香石竹水孔蛋白基因的克隆及表达分析

以香石竹(Dianthus caryophyllus)‘马斯特’为试验材料,在分析香石竹和石竹转录组数据的基础上克隆得到10个水孔蛋白(AQP)基因,7个属于PIP亚家族,3个属于TIP亚家族;其中DcaAQP1、DcaAQP2、DcaAQP3、DcaAQP4、DcaAQP6、DcaAQP8和DcaAQP10在萼片中优势表达,DcaAQP5在茎和花瓣中优势表达,DcaAQP7在叶中优势表达,DcaAQP9在各个组织中表达均比较低;在切花开放萎蔫过程中,DcaAQP1、DcaAQP3和DcaAQP6的表达量从花蕾期开始升高,半开期达到最高,DcaAQP4、DcaAQP7、DcaAQP9和DcaAQP10在盛开期表达量达到最高;DcaAQP2在花蕾期表达量最高,DcaAQP5在开始萎蔫期表达量达到最高,表明多个AQP基因协同作用来维持切花开放萎蔫过程中花瓣细胞水分吸收和营养物质转运。     

荔枝水孔蛋白基因LcPIP的克隆与组织特异性表达研究

 从荔枝组织中克隆了9个质膜水孔蛋白基因（LcPIP）的cDNA全长序列,并研究了其组织特异性表达。结果表明：9个LcPIP分为PIP1和PIP2两类。定量PCR结果表明9个LcPIPs在荔枝的不同组织中均表达,其中LcPIP1-2、LcPIP1-4、LcPIP2-1、LcPIP2-2在花中的表达量相对较高,LcPIP1-1在茎中相对较高,LcPIP1-2在果肉中较高,LcPIP2-5在种子中的表达量仅次于果皮,而LcPIP1-3在叶中最高,LcPIP2-4在根中最高。LcPIP1-1、LcPIP2-4、LcPIP2-5在果皮中表达量较高,而LcPIP2-3在果皮中特异表达,且在所有成员中表达量最高,可能与果皮组织水分运输有关。     

香石竹优良切花品种引种简报

1　国内外技术水平及研究意义香石竹原产南欧及印度冬暖夏凉的地中海类型气候区。以后传入法国、英国等国,后来才传到美国及亚洲等国,至1910年由英国传入中国上海,解放前夕我国种植香石竹的面积达6.67ｈｍ2,但一直是零散粗放生产,不能周年供花。直到1984年上海市开始从荷兰引进新品种十多种,淘汰了原有的退化品种,并进行了香石竹组培快繁技术研究。到90年代,上海已建立了香石竹品种园和无病毒母本园,并在大连、北京、南京、武汉、成都、昆明、深圳等地开始了香石竹的种植。国外技术现状:(1)育种工作成果显著,有240多个品种流行在欧、美、日…     

香石竹切花保鲜方法研究进展

香石竹(Dianthus caryophyllus L.)是四大商品切花之一,对其保鲜技术的研究蕴涵着巨大的经济价值.现从化学方法和生物方法两个方面对近年来香石竹切花保鲜技术的研究成果做了系统的回顾和总结,并对其未来发展前景进行了展望.认为广泛的适用性、可靠的安全性和系统的控制性是未来保鲜技术的三大发展方向.     

不同保鲜剂对香石竹切花保鲜效果的研究

用5种保鲜剂对香石竹切花进行了处理,测定其瓶插寿命、鲜重变化和花径等综合指标。结果表明:配方为50 g/L蔗糖+150 mg/L柠檬酸+50 mg/L硝酸银的保鲜效果最好。     

不同处理对香石竹切花的保鲜作用

本试验用50ml/L的1-MCP和300mg/L8-HQS+3%Suger+250mg/LCA处理香石竹切花,实验显示1-MCP能提高香石竹切花的质量,延长瓶插寿命。     

海带多糖对香石竹切花保鲜效果的研究

 研究了降解前后的海带多糖对瓶插香石竹切花的保鲜效果，结果表明：降解后的海带多糖能使切花寿命延长5—8 d，最大花径增大1 2 em，呼吸高峰推迟4～6 d，细胞膜相对透性小，较好地维持水分平衡，切花鲜样质量增加，观赏效果提高。海带多糖降解后浓度为2．0 g／L效果最好。     

硝酸钙对香石竹切花保鲜效果的影响

研究不同浓度的Ca(NO3)2对香石竹保鲜效果的影响。结果表明:瓶插液中含适宜浓度的Ca(NO3)2能够增大切花最大花径、增加花枝鲜重、提高叶绿素、可溶性糖和花色素苷含量并能减缓质膜透性增加的速度。其中以配方为3%蔗糖+300 mg/L 8-HQS+500 mg/L柠檬酸+1.0 g/L Ca(NO3)2的瓶插液保鲜效果较好。     

无机盐对香石竹切花保鲜生理效应的研究

4种含不同无机盐的保鲜剂均能不同程度地增加切花的鲜重 ,改善体内的水分状况 ,降低游离脯氨酸含量以及过氧化物酶 (POD)活性 ,延长瓶插寿命 ,其中以保鲜剂 1(3%蔗糖 +2 0 0mg·L-18-HQ +2 0 0mg·L-1柠檬酸 +5 0mg·L-1AgNO3 )保鲜效果最好。     

不同保鲜剂对香石竹切花保鲜效应

研究了由蔗糖、KNO3、Vc和柠檬酸组成的不同保鲜剂对香石竹切花的保鲜效果及瓶插寿命的影响.通过对切花在瓶插期间的生理生化变化的研究,结果表明:1.5%蔗糖 0.2%KNO3 0.02%Vc 0.01%柠檬酸能改善花枝的生理状况,延长切花瓶插寿命(17 d(天)),是适合香石竹切花保鲜的最优组合.     

香石竹DcMAPK1和DcMAPK2的克隆及功能初#br# 步分析

 分离了香石竹（Dianthus caryophyllus）两个促分裂原活化蛋白质激酶（mitogen-ac-tivated protein kinase,MAPK）基因cDNA 全长,分别命名为DcMAPK1 和DcMAPK2,其中DcMAPK1 与拟南 芥AtMAPK6 高度同源。DcMAPK1 在香石竹花瓣衰老过程表达增加,乙烯处理显著促进其表达,瞬时抑 制DcMAPK1 后切花瓶插寿命显著延长。而DcMAPK2 在花瓣衰老过程中组成型表达,乙烯处理对其表达 无显著影响,瞬时抑制DcMAPK2 对切花瓶插寿命无显著影响。     

纳米银处理减轻香石竹切花细菌性茎堵塞的研究

探讨了新型抗菌剂纳米银（nano-silver,NS）处理对香石竹‘Master’切花的保鲜作用及其减轻切花细菌性茎堵塞的效果。结果表明,用150 ~ 300 mg · L-1 NS 溶液预处理香石竹切花茎基端1 h 后再瓶插于去离子水中,可延长切花的瓶插寿命和促进瓶插期间花径增大,并改善切花的水分吸收和维持切花的鲜样质量,其中以250 mg · L-1 NS 处理效果最佳;进一步研究发现,250 mg · L-1 NS 处理可显著延缓香石竹切花茎末端水分导度的降低。采用电感耦合等离子体发射光谱（ICP-AES）法测定NS 在香石竹切花体内分布和变化特点表明,经250 mg · L-1 NS 预处理1 h 后,整个瓶插期间NS 主要集中在香石竹切花的茎末端。此外,通过扫描电镜观察证实,该处理可显著减轻香石竹切花细菌性茎堵塞的发生。     

Co2+对香石竹切花瓶插期间膜脂过氧化作用的影响

以Yellow sim香石竹为试验材料,比较了Co2+与硫代硫酸银(STS)对香石竹切花采后主要膜脂过氧化指标的影响。结果表明:Co2+处理与STS处理相比,可有效减缓花瓣含水量和可溶性糖含量的下降,抑制细胞膜透性的上升幅度,延缓SOD活性下降,有效减缓膜脂过氧化的伤害,延长切花瓶插寿命。Co2+处理比STS处理具有更好的保鲜效果,可作为STS的一种安全环保替代剂。     

唐菖蒲质膜水孔蛋白基因GhPIP1;1 的克隆及表达分析

 采用RT-PCR和RACE技术从唐菖蒲（Gladiolus hybridus‘Eerde’）花瓣中克隆得到1个质膜内在蛋白（plasma membrane intrinsic proteins,PIPs）类的水孔蛋白基因,命名为GhPIP1;1。该基因cDNA 全长1 130 bp,包含867 bp完整开放阅读框（ORF）,编码288个氨基酸。克隆和分析相应的gDNA序列（2 098 bp）表明,其包含由4个外显子和3个内含子组成的编码区序列。氨基酸序列分析表明GhPIP1;1具有水孔蛋白家族高度保守的2个NPA（Asn-Pro-Ala）基序。同源性分析显示GhPIP1;1氨基酸序列与同科的荷兰鸢尾（Iris hollandica）PIP1氨基酸序列的同源性达94%。半定量RT-PCR分析表明,GhPIP1;1在唐菖蒲花瓣、雄蕊、雌蕊、茎、苞片和叶片等均有表达,但表达量以花瓣中最高,叶片中最低;GhPIP1;1在花蕾至花朵盛开期间的表达水平较高且变化不明显,但在花朵盛开后的萎蔫过程中表达水平明显降低。     

杜梨干旱胁迫相关水通道蛋白基因的筛选与克隆

以杜梨实生苗为材料,采用15%PEG 6000进行模拟干旱处理,利用qRTPCR、同源重组、亚细胞定位等方法,研究了不同水通道蛋白基因在15%PEG 6000胁迫条件下表达水平的变化趋势,筛选了响应干旱胁迫相关的水通道蛋白基因,并对其进行克隆和分析,以期为梨抗旱基因筛选提供参考依据。结果表明:AQPs在杜梨的根、茎、叶中均有表达,且随着胁迫时间的延长,大部分AQPs在根系中的表达水平呈先上升后下降的趋势,其中PIP2;2基因在胁迫处理3h后,相对表达量最高;从杜梨根系中克隆获得PbPIP2;2,该基因包含一个完整的846bp的开放阅读框,编码281个氨基酸。氨基酸序列比对分析结果表明,PbPIP2;2与其它近缘物种具有一致的保守功能域,其中与苹果MdPIP2;2、白梨PcPIP2;2相似度最高。洋葱表皮亚细胞定位发现PbPIP2;2基因定位在质膜上。     

野生毛葡萄水通道蛋白基因VhPIPs的克隆与组织特异性表达研究

从野生毛葡萄组织中克隆了9个质膜水通道蛋白基因（VhPIP）的cDNA全长序列,并研究了其生物信息学特征及组织特异性表达。氨基酸序列分析表明,9个VhPIP分为PIP1和PIP2两类;均含有MIP蛋白家族保守的信号序列SGGHINPAVT和两个NPA（Asn-Pro-Ala）单元,均为稳定性蛋白、疏水性蛋白,且每个VhPIP均含有6个跨膜区。实时荧光定量RT-PCR分析表明,这9个VhPIP在抗旱的毛葡萄‘花溪–9’根、茎、叶中均有表达,其中VhPIP1;1、VhPIP1;2、VhPIP1;4、VhPIP2;1、VhPIP2;2和VhPIP2;4在其根中的表达量最多,可能与根部水分运输的调节密切相关;VhPIP1;5和VhPIP2;3在其叶中的表达量最多,可能主要参与叶片的水分运输,与叶片的蒸腾作用密切相关;VhPIP1;3在根、茎和叶中的表达量无显著性差异;相对于其他基因的表达,VhPIP1;1和VhPIP2;4在根中表达量最高,这两个基因可能在水分运输过程中起较大作用。     

白菜亚硝酸还原酶基因BcNiR的克隆及表达分析

 以白菜品种‘苏州青’自交系叶片cDNA为模板, 采用RT-PCR、3′RACE和5′RACE技术, 获得了编码亚硝酸还原酶基因(NiR) 的cDNA全序列1 852 bp, 包含有1 749 bp的开放阅读框, 编码583个氨基酸, 命名为BcNiR。所推导的氨基酸序列与拟南芥NiR1、烟草nii2编码的氨基酸序列具有较高同源性, 分别为83%和76%。生物信息学分析表明, BcNiR具有完整的NiR蛋白结构, 含血红素蛋白β - 化合物区域, 一个明显的西罗血红素siroheme结合位点和4Fe-4S区域, 可以在SWiSS-MODEL数据库中搜索到与之相近的三维结构。RT-PCR结果显示, 该基因在叶片中的表达量远远高于根系, 在以0、10、20、30、40 mmol·L ^{- 1}硝态氮各分别处理0、2、4、6、8、12 h的试验中, 30 mmol·L ^-1处理4 h可使BcNiR的表达量达到最大; 5和10 mmol·L ^{- 1}铵态氮处理试验表明, 高浓度的铵抑制该基因的表达。     

茄子生长素诱导基因SmIAA19的克隆和分析

以茄子单性结实品系‘D-10’为材料,以茄子单性结实差减文库中差异表达的EST片段Z732为依据,采用RT-PCR和RACE技术克隆获得了生长素诱导基因SmIAA19（登录号KP114221）的cDNA序列。该基因全长为800 bp,开放阅读框为558 bp,编码185个氨基酸。氨基酸序列比对结果表明该基因编码的氨基酸序列具有Aux/IAA基因家族的典型结构域和保守基本序列,在分子进化上与马铃薯距离最近,与番茄处于同一分支。qRT-PCR分析表明,在低温（门茄）和适温（四门斗）条件下,SmIAA19在单性结实和非单性结实的子房和果实发育过程中均有表达,单性结实品系中的表达量显著高于非单性结实品系,单性结实品系开花当天子房中的表达量最高,非单性结实品系在低温和适温条件下的表达量均保持在较低的水平。IAA含量检测结果表明,在不同结实性茄子品系的果实发育过程中IAA含量的变化趋势基本相同,在果实发育前期含量较高,且在低温（门茄）条件下,不同结实性果实中IAA的含量变化与SmIAA19基因的表达量变化相一致。SmIAA19基因可能与茄子的单性结实有关。