婴幼儿配方乳粉中阪崎肠杆菌检测方法探讨

通过对婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌的菌落形态、生化特性等方面的试验,确定采用灭菌蒸馏水(DW)前增菌、肠道菌增菌肉汤(EE)增菌、显色培养基(X--αGlcA)分离培养、再以API20E生化系统鉴定的方法为检出该菌的理想方法。     

2013年青海省市售食品中食源性致病菌监测分析

目的 了解青海省市售食品中食源性致病菌的污染状况,为食品安全监管及食源性疾病防控提供科学依据。方法 按照《全国食品安全风险监测工作手册》要求,结合我省各地经济发展水平、人口分布状况、食品主要生产、加工、销售等的分布情况进行采样,按照《食源性致病菌监测工作手册》对样品进行检测。结果 2013年共采集10类食品2698份样品, 检出蜡样芽孢杆菌、阪崎肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等70株食源性致病菌,致病菌总检出率为2.6%,检出率较高的食品类别为婴幼儿食品、乳粉、桶装水。结论 青海省市售食品中食源性致病菌检出率较低;但应进一步加强市售婴幼儿食品、乳粉、桶装水等主要受污染食品的监督管理。     

火焰原子吸收光谱法测定婴幼儿配方奶粉中铜、锰元素含量

采用干法灰化法处理6种婴幼儿配方奶粉,探究适合奶粉灰化的温度,并且用火焰原子吸收光谱法测定奶粉中铜、锰元素的含量。结果表明测定铜、锰元素含量时奶粉的灰化温度为450～550℃;同一厂家生产的同一品牌不同成长阶段的婴幼儿配方奶粉,铜、锰元素含量存在一定的差异,同一厂家生产的同一阶段不同品牌的婴儿配方奶粉中铜、锰含量不存在显著性差异,但较大婴儿配方奶粉存在显著性差异;6种奶粉的铜、锰元素含量均符合国家标准GB/T 5413.21-1997。     

国内外婴幼儿配方奶粉激素含量比较

[目的]对国内外婴幼儿配方奶粉中的16种激素含量进行比较。[方法]采用高效液相色谱-串联质谱法分别测定样品中8种糖皮质激素和8种性激素的含量;分别对国内外婴幼儿配方奶粉中16种激素的检测结果、检出率、含量范围进行比较。[结果]16种激素中有15种未检出;国产奶粉和进口奶粉的黄体酮检出率分别为97%和95%,含量主要在20μg/kg（含20μg/kg）以下;在20～60μg/kg之间的,国产奶粉有11个样品,进口奶粉有2个样品,超出90μg/kg的只有2个进口奶粉样品。[结论]16种激素物质中,有15种在国内外婴幼儿配方奶粉中均没发现,而黄体酮在国内外婴幼儿配方奶粉中具有一定的普遍性,而且其含量范围有一定的相似性。     

一种基于TaqMan探针法的阪崎肠杆菌qPCR全自动检测技术体系的建立

[目的]建立快速准确地检测食物样品中食源性致病菌的体系。[方法]配套湖州市微生物制剂与农产品安全重点实验室自主研发的微生物分子检测仪,建立一种基于Taq Man探针法的阪崎肠杆菌q PCR检测体系。[结果]体系建立成功,标准曲线斜率为-3.44,R~2=0.995 5,扩增效率为95.3%。[结论]该q PCR体系特异性强,灵敏度高,明显缩短了检测时间,并具有良好的稳定性与重复性,为食品中阪崎肠杆菌的高通量和自动化检测提供了一个新的途径。     

火焰原子吸收光谱法测定婴幼儿奶粉中铁、锌元素含量

[目的]鉴于婴幼儿食品的特殊性和重要性,对婴幼儿配方奶粉中的铁、锌元素含量进行测定。[方法]采用干法灰化法处理6种婴幼儿配方奶粉,探究适合奶粉灰化的温度,并且用火焰原子吸收光谱法测定奶粉中铁、锌元素的含量。[结果]试验表明,测定铁、锌元素含量时奶粉的灰化温度为450～500℃;同一厂家生产的同一品牌不同成长阶段的婴幼儿配方奶粉,铁含量存在一定的差异,锌含量存在显著性差异,同一厂家生产的不同品牌的婴儿(较大婴儿)配方奶粉,铁、锌含量均不存在显著性差异,不同品牌幼儿配方奶粉的铁、锌含量存在显著性差异;6种奶粉的铁、锌元素含量均符合国家标准GB/T5413.21-1997。[结论]科学全面地评价婴幼儿配方奶粉中铁和锌元素的含量,对评价奶粉的品质以及正确引导消费者消费具有积极的现实意义。     

呼和浩特市婴幼儿配方奶粉的消费调查分析

呼和浩特市作为中国"乳都",因人口基数较大,对婴幼儿配方奶粉的需求较高,但存在进口婴幼儿配方奶粉消费需求远高于国产婴幼儿配方奶粉的现象。通过对呼和浩特地区婴幼儿配方奶粉市场的调查,分析其国产婴幼儿配方奶粉和进口婴幼儿配方奶粉的消费者特征和消费现状,提出提高国产婴幼儿配方奶粉市场占有率的相关建议。     

液态奶中阪崎肠杆菌污染状况的调查

[目的]了解某地区液态奶中阪崎肠杆菌的污染情况,为政府加强对液态奶的管理提科学依据。[方法]采用改进方法和PCR法检测液态奶。PCR适宜反应体系为：6μl 10×PCR buffer,4μl dNTPs混合物,2．5Mg^2＋ μl（25mM）,2μl 10μmol正向引物,2山10μmol反向引物,0．25μl（5U／μl）Taq,23．25μl水,总反应体系为50μl;其适宜的PCR扩增程序为：PCR反应采用冷启动,95℃预变性5min;变性95℃ 1min,退火61℃0．5min进行35个循环。PCR反应产物在2％的琼脂糖凝胶中进行电泳,凝胶成像系统观察结果,检出率为2．4％,同时对阪崎肠杆菌的毒力进行了研究,所筛出的4株阪崎肠杆菌均导致受试昆明小鼠死亡。[结果]从167份液态奶样品中检出4株阪崎肠杆菌。     

消费者对国产婴幼儿奶粉质量安全风险感知偏差及其影响因素

为了解和调整消费者对国产婴幼儿奶粉质量安全风险感知偏差,基于情景模拟实验法获取559位消费者数据,采用有序Logistic模型,对消费者的国产婴幼儿奶粉质量安全风险感知偏差及其影响因素展开实证研究.结果表明:1)89.98％的消费者主观感知到的国产婴幼儿奶粉质量安全风险高于客观风险水平,存在风险感知偏差.2)产品知识、...     

海藻糖对阪崎肠杆菌温度耐受性的影响研究

[目的]研究在磷酸缓冲液中添加不同浓度海藻糖的条件下阪崎肠杆菌对高温、低温的耐受性,为食品加工过程中控制阪崎肠杆菌污染提供参考。[方法]通过试验观察阪崎肠杆菌在不同温度条件下存活状况来反映其对温度的耐受性。[结果]阪崎肠杆菌在一定的高温条件下,其存活率与海藻糖的浓度成正比。[结论]海藻糖对阪崎肠杆菌有保护作用,随着海藻糖浓度的升高,其保护作用越明显。     

南亚实蝇成虫肠道细菌的分离与鉴定

采用传统的微生物培养和16S r DNA(V6-V8)高变区测序相结合的方法,从室内人工饲养的性成熟南亚实蝇雌虫肠道中分离、鉴定出21株细菌,均属于γ-变形菌门,分别为肠杆菌属(7株)、拉乌尔菌属(3株)、沙雷氏菌属(2株)、普罗维登斯菌属(2株)、不动杆菌属(1株)、柠檬酸杆菌属(1株)、西地西菌属(1株)和不可培养的细菌(4株);从性成熟的南亚实蝇雄虫肠道内分离得到20株细菌,分别为细菌(7株)、克雷伯氏菌属(4株)、肠杆菌属(3株)、普罗维登斯菌属(2株)、沙雷氏菌属(1株)、摩根菌属(1株)、假单胞菌属(1株)和γ-变形杆菌(1株),也均属于γ-变形菌门.由上可知,性成熟的南亚实蝇雌、雄成虫肠道共有细菌为肠杆菌属、普罗维登斯菌属和沙雷氏菌属,均属于肠杆菌科,表明肠杆菌科是南亚雌、雄成虫肠道细菌的优势菌群.     

陕西市售婴幼儿食品中阪崎克罗诺杆菌流行状况及相关特性研究

对陕西省62个品牌的366份市售婴幼儿配方乳粉和米粉及其他食品中阪崎克罗诺杆菌的污染状况进行调查,并对分离株的相关特性进行分析,旨在阐明陕西市售婴幼儿食品的食用安全性。结果表明,87份样品检出阪崎克罗诺杆菌阳性,平均检出率为23.8%。乳粉阳性样品检出率为18.3%,米粉为27.3%,其他婴幼儿配方食品检出率20.0%。共检出169株阪崎克罗诺菌,其中168(99.4%)株对利福平产生抗性,对其他抗生素耐药的菌株比例依次为阿莫西林20.12%、链霉素18.93%、四环素17.16%、氨苄西林12.43%、庆大霉素11.24%和头孢曲松0.59%等。135株(79.88%)分离株携带ompX基因,120株(71.01%)携带cpa基因、111株(65.68%)携带sip基因、93株(55.03%)携带hly基因。按照95%的相似性,169株分离株脉冲场凝胶电泳(Pulse field gel electrophoresis,PFGE)分型后可被分为4个大簇、8个小簇和1个单基因型,部分源于不同品牌或批次食品的菌株基因型相似性较高,表明陕西省市售婴幼儿配方粉及婴幼儿食品中阪崎克罗诺杆菌染问题不容忽视,存在严重的食品安全危胁。     

重庆地区玉米叶内生细菌的分离及其与草地贪夜蛾肠道菌的比较

为进一步了解重庆地区玉米叶内生细菌的组成以及这些内生细菌与入侵重庆地区草地贪夜蛾肠道微生态的相互关系,以采集自巫山地区被草地贪夜蛾入侵的玉米地里的玉米嫩叶为材料,运用传统微生物培养方法尝试对其内生细菌进行初步的分离培养,并通过16S rDNA测序开展了优势菌的属水平鉴定.此次共分离获得了22个细菌分离株,经16S rDNA序列同源性分析,将它们归类到11个分类单元,分属克雷伯氏菌属(Klebsiella)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)、肠球菌属(Enterococcus)、微杆菌属(Microbacterium)、鞘氨醇杆菌属(Sphingobacterium)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、无色杆菌属(Achromobacter)和丛毛单胞菌属(Comamonas).与前期研究得到的该地区草地贪夜蛾肠道微生物菌群数据比较可以发现,玉米内生细菌中包括克雷伯氏菌属(Klebsiella)、不动杆菌属(Acinetobacter)、肠球菌属(Enterococcus)、鞘氨醇杆菌属(Sphingobacterium)和金黄杆菌属(Chryseobacterium)在内的5个属可以在草地贪夜蛾肠道中分离到,表明草地贪夜蛾肠道微生物多数可能源自其食物,但是草地贪夜蛾肠道微生物中常见的假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、短波单胞菌属(Brevundimonas)和气单胞菌属(Aeromonas)并未在玉米嫩叶中分离到,说明它们可能是主要存在于草地贪夜蛾肠道中的微生物.该研究对草地贪夜蛾所取食的玉米叶中内生细菌的种类进行了初步分析,为后续研究玉米叶内生细菌和草地贪夜蛾肠道微生物的相互关系奠定了基础.     

基于BP神经网络的婴幼儿奶粉质量安全评价模型研究

针对婴幼儿奶粉质量安全评价问题,提出了基于BP神经网络的评价模型;以湖南卓跃生物科技有限公司日常监测数据为样本,筛选并选择了与婴幼儿奶粉质量安全评价最为相关的27种指标因素,以27种指标因素组成输入层,评价结果组成输出层;针对隐含层节点个数,首先利用试凑法预估范围,然后利用MATLAB仿真确定最佳的隐含层节点个数,最后利用10组数据对神经网络评价模型进行了仿真验证。结果表明,提出的评价模型是可行和有效的。     

一株高效好氧反硝化细菌的分离与鉴定

采用选择性培养基通过定量增加亚硝酸盐含量来富集筛选好氧反硝化细菌,经过选择性培养基初步筛选,测定NO-2-N与NO-3-N的去除率,再通过反硝化培养基复筛选出同时具有去除NO-2-N与NO-3-N能力的目的菌。通过16S rRNA基因序列分析及同源性比对以及与其他已筛选出的部分硝化细菌与反硝化细菌的比对构建系统发育树,结合菌株的生理生化鉴定试验,鉴定出目的菌株。在好氧、28℃培养条件下,在反硝化培养基中,该菌株5 d内将NO-2-N由3 570 mg/L降至22 mg/L,去除率达99.4%,将与NO-3-N由2 464 mg/L降至27 mg/L,去除率达98.9%。通过形态学、生理生化反应以及16S rRNA序列测定鉴定菌株DB-6为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae),命名为DB-6。新筛选的阴沟肠杆菌反硝化能力较强,具有生物脱氮的应用潜质,有望应用于海水养殖水质净化。     

肉品发酵剂松鼠葡萄球菌SL4冻干菌粉的制备

为提高葡萄球菌冻干菌粉的活菌数,制备高活性肉用葡萄球菌发酵剂。以前期研究获得的1株优良肉用发酵剂菌株松鼠葡萄球菌SL4为研究对象,对其菌体收集条件、冷冻干燥保护剂及初始菌悬液活菌数进行优化。结果表明:松鼠葡萄球菌SL4最适离心收集条件为离心转速6 000r/min,离心时间10min;冷冻干燥保护剂配方为脱脂奶粉100g/L,甘油23.56mL/L,甘露醇50g/L,海藻糖51.68g/L;初始菌悬液活菌数为109 CFU/mL。经以上条件优化后松鼠葡萄球菌SL4冻干存活率可达95%。     

高压液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中7种B族维生素含量

[目的]建立一种高压液相色谱-串联质谱同时测定婴幼儿配方奶粉中7种B族维生素(核黄素、硫胺素、吡哆醇、吡哆胺、吡哆醛、烟酸、烟酰胺)含量的方法。[方法]样品用0.1%甲酸溶液溶解后,加入一定体积的正己烷,经过超声、离心、过滤处理。用0.1%甲酸-甲醇为流动相(梯度洗脱),Eclipse Plus C18色谱柱为分析柱,对滤液进行分离。采用电喷雾正离子模式,多重反应监测(MRM)对7种B族维生素进行检测。[结果]7种B族维生素在5 min内能较好分离,在一定的浓度范围内线性良好,相关系数(R2)均大于0.99,样品加标回收率(3个加标水平)为75.25%~107.65%,相对标准偏差在3%以下。[结论]该方法具有操作简单、分离度好、灵敏度高、检测速度快等优点,可用于婴幼儿配方奶粉中B族维生素含量的检测。     

烟台市售乳及乳制品重金属污染状况及暴露风险评估研究

对2012-2016年烟台市售生乳、发酵乳、灭菌乳、全脂乳粉和婴幼儿配方乳粉5种乳及乳制品中的铅(Pb)、镉(Cd)、总汞(Hg)及总砷(As)含量进行测定.采用单因子污染指数法和内梅罗综合污染指数法,对其污染程度进行分析评价.结果表明:乳制品中铅(Pb)、镉(Cd)、总汞(Hg)和总砷(As)的检出率分别为58.69%(125/213)、36.62%(78/213)、3.29%(7/213)、2.82%(6/213),发酵乳和婴幼儿配方乳粉中总Hg和总As未检出,全脂乳粉中总As未检出.生乳、发酵乳和灭菌乳等液态乳Pb的检出率和单因子污染指数均最高;全脂乳粉Pb的检出率最高,Cd的单因子污染指数最高;婴幼儿配方乳粉中Cd的检出率最高,而Pb的单因子污染指数最高.生乳中重金属污染程度最高,P综合=0.292,全脂乳粉综合污染指数最低,P综合=0.087 6,各类乳制品的综合污染指数从大到小排序为生乳﹥发酵乳﹥灭菌乳﹥婴幼儿配方乳粉﹥全脂乳粉.生乳、发酵乳和灭菌乳重金属污染物主要为Pb,全脂乳粉和婴幼儿配方乳粉为Pb和Cd.生乳的综合污染指数较高.     

瘤胃微生物基因组文库中BAC末端序列分析

基于前期从瘤胃微生物基因组文库中筛选的功能酶克隆菌,利用T7和pIBRP引物,测定功能酶克隆菌的BAC末端序列,并利用NCBI Blast系统对BAC末端序列进行分析.结果表明:共得到26条BAC末端序列,经Blast比对分析,与已知编码基因的匹配度低,而大部分BAC末端序列与阪崎肠杆菌和环境中的微生物匹配度高,说明瘤胃中的微生物与其它环境中的微生物具有一定的相似性,进一步丰富了对瘤胃微生物的认识.     

婴儿系列配方奶粉S－2的研究

婴儿系列配方奶Ｓ－２，以新鲜牛乳、脱盐乳清粉、小米、精炼植物油等为原料；强化维生素、常量元素、微量元素、牛磺酸等为营养添加剂，采用普通奶粉生产工艺，生产出适用于４～１２月龄婴儿食用配方奶粉。动物喂养试验结果表明，Ｓ－２奶粉质量（包括营养学和工艺学指标）均达到并超过同类型产品－台湾味全较大婴儿奶粉（Ｓ－２）。哈尔滨医科大学通过对４～１２月龄婴儿跟踪喂养检测。结果表明，Ｓ—２奶粉对此阶段婴儿的生长发育具有明显的促进作用。其身长、体重等各项指标均达到或超出正常标准。