基因免疫的研究进展

综述了当前基因免疫的研究进展，其内容包括基因载体、基因免疫应答、基因免疫佐剂、病毒、细菌、寄生虫、肿瘤病的基因免疫保护，基因免疫的安全性分析及应用前景     

基因免疫疫苗研究进展（待续）

新型疫苗的研究对于动物疾病的防治有重大的经济价值，基因免疫疫苗作为第三代疫苗，其具备传统疫苗和基因免疫不可比拟的优点，能够诱导全方位的免疫反应且使用安全方便，开创了疫苗发展史上的新纪元。综述了基因疫苗研究新进展，讨论免疫作用机理。     

基因免疫与动物生殖

基因免疫核心是将外源基因组装到含有必要表达调控元件的真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒导入动物体内，使外源基因在体内表达，从而激活机体的免疫系统，引发免疫反应的．是90年代初开始发展起来的一种新方法。基因疫苗因为制备简单以及良好持久的免疫反应性，便于保存等优点而受到普遍重视，目前已成为分子生物学研究的重点方向之一。本文对基因免疫的的作用机制、方法和基因免疫对动物的生殖影响作一综述。     

基因免疫与基因疫苗

基因免疫是九十年代初发展起来的新兴免疫学技术，它是将编码目的抗原的基因以重组表达载体的形式经各种基因转移途径转入机体细胞，借用容量主细胞表达加工合成抗原分子，以MHC～I或（和）MHC～II类分子抗原处理和输送途径将抗原信息递呈给T细胞和B细胞。全过程模拟了病毒自然感染提呈过程，既产生了体液免疫，又启动了细胞免疫，使得免疫效果极大的改善。因此，基因疫苗也被誉为第三次疫苗革命，它将成为我们今后预防疾病的重要武器。基因免疫的优点是毋庸置疑的，其化学结构是比蛋白质稳定得多的DNA，便于保存和运输，很适合做疫苗…     

基因免疫研究进展及其面临的问题

传统疫苗是基于抗原刺激机体产生特异性抗体的原理，这类疫苗绝大多数是激发机本的体注免疫，很难启动细胞免疫。而基因疫苗能模拟病毒自然感染原提呈的过程，使表达的抗原能在自然的形式被加以提呈给免疫系统，即能产生细胞免疫，又能产生体液免疫，此种免疫不受母液抗体的干扰。自１９９０年报道了其基因治疗研究以来，基因免疫在预防人类某些病毒性、细菌性、寄生虫性疾病等方面取得了突破性进展。笔者就基因免疫的原理、特点、研     

表达MDV—gB基因的重组鸡痘病毒免疫效果观察

将马立克氏病病毒（MDV）gB基因插入鸡痘病毒中，构建了含有MDV－gB基因的重组鸡痘病毒（rFPV)，用rFPV、火鸡疱疹病毒（HVT）冻干疫苗、rFPV HVT二联疫苗分别免疫1日龄AA肉用雏鸡，8日龄攻毒后观察免疫保护效果。结果表明，3种疫苗均诱导了免疫应答，免疫保护率分别为69％、69％和85％。该重组病毒疫苗的免疫效果与HVT疫苗的免疫效果相当，二者联用具有免疫协同作用。     

鹅Ⅰ型禽副黏病毒F基因重组质粒的构建及其DNA免疫

通过RT-PCR扩增出鹅Ⅰ型禽副黏病毒GPMV／QY97-1株F蛋白基因的cDNA，并将F基因cDNA克隆到含CMV启动子的pCI载体上，构建这一基因的真核表达质粒pC-GPMVF，以此质粒肌肉注射3周龄非免疫鸡，并分别于免疫后第2、4、6周通过ELISA方法检测抗体水平。结果证明，用重组质粒pC-GPMVF免疫鸡，能刺激机体产生抗Ⅰ型禽副黏病毒的特异性抗体和免疫应答。     

凋亡抑制基因免疫对小鼠生长的影响

小鼠经凋亡抑制基因免疫后，从3周龄到8周龄基因免疫组小鼠平均体重比对照组分别低0．48、1．18、1．16、1．35、0．99、0．85g。基因免疫后的头2周，小鼠生长速度明显低于对照组，且生长速度的差异随着免疫时间的增加而减小。这提示该基因与小鼠生长有关，如果用基因治疗方法增加凋亡抑制基因表达量，有可能增加小鼠生长速度。将凋亡抑制基因作为候选基因，研究它对家畜生长的遗传效应，对家畜繁育有重要的意义。     

核酸疫苗研究进展(下)

Sato等报道，在质粒载体上引入大肠杆菌Amp^ 抗性基因(内含有6核苷酸片段的ISS免疫增强序列)，真皮免疫小鼠后ISS增强CTL和Th1细胞的免疫反应。有人提出利用含有病毒免疫原性基因的基因大片段进行基因免疫，以弥补单基因免疫活性的不足。将协同因子如IL-2、IL-12、TCA等的表达质粒与抗原表达质粒混合注射可使Th1型细胞免疫增强，而GMcsf能明显加强体液免疫，     

质粒DNA中的佐剂单位及其在基因免疫中的作用

质粒DNA进行基因免疫在许多动物实验中都已经产生良好的免疫效果并且其研究越来越多，但质粒DNA刺激机体免疫系统对其编码的抗原的免疫反应基本机制刚开始发现，本文阐述了基因免疫中质粒DNA中的结构组成特别是其佐剂单位及其作用。     

鸡传染性喉气管炎病毒DNA疫苗免疫效果观察

将分别构建的含有鸡传染性喉气管炎病毒王岗株ｇＢ、ｇＣ和ｂＤ基因的重组真核表达质粒及空载体质粒分组肌肉注射雏鸡，攻毒后观察免疫保护效果。结果表明，重组质粒诱导了免疫应答，免疫保护率为７９％，该基因疫苗可以作为预防ＩＬＴ的一个补充。     

鸡新城疫病毒F基因疫苗接种剂量的研究

本研究以新城疫病毒 Ｆ 基因的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 与真核表达载体ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 重组，构建了新城疫病毒 Ｆ基因疫苗。采用不同剂量接种 Ｓ Ｐ Ｆ鸡后，通过抗体监测和强毒攻击试验，分析了其诱导的体液免疫应答及免疫保护作用。结果表明，接种剂量为１００μｇ、２００ μｇ 时，试验鸡在免疫后第 ２ 周出现较明显的抗体反应，接种剂量为 １０ μｇ 时抗体变化不明显。以标准强毒 Ｆ４８ Ｅ９ 攻击后，空白对照组及接种剂量为１０ μｇ 和１００ μｇ 组的鸡只全部发病死亡，未获得免疫保护；而２００ μｇ 组鸡只全部存活，获得完全免疫保护。表明基因免疫效果与接种的剂量有密切的关系。     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗又称基因疫苗，包括DNA疫苗和RNA疫苗。目前研究最多的是DNA疫苗，由于其不需要任何化学载体，又称裸DNA疫苗，主要是利用基因重组技术直接将编码抗原蛋白的外源抗原基因导入动物体细胞内，在宿主细胞中表达外源抗原基因，诱导宿主产生对该抗原的免疫应答，从而使被接种动物获得免疫保护。     

猪SLAⅡ类基因多态性及其与抗病性状关联的研究进展

猪的白细胞抗原（swine lymphocyte antigen,SLA）是猪体内与抗病性和免疫应答密切相关的一组基因群，它不仅编码移植抗原，控制移植排斥反应，还参与免疫应答调控和免疫识别，其中最重要的功能之一就是抗原递呈。对SLA的深入研究不仅可以为兽医临床免疫耐受、表位疫苗的研制提供先进的理论基础，同时还有助于发现猪抗病育种中有效的候选基因。作者就SLAⅡ类基因的多态性及其与抗病性状关联的研究作一综述。     

猪传染性胃肠炎病毒核酸免疫昆明鼠的抗体应答

以猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)TH98株N基因的重组质粒pHN为模板，Li-15和Li-2为上、下游引物扩增出TGEVTH98／N基因。将N基因与真核表达载体pcDNA3．1( )分别用BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后连接，构建了重组真核表达载体pcDNA—N。将昆明鼠随机分为2组，分别肌肉注射pcDNA—N和pcDNA3．1( )，每只鼠100μg，共免疫3次，每次间隔2周。首次免疫后第0、14、21、28、35、39、47和54d采血分离血清，采用ELISA检测抗体动态变化。注射pcDNA—N组小鼠在首次免疫后第39d检测到针对TGEVN蛋白的阳性抗体。     

传染性喉气管炎病毒基因疫苗免疫效应

以传染性喉气管炎病毒（ILTV）WG株gB和gD基因为目的基因构建真核表达质粒pCAGG-gB和pCAGG-gD。将75只SPF鸡随机分为7组，经肌肉注射接种pCAGG-gB、pCAGG-gD、pCAGG-gB＋pCAGG-gD、pCAGG-gB＋rFPV-ILTVgB以及rFPV-ILTVgB，并设有生理盐水和空载体（pCAGG）对照组。免疫2周后以500EID50 ILTV WG株强毒进行攻击，以评价ILTV基因疫苗以及基因疫苗和重组病毒联合应用对SPF鸡的免疫保护作用。血清抗体的检测表明：在免疫后的2周，各免疫组的鸡只均产生了特异性的ILTV抗体，外周血CD4^＋T、CD8^＋T、TCRTγδ^＋T细胞明显高于对照组，并且pCAGG-gB和pCAGG-gD分别诱导了高水平的IL-18和IFN-γ的表达。ILTV强毒攻击后，非免疫鸡全部发病，并在第2天出现死亡。而各质粒免疫组均获得了一定的保护（保护率44％），两种质粒联合免疫（pCAGG-gB和pCAGG-gD）和重组病毒（rFPV-ILTVgB）与质粒（pCAGG-gB）联合免疫的免疫组的保护率（56％）高于单独免疫组，产生高水平细胞因子表达的免疫组的保护率高于对照组。重组鸡痘病毒免疫组的保护率（69％）最高。这些结果表明ILTV的DNA疫苗能够诱导鸡体产生特异性免疫应答，并能对传染性喉气管炎强毒的攻击提供一定的免疫保护。     

基因免疫及其在传染病学中的应用

基因免疫及其在传染病学中的应用沈正达（甘肃农业大学动物医学系,兰州７３００７０基因免疫（ｇｅｎｅｔｉｃｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ）又称ＤＮＡ免疫或核酸免疫,是指利用各种方法将带有目的基因的表达载体转化到体内,诱导机体产生抗体并引起特异的免疫应答。基因免...     

成疫病毒F基因疫苗接种剂量的研究

以新城疫病毒Ｆ基因的ｃＤＮＡ与真核表达载体ｐｃＤＮＡ３重组，构建了新城疫病毒Ｆ基因疫茵。采用不同剂量接种ＳＰＦ鸡后，通过抗体监测和强毒攻击试验，分析了其诱导的体液免疫应答及免疫保护作用。结果表明，接种剂量为１００，２００ｕｇ时，试验鸡在免疫后第２周出现较明显的抗体反应，接种剂量为１０ｕｇ时抗体变经不明显。以标准强毒Ｆ４８Ｅ９攻击后，空白对照组及接种剂量为１０，１００ｕｇ组的鸡只全部发病死亡，未获得     

基因疫苗的研究近况

本文综述了基因疫苗的概念、基因免疫的发现、基因疫苗的载体、基因疫苗的免疫学机理、基因疫苗的优越性以及基因疫苗的应用研究概况。并提出了目前基因疫苗在实验研究过程中存在的问题和展望，从而为动物疫病防治提出了新思路。     

规模化猪场猪伪狂犬病攻毒及免疫效果监测

伪狂犬病(PR)是由疱疹病毒引起的多种动物共患的急性传染病。在养猪生产中主要引起种猪不育、妊娠母猪流产、产死胎和木乃伊胎，新生仔猪和断奶仔猪大量死亡，肥猪增重减慢、饲料报酬降低等，给养猪业造成巨大的经济损失。目前该病主要通过疫苗接种进行预防，应用的免疫程序为：妊娠母猪产前30天应用猪伪狂犬病灭活苗免疫；疫区仔猪应用猪伪狂犬病基因缺失弱毒疫苗进行超前免疫或20～25日龄免疫。为验证现行的免疫程序特进行免疫效果监测和攻毒保护实验。