毛百合×有斑百合种间杂种的育成

以毛百合（Lilium dauricum）为母本、有斑百合（L.concolor var.pulchellum）为父本进行常规杂交,通过胚培养成功获得了种间远缘杂交种,对种间杂交亲和性、胚培养和杂种的形态特征进行了调查研究。结果表明：毛百合×有斑百合蒴果膨大率达46.1%,种子有胚率为1.30%,胚培养萌发率为15.2%;4个杂交后代生长旺盛,株高表现出较明显的超亲现象,其他性状呈趋中趋势,杂种植株的花色更偏向橙色。4个杂交后代虽然在花色上与亲本有一定差异,但其它性状均具有双亲的特征,从形态上能证明是真杂种。     

玫红百合为亲本育成百合种间杂种

玫红百合(Lilium amoenum Wilson ex Sealy)是起源于中国的珍稀百合。本试验以王百合和麝香百合为母本与玫红百合进行了种间杂交。以花柱内授粉和幼胚离体培养法得到了王百合×玫红百合杂种F_1和麝香百合×玫红百合杂种F_1。通过染色体组型分析确认了杂种的真实性。杂种王百合×玫红百合杂种F_1花朵为粉红色、株矮,可供盆栽,花粉不育。麝香百合×玫红百合杂种F_1花色淡粉红,诱导成多倍体后花粉可育,可作为进一步杂交的亲本。     

静电场处理对樱桃远缘杂交亲和性及杂种胚萌发生长的影响

以甜樱桃为母本、中国樱桃为父本进行了种间远缘杂交,研究了静电场对远缘亲和性及杂种胚萌发生长的影响,并用流式细胞仪对杂种的真实性进行了鉴定。结果表明,1)用强度为333~434 kV.m-1的静电场处理花粉对提高樱桃远缘杂交坐果率、克服杂交不亲和性具有明显作用;2)用场强为333~474 kV.m-1的静电场处理后的花粉进行樱桃远缘杂交,在胚抢救过程中,其杂种胚的萌发生长率、生长状况及多丛芽诱导与增殖能力等均明显高于对照,表明适宜场强的静电场处理确实对杂种胚萌发生长以及多丛芽的诱导与增殖具有积极作用;3)研究发现,MS+6-BA 0.6 mg.L-1有利于减少胚芽梢继代增殖过程中的玻璃化现象,是樱桃远缘杂种胚多丛芽诱导与增殖的适宜培养基;4)通过流式细胞仪进行的倍性鉴定结果表明,所测杂种1号和杂种2号均是倍性为三倍体的真杂种。研究进一步优化了樱桃远缘杂交的胚抢救体系。     

毛百合×有斑百合种间杂种的育成

以毛百合(Lilium dauricum)为母本、有斑百合(L.concolor var.prlchellum)为父本进行常规杂交,通过胚培养成功获得了种间远缘杂交种,对种问杂交亲和性、胚培养和杂种的形态特征进行了调查研究.结果表明:毛百合×有斑百合蒴果膨大率达46.1%,种子有胚率为1.30%,胚培养萌发率为15.2%;4个杂交后代生长旺盛,株高表现出较明显的超亲现象,其他性状呈趋中趋势,杂种植株的花色更偏向橙色.4个杂交后代虽然在花色上与亲本有一定差异,但其它性状均具有双亲的特征,从形态上能证明是真杂种.     

李杏远缘杂交胚抢救体系的建立

以蜜李为母本,分别以龙园甜杏、龙园桃杏、山杏为父本进行远缘杂交,调查了杂种胚败育的时间,对最适宜胚抢救技术体系进行了研究。结果表明,不同李、杏远缘杂交组合坐果率存在差异,均表现为随发育周数增长而降低,杂种胚败育发生在授粉后第3周。在远缘杂交胚抢救体系中,MS为适宜基本培养基,外植体褐化率最低;杂交授粉后35天(PF值>0.5)为适宜胚抢救时间;不同杂交组合杂种胚培养所需要的植物生长调节剂配比不同。杂种胚培苗扦插生根移栽成活率高(60.0%),好于组织培养生根(移栽成活率30.2%)。     

简讯

山东农业大学获植物育种专利据山东农业信息网报道,由山东农业大学园艺学院陈学森教授等研发的“利用远缘杂交创造核果类果树新种质的三级放大法”,近日被国家知识产权授予发明专利。该发明提供了一种克服核果类果树远缘杂交不亲和及远缘杂种不育的系统方法,即将物理手段、有性杂交、组织培养及分子生物学技术科学集成的三级放大法。其主要特征是运用氦氖激光和负高压平板静电场处理李、杏和樱桃等的花粉,通过培养基专用配方培养幼胚苗、多丛芽胚培苗和生根胚培苗,并利用分子生物学技术对杂种胚培苗进行早期鉴定。目前,研究人员已利用该方法…     

果树远缘杂交育种研究进展

远缘杂交是指种或属间及亲缘关系更远的分类单位间进行的杂交,它是创造果树新种质的重要途径。简要列举了果树远缘杂交育种取得的主要成就,阐述了远缘杂交不亲和和育性障碍的若干表现与机制。目前克服杂交障碍的途径有:蕾期授粉、混合花粉、重复授粉、亲本选择、特殊处理、胚抢救和染色体加倍等。杂交后代遗传变异分为3种类型:综合性状类型、亲本性状类型和新物种类型。杂交后代的早期鉴定方法有形态鉴定、染色体鉴定、同工酶鉴定和分子鉴定。果树远缘杂交育种虽然困难很多,但前景非常广阔,今后的重点是深入研究远缘杂交不亲和和育性障碍的机理和有效的克服途径,并借助分子标记技术对杂种进行早期鉴定以及对复杂遗传规律进行深入研究。     

亲本品种对樱桃远缘杂交亲和性及胚抢救的影响

以3个甜樱桃品种为母本,3个中国樱桃品种为父本进行了种间远缘杂交,并对所得到的杂种成功地进行了胚抢救,探讨了不同亲本品种对大樱桃远缘杂交亲和性及其胚抢救的影响。结果表明,(1)不同杂交组合的坐果率差异显著,在同一母本的杂交组合中,均以五莲红樱桃作父本的杂交组合坐果率最高(≥4.14%);而以红灯为母本与3个父本品种杂交的平均坐果率高于那翁和先锋为母本的相同杂交组合的平均坐果率;(2)不同亲本品种的杂种胚萌发生长率与多丛芽增殖系数存在显著差异,其中在参试的3个父本品种中,以五莲红樱桃表现最好;(3)经过生根培养,已经成功地将一批杂种胚培苗移栽到大田。     

百合‘白天使’与山丹远缘杂交胚胎发育的细胞学研究

采用石蜡切片法对以亚洲百合品种‘白天使’为母本,野生种山丹为父本杂交后不同发育时期的胚珠进行制片观察,发现白天使×山丹远缘杂交受精和胚胎发育过程比较复杂,共有4种情况,即:不能完成受精,胚囊成员细胞最后解体;卵受精,只产生胚而无胚乳;极核受精,只产生胚乳而无胚;完成双受精,产生了胚和胚乳。百合杂种胚发育经过合子、原胚、球形胚、偏梨形胚、棒状胚阶段。偏梨形胚之前,胚的发育所需要的营养主要是通过胚柄从珠心和珠被中吸收。当胚体内部开始分化,外形呈棒状,胚柄解体。此后胚发育所需的营养则主要由胚乳细胞提供。百合胚乳发育为核型。杂种胚败育的可能原因是胚没有得到胚乳的哺育,这样的胚最多发育到球形胚阶段;其次是胚乳发育缓慢或停止,最后导致胚的夭折。该杂交组合授粉后45d,是进行胚抢救的最佳时期。     

亚洲百合与东方百合远缘杂交花粉管生长荧光观察及胚培养

以亚洲百合杂种系的3个不同倍性品种"布鲁拉诺"(‘Brunello’,4x)、"耀眼"(‘Dazzling’,3x)和"多安娜"(‘Pollyanna’,2x)与东方百合杂种系的2个二倍体品种"西伯利亚"(‘Siberia’,2x)和"索邦"(‘Sorbonne’,2x)为试材,采用荧光显微镜观察法和胚培养法,研究了亚洲百合与东方百合几个品种正反交授粉后花粉萌发及花粉管生长过程和不同方法处理幼胚对胚萌发及幼苗生长的影响,以期获得亚洲百合与东方百合远缘杂交新品种。结果表明:除"耀眼"外,杂交中其它百合品种柱头上的花粉均能萌发并形成花粉管,但多数花粉管在授粉72h后表现出顶端膨大、缠绕折叠或出现胼胝质等异常现象,只有少量花粉管到达子房。其中,"布鲁拉诺"×"西伯利亚"、"布鲁拉诺"×"索邦"、"索邦"×"布鲁拉诺"和"索邦"×"多安娜"组合花粉管在授粉120h后到达子房;而"西伯利亚"×"布鲁拉诺"、"西伯利亚"×"多安娜"、"多安娜"×"索邦"和"多安娜"×"西伯利亚"组合中,花粉管生长缓慢甚至在花柱中停止生长,授粉120h后仍未伸向子房。同时,通过胚培养获得了种间杂种,胚培养时以授粉后40d左右胚龄为宜;最佳幼胚处理方法为剥离种皮和胚乳,只取幼胚的方法;MS+NAA 0.01mg·L~(-1)+BA 0.1mg·L~(-1)是胚培养的最适培养基。     

桃远缘杂种的获得及杂种胚抢救技术

以桃为母本, 与经过处理的李、杏花粉进行远缘杂交, 成功地对杂种幼胚进行了胚抢救, 并对部分杂种进行了分子鉴定。研究表明, 在以‘雨花露’为母本的杂交组合中, 杂种胚的败育发生于授粉后第7周, 而以‘中华寿桃’为母本的杂交组合中, 杂种胚的败育开始于授粉后第8周; 以早熟桃品种‘雨花露’为母本的杂种胚PF (胚长/种子长) 值为0.5时幼胚萌发率仅为6.7% , 而以晚熟品种‘中华寿桃’为母本的杂种胚PF值为0.5时幼胚萌发率却大于50%; 适宜场强的静电场处理父本花粉后可显著提高杂种胚培苗多丛芽诱导增殖效率, 而父本花粉经过⁶⁰Coγ射线照射后得到的胚培苗, 多丛芽诱导效果较差, 组培苗长势较弱; 在胚抢救技术体系中, 杂种胚最佳萌发及生长培养基为1 /2MS + 6-BA 4 mg·L^-1 +IBA 0.5 mg·L^-1 , 胚萌发及分化率达90%; 最佳多丛芽诱导及增殖培养基为MS + 6-BA 1.0mg·L^-1 + IBA1.0 mg·L^-1 , 最佳生根培养基为MS + IAA 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.2 mg·L^-1 ; SSR技术对杂种鉴定结果表明, 所获杂种为真杂种。     

普通枇杷种内和种间杂种苗的RAPD鉴定

枇杷同其他木本果树一样,遗传上是高度杂合的,因此,获得真杂种是进行杂交育种等遗传改良的重要基础工作。以我国的特早熟优质枇杷品种早钟6号作母本,分别以西班牙的3个大果型品种作父本进行种内杂交;并以栎叶枇杷为母本与普通枇杷的解放钟作父本进行远缘杂交,4个杂交组合(ZJ、ZU、ZP和Lj)共获得493株杂种苗。运用RAPD分子标记,对这些杂交苗进行早期杂种鉴定,根据有无父本的特征带或新带型来鉴定其是否杂交成功,4个组合从100条RAPD引物中共计筛选出9条具有父本特征带的引物,鉴定454株杂种苗为真杂种。试验获得的真杂种苗可为枇杷品种的选育提供重要资源。     

基于SRAP标记的百合部分种及品种遗传结构分析

 筛选了15对SRAP（Sequence-related Amplified Polymorphism）标记引物,对80个百合种及品种组成的样本进行标记,以所获的144个多态性位点和杂交试验获得的胚数,采用Pritchard分类方法对80个样本进行遗传结构分群分析。将试验样本划分为4个群,群体S1以亚洲百合杂种系的品种及原生种为主,群体S2以铁炮百合系的品种为主,群体S3以东方百合系的品种及原生种为主,群体S4则以OT杂交品种及原生种（S4）为主组成群,分群结果与传统百合杂种系的分类有一定的一致性;以S3群内部分样本杂交获得的胚数量作为亲和性指标与双亲群组分差异相关分析显示：群内双亲群组分差异绝对值与杂交获得胚的数量呈显著相关,表明分群及其组分能够比传统分类更好地体现出各样本间的主成分组成和遗传关系。据此,在百合杂交育种中可将分群以及组分作为亲本选配参考。     

利用远缘杂交创造核果类果树新种质的研究

以桃、杏、李、樱桃、杏梅等果树的 1 4个品种为亲本 ,3年来共进行了 80余个组合的远缘杂交试验 ,探讨了核果类果树远缘杂交的亲和性 ,并对远缘杂种幼胚进行了胚抢救。结果表明 ,铃铛花期授粉的坐果率显著高于初花期授粉 ;同一杂交组合 ,正反交坐果率差异显著 ,母本对远缘杂交亲和性影响很大 ,选择自交亲和或自然坐果率高的种或品种做母本容易克服远缘杂交的不亲和性 ;适宜场强的静电场、He -Ne激光处理及60 Coγ射线与He -Ne激光联合处理花粉 ,均能显著提高花粉离体萌芽率 ,用上述处理的花粉进行的远缘杂交坐果率也明显高于对照 ;60 Coγ射线单独处理则降低了花粉离体萌芽率 ,远缘杂交的坐果率也低于对照 ;对远缘杂种幼胚及时地进行胚抢救 ,并诱导形成多丛芽 ,是克服核果类果树远缘杂种不育性的有效方法。研究并筛选出了李、樱桃胚萌发与生长、多丛芽诱导与增殖以及生根培养等最佳培养基配方。目前已将欧洲甜樱桃×中国樱桃、大石早生李×泰安巴旦水杏及凯特杏×总统李等一批核果类果树远缘杂种定植于露地 ,其中欧洲甜樱桃与中国樱桃的种间杂种是国内外首次获得     

大白菜远缘杂交研究进展

对大白菜与不同属间以及属内种间植物的远缘杂交研究进行了综述,指出大白菜远缘杂交育种中存在的远缘杂交不亲和,杂种不育和后代变异复杂等主要问题以及克服方法,并对大白菜远缘杂交研究进行了展望。     

百合子房培养胚培养及杂种鉴定

栽培的百合,除新太保品种外,个体和百合片繁殖得到的个体1年不开花.用球根切花栽培,虽然球根费比率大,但高沙五、新太保百合的实生个体播种1年后具有开花性状.把这一性状导入其他百合,能够降低切花栽培的球根费比率.由于以往的杂交法难以获得杂种个体,因此以高沙五、新太保百合作母本,其他百合作父本,通过节间杂交培育个体,开发了包括培养技术的胚培养法,研究了有关组合杂交个体的早期确认法.(一)胚培养1、胚培始期:把园沙迈、中仙姬和新太保3种百合的种内受精胚每隔7日摘出培养,无论哪种百合,授粉35日后胚培养都能得到植物体,授粉40日后,胚的长度约0.8mm.通过胚培养培植的胚约20 %—30%成为植物体,授粉50日后,胚的长度1mm以上,中仙姬、新太保培养的胚大部分生育,而园沙迈培养的胚,有30%—40%不能生育.     

百合种间杂种胚离体培养研究

以不同百合种间杂交获得的幼胚为外植体进行离体胚培养,观察不同百合种间杂种胚的萌发和生长情况,并筛选适合百合种间杂种胚萌发、增殖和生根的培养基.结果表明,在所有的杂交组合中,渥丹×卷丹的萌发率最高,达到96.1%,兰州百合×渥丹的萌发率最低,为9.4%.最适合百合种间杂种胚萌发的培养基为MS BA0.1mg/L NAA0.01mg/L,杂种幼苗最佳增殖培养基是MS NAA0.01mg/L BA0.5～0.75mg/L.在培养基1/2MS 0.1%活性炭中杂种幼苗的生根情况最好.杂种幼苗沙床扦插成活率可达到90%以上.     

甜瓜与非洲角（Cucumis africanus）远缘杂交诱导甜瓜双单倍体

【目的】利用远缘杂交诱导培育具有优良特性的甜瓜（Cucumis melo L.）双单倍体。【方法】选择薄皮甜瓜（C. melo ssp. agrestis）超甜小麦酥作为母本,与远缘野生种非洲角（C. africanus）进行杂交,然后进行胚拯救获得再生植株;利用SSR标记和植物学性状综合鉴定其双单倍体特性;测定双单倍体的一些果实性状。【结果】对超甜小麦酥与非洲角杂交获得种胚进行组培,获得1株再生苗,再生胚产率为0.56%;SSR和表型鉴定表明该再生植株为双单倍体。双单倍体的节间长度、叶片大小和可溶性固形物含量与对照品种差异显著,其果实比受体母本更甜;而且其自交的结籽率和种子的发芽率与对照品种差异不显著。【结论】甜瓜与非洲角远缘杂交可以诱导获得优良的薄皮甜瓜双单倍体,且可以通过种子繁殖保存。     

采用胚挽救获得Ogura CMS甘蓝与甘蓝型油菜的种间杂种

为将甘蓝型油菜细胞质雄性不育系(Ogura CMS)的恢复基因转至甘蓝Ogura CMS材料上,以6份甘蓝Ogura CMS材料为母本,以含恢复基因的甘蓝型油菜为父本,人工杂交结合胚挽救培养,研究取材时期、培养基成分和杂交组合对胚珠成苗的影响,同时对胚挽救培养获得的植株是否为真实F1杂种进行鉴定。结果发现,胚珠培养以剥蕾授粉后16d取材时胚珠成苗数最多,成苗率为4.56%;培养基以MS+GA 0.1 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+0.5%水解酪蛋白(CH)+0.5%活性炭(AC)成苗效果最好,成苗率高达6.24%;M09CMS×RFO-46组合成苗数最多,成苗率为5.96%。67株胚挽救培养得到的植株经流式细胞仪、SSR分子标记和形态学鉴定,得出65株为真杂种,真杂种率高达97%。     

杨梅种间杂交及杂种F_1的胚培养

在杨梅属的杨梅种和矮杨梅种之间进行了人工远缘杂交,然后对其杂交F1代成熟种子作了胚培养研究,并用SSR分子标记对杂种的真实性进行了鉴定。结果表明,杨梅种和矮杨梅种有着较好的杂交亲和性,以杨梅种为母本、矮杨梅种为父本的F1杂交种中,70.5%的种子胚正常发育;以矮杨梅种为母本、杨梅种为父本的F1杂交种中,76.5%的种子胚发育正常。用MS添加0.5mg·L-1的6-BA培养基对矮杨梅种(♀)×杨梅种(♂)和杨梅种(♀)×矮杨梅种(♂)2个F1杂交组合以及杨梅品种晚稻杨梅(WD)、迟色(CS)等4份材料的胚培养中,绿苗诱导率分别为85.0%、28.6%、6.9%、0.0。在1/2MS添加0.5mg·L-1IBA的生根培养基中,矮杨梅种(♀)×杨梅种(♂)和杨梅种(♀)×矮杨梅种(♂)F1绿苗的生根率分别为29.2%和33.3%。SSR分子标记对杨梅种(♀)×矮杨梅种(♂)F1的鉴定表明杂交后代为真杂种。研究结果为杨梅育种提供了新的途径,并为杨梅遗传连锁作图研究的群体构建奠定了技术基础。