蛹虫草培养基对海兰褐蛋鸡蛋品质的影响

在饲料中添加0.5％、1％的蛹虫草培养基,与对照组相比,研究24周龄海兰褐蛋鸡蛋品质的变化.试验共90只鸡,随机分为3组,每组3个重复,每个重复10只鸡.预试期5 d,正试期20 d.结果:添加蛹虫草培养基后试验组与对照组相比,蛋形指数变化不明显,但平均蛋重、蛋壳厚度、蛋壳强度有所增加.试验组的蛋黄相对重、哈氏单位、蛋...     

不同培养基培育蛹虫草中的虫草素和腺苷含量测定

虫草素和腺苷是蛹虫草的重要活性成分,通过高效液相色谱(HPLC)法测定不同培养基培育蛹虫草中的虫草素和腺苷含量,筛选能生产高品质蛹虫草的培养基。测定结果表明,用不同培养基培育的蛹虫草子实体中,其虫草素和腺苷含量存在显著差异,总体表现为粳米+家蚕蛹浸提液培养基>糯米+家蚕蛹浸提液培养基>粳米培养基>糯米培养基,其中用粳米+家蚕蛹浸提液培养基培育蛹虫草子实体中的虫草素和腺苷质量比分别高达15.37 mg/g和39.96 mg/g。此外,相同培养基培育的蛹虫草子实体、菌丝体和培养基质中的虫草素与腺苷含量存在极显著差异,总体表现为子实体>菌丝体>基质。试验结果表明,粳米培养基中添加家蚕蛹浸提液可显著提高蛹虫草中的虫草素和腺苷含量。     

不同品种柞蚕蛹培育蛹虫草其性状与成分含量比较

选择5个不同品种柞蚕蛹培育蛹虫草,通过观察检测柞蚕蛹虫草的生产性状、主要成分含量及SOD酶活力,为培育高品质的柞蚕蛹虫草筛选出更适宜的柞蚕品种提供依据。不同品种柞蚕蛹培育的蛹虫草其生产性状、主要成分含量及SOD酶活力均有差异,其中582和抗大的僵化率均在95%以上,子实体数量及鲜草重也明显高于其他品种(P<0.01),分别为23.7根和9.15 g, 22.36根和9.07 g;氨基酸总量和必需氨基酸质量分数从高到低依次为抗大、582、9906、青一、988;虫草素含量最高的是582,达到1 435 mg/kg,其次是9906,为1 320 mg/kg;腺苷含量最高的是988,达到1 070 mg/kg,其次是抗大,为1 021 mg/kg;虫草酸含量由高到低依次为582、抗大、988、青一、9906;虫草多糖含量最高的是抗大,9906品种最低;582品种的蛹虫草中SOD酶活力最高,达到394.0 U/g,其次是抗大,为313.0 U/g, 988最低,为274.0 U/g。初步认为,培育柞蚕蛹虫草最好选择582、抗大或9906柞蚕品种,可以生产出更高品质的蛹虫草。     

吖啶橙诱变提高蛹虫草虫草素含量的研究

蛹虫草的活性成分与冬虫夏草基本相同,常被用作冬虫夏草的替代品。虫草素是虫草属特有的次生代谢产物,具有很高的药用价值。为提高虫草素含量,应用吖啶橙对蛹虫草无性型孢子进行诱变,筛选虫草素含量高的突变菌株,并对获得的稳定遗传的突变株进行再诱变,经二次诱变得到的突变菌株其虫草素含量可达290.60mg/L,比初发菌株提高了7.4倍。     

蛹虫草中虫草素差异表达基因cDNA的克隆

采用抑制差减杂交技术（Suppression Subtractive Hybridization,SSH）分离与虫草素合成相关的差异表达基因的cDNA片段,为克隆相关基因提供研究基础。对虫草素表达产生的差异进行基因水平的分析,做了双向调控的分析,即以高表达虫草素的突变型菌株作为检测子,以未作移码诱变处理的出发野生型菌株作为驱动子,同时,以未作移码诱变处理的出发野生型菌株作为检测子,以高表达虫草素的突变型菌株作为驱动子。经过消减杂交后得到一组正调控基因片段的克隆,并对该组克隆进行了序列测定。     

发酵生产蛹虫草饲料添加剂的培养基优化

以多糖含量为发酵指标,通过单因素试验和正交试验对蛹虫草菌丝体发酵生产生物饲料添加剂的培养基组成进行优化。结果表明:最佳培养基组成为玉米粉4%,蚕蛹粉2%,MgSO40.04%,KH2PO40.15%,胞外多糖含量为10.14 g/L。     

用不同蛹虫草菌株和家蚕品种幼虫覆土栽培蚕蛹虫草的试验

采用覆土培育的方法人工栽培蚕蛹虫草,在相同的培育环境条件下以6株蛹虫草菌(Cordyceps militaris)菌株和4个家蚕品种的5龄第6天幼虫供试,筛选合适的菌株和蚕品种。同一个家蚕品种的幼虫接种不同蛹虫草菌株的感染率差异显著;接种相同蛹虫草菌株120 h时,家蚕二元杂交组合与四元杂交组合幼虫间的感染率差异显著,至168 h,仅接种菌株H24的2个家蚕二元杂交组合间幼虫的感染率差异显著,各家蚕品种幼虫接种其余菌株的感染率已无显著差异,家蚕品种7532×湘晖的幼虫接种菌株LP4的感染率最高达到93.33%,并且该菌株对4个家蚕品种幼虫的感染能力显著高于其他菌株。不同菌株接种各家蚕品种幼虫的发菌率无显著差异。各家蚕品种幼虫接种菌株H24和H7未获得子实体,接种菌株H10和LP4的出草率最高,平均值分别为84.73%和88.70%。供试菌株和家蚕品种均显著影响蚕蛹虫草中3种活性成分的含量,并且菌株的影响更显著:以菌株L2接种7532×湘晖的幼虫培育蚕蛹虫草中的虫草素含量最高;以菌株H0接种932·芙蓉×7532·湘晖的幼虫培育蚕蛹虫草中的腺苷含量最高;以菌株H0接种洞·庭×碧·波的幼虫培育蚕蛹虫草中的虫草多糖含量最高。综合各项试验成绩初步认为:蛹虫草菌L2菌株和LP4菌株具有较高的生产应用价值;家蚕品种直接影响菌株的感染速度,对培育蚕蛹虫草中活性成分的含量也有一定影响。     

利用蚕虫草培育过程的优化以提高虫草素产量的研究进展

蚕虫草是冬虫夏草的最佳替代品之一,其虫草素的含量高于冬虫夏草中虫草素的含量,而虫草素具有重要的药用价值,如何提高虫草素的产量一直是研究者关心的问题之一.本文基于过去的相关研究,对利用蚕虫草培育过程的优化来提高虫草素产量的具体方法进行阐述、分析、总结和讨论.     

采用固相分离与反相色谱法制备柞蚕蛹虫草虫草素

虫草素是蛹虫草中具有药用功能的活性成分。采用超声波技术获得柞蚕蛹虫草虫草素萃取液后,利用固相萃取柱对虫草素进行预分离,再利用反相制备型高效液相色谱监测制备虫草素。试验结果表明,采用固相萃取柱可以高效地分离柞蚕蛹虫草萃取液中的虫草素,虫草素洗脱液中的虫草素质量分数达47.05%,经反相高效液相色谱监测制备的虫草素样品纯度达到99%以上,其萃取、分离、制备工艺简单,具有实用价值。     

人工培养蛹虫草与冬虫夏草的主要活性成分比较

蛹虫草为珍稀中药材,基于为培养出含有类似天然冬虫夏草主要活性物质的蛹虫草提供基础依据的目的,对人工培养蛹虫草及菌丝体、子实体和冬虫夏草及菌丝体中的氨基酸、多糖、虫草素等活性物质含量与组成进行了测定,结果表明:人工培养蛹虫草与冬虫夏草在氨基酸种类上完全一致,但人工培养蛹虫草中赖氨酸、酪氨酸含量显著升高,组氨酸则显著降低;二者组成的多糖基本一致,但冬虫夏草特有一个分子质量约100 kD的组分,该组分占多糖总量的1.38%,人工培养的蛹虫草的虫草素含量显著高于冬虫夏草。以上成分的细微变化是否是造成二者药理活性差异的原因还有待研究。     

蛹虫草培养残基中虫草素的水热回流提取及含量测定

【目的】 探究水热回流法提取蛹虫草培养残基中活性成分虫草素的最佳工艺参数。【方法】 选取液料比、提取次数、提取温度、提取时间4个因素进行单因素试验和正交试验,并通过高效液相色谱法（HPLC）测定虫草素含量,确定水热回流法提取蛹虫草培养残基的最佳工艺参数。【结果】 方法学验证结果表明,蛹虫草培养残基中虫草素含量的HPLC测定方法精密度、重复性、稳定性相对标准偏差（RSD）均<2%,准确度RSD为2.64%,标准曲线线性相关性高。正交试验结果显示,影响水热回流法提取效果的因素依次为提取时间、提取次数、液料比、提取温度,其中提取时间和提取次数对提取物虫草素含量均有显著影响（P<0.05）,提取温度和液料比影响不明显（P>0.05）。单因素试验和正交试验结果表明,蛹虫草培养残基的最佳提取工艺参数为：液料比25：1、提取次数5次、提取温度70 ℃、提取时间60 min,该提取条件下测得蛹虫草培养残基中虫草素含量为1.48 mg/g。【结论】 采用本研究确定的水热回流法最佳工艺参数能有效提取蛹虫草培养基活性成分,且操作简单实用,提取物活性成分得率稳定,为后续蛹虫草培养残基产品开发提供参考依据。     

氟化物对家蚕生长发育的影响

为了探究家蚕T6和734两品系耐氟力的差异,分别对其4龄时期氟敏指数,以及5龄时期体重变化和死亡率进行调查,在100ppm、200ppm、300ppm、400ppm氟化物浓度下．734的氟敏指数分别是：29．14、62．22、104．36和137．61,而T6的分别是：4．38、11．13、26．87和43．76,两品系的氟敏指数随着氟化物浓度的增大而增大,但734指数增加远远大于T6;734体重变化较T6明显。并且734的死亡率也远大于T6。表明了家蚕T6品系具有较强的耐氟能力。     

胚胎期高温处理对家蚕生长发育及部分经济性状的影响

用 3 4℃、RH80 %的环境处理 2 0余个家蚕品种的己 + 2 期胚胎 ,结果表明 :高温处理对某些品种的幼虫经过、幼虫体重、全茧量、茧层量等有明显影响 ,对健康性、茧层率无明显影响 ,对丝质无实质影响 ;高温处理对家蚕生长发育和经济性状的影响纯种间存在差异 ,杂交种受影响比纯种小。因此认为 ,高温处理对家蚕生长发育、经济性状的影响不会成为伴性温敏基因和雄蚕品种利用的限制因素 ,部分不良影响可以通过常规育种手段加以解决     

家蚕脂肪体细胞原代培养及其细胞分化的研究

取家蚕4~5龄幼虫背部脂肪体,采用胰蛋白酶消化和组织块贴壁法进行离体培养,观察脂肪体细胞在体外培养过程中的变化。家蚕脂肪体细胞在原代培养过程中出现了一批具有繁殖和再分化能力的脂肪前体细胞,细胞间呈管道状或网状排列,可在体外培养条件下繁殖,分化成新的脂肪组织,形成的脂肪细胞分泌大量脂肪油滴后破裂死亡。研究结果可为进一步探讨家蚕脂肪体细胞的分化及脂类代谢调节机制提供实验条件。     

家蚕和野桑蚕酚氧化酶原基因的组织表达差异比较

酚氧化酶在昆虫体液免疫反应中起着非常重要的作用。根据GenBank中登录的家蚕和野桑蚕酚氧化酶原基因cDNA序列设计特异引物,用半定量RT-PCR方法检测了家蚕和野桑蚕各组织中酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)的表达谱,发现该基因在家蚕和野桑蚕组织中的表达差异较大,且具有明显的组织特异性。家蚕PPO1基因只在血液中被检出有很高的表达,而野桑蚕PPO1基因在血液和头部中均有表达,且在血液中的表达量最高;PPO2基因在家蚕组织中的表达量从高至低顺序为血液、脂肪体、卵巢、头部、表皮、精巢、中肠和丝腺,而在野桑蚕组织中的表达量从高至低顺序为血液、头部、中肠、表皮、精巢、卵巢和脂肪体,在丝腺中没有被检出有表达。推测可能是由于起源于野桑蚕的家蚕在长期的驯化及人工选择过程中引起了酚氧化酶原基因功能的变化。     

蛹虫草多糖对四氯化碳诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用研究

蛹虫草是一种药用真菌。从人工培养的蛹虫草中提取蛹虫草多糖(CMPS),采用Ⅳ型胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养,研究蛹虫草多糖对CCl4诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用。结果表明:蛹虫草的子实体和基质都含有丰富的多糖,其中基质中的多糖含量最高,约为子实体的2～4倍;CMPS可明显降低由CCl4诱导的损伤肝细胞培养上清液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的活性水平和丙二醛(MDA)的含量水平,显著提高由CCl4诱导的损伤肝细胞培养上清液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和诱导损伤肝细胞的存活率。试验结果提示CMPS对大鼠原代培养肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

蛹虫草的人工培育、有效成分及药理作用研究进展

蛹虫草是由蛹虫草真菌(Cordyceps militaris)寄生在鳞翅目昆虫蛹或幼虫体上所形成的菌虫复合体。作为一种药用真菌,可作为冬虫夏草(Cordyceps sinensis)的代用品。就蛹虫草的生物学特性、培育技术、有效成分及其主要药理作用进行了综述,为有效地开发利用蛹虫草资源提供科学依据。