罗氏沼虾三群体线粒体D-loop基因序列差异的初步研究

通过测定罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）人工养殖群体（A）（浙江湖州）、缅甸引进群体F2代（B）和“南太湖1号”（C）3个群体线粒体控制区（D-loop）基因序列片段（约1200bp），探讨罗氏沼虾群体遗传结构。结果发现，在用于分析的1121bp基因序列中有86个变异位点，共计14个单倍型。其中，群体A、C的遗传多样性均较低，其订值分别为0．022和0．025，相比之下，群体B的遗传多样性则明显要高于上述两个群体（π=0．032）。AMOVA分析表明，群体间的遗传变异占总遗传变异的6．32％，而93．68％的遗传变异源于群体内。对三群体的遗传学参数计算结果表明，群体A和B间遗传分化指数（Fst）为0．105，已达到中等分化水平；群体C与A间的遗传距离（D=0．025）最小，提示它们的亲缘关系最近。本研究结果认为，D—loop基因可以作为检测罗氏沼虾群体遗传差异的分子标记，“南太湖1号”群体遗传多样性比人工养殖群体有所提高，但仍偏向养殖群体，未表现出最高的杂种优势。     

罗氏沼虾和海南沼虾网箱饲养可行性初探

网箱养鱼已为世人所熟知,网箱养日本沼虾和罗氏沼虾亦已有报道。网箱中混养罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbegii)和海南沼虾(M.hainanense)情况若何?多层网箱混养情况又如何?皆为作者所关心。为此我们于1989年进行了这两种淡水虾网箱饲养可行性的初步探索。     

罗氏沼虾养殖技术

罗氏沼虾又名马来西亚大虾,原产于东南亚国家,属热带河口性淡水虾。具有生长快、个体大、食性广、疾病少、养殖周期短和商品价值高等特点。70年代世界各地广泛引种进行试养。 1.罗氏沼虾的生活习性罗氏沼虾是生活在热带地区的淡水虾,天然水域中的罗氏沼虾具有生殖洄游习性,     

罗氏沼虾在苏北落户

1989年从无锡引进了罗氏沼虾亲虾。白驹养鳗场利用温室养鳗池进行越冬保种,今年人工育苗成功。5月20日用2.4亩鱼种池放养0.54万尾自繁虾苗,10月11日起捕,捕鱼177.08公斤/亩;收虾2172尾,亩产22.5公斤,成活率达40.22%,规格24.86克/尾。在     

罗氏沼虾的工厂化育苗

罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii Aeman,又名马来西亚大虾,是一种大型淡水虾,原产于热带、亚热带一些国家和地区,其适温范围与罗非鱼基本相同.因具有生长快、个体大、食性广、营养价值高、养殖周期短等特点,引起了世界上许多国家的重视.我国于1976年引进,1977年在广西人工繁育成功。为探讨在北方地区育苗和养殖的可行性,作     

罗氏沼虾三群体线粒体D-loop基因序列差异的初步研究

通过测定罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)人工养殖群体(A)(浙江湖州)、缅甸引进群体F2代(B)和"南太湖1号"(C)3个群体线粒体控制区(D-loop)基因序列片段(约1200 bp),探讨罗氏沼虾群体遗传结构.结果发现,在用于分析的1121 bp基因序列中有86个变异位点,共计14个单倍型.其中,群体A、C的遗传多样性均较低,其π值分别为0.022和0.025,相比之下,群体B的遗传多样性则明显要高于上述两个群体(π=0.032).AMOVA分析表明,群体间的遗传变异占总遗传变异的6.32%,而93.68%的遗传变异源于群体内.对三群体的遗传学参数计算结果表明,群体A和B间遗传分化指数(Fst)为0.105,已达到中等分化水平;群体C与A间的遗传距离(D=0.025)最小,提示它们的亲缘关系最近.本研究结果认为,D-loop基因可以作为检测罗氏沼虾群体遗传差异的分子标记,"南太湖1号"群体遗传多样性比人工养殖群体有所提高,但仍偏向养殖群体,未表现出最高的杂种优势.     

罗氏沼虾养殖新模式

随着成虾价格的逐渐回落,罗氏沼虾养殖业已逐渐由高效益行业转变为低效益行业。如果一味地采用原来的养殖模式,已很难产生理想的效益,且风险依然存在。唯有挖掘潜力,较大幅度地提高亩产量,才是根本出路。同一虾池,高密度放养不同批次虾苗,捕大留小,逐渐上市,使池载虾量始终维持较理想的水平,最大限度地利用自然资源,达到高产高效,不失为一种理想的模式。一、池塘宜大而深１．面积与水深：面积以５－１０亩为宜,平均水深１．２－１５米。池塘以长方形,东西向为好。２．塘堤高与底质：塘堤坚固,防漏性能好;池底平坦,少留淤泥…     

罗氏沼虾亲虾选留与越冬

本人根据几年来的实践，对罗氏沼虾亲虾的选留及越冬培育管理技术总结如下：1．亲好的选留用于人工繁殖的亲虾，一般来源于成虾养殖池中，其选留标准为：（1）个体要大。雌虾要求10厘米以上，体重25～30克以上，雄虾的体长及体重均要大于雌虾。我们发现个体小的亲虾产卵量少，孵出幼体质量差，且易引起性状退化。为确保虾卵和幼体有较高的质量，在选留亲虾时原则上以个体越大越好。（2）健康无病。亲虾必须挑选身体肥壮、体色鲜艳、活动正常、健康无病的虾。（3）附肢完整。亲虾必须触角、附肢完整，特别是步足和腹足要完好。所以在选捕亲虾…     

罗氏沼虾引种复壮技术的研究

长期以来,国内进行罗氏沼虾人工繁殖一直以池塘饲养的成虾作亲本,由此造成该虾种质退化,养殖经济效益下降.为提高其种质和养殖经济效益,于1996年和1997年从马来西亚引进野生原种繁育虾苗,进行复壮技术的研究.研究结果表明,野生种子代和杂交种子代的体长、体重明显高出本地的驯养种.种群间具有标准差、变异系数、第二步足与体长的比值相对较小、额齿数相对较多的特点.通常野生原种体形细长、体色淡黄透明、摄食旺盛、抗病力强、性成熟个体较大.野生种子代和杂交种子代幼体活力强,摄食旺盛,变态期延长,但人工育苗的难度大.研究结果显示,采用繁育难度相对较低的雌(本地驯养种)×雄(野生种)配组方式繁育杂交苗,难度较小,效果好.     

罗氏沼虾冷冻调理品的开发利用

对罗氏沼虾（Ｍａｃｒｏｂｒａｃｈｉｕｍｒｏｓｅｎｂｅｒｇｉ）冷冻调理品的加工方法和保鲜技术进行了研究。试验结果表明,加工后的罗氏沼虾,其保藏性能增强,加添加剂后罗氏沼虾的鲜度下降明显减慢。     

罗氏沼虾不同养殖条件下的生长和存活率相关分析

为探讨不同养殖条件下罗氏沼虾重要经济性状的相关性,以106个罗氏沼虾家系为材料,将每个家系随机分成两组,分别放入两个大小不同的池塘中,以不同的养殖密度养殖,两个月后测定每个家系的头胸甲长、腹长、体长、体重及存活率,并以家系为单位进行同一性状在两种不同养殖环境条件下的相关分析。结果表明,罗氏沼虾头胸甲长、腹长和体长在两种不同养殖环境条件下的对应性状间均呈不显著正相关(P>0.05),相关系数依次为r=0.109、r=0.15和r=0.143;体重呈显著正相关(r=0.223,P<0.05);存活率呈极显著正相关(r=0.862,P<0.01)。头胸甲长、腹长和体长的变异系数范围在10.85～18.09之间;两个土池中体重的变异系数分别为36.80和43.47,说明罗氏沼虾体重性状具有较大的遗传选择潜力。研究结果表明,罗氏沼虾在不同养殖条件下,以体重、存活率为选育指标,尽管选择趋势不变,但选种效果有差别。     

罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体的制备及应用

罗氏沼虾肌肉白浊病（whitish muscle disease of Macrobrachium rosenbergii）是一种发生在罗氏沼虾苗种阶段的流行病,发病虾苗出现肌肉白浊、白斑或白尾症状,死亡率高达60％以上,作者所在实验室在确定其病原是罗氏沼虾诺达病毒（Macrobrachiium rosenbergii Nodavirus,MrNV）的基础上,用MrNV免疫BALB／c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2／0鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA筛选阳性孔,经有限稀释法克隆,得到12株能特异分泌抗MrNV的单兜隆抗体（Mab）的杂交瘤细胞。注射小鼠,制备腹水单克隆抗体,ELISA效价为1：10^5～10^6。亚型鉴定结果表明,有6株单抗为IgG1型,4株甲抗为IgG2a型,2株单抗为IgG2b型。12株单抗与对虾白斑综合征病毒（WSSV）和桃拉综合征病毒（TSV）均无交叉反应：挑选效价高的腹水单抗2B5,建立了检测罗氏沼虾诺达病毒的三抗体夹心酶联免疫吸附测定（TAS—ELISA）法,该方法检测灵敏度达0．98ng左右。Wesrtem blot分析表明,2B5能与MrNV 43kD的外膜蛋白特异性结合。     

罗氏沼虾生长性状的遗传参数及其相关性

对106个罗氏沼虾家系(包括32个半同胞家系)5月龄的5个生长性状进行测量。采用动物模型,把性别、雌虾出池时是否抱卵作为固定效应,并以日龄为协变量,借助DFREML方法估计头胸甲长、腹长、最后腹节长、体长和体重等性状的方差组分,进行遗传参数的估算。结果表明,5个生长性状的变异系数中体重的变异系数最大,为36.80;罗氏沼虾5月龄头胸甲长、腹长、最后腹节长、体长和体重的遗传力分别为0.06、0.07、0.02、0.07和0.07,生长性状的遗传力属低遗传力;5个生长性状的表型相关系数在0.398～0.910之间,遗传相关系数在0.35～1.0之间,其中头胸甲长与体长的遗传相关程度最高,遗传相关系数为1.0,体长与体重的遗传相关程度次之,遗传相关系数为0.98。本研究可为罗氏沼虾的进一步选育提高和杂交利用提供科学依据和理论参数。     

罗氏沼虾大规模家系构建与培育技术研究

为建立罗氏沼虾育种项目,2006年利用罗氏沼虾3个群体,通过巢式交配设计,实现了大规模构建罗氏沼虾父系半同胞家系。实验中,每箱放置亲虾1雄5雌,按交配设计共布置100个交尾网箱;通过对培育条件及幼体数量的标准化,使每个家系在幼体培育的各个阶段的条件尽量保持一致,减少由于条件不一致造成的家系间的环境偏差。结果显示,500尾雌虾抱卵虾为271尾,亲虾抱卵率平均为54.2%,且每个网箱出现两尾以上抱卵虾的网箱数为92个,占全部网箱数的92%;通过标准化培育,最终建立了123个家系,其中含有父系半同胞家系37个。本试验结果为建立罗氏沼虾全同胞和半同胞家系提供了依据。     

流式细胞术与显微观察对罗氏沼虾血细胞的比较研究

应用流式细胞术和显微观察对罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）血细胞的分类分群和各类细胞组成比例进行研究,比较2种方法的优缺点。应用显微观察,根据细胞颗粒的有无和大小以及细胞染色情况,可把罗氏沼虾血细胞分为透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞。根据其血细胞的前向角散射光（FSC）和侧向角散射光（SSC）特性的不同,也将血细胞分为3个亚群：透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞。检测各种细胞所占的比例,2种方法测得比例均为：小颗粒细胞〉大颗粒细胞〉透明细胞;2方法的结果存在显著差异（P〈0．05）,但相关性极显著（P〈0．01）。利用流式细胞术可更快捷、准确,减少人为误差,显微观察可对细胞内部结构进行更深入的分析,并可进行细胞实际大小和细胞密度的测定。2种方法互补不足,可更快速、准确、全面地进行细胞基础特征的研究。     

罗氏沼虾胚胎附着机制的初步研究

甲壳动物十足目的大多数种类,其受精卵自产出后就附着于亲体腹部,并完成胚胎发育过程直至孵化,这对于胚胎的发育、保护和幼体散布有重要的生物学意义。胚胎的附着机制较为复杂,与刚毛、卵柄、卵索、卵膜和黏液腺有关:卵柄和卵索的形成决定了胚胎发育的顺利进行;卵膜的变化影响着胚胎的附着;黏液腺在胚胎附着过程中形成卵柄和外层卵膜,胚胎是依靠卵柄或卵索附着于腹肢的刚毛上,进而完成胚胎发育过程。本研究采用常规组织学和扫描电镜的方法研究了罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)胚胎及其附着结构。结果表明,胚胎附着与母体腹肢的结构、黏液腺分泌的黏液相关,也与胚胎表面结构、次级卵膜的形态和结构密切相关。原肢底节和内肢刚毛密而长,基部有细小的分支,有利于胚胎的附着,外肢刚毛羽状则有利于胚胎的托附和保护。抱卵雌虾腹肢的原肢和内肢上布满腹肢黏液腺分泌的黏液;携卵刚毛中空、壁厚,刚毛外壁由微绒毛状结构组成,扩大了携卵刚毛的表面积,以利胚胎附着。胚胎外表面由初级卵膜和次级卵膜组成,次级卵膜主要由卵巢黏液腺分泌的黏液参与形成。排卵时,受精卵依靠坚韧的次级卵膜相互粘连,同时,部分受精卵在刚毛上滑动、旋转,并借助次级卵膜逐渐形成了卵柄或卵索固着在腹肢刚毛上。从受精卵到胚胎孵化,胚胎之间最主要的连接方式是依靠次级卵膜的连接。胚胎的表面有许多褶皱和黏液,利于胚胎的附着以及胚胎对溶氧和小分子物质等的通透。以上结构与附着相适应,保证了胚胎发育的顺利进行和幼体的正常孵化。本研究旨为进一步认识甲壳动物胚胎附着机制、胚胎发育和人工育苗的研究提供参考。[中国水产科学,2007,14(1):67-73]