一种测定水产品中残留甲氧苄啶的方法探讨

目的：探讨高效液相色谱法测定水产品中残留的甲氧苄啶的实验方法。方法：将拟测定水产样品用三氯甲烷和酸性甲醇溶液提取,并将提取液调至碱性,用二氯甲烷革取,经MCX柱净化,浓缩至近干,再用流动相溶解过滤后,用高效液相色谱紫外检测定量。结果：甲氧苄啶在0．05—5．0ug／mL质量浓度范围内,色谱峰面积与甲氧苄啶质量浓度之间线性关系良好（相关系数为0．999967）,在空白样品的20、40、200μg／kg3个加标量条件下,样品平均回收率均大于80％,相对标准偏差小于7％,方法的检测限为20ug／kg。结论：高效液相色谱法测定水产品中残留的甲氧苄啶简便快速、干扰小、准确性高,可以在水产品中甲氧苄啶的残留分析时加以推广和应用。     

甲氧苄啶与环糊精的研究分析

甲氧苄啶是广谱、高效、低毒的抗菌药和杀菌剂,优良的甲氧苄啶可以治疗畜禽细菌感染等疾病,但较强的疏水性使甲氧苄啶溶出速率低、生物利用率小,限制临床应用范围。而环糊精是一种新型药用辅料,可以做载体。大量研究证实,采取饱和水溶液法、搅拌法等制备方法进行包合时,在水溶液中,环糊精亲脂腔体中的水分子形成氢键的倾向得不到充分满足。因此,整个分子或药物脂质体部分可以取代环糊精体中水分子,从而降低系统能量形成包合物,能显著增加药物的溶解度或溶出速率、提高药物生物利用度和疗效,具有广阔的发展前景。     

二甲氧苄啶在猪体内的残留消除

【目的】建立在猪组织中二甲氧苄啶浓度的检测方法,并对二甲氧苄啶在猪体内的残留消除进行研究,制订该药在猪体内的休药期.【方法】常规饲养条件下,将30头健康猪随机分为6组,按体质量以5 mg·kg-1剂量混饲给药,每天2次,连用7 d,于最后一次给药后6、24、96、168、240和336 h各宰杀1组猪,分别采集每头猪的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪组织,采用HPLC法对二甲氧苄啶在各组织的残留量进行测定.【结果和结论】二甲氧苄啶在猪组织中消除较快,给药后第240小时所有检测组织中的二甲氧苄啶已全部低于方法的定量限(40μg·kg-1),二甲氧苄啶在肌肉中消除最快,在肾脏中消除最慢.根据日本肯定列表规定的二甲氧苄啶在禽组织的最大残留限量(50μg·kg-1)和WT1.4休药期软件计算结果,建议该药在猪体内的休药期为8 d.     

甲氧苄啶对部分抗菌药的抗菌增效作用

以液体试管法和棋盘法测定甲氧苄啶(TMP)和7种抗菌药物对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)、部分抑菌浓度(FIC),判定TMP与各药联合抗菌作用效果,确定其与不同抗菌药物联合应用的最佳配伍比例。结果表明,TMP对青霉素G钠、氨苄西林、阿莫西林、北里霉素、林可霉素、土霉素等几种抗菌药物有不同程度的抗菌增效作用,对甲硝唑无抗菌增效作用。     

甲氧苄啶对连翘体外抗菌增效作用的研究

采用微量棋盘法测定甲氧苄啶、连翘及药物联用对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度,计算连翘与甲氧苄啶联用的FIC指数。再采用平板计数法测定连翘与甲氧苄啶联合作用于三种细菌1、2、4和8 h后的细菌数,并计算杀菌率。利用最小二乘法对杀菌率进行拟合,计算出甲氧苄啶与连翘配伍的最佳添加剂量。试验结果表明：连翘与甲...     

甲氧苄啶与中药复方联用抗菌增效作用的研究

探索甲氧苄啶对中药复方体外抗菌增效的最优添加剂量.根据传统中兽医理论,自拟中药复方由黄芩、板蓝根、蒲公英和连翘按1∶1∶2∶1比例组成.采用平板计数的方法,测定了甲氧苄啶与中药复方联用作用于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌1、2、4和8h后的细菌数,计算杀菌率,并用最小二乘法对杀菌率进行拟合,得出甲氧苄啶的最优添加剂...     

猪粪便和尿液中二甲氧苄啶的液相色谱串联质谱检测方法研究

试验旨在建立二甲氧苄啶在猪粪便和尿液中的液相色谱串联质谱检测方法。尿液经乙酸乙酯液液萃取,有机层经氮气吹干、35%乙腈水复溶后上机检测;粪便样品经酸乙酯提取,MCX 小柱净化后,洗脱液用氮气吹干,35%乙腈水复溶后上机检测。结果显示：猪粪便和尿液中二甲氧苄啶浓度分别在5~1 000 μg/kg 和10~1 000 μg/L范围内呈现良好的线性关系渊r>0.99冤,尿液尧粪便中二甲氧苄啶的定量限分别为10 μg/L 和5 μg/kg,尿液添加浓度为10、100、1 000 μg/L时的回收率分别为79.6%、84.3%、90.2%,粪便添加浓度为10、100、1 000 μg/kg 时的回收率分别为66.1%、65.1%、54.7%,批间、批内变异系数均小于14%,该方法定量限低,灵敏、准确,符合相关研究的要求。     

甲氧苄啶对秦皮体外抗菌增效作用及量效关系的研究

采用微量棋盘稀释法测定了秦皮、TMP及两药联用时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的MIC值,结果表明秦皮与TMP联用MIC值明显小于两药单用MIC值,两药联用三种细菌的FIC指数均在0.5～1之间,呈相加作用。应用倾注平板计数法测定了秦皮与320、160、80、40和20μg·mL^-1TMP联用时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的杀菌率,利用最小二乘法对杀菌率进行拟合,计算出TMP增强秦皮抗三种细菌的最优添加量分别为2.0、2.1和1.9mg·g^-1。     

高效液相色谱同时检测鱼肉组织中4种磺胺与甲氧苄啶的残留量

建立了同时测定鱼肉组织中4种磺胺(磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑)和甲氧苄啶残留量的高效液相色谱法.鱼肉组织用乙腈提取后经乙腈饱和的正己烷去脂,过HLB柱净化,甲醇洗脱,减压浓缩蒸干,流动相(乙腈+1%乙酸,体积比为10∶90)定容,用带DAD检测器的高效液相色谱仪在272 nm波长下检测,流动相采用梯度洗脱.结果显示:4种磺胺和甲氧苄啶分别在0025～10 μg·mL-1和005～20 μg·mL-1范围内呈良好线性关系,相关系数(r)为0999;4种磺胺和甲氧苄啶分别在002、010和020 mg·kg-1和004、020和040mg·kg-1 3个浓度水平下的添加回收率为752%～979%,变异系数为28%～100%(n＝6);根据3倍信噪比计算,磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的最低检测限分别为0006、0007、0008、0008和0019mg·kg-1.     

二甲氧苄啶对磺胺类药物的抗球虫增效作用研究

选用10日龄健康雏鸡190只,随机分为19组,每组10只。试验组和阳性对照组雏鸡人工感染柔嫩艾美耳球虫,建立雏鸡球虫病模型。在感染后3d开始用药,以存活率、相对增重率、盲肠病变值和盲肠卵囊值为观察指标,以抗球虫指数(ACI)为判定标准,研究二甲氧苄啶(DVD)以1∶5比例与几种磺胺药联合应用的抗球虫增效作用。结果表明,0.06%磺胺二甲嘧啶(SM2)、0.05%磺胺喹恶啉(SQ)、0.05%磺胺-6-甲氧嘧啶(SMM)、0.05%SQ+0.06%磺胺氯吡嗪(Esb3)的ACI分别为161、142、157、147。DVD与不同浓度SM2联用的ACI分别为179、166、155;与不同浓度SQ联用的ACI分别为178、168、152;与不同浓度SMM联用的ACI分别为184、174、163;与不同浓度SQ和Esb3混合组联用的抗球虫指数分别167、176、186。表明DVD与几种磺胺药联用后均产生了抗球虫增效作用。     

快速检测联苯菊酯的胶体金层析试纸条研制

[目的]采用免疫胶体金技术,建立一种快速检测联苯菊酯的试纸条方法。[方法]利用有机合成方法制备了联苯菊酯半抗原,并与载体蛋白偶联得到免疫抗原,利用人工免疫的方法获得其单克隆抗体,通过酶联免疫法对制备的单克隆抗体的性能进行了验证。联苯菊酯胶体金层析试纸条是利用单克隆抗体标记胶体金,并将联苯菊酯抗原与羊抗鼠Ig G分别喷制到硝酸纤维膜上,与样品垫、吸水垫组装在PVC衬板上制备而成。[结果]联苯菊酯胶体金层析试纸条检测限为500~800μg/kg,具有速度快、简单等优点。此外,该试纸条与大部分的拟除虫菊酯没有明显的交叉反应,利用该试纸条可实现对苋菜中联苯菊酯添加试验的准确判定。[结论]胶体金试纸条方法具有前处理简单、检测速度快、可以肉眼判断结果等优点,该试纸条有望实现对果蔬中联苯菊酯残留的快速筛查。     

三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究

[目的]探讨系统地检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的方法.[方法]通过三甲氧苄氨嘧啶与马来酸酐反应,得到三甲氧苄氨嘧啶半抗原,再通过免疫动物得到抗三甲氧苄氨嘧啶的单克隆抗体,并将其应用于能够检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的ELISA试剂盒.[结果]该试剂盒对水质中三甲氧苄氨嘧啶的检测限为2.34 μg/kg,IC50(50％抑制浓度)为4.8 μg/L,回收率为60.5％～79.7％,试剂盒的标准曲线范围为0～80 μg/L,批内、批间的相对标准偏差均小于10％.三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体与二甲氧苄氨嘧啶的交叉反应率小于1％.4℃下能够保存12个月,稳定性较好.[结论]研究结果为监管三甲氧苄氨嘧啶的滥用提供参考依据.     

放线菌快速检测方法的反应体系及反应条件的优化

[目的]研究放线菌快速检测方法的PCR反应体系及反应条件的优化。[方法]以5种存在于16SrDNA序列中的放线菌特异性的特征序列为引物,通过对PCR反应体系和反应条件的优化,建立最佳扩增体系及反应条件,并对供试菌株进行测定,以验证该方法的可靠性。[结果]所采用的特异性引物能够有效检测出特定类群的放线菌,从而达到快速检测不同类群放线菌的目的。[结论]该方法可用于放线菌的快速检测,为放线菌的分类鉴定研究提供参考。     

单克隆抗体-胶体金标记技术快速检测柑桔黄龙病

应用单克隆抗体一胶体金标记技术,采用徒手切片法和斑点试验法检测柑桔黄龙病获得成 功。该方法检测速度快,操作简单,成本低,适合柑桔种苗大批量检测和田间普查。采用单抗金标技术 对田间栽培的柑桔品种、柑桔实生苗、试管微芽嫁接苗、热处理脱毒后的嫁接苗进行检测,结果表明 田间栽培的6个柑桔品种不论是否显示黄龙病症状均检测到柑桔黄龙病病菌,而消毒种子播种所得 实生苗及试管微芽嫁接苗为无病株,带病株经过30d 40℃恒温热处理后产生的新梢及其嫁接苗绝大 部分也是无病株。     

鲜奶中甲醛快速检测的方法研究

通过试验对牛奶中甲醛快速检测的三种方法(间苯三酚法、AgNO3-NaOH法和酚酞-亚硫酸钠法)进行了对比试验研究.并对该法所需试剂的用量和加入顺序等影响因素进行了系统的考察和优化,最终选择并制定出快速、灵敏、高效、便捷的检测方法.在最佳方法和操作条件下,可检出的最低下限为7.2 μg/mL乳.此外,还对奶精(植脂末)干扰物对试验的干扰做了测定.结果表明,乳中添加奶精对实验检测结果没有影响.试验筛选出的检测方法具有灵敏,操作简便,掺假现象容易判断和把握,检测费用低廉等特点,便于在实际生产中推广应用.     

食品微生物快速检测技术研究进展

近年来,微生物及其产生的各类毒素引发的食品污染备受重视,微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的问题。准确、省时的快速检验方法,对预防肠道传染病和食物中毒具有重要意义。随着生物学技术和微电子技术的发展,食品微生物快速检验技术有了较大进展。综述了食品微生物快速检验技术的研究进展。     

具毒性质粒沙门氏菌的快速检测

针对沙门氏菌毒性质粒spvR基因设计PCR引物,检测具有毒性质粒的沙门氏菌.6株常见具有毒性质粒的沙门氏菌均获得特异性扩增,11株常见的无毒性质粒的沙门氏菌均未获得特异性扩增,5株非沙门氏菌检测结果均为阴性.结果表明,所设计引物具有高度特异性,适用于具毒性质粒沙门氏菌的快速检测.     

饲粮中霉菌毒素快速检测技术研究现状及发展方向

霉菌毒素的污染广泛存在,对饲料和粮食造成严重危害,给食品和农业造成巨大的经济损失,因此对霉菌毒素的监管也越来越得到重视。传统霉菌毒素检测方法虽然有着良好的重现性和准确度,但存在试验周期较长,实验过程相对复杂等缺点。霉菌毒素快速检测技术因检测较为快速、灵敏,且检测成本相对较低,实验过程简捷等特点,越来越被市场关注。文章就应用较为广泛的胶体金酶联免疫层析快速检测技术进行比较评价。     

用生物膜干涉技术快速检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留

[目的]采用生物膜干涉技术建立快速检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的方法.[方法]首先通过疏水作用力在APS光线生物传感器探头末端固定氨苄青霉素-BSA偶联物,结合40 nm纳米金标记的β-内酰胺类抗生素受体,建立了检测牛乳中β-内酰胺类抗生素的方法.[结果]生物膜干涉技术检测牛乳中的β-内酰胺类抗生素的灵敏度比胶体金免疫层析试纸条的灵敏度高1倍.该技术还具有良好的特异性,与浓度为1 000 ng/ml的黄曲霉毒素M1、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、泰乐菌素、氯霉素、三聚氰胺无交叉反应.[结论]研究表明,金标记BLI检测β-内酰胺类抗生素的定量范围较小,并不适用于实际生产中的定量检测,但却是一种简便、快捷的定性检测方法,可用于牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的快速检测.     

五氯酚钠胶体金快速检测试纸条的研制

[目的]研制五氯酚钠胶体金快速检测试纸条。[方法]利用胶体金免疫层析技术,研制一种快速检测猪肉、鸡肉、鱼、虾、水质中五氯酚钠的试纸条。[结果]经测试,该试纸条对猪肉、鸡肉、鱼、虾的检测限为1μg/kg,对水质的检测限为2μg/kg,检测时间为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。[结论]该方法准确、可靠,使用简便,适合大量样品的现场检测。