒山羊瘤胃细菌多样性的影响

研究不同饲粮类型对内蒙古绒山羊瘤胃液细菌多样性及群落结构的影响。选择24只健康的8月龄、体重约25 kg的内蒙古绒山羊母羊,随机分为4组,每组6只,分别为苜蓿组(G1)、苜蓿补饲精料组(G2)、玉米秸秆组(G3)和玉米秸秆补饲精料组(G4),试验期共25 d,其中预饲期20 d。在正式试验期第5天,经口腔采集瘤胃液,利用高通量测序技术进行瘤胃细菌多样性分析。结果表明:基于相似性>97%的原则,4组样品共产生1 399个操作分类单元(OTU),共享OTU 1 040个,约占总数的74.34%;各组α多样性指数指标无显著性差异(P>0.05)。各组门水平最优势菌为拟杆菌门,科水平最优势菌为普雷沃氏菌科,属水平最优势菌为普雷沃氏菌属,在所有占总细菌比例大于1%的瘤胃细菌中,G2组软壁菌门比例显著高于G3和G4组(P<0.05),G1组毛螺旋菌科比例显著(P<0.05)高于其他3组,其余各组菌群比例均无显著差异(P>0.05)。综合得出,不同饲粮类型条件下,内蒙古绒山羊最优势菌门为拟杆菌门,最优势菌科是普雷沃氏菌科,最优势菌属是普雷沃氏菌属;不同饲粮类型对内蒙古绒山羊瘤胃菌群结构影响不明显。     

奶牛瘤胃积食的防治技术

奶牛瘤胃积食是奶牛生产养殖中常见的一类疾病,主要是由于奶牛采食大量难消化或容易鼓气的饲料所致,该病影响奶牛的生长和发育,严重危害了养牛业的发展。基于此,熟知奶牛瘤胃积食的发病原因、临床症状、诊断、治疗和预防方法在奶牛养殖中具有重要意义。     

奶牛过瘤胃氨基酸营养研究进展

反刍动物蛋白质营养的核心是氨基酸营养。由于瘤胃微生物的作用,直接添加到奶牛日粮中的氨基酸,会在瘤胃中部分或完全降解,最终到达小肠可被吸收利用的氨基酸量很少。赖氨酸和蛋氨酸是反刍动物增重、产奶或产毛的主要限制性氨基酸,因此过瘤胃氨基酸的研究主要集中在这两种氨基酸上。使用少量的瘤胃保护氨基酸不但可以代替数量可观的瘤胃非降解蛋白,还能提高奶牛产奶量和乳脂率,降低日粮蛋白质水平,从而降低饲料成本。因此,开发和利用过瘤胃氨基酸具有十分重要的意义。     

奶牛瘤胃中一株纤维分解菌的筛选与鉴定

试验从奶牛瘤胃中分离得到1株纤维分解菌,研究其生化性质和种属分类.将富集的纤维分解菌群,通过厌氧平板分离培养得到纤维分解菌.利用全自动微生物分析系统的革兰氏阴性菌鉴定卡鉴定纤维分解菌的生化图谱,并对菌株16SrDNA进行PCR扩增并测序,与GenBank数据库中序列进行同源性比对,确定其种属分类地位.结果表明:通过体外培养,分离得到纤维分解菌CB11,纤维分解平均消失率达82%,革兰氏染色为阴性,绝对厌氧,能够产生β-半乳糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、β-木糖苷酶等.通过建立系统发育树,CB11的16SrDNA序列与解肝素拟杆菌的相似度达99%.     

过瘤胃蛋氨酸对奶牛产奶量、乳成分以及血液氨基酸的影响

选用16头泌乳中期荷斯坦奶牛按拉丁方设计进行试验,研究饲粮中补充0、8、12和16 g.d-1过瘤胃蛋氨酸对奶牛产奶量、乳成分以及血液氨基酸含量的影响。结果表明,与对照组相比,补饲过瘤胃蛋氨酸能够提高奶牛乳蛋白、乳脂率和酪蛋白水平。补饲过瘤胃蛋氨酸对产奶量较高(>22 kg.d-1)的奶牛有增加产奶量的趋势,对产奶量低的奶牛没有积极作用,能提高高产奶牛乳蛋白和乳脂肪量。选用9头泌乳中期荷斯坦奶牛,在补饲过瘤胃蛋氨酸和普通蛋氨酸前后连续采血44 h,探索蛋氨酸的吸收变化曲线,发现奶牛补饲过瘤胃蛋氨酸后12~16 h达到吸收高峰,过瘤胃蛋氨酸能显著提高奶牛血清蛋氨酸水平,而补饲普通蛋氨酸则无明显影响。补饲过瘤胃蛋氨酸和普通蛋氨酸对血清总氨基酸水平均无显著影响。     

纳豆芽孢杆菌在奶牛瘤胃和十二指肠存活规律

通过体内外试验研究纳豆芽孢杆菌（Bacillus subtilisnatto,BSN）在奶牛胃肠道存活规律及停留时间。试验1：经过滤的荷斯坦奶牛瘤胃液或十二指肠液加入BSN菌液（芽孢含量为10^5cfu／mL）,对照组不添加;将处理好的发酵液于39℃厌氧培养,瘤胃液检测发酵0、6、12、24、48和72h挥发性脂肪酸浓度和芽孢数,十二指肠液检测发酵0、1、2、3、4、5和6h芽孢数。试验2：选取7头瘘管牛随机分成2组,处理组（4头）通过瘤胃瘘管投放100mL．BSN菌液（芽孢含量为10^8cfu／mL）,对照组（3头）不投放;投放后6、12、24、48和72h采集瘤胃液、十二指肠液和粪样。BSN在瘤胃液发酵过程中芽孢数呈先增高后降低的趋势,发酵24和72h的存活率分别为191．3％和175．9％,并促进了丙酸和丁酸的产生（P〈0．05）,减少了乙酸、异丁酸和异戊酸的产生（P〈0．01）。BSN在十二指肠液中发酵1h内芽孢数有上升的趋势（P〉0．05）,发酵3h后急剧降低,发酵1、3和6h的存活率分别为159．2％、121．4％和35．7％。体内试验结果表明瘤胃、十二指肠和粪便中的芽孢数均随投喂时间的延长而逐渐降低,48h后各位点均很难检测到芽孢。总之,BSN能耐受奶牛瘤胃液环境,并能影响瘤胃发酵,在十二指肠液的耐受时间约为3h,但不能在奶牛胃肠道中定植。     

复合包膜甜菜碱对夏季奶牛产奶性能及血液生化指标的影响

选取36头泌乳中期的荷斯坦奶牛,随机分为3组,即基础对照组、试验Ⅰ和Ⅱ组,分别添加10、20和30 g.d-1复合包膜甜菜碱于奶牛全混合日粮中.于试验前、中期和后期在牛尾静脉采集血液,测定血液指标,研究复合包膜甜菜碱对夏季奶牛的产奶性能及血液指标的影响.结果表明:三组奶牛的产奶量差异不显著(P>0.05),Ⅰ和Ⅱ组的产奶量分别比基础对照组提高0.58和1.17 kg.d-1;三组奶牛乳脂含量、乳蛋白含量和体细胞数的变化均不明显,各组之间的差异均不显著(P>0.05);试验期间,三组奶牛血浆中的葡萄糖浓度较试验前均有增加,血浆中的乳酸脱氢酶、肌酸磷酸激酶和碱性磷酸酶活性均下降后上升;试验中期,Ⅱ组奶牛血浆中的总蛋白含量显著低于基础对照组(P<0.05);试验末期,Ⅰ和Ⅱ组奶牛血浆中的总蛋白和白蛋白含量低于基础对照组(P>0.05),Ⅰ组血浆中的尿素氮含量高于基础对照组(P>0.05),Ⅱ组尿素氮含量低于基础对照组(P>0.05).由于试验缺乏空白对照组,因此不同添加量的复合包膜甜菜碱对奶牛的产奶性能及与能量代谢有关的血液指标无显著影响,但Ⅱ组产奶量较高;与Ⅰ和Ⅱ组相比,基础对照组有积累血浆中总氮的趋势.     

日粮精粗比对奶牛瘤胃发酵及泌乳性能的影响

选择4头安装有永久性瘤胃瘘管的泌乳奶牛,按4×4拉丁方设计,分别饲喂精粗比约为30∶70的“高低质粗料型”日粮、30∶70的混合型高青贮日粮、50∶50的精粗料比例相当的日粮及65∶35的高精料日粮等4种不同精粗比日粮,研究日粮精粗比对奶牛瘤胃发酵及泌乳性能的影响。结果显示,日粮精粗比对奶牛瘤胃pH值,氨氮质量浓度,总挥发性脂肪酸、丙酸、丁酸的浓度和乙酸/丙酸、(乙酸+丁酸)/丙酸有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)影响,而对瘤胃乙酸浓度影响不显著(P>0.05);饲喂不同精粗比日粮,奶牛乳产量、4%标准乳产量均有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异,而乳脂、乳蛋白、乳糖、非脂固形物及总固形物的含量差异均不显著(P>0.05),但其产量随乳产量的增加而增加,存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异。结果表明,4种精粗比日粮能使瘤胃发酵和乳成分含量保持稳定,但影响瘤胃挥发性脂肪酸浓度和乳产量;低质和优质粗料的合理搭配有利于稳定瘤胃内环境和乳脂含量,且能改善泌乳性能。     

奶绵羊与奶牛乳成分与泌乳期血清代谢组比较分析

通过对绵羊奶与牛奶乳成分及泌乳期奶绵羊和奶牛血清代谢组进行分析，旨在探究两个物种乳成分差异及潜在调控机制。在分娩后第90天分别采集6只奶绵羊与奶牛奶样与血液样本，通过乳成分分析仪对两个物种进行乳常规成分分析，并通过非靶向代谢组学对血清代谢物进行比较分析。结果发现，绵羊奶中乳脂、蛋白质、酪蛋白、固形物和非乳脂固形物均显著高于牛奶（P＜0.05），乳糖无明显差异（P＞0.05）。对血清进行代谢谱分析，共检测到1 615种代谢物，对其中486种进行了注释，根据条件筛选鉴定出412种差异代谢物。对差异代谢物进行通路（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）富集分析，共富集到28条功能通路，正离子模式下18条，负离子模式下10条。在奶绵羊血清中存在许多代谢物与抗微生物、抗病毒或抗癌有关，例如芬那酸、瑞德南特和水杨酸。研究结果为揭示乳畜产奶性状和乳成分差异调控机制提供了一定的理论依据，为改良乳畜泌乳性能提供了参考。     

基于高通量测序技术分析奶牛场垫沙和橡胶垫卧床中的菌群差异

为探究奶牛场沙土垫层和橡胶垫层菌群特征及差异,分别采集四川省两个规模化奶牛场的沙土垫层样本和橡胶垫层样本各6份,利用高通量测序技术对16S rRNA基因的V4区进行测序和生物信息学分析。结果显示,两个奶牛场的卧床垫层12个样本共获得1 443 818条优化序列(clean reads),将相似度为97%的有效序列进行操作分类单元(operational taxonomic units, OTUs)聚类,共得到2 311个OTUs。在属分类水平上,沙土垫层优势菌属为不动杆菌属(Acinetobacter)、海杆菌属(Marinobacter)、里氏杆菌属(Riemerella)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、节杆菌属(Arthrobacter);橡胶垫层优势菌属为棒状杆菌属(Corynebacterium)、藤黄单胞菌属(Luteimonas)、梭杆菌属(Fusobacterium)、盐单胞菌属(Halomonas)、弧菌属(Vibrio)。沙土垫层样本中不动杆菌属(Acinetobacter)、里氏杆菌属(Riemerella)的相对丰度显著高于橡胶垫层样本(P<...     

过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能和能量代谢的影响

为阐明日粮中添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能和能量代谢的影响,选取年龄、胎次和泌乳量相近的健康荷斯坦奶牛40头,随机分为4组,每组10头。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组每天分别在基础日粮中添加5、10和20g过瘤胃胆碱,Ⅳ组饲喂基础日粮。试验期内(产前14d～产后42d)分别调查和检测奶牛的生产性能(泌乳量和干物质摄入量)、血液生化指标(葡萄糖、β-羟丁酸、游离脂肪酸、甘油三酯和胆固醇)和内分泌指标(胰岛素和胰高血糖素)。结果显示:1)围产期奶牛日粮中添加过瘤胃胆碱能明显提高奶牛泌乳量(MY)和干物质摄入量(DMI),以每头奶牛每天添加10g过瘤胃胆碱效果最好。2)围产期奶牛日粮添加过瘤胃胆碱,能延缓血浆葡萄糖(Glu)水平的下降(P<0.05),显著降低试验奶牛血浆β-羟丁酸(BHBA)、游离脂肪酸(NEFA)总胆固醇(TCHO)含量(P<0.05),与对照组相比,血浆甘油三酯(TG)有升高的趋势(P>0.05)。3)添加过瘤胃胆碱,有提高试验奶牛血浆胰岛素(Ins)含量、降低胰高血糖素(Gn)含量的趋势,但差异不显著(P>0.05)。上述结果表明围产期奶牛日粮添加过瘤胃胆碱能够提高奶牛的生产性能,改善奶牛体内脂肪代谢,促进体内糖异生作用,缓解围产期和泌乳早期奶牛的能量负平衡。