洋葱浸提液对丹参根腐病菌的抑制效应研究

丹参根腐病是丹参生产中的重要病害之一,本试验采用组织分离法,分离丹参根腐病植株中的病原菌(采集于河北省行唐县),并以紫洋葱和白洋葱为试验材料,研究2种洋葱不同浓度的浸提液对丹参根腐病病原菌的抑菌效果.结果 表明:丹参根腐病病原菌是腐皮镰刀菌,不同浓度的白洋葱和紫洋葱浸提液对丹参根腐病病原菌均有不同程度的抑制效果.随浸提...     

衡水湖黄顶菊对丹参根腐病菌的抑制效应研究

In this experiment, the common invasive asteraceae plant-Flaveria bidentis of hengshui lake was used as experimental material,the ultrasonic cell disruption method was used to prepare the extract of Flaveria bidentis under the conditions of different ethanol concentration, different solid-liquid ratio,different extraction time and different extraction power,then the bacteriostasis test was carried out on the root rot fungus of Salvia miltiorrhiza,and the optimum extraction conditions were determined according to the bacteriostasis rate.The results showed that the optimum ethanol extraction concentration was 75%,the optimum solid-liquid ratio was 1:10,the optimum extraction time was 100 min,and the optimum extraction power was 30%.The effective antibacterial components in Flaveria bidentis were extracted to the maximum extent,in order to open up a new way for the effective control of root rot disease of Salvia miltiorrhiza and the prevention and control of alien invasive plants of compositae.This ecological prevention and control? which was economically effective and environmental protection had great significance.     

三七根际土壤中皂苷类自毒物质降解拮抗细菌的分离筛选

[目的]筛选出既可降解三七皂苷类自毒物质又能拮抗三七锈腐病菌的细菌菌株,为防治三七病害及克服连作障碍提供生防资源.[方法]利用连续稀释法从健康三七根际土壤中分离可培养细菌,测定细菌菌株在以粗皂苷为唯一碳源培养基上的生长情况,以对峙培养法测定细菌菌株对三七锈腐病菌毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destruc-tans)RS006的拮抗活性;结合16S rDNA测序和形态学特征对活性菌株进行分类鉴定,并通过HPLC测定活性菌株在不同时间内对主要皂苷类自毒物质(R1、Rg1、Re、Rb1和Rd)的降解能力.[结果]从三七根际土壤中分离获得91株细菌分离物,其中17株分离物能在以粗皂苷为唯一碳源的培养基上生长、14株分离物对菌株RS006具有拮抗活性;菌株41既能以三七粗皂为唯一碳源生长,又对菌株RS006具有较强抑制活性.综合菌株41的形态特征和16S rDNA分子鉴定结果,将菌株41鉴定为蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii),编号为PM-41.菌株PM-41对三七主要皂苷类自毒物质R1、Rg1、Re、Rb1和Rd均存在较明显的降解效果.[结论]蒙氏假单胞菌PM-41既能拮抗毁灭柱孢菌又能有效降解三七皂苷类自毒物质,具有防治三七锈腐病和缓解三七连作障碍的生防潜力.     

津岛链霉菌JT-2F对三七根腐病菌的抑制作用

【目的】明确津岛链霉菌JT-2F对三七根腐病菌的抑制作用,为三七根腐病的生物防治提供理论依据。【方法】采用平板拮抗和滤纸条法测定津岛链霉菌（Streptomyces tsukiyonensis）菌株JT-2F对三七根腐病菌和3种三七叶部病害病原菌的的抑制作用,并采用离体块根刺伤接种法测定菌株JT-2F对三七根腐病菌的防治效果;利用酶联免疫分析（ELISA）法测定菌株JT-2F发酵液中蛋白酶、纤维素酶和几丁质酶等酶活性。【结果】菌株JT-2F对三七根腐病菌具有较强的拮抗作用,其抑菌率达76.47%,对3种三七叶部病害病原菌也有明显的抑制效果,抑菌率均超过80.00%。菌株JT-2F的发酵液对病原菌菌丝有明显的抑制作用,使菌丝体畸形、膨大变粗,并呈串珠形状。产酶能力测定结果显示,菌株JT-2F可分泌几丁质酶、蛋白酶和纤维素酶,可破坏病原菌菌丝体,并抑制病原菌生长。离体防效试验结果显示,菌株JT-2F发酵原液对离体三七块根根腐病的防效达78.43%。【结论】津岛链霉菌菌株JT-2F对三七根腐病菌有较好的抑制作用,具有较好的生防开发潜力。     

茴香挥发物对三七根腐病菌的抑制活性及抑菌物质鉴定

[目的]明确茴香挥发物对三七主要根腐病菌的抑制活性及主要抑菌物质,为利用茴香与三七多样性种植防控三七根腐病提供理论依据.[方法]采用菌丝生长速率法测定茴香茎叶挥发物对3种三七根腐病菌(茄腐镰刀菌F-3、恶疫霉菌D-1和毁灭柱孢菌RS006)的抑制活性;收集茴香挥发物并通过气相色谱—质谱联用仪(GC-MS)分析挥发物成分及其相对含量;通过化合物抑菌活性测定明确挥发物中主要的抑菌物质.[结果]茴香茎叶挥发物对3种三七根腐病菌(F-3、D-1和RS006)菌丝生长的抑制活性均随着用量的增加而增强,且对D-1和RS006的抑制能力强于F-3;当用量达2.0 g/皿时,茎部挥发物对F-3、D-1和RS006的抑制率分别为14.50%、66.10%和85.90%;叶部挥发物对F-3、D-1和RS006的抑制率分别为15.20%、67.60%和79.10%.GC-MS分析表明,茴香挥发物中主要是烯烃类(39.47%)和萜烯类(25.68%)物质,主要的单体成分为1,6-二甲基-1,5环辛二烯(36.82%)、4-烯丙基苯甲醚(17.05%)、萜品油烯(9.28%)、茴香脑(7.68%)和罗勒烯(5.19%)等.挥发物单体抑菌活性测定结果表明,4-烯丙基苯甲醚的抑菌活性较强,在1200 mL/m3时对F-3和RS006的抑制率分别为48.59%和86.17%,在800 mL/m3时对D-1的抑制率已达100.00%.[结论]茴香挥发物能较好地抑制三七根腐病菌生长,主要的抑菌单体成分为4-烯丙基苯甲醚,可利用茴香与三七进行间作或套作以防控根腐病.     

油菜挥发物对三七根腐病菌的抑菌活性及其化学成分GC-MS分析

[目的]研究油菜挥发物对三七主要根腐病菌的抑制作用,为利用油菜与三七轮作或作为生物熏蒸材料控制三七根腐病害提供指导.[方法]利用挥发物收集装置收集油菜茎和叶组织的挥发物,通过气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)分析油菜切段和研磨挥发物成分及相对含量;采用菌丝生长速率法测定油菜茎和叶挥发物及挥发物中硫醚类和异硫氰酸酯类化合物对3种根腐病菌(腐皮镰刀菌F-3、恶疫霉菌D-1和锈腐病菌RS006)的抑菌活性.[结果]油菜茎和叶对F-3菌株的抑菌活性表现出低促高抑的浓度效应,在最大用量2.0 g/皿时对D-1和RS006菌株的抑制率均大于65.00%.油菜切段挥发物的主要成分为二甲基二硫醚(相对含量55.86%),研磨的主要成分为叶醇(相对含量54.14%)等醇类物质.硫醚类和异硫氰酸酯类化合物中的二甲基二硫醚(DMDS)、二甲基三硫醚(DMTS)和异硫氰酸烯丙酯(AITC)对三七根腐病菌均有抑菌活性,强弱顺序为AITC>DMDS>DMTS.DMDS在浓度1200 mL/m3时对F-3、D-1和RS006菌株的抑制率分别为35.24%、73.23%和52.19%;DMTS在50 mL/m3时对F-3和RS006菌株的抑制率分别为61.55%和78.71%,对D-1菌株的抑制率为100.00%;AITC在8 mL/m3时对F-3和RS006菌株的抑制率为53.85%和79.39%,在2 mL/m3时即可完全抑制D-1菌株的生长.[结论]油菜挥发物中的DMDS、DMTS和AITC有较强的抑菌活性,利用油菜与三七轮作或对土壤进行生物熏蒸以控制三七根腐病具有很大的开发潜力.     

中草药提取物对板蓝根根腐病菌抑制作用研究

测试了123种中草药提取物对茄腐镰刀菌(Fusarium solani)菌落生长及分生孢子萌发的抑制作用。结果表明:提取物浓度为0.01 g/mL时,99种提取物对菌落生长具有显著的抑制作用,其中苦楝皮和威灵仙的抑菌率大于50%,北沙参的抑菌率达到了100%;112种提取物对分生孢子萌发具有显著抑制作用,其中11种提取物的抑制率在50%以上,而且北沙参和牛膝的抑制率达到了100%。将抑制率大于50%的11种提取物稀释为200倍,进行二次筛选,发现苦楝皮和威灵仙2种提取物对菌落生长的抑制作用下降,而北沙参对菌落生长抑菌率仍为100%;11种提取物对分生孢子萌发抑制率下降的幅度在21.59%~47.02%,而北沙参的抑制率最高,为74.50%。北沙参的抑制中浓度(EC50)为3.621 mg/mL。     

绿豆根腐病菌生物学特性研究

研究结果表明,尖孢镰孢菌菌丝生长范围在5～35 ℃,生长的最适温度为30 ℃。尖孢镰孢菌产孢的最适温度为30 ℃,0 ℃以下不产生孢子。立枯丝核菌菌丝生长范围在10～35 ℃,生长的最适温度为30 ℃。尖孢镰孢菌在pH为6.26时生长最快,产孢量最高;立枯丝核菌在pH为5.35时生长最快。尖孢镰孢菌孢子在光暗交替条件下产孢量最多,立枯丝核菌在光暗交替条件下菌丝生长最好。尖孢镰孢菌的菌丝在以蔗糖为碳源的培养基上生长最快,而在以麦芽糖为碳源的培养基上产孢最多;立枯丝核菌在以淀粉为碳源的培养基上生长最快。尖孢镰孢菌在以硝酸钙为氮源的培养基上生长最快,而在以谷氨酸为氮源的培养基上产孢最多;立枯丝核菌在以L-半胱氨酸为氮源的培养基上生长最快。     

辣椒根腐病菌生物学特性研究

对辣椒根腐病病原菌进行了生物学特性的初步研究。试验结果表明,病菌菌丝在大多数培养基中均能良好生长,而在马铃薯酵母膏琼脂培养基上生长较为缓慢;菌丝在10～35℃范围内均能生长,最适为25℃;菌丝生长的pH值范围为3～12,最适pH值为7;光照对菌丝生长影响不大;菌丝致死温度为64℃、10min。病菌在马铃薯斜面上易于产孢,且产生的大多为大型分生孢子,而在PSA斜面上产生的以小型分生孢子为主;在其他测试培养基上不易产孢。病菌分生孢子在各种营养物质中均能萌发;萌发温度范围为15～35℃,最适温度30℃;pH值3～12间病菌孢子均能萌发,最适pH值为7;分生孢子致死温度为58℃、10min。     

3种杀菌剂对花椰菜甘蓝黑腐病菌的抑制效应

经室内测定,用200—400ppm农用链霉素、新植霉素处理带有甘蓝黑腐病菌的花椰菜种子,可以完全消除种子所带病菌,而且200ppm农用链霉素处理的种子的发芽率和发芽势均不受影响,因此可用作花椰菜种子的消毒剂。     

小麦根腐病菌生物学特性研究

通过实验,对小麦根腐病菌的生长发育条件进行了研究。结果是:根腐病菌的分生孢子萌发与菌丝生长发育适温为25～30℃;光对菌丝生长无影响。分生孢子萌发对湿度条件要求很高,湿度低虽在适温下也不萌发,相对湿度在98%以上才能萌发,以在水滴中萌发率最高,而且萌发的速度也快。尽管根腐病菌可在多种基物上生长发育并产生孢子,但分生孢子萌发时却需要一定的氮、碳源。分生孢子在豆饼浸出液、糖溶液和小麦叶组织浸出液中萌发率最高,在清水中的分生孢子虽也可萌发,但萌发率很低。分生孢子萌发的pH值范围是5～9,适宜pH值为5～7。     

精甲霜灵对大豆根腐病菌的毒力研究

利用35%精甲霜灵种子处理乳剂对大豆根腐病菌进行室内菌丝生长抑制、卵孢子形成的影响和苗期盆栽防治试验.结果表明,35%精甲霜灵种子处理乳剂对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、瓜果腐霉菌(Pythium aphani dermatum)和大豆疫霉根腐病菌(Phytophthora sojae)菌丝生长抑制率均较高,分别为100%、100%和84.82%.35%精甲霜灵种子处理乳剂对瓜果腐霉菌卵孢子的形成有抑制作用,对大豆疫霉根腐病卵孢子的形成有促进作用.苗期盆栽防治试验中,35%精甲霜灵种子处理乳剂对尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、立枯丝核菌、瓜果腐霉菌和大豆疫霉根腐病防效均高于对照药剂,分别达到70.93%、65.63%、63.71%和76.54%     

西番莲提取物对田七根腐病菌抑制作用的研究

采用病原菌生长速率法测定不同浓度新鲜西番莲叶、茎、果的水、乙醇、乙酸乙酯提取物对田七根腐病菌之一尖孢镰刀菌的抑菌活性,为田七根腐病综合防治提供参考。结果表明,西番莲叶、茎的水、乙醇和乙酸乙酯提取物对田七根腐病菌有良好的抑制活性,抑菌活性随浓度增高而增强。其中西番莲叶的乙酸乙酯提取物对尖孢镰刀菌的抑制效果最明显,抑制率达到49%。     

沙打旺根腐病菌的生物学特性研究

对引起沙打旺根腐病的2种病原菌茄病镰刀菌沙打旺专化型(Fusarium solani f.sp astrgali,Sad1)和尖孢镰刀菌沙打旺专化型(Fnsarium oxysporum f.sp astrgali,Sad2)的生物学特性进行了研究.结果表明Sadl和Sad2均能在PDA、燕麦、沙打旺汁液、ezapek等固体和液体培养基上生长,PDA和燕麦固体培养基是最适条件;但液体培养基以czapek为最适条件.Sad1和Sad2最适液体产孢条件是燕麦培养基,最适固体产孢条件是PDA.Sad1在5℃-40℃均能生长,适温是25℃-30℃,在5℃时生长缓慢;pH 3-12范围内都能生长,25℃适温条件下pH 6.0-8.0;Sad2在5℃-35℃均能生长,适温是25℃-30℃;pH 3-12范围内都能生长,25℃适温条件pH 9.0-11.0;2菌均能利用葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、甘油和可溶性淀粉等多种碳源;也能利用天门冬酰胺、干酪素、谷氨酸,但对蛋白胨利用较差,不利用柠檬酸和酒石酸.生物学特性表明,2菌株是一类对营养要求不高,对环境适应能力强的病原菌.     

甘薯根腐病菌生物学特性的研究

甘薯根腐病主要致病菌(Fusarium javanicum Koord),在室内干贮条件下可存活36个月,在10厘米土层,可存活31个月。生长发育温度14—36℃,以25—28℃最适;在pH5—9范围内均可生长,以pH6.5—7.5为最适。湿热致死温度,分生孢子为52℃,10分钟;厚垣孢子为54℃,10分钟。在干热72℃下,分生孢子经12小时死尽;厚垣孢子18小时死尽。重病地区病菌多存在于0—20厘米的耕作层内,但100—110厘米的土层仍有少量存在。据此,可采用三年轮作、温水52—54℃下10分钟浸种薯和深翻改土等防治措施。     

甘薯根腐病菌寄主范围的初步研究

在明确了甘薯根腐病主要致病菌之后,1978～80年我们对病菌寄主范围进行了调查研究,内容包括人工接种试验和重病田杂草和自生作物调查两部分。调查主要是在中牟和新安两县的重病区进行的。     

外源草酸对三七皂苷Rg1自毒效应的缓解作用及机制研究

【目的】明确外源添加草酸缓解皂苷Rg1对三七根系自毒的缓解效应及作用机理,为缓解三七自毒危害提供依据。【方法】采用外源添加的方式,测定了1.0 mg/L皂苷Rg1溶液单独处理及外源添加质量浓度0.1,1.0,5.0 mg/L草酸的混合处理对三七种苗根系萎蔫和鲜质量的影响,同时以体积分数0.1%甲醇为空白对照,分析外源添加草酸对Rg1引起的三七种苗自毒效应的缓解作用。利用硝基四唑蓝氯化物(NBT)活性氧染色法,比较外源添加草酸后三七根尖活性氧的积累情况, 测定抗氧化酶系统中与活性氧清除相关的过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的活性,以及坏血酸 谷胱甘肽（ASC GSH）循环中抗坏血酸过氧化物酶（APX）和脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）的活性及抗坏血酸（ASC）和脱氢抗坏血酸(DHA)含量,探讨外源添加草酸对Rg1自毒作用的缓解机制。【结果】1.0 mg/L Rg1单独处理会导致三七植株出现明显萎蔫,萎蔫率达到46.70%,鲜质量减少率达18.10%。外源添加质量浓度为0.1,1.0,5.0 mg/L草酸后,三七的萎蔫率显著降低,仅为0~2.50%,鲜质量减少率降低至3.64%~6.17%,明显缓解了由皂苷Rg1引起的自毒效应。NBT染色结果显示,Rg1能诱导三七根尖活性氧大量积累,外源添加草酸后根尖积累的活性氧显著减少。酶活性分析表明,Rg1能降低抗坏血酸 谷胱甘肽（ASC-GSH）循环中的抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性和抗坏血酸（ASC）含量,从而降低细胞对氧自由基的清除能力,导致细胞内活性氧的大量积累。外源添加草酸能通过增强过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）和脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）的活性及增加抗坏血酸（ASC）的含量来提高根系的抗氧化能力。【结论】外源添加草酸能提高ASC-GSH循环中酶APX和DHAR的活性及抗氧化剂ASC含量,进而增强三七根系的抗氧化能力,有效缓解皂苷Rg1对三七生长的自毒活性。     

活体外黄芪根腐病菌细胞壁降解酶产生能力比较

利用细胞壁降解酶(CWDEs)是镰刀菌(Fusarium sp.)侵染寄主的主要手段之一,不同种类的镰刀菌在致病过程中起主要作用的降解酶种类有所不同。以山西省黄芪(Astragalus L.)根腐病的优势病原菌锐顶镰刀菌[F.acuminatum(Ellis et Everhart)Wr.]、腐皮镰刀菌[F.solani(Mart)Sacc.]和尖孢镰刀菌(F.oxysporum Schlecht)为研究对象,对其活体外诱导培养产生的主要细胞壁降解酶(多聚半乳糖醛酸酶、聚甲基半乳糖醛酸酶、多聚半乳糖醛酸反式消除酶、果胶甲基反式消除酶、内切1,4-β-D葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶)及其变化规律进行了比较。结果表明,3种根腐病菌均能产生多聚半乳糖醛酸酶、聚甲基半乳糖醛酸酶、多聚半乳糖醛酸反式消除酶、果胶甲基反式消除酶、内切1,4-β-D葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶6种CWDEs,但不同的致病菌产生各种酶的活性大小和变化趋势具有明显差异。该结果为深入研究CWDEs在根腐病菌侵染黄芪过程中的致病作用奠定了基础。     

白术根腐病菌分离及致病性研究

在同一地块通过对白术根腐病的发病情况进行调查,确定白术根腐病分为湿腐和干腐2种症状,湿腐为主要症状类型,在田间所占比例达69.68%.通过对30个病株样本进行病原分离,共分离得到131个菌株,12种分离菌中有7种对白术具有致病力,其中尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和茄病镰刀菌(F.solani)能产生白术根腐病的典型症状.尖孢镰刀菌为根腐病主要致病菌,并能导致两种症状,致病率达90%;茄病镰刀菌危害症状为湿腐,致病率为30%.