红三叶愈伤组织培养与异黄酮的产生

对红三叶Trifolium pratense下胚轴和子叶进行愈伤组织的培养,结果表明:添加2.0 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L 6-BA的MS培养基最适合诱导愈伤组织。采用紫外分光光度法对愈伤组织总异黄酮含量进行测定,结果发现:愈伤组织中异黄酮的含量明显高于实生苗,子叶愈伤组织中异黄酮的含量比下胚轴愈伤组织中的高,且差异显著(P<0.05)。     

红三叶总异黄酮提取研究

本研究采用乙醇溶剂浸提,结合超声波辅助提取豆科牧草红三叶中的异黄酮。通过对提取剂乙醇浓度、提取温度、提取时间和料液比4因素3水平的正交试验,得出苜蓿异黄酮最佳提取条件为:预浸8h,乙醇浓度70%,料液比1∶25,提取温度70℃,提取时间1h。在此条件下红三叶异黄酮的提取量为24.6mg/g,粗提物得率为24.74%,粗提物纯度为5.99%。     

亚临界水法提取红三叶中的总异黄酮

应用亚临界水法对红三叶(Trifolium pratense)总异黄酮的提取工艺进行优化,选择提取温度、液料比、提取时间、提取压力等因素分别进行单因素和正交试验。结果表明,提取温度为120 ℃,提取时间为15 min,液料比为40 mL·g-1,压力为1.4 MPa条件下,异黄酮提取效果最佳,此时红三叶总异黄酮得率为33.61 mg·g-1。     

基因型对红三叶异黄酮含量的影响

采用高效液相色谱法,对4个不同红三叶品种的异黄酮含量进行了分析,发现基因型对红三叶的异黄酮总含量影响显著,4个供试材料的异黄酮总含量为:新品系R-1>瑞德>岷山>多丽.基因型对红三叶各异黄酮单体含量变化影响不同,对大豆黄素含量的变化影响最大,对刺芒柄花素含量的变化影响最小.红三叶积累刺芒柄花素的能力最高,其次是鹰嘴豆芽...     

近红外预测红三叶异黄酮含量的模型研究

应用偏最小二乘法建立红三叶（Trifolium pratense）多种异黄酮及总异黄酮定量分析的近红外模型。用验证集对模型的预测性能进行了评价。结果表明：黄豆黄苷、芒柄花黄素及总异黄酮的模型预测效果较理想。其中,黄豆黄苷模型系统偏差为-0.007,相关系数为0.83,芒柄花黄素模型系统偏差为0.010,相关系数为0.91,总异黄酮模型系统偏差为-0.185,相关系数为0.90。     

不同生长时期红三叶异黄酮含量变化的研究

采用紫外分光光度法对不同时期红三叶的叶(叶片,叶柄和托叶)、茎、根、花等器官中的异黄酮含量进行测定,结果发现:所测的4种器官中均含有异黄酮;叶片,叶柄和托叶中异黄酮含量均在3月29日最高,分别为1.633μg/mg,1.184μg/mg,5月17日异黄酮含量最低,分别为0.646μg/mg,0.438μg/mg。茎、根、花3个部位异黄酮含量均在5月8日最高,依次为0.750μg/mg,0.895μg/mg和0.906μg/mg,5月17日含量最低,分别为0.321μg/mg,0.441μg/mg和0.450μg/mg。各个时期异黄酮含量均以叶片中最高,花次之,然后是根,茎、叶柄和托叶。     

不同产地黄芪中黄芪总糖含量测定

目的：比较不同产地黄芪中黄芪总糖的含量差异。方法：对黄芪样品进行煎煮处理,提取黄芪总糖成分,按照部颁黄芪多糖含量测定方法,利用紫外分光光度法测定其总糖的含量。结果：甘肃产黄芪总糖含量最高为19-3％。结论：不同产地黄芪中黄芪总糖的含量差异较大,可能与其产地、采收时间有关。     

沙葱异黄酮含量测定方法的研究

比较紫外分光光度法和高效液相色谱法测定沙葱异黄酮的含量,建立沙葱异黄酮含量测定的最佳试验方法。两种试验方法均以鸢尾苷为对照品,紫外分光光度法在其最大吸收峰295nm处进行测定。高效液相色谱法以Intertsil ODS-SP C18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为30%乙腈,柱温25℃,流速0.5ml/min,进样量10μl,检测波长295nm。试验结果表明,紫外分光光度法中,沙葱异黄酮含量比高效液相色谱法结果高出46%,相对标准偏差为5.7%,平均加样回收率为98.75%;高效液相色谱法中,沙葱异黄酮含量为4.320mg/kg,相对标准偏差为0.26%,平均加样回收率为99.99%。紫外分光光度法简便、快速,但测定误差大。高效液相色谱法虽然复杂,但比紫外分光光度法准确。     

红三叶异黄酮抗氧化功能及其药理作用研究进展

红三叶为豆科三叶草属植物,广泛分布于世界各地。在全面综述红三叶主要成分异黄酮的抗氧化功能及其药理作用研究进展基础上,展望其进一步开发应用前景,旨在为相关科研、医药生产单位及其深加工提供重要参考。大量研究结果表明,红三叶中含有多种异黄酮类物质,这些物质不但具有抗氧化性等多种生理活性,而且具有弱的雌激素样作用和促进动物生长、抑制癌细胞等多种生理功能,对于预防乳腺癌、前列腺癌、改善骨质疏松和改善妇女更年期症状等有一定的作用,说明红三叶异黄酮是一种极具开发前景的天然药物,具有潜在的预防疾病的作用,将会得到更广泛的关注。     

岷山红三叶总异黄酮提取方法的研究

为选择提取岷山红三叶中总异黄酮的最佳方法,本文研究了用回流法、冷浸法和索式提取法提取岷山红三叶中总异黄酮的效果.通过紫外分光光度法测定提取液中的总黄酮含量,结果表明:回流提取法提取效果优于冷浸法和索式提取法.具有安全、简便和提取率高的优点.     

红三叶寡肽酶解制备工艺研究

本试验以水解度为指标研究不同蛋白酶对红三叶叶蛋白的水解作用.通过单酶筛选试验确定了中性蛋白酶Ⅱ(来源于1398枯草芽孢杆菌)为最佳水解酶,进一步的单因素试验和正交试验结果表明,酶解最佳工艺条件为酶解温度40 ℃,pH值7.6,酶活添加量5000 U/g,底物浓度1%,酶解时间3 h.     

地锦草总黄酮提取工艺研究

运用正交试验优化超声粉碎地锦草细胞的最佳条件,采用超声-加热回流-大孔树脂吸附的工艺流程提取分离纯化地锦草总黄酮。结果表明,超声波提取地锦草总黄酮的最佳工艺以料液比为1∶20,70%的乙醇为提取溶剂,60℃超声提取35min,影响超声提取效果大小的因素依次为提取时间〉溶剂浓度〉料液比〉提取温度;100g地锦草干燥全草提取纯化得到黄褐色粉末3.679g,经多种化学试剂鉴定,均呈明显的黄酮反应。     

藏药绿萝花总化学成分水提工艺试验

为了确立藏药绿萝花总化学成分的水提工艺,给绿萝花药理研究和开发利用提供研究材料。采用L9(34)正交表设计试验,结合单因素考察,对药材浸泡时间、加水量、煎煮时间和煎煮次数4个影响因素进行优化。结果以水提后的总化合物干膏重量为评价指标,最终确定水提工艺为:浸泡时间0.5 h,加水量20倍,加热时间1 h,煎煮次数3次。表明水提工艺组合稳定可靠,水提干膏平均收率为23.11%(23.12%、23.17%、23.05%),均接近正交方案中的最高值。     

槟榔碱提取分离工艺的研究及其含量测定

用稀盐酸从槟榔生药中提取槟榔碱（Arecoline）,将提取物依次用乙醚、高浓度酒精溶解过滤,然后和适量的氢溴酸反应制成氢溴酸盐,用薄层层析鉴定氢溴酸槟榔碱,用高效液相测定其含量,熔点熔程法鉴定纯度。结果稀盐酸提取法提取槟榔碱在成本和提取率方面均明显优于高浓度酒精提取法。     

基于改进遗传神经网络的紫花苜蓿总黄酮提取工艺参数优化

针对回归分析方法优化紫花苜蓿总黄酮提取工艺参数存在的问题,提出一种改进的遗传神经网络优化方法,该方法利用区间自适应遗传算法自动调整搜索区间的特点,彻底取代神经网络反向传播过程调整权值和阈值。以紫花苜蓿总黄酮提取率为性能指标,选取液料比、提取时间、提取温度和乙醇浓度4个工艺参数为试验因素,依据4因素5水平正交旋转组合试验数据建立学习样本,训练遗传神经网络。当神经网络训练误差达到4.34×10^-9时,遗传神经网络算法的平均相对误差为0%,而回归模型的平均相对误差为0.58%,拟合精度和拟合优度明显优于回归模型。用训练好的遗传神经网络算法优化紫花苜蓿总黄酮提取工艺参数,获得最优工艺参数为:取液料比53.26 mL/g、提取温度70.96℃、提取时间50.32 min、乙醇浓度为60%,紫花苜蓿总黄酮提取率达到最大值6.51 mg/g。     

苦豆子总碱对小鼠急性毒性试验研究

采用改良寇氏法测定苦豆子总碱提取物对小鼠腹腔注射的急性毒性,评价其安全性,为临床安全用药提供依据。给试验组小鼠灌服不同浓度的苦豆子总碱提取物,观察给药后小鼠的临床表现与死亡情况,采用改良寇氏公式计算LD50及LD50的95%可信限,结果表明,苦豆子总碱经腹腔注射的LD50为559.24 mg/kg,95%可信限为471.95-663.59 mg/kg。试验结果提示,苦豆子总碱的毒性较低,临床用药安全可靠。     

荔枝果皮总RNA提取方法的筛选

以三月红荔枝果皮为试验材料,通过采用改良CTAB法、SDS法、改良SDS法、改良Bugos法和RNAplant plus Reagent试剂盒（TIANGEN公司）提取总RNA,采用浓度检测、纯度检测、RT-PCR等方法进行提取结果检测,进而筛选出最佳的提取方法。结果表明,这五种方法都能从三月红荔枝果皮中提取出总RNA,但总RNA浓度和纯度有明显的差异。其中采用改良Bugos法、改良SDS法和RNAplant plus Reagen试剂盒提取RNA的浓度较高;采用改良CTAB法和RNAplant plus Reagen试剂盒提取的总RNA纯度较高,完整性较好。采用SDS法、改良SDS法和改良Bugos法所提取的荔枝果皮总RNA纯度低,降解严重。经RT-PCR验证,采用改良CTAB法和RNAplant plus Reagen试剂盒均能扩增得到200bp的18sRNA编码基因片段。综合以上各项检测的结果,改良CTAB法为提取荔枝果皮总RNA的最佳方法,总RNA质量和得率满足后续分子生物学实验的需要。     

金丝桃素的提取纯化工艺研究

用乙醇从贯叶连翘中提取金丝桃素并对其进行纯化,考察了金丝桃素的工艺流程.用乙醚作为除杂剂,用乙醇热浸贯叶连翘,后浓缩浸提液为浸膏;用热水溶解浸膏,乙酸乙酯萃取,浓缩萃取液为浸膏(粗提物).然后再用乙醇溶解,利用树脂柱层析分离纯化金丝桃素,减压浓缩洗脫液,干燥,即得金丝桃素产品.经HPLC测定,结果表明:该产品中金丝桃素的含量高达1.2% ;该工艺不但有效改善了金丝桃素产品易吸湿、易发粘的缺点,而且具有操作简单,经济易行的特点.