富油微藻育种技术研究进展

微藻因生长快、油脂含量高/占用可耕地面积少等优势成为生物柴油的重要原料之一,优良的富油微藻藻株是研究和生产微藻生物柴油的首要关键技术.从选择育种、诱变育种、细胞融合和基因工程育种等方面阐述了当前富油微藻的选育概况.     

紫外诱变热带微藻选育高油脂藻株

为选育高含油量微藻藻种,本试验以优势藻株La4-37为原材料,采用紫外线辐射法对其进行诱变处理,获得了296株藻株。利用尼罗红荧光检测法对获得的藻株进行荧光检测,筛选获得相对含油量最大的诱变藻株M077和M040。通过对诱变株生长及脂荧光强度动态跟踪发现,诱变株生长周期和油脂积累时期基本一样,当达到平稳期时,诱变株油脂积累能力均有较大提高,脂荧光强度分别是原始藻株的6.2倍和1.7倍。     

富油脂微藻的分离筛选与鉴定

为从中国江河、海水等水体中筛选油脂含量较高的微藻,采集了青岛海水、武汉南湖水的水样,分离了12株微藻。对微藻的油脂含量进行了测定,其中油脂含量最高的微藻为H2-1,油脂含量达到56.25%细胞干重,其次是BQ6,油脂含量为31.43%。BQ1、BQ2、BQ4、BQ6油脂含量也较高,达29%左右。PCR扩增获得微藻18S r DNA的部分片段,序列测定后,进行BLAST同源性分析。结果表明,QS1、QS2、QS3、BQ1、BQ2、BQ3、BQ4、BQ5、BQ6、H1-1、H2-2均属于小球藻属(Chlorella spp.),H2-1属于胶网藻属(Dictyosphaerium sp.)。该研究将为中国生物能源的生产和开发提供优良的藻种资源。     

微藻油脂含量不同测定方法的比较研究

为了对微藻油脂含量不同测定方法进行比较,以球等鞭金藻8701 Isochrysis galbana Parke 8701和小新月菱形藻Nitzschia closterium f.minutissima两种微藻为研究对象,采用溶剂提取法和苏丹黑B染色法对其油脂含量进行测定,建立了两种微藻油脂含量与苏丹黑染色后吸光度A645 nm的线性回归方程,并应用于微藻油脂积累培养过程的快速测定,利用气相色谱法对两种微藻脂肪酸组成进行分析。结果表明:当提取溶剂为二氯甲烷和甲醇的混合溶剂(二者的体积比为1∶2)时,油脂提取效果较好,得到球等鞭金藻8701和小新月菱形藻的油脂含量分别为22.99%和16.89%;采用苏丹黑B染色法测定的油脂含量基本和生物量大体一致,是一种可行的估测油脂含量的方法;气相色谱检测结果显示,两种微藻具有明显不同的脂肪酸组成特征,球等鞭金藻8701的饱和脂肪酸含量(55.02%)较小新月菱形藻(51.39%)高。研究表明,从两种微藻的油脂含量和脂肪酸组成来看,球等鞭金藻8701较小新月菱形藻更适用于作为生物柴油的原料。     

一株产油微藻的分子生物学鉴定及其油脂含量测定和成分分析

从内蒙古乌梁素海淡水水体分离得到一株产油微藻DZ306,通过形态观察可知其为Nitzsc hia.sp..建立了尼罗红染色快速检测油脂含量的方法,并对该菌株的油脂成分进行分析,发现其富含多不饱和脂肪酸二十碳四烯酸(AA)和二十碳五烯酸(EPA).PCR扩增该菌株18S rDNA序列,测序获得长度为1 562 bp的片段,用BLAST软件对基因序列的同源性进行分析,其与N.palea的相似度为99％;用ClustalX软件进行多序列对齐排列,用MEGA4.0软件采用Neighbor-Joining算法构建进化树,证明所分离得到的微藻DZ306为Nitzschia palea.     

环境因子对微藻油脂积累的影响

综述了营养盐、铁离子浓度、温度、CO2浓度、光强等环境因子对微藻油脂积累的影响,并对一些环境因子的作用机理作了介绍。     

富油金藻CCMM5001培养条件优化研究

[目的]研究培养富油金藻（Isochrysis sp.）CCMM5001的优化条件。[方法]以富油金藻CCMM5001为试材,采用挑单胞法和划线法对藻种进行纯化,并采用一次性培养方法,选用3种培养基（f/2、SBM和provasoli）,分别设置3种单一因子试验：温度梯度为20、24、28℃和光照强度梯度为3 480、5 450、8 460 lx以及培养瓶中藻细胞初始密度分别是OD630为0.2、0.3、0.4,研究不同培养基、光照强度、温度以及接种密度对金藻CCMM5001生长的影响,确定培养富油金藻CCMM5001的优化条件。[结果]3种培养基优化试验中,f/2培养基较适合金藻CCMM5001的生长,其生物量指标具有显著优势。单因子试验表明,培养富油金藻CCMM5001的最适光照强度为5 450lx,最适温度为24℃,藻液的最佳接种密度OD为0.3。[结论]该研究为富油金藻CCMM5001的开发与利用提供科学依据。     

微藻油脂含量的几种快速测定方法

生物能源的开发利用是缓解全球能源压力,保障能源安全的重要途径。微藻因其生长迅速、油脂含量高,被认为是制备生物柴油的理想原料。在微藻生物柴油开发的过程中,需要频繁地测定油脂含量。简单介绍了尼罗红比色法、铜试剂比色法、傅立叶红外光谱法和气质联用法几种快速测定微藻油脂含量的方法。     

高油脂产量微藻的选育方法及研究进展

能源短缺和环境问题已经成为人类面临的全球性重大危机,生物质能作为一种环境友好的可再生能源受到国内外学者的关注。微藻作为生物质能原料有很多优势,但制约微藻生物质能源工业化生产的主要限制因素之一是微藻的油脂含量。选育高油脂含量的微藻株系是目前微藻领域的研究热点之一。在此综述了微藻作为生物质能原料的优势和基于生物质能原料生产的微藻选育的研究进展。     

城市生活污水中富油微藻的筛选

为筛选在城市生活污水中生长快、产油高的微藻,从污水样品中分离出40株微藻,采用高通量方法（96孔板培养、尼罗红染色）从中筛选出一株优良藻株,经18S rRNA基因序列分析及形态学鉴定属于小球藻属（Chlorella）。污水培养7 d后,其油脂含量达31.21%,污水的TN、NH+4-N、TP和COD去除率分别为71.6%、98.2%、99.4%和78.8%。该藻株在污水处理与微藻生物能源生产耦合系统中具有潜在的应用前景。     

富硒乳酸菌对小鼠组织脂质过氧化的影响

[目的]探讨富硒乳酸菌对健康小鼠,组织脂质过氧化的影响。[方法]选择30只健康小鼠,随机分为对照组(C组)和富硒乳酸菌组(Se组)。分别于试验后第2、4、6周,迅速采集肝脏、心脏、脾脏和肾脏等。同时,测定谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性和丙二醛含量。[结果]整个试验期内,C组和Se组体重均随周龄增加而上升,两组间没有显著差异;Se组小鼠肝脏、心脏、肾脏和脾脏GSH-Px活性总体水平高于或显著高于C组;Se组4种组织SOD活性除肾脏第4周显著升高之外,其余升高均不显著;Se组肝脏CAT活性稍有降低,心脏均为上升,肾脏、脾脏在前4周下降,以后上升;试验期内Se组4种组织MDA含量在前4周多有波动,第6周均低于C组。[结论]富硒乳酸菌能够通过提高组织抗氧化酶活性、抑制脂质过氧化产物,保护机体免受脂质过氧化损伤。     

壳寡糖及其复合聚合氯化铝絮凝微藻富集的研究

［目的］ 为了找到可以加速微藻富集的合适絮凝剂。［方法］ 制备了壳聚糖的降解产物壳寡糖,用于绿色巴夫藻（Pavlovaviridis Tseng, Chen et Zhang）和小球藻（Chloreiia spp.） 絮凝富集。［结果］ 终浓度为30 mg/L以上的壳寡糖溶液对2种藻类具有显著的促沉降效应。当壳寡糖与6 mg/L聚合氯化铝混合使用时,壳寡糖/聚合氯化铝促沉降效应明显提高。［结论］ 壳寡糖可以用于微藻大规模生产的采收。     

超声波辅助提取桦褐孔菌子实体中三萜类化合物的研究

[目的]优化桦褐孔菌中三萜类物质的超声波辅助提取工艺。[方法]以异丙醇为提取溶剂,采用超声波辅助提取法提取桦褐孔菌中三萜类物质,以不同处理条件、超声功率、超声次数和超声处理时间为试验因素,以三萜的提取率为评价指标进行单因素试验,筛选最佳提取工艺。[结果]超声辅助技术提取桦褐孔菌子实体中三萜类化合物的最佳工艺条件为超声功率400 W、超声次数30次、超声时间15 min;在此条件下,三萜得率为1.06%。[结论]超声波辅助提取法是一种有效的桦褐孔菌三萜类物质提取方法。     

超声波辅助提取黄花菜中类胡萝卜素工艺研究

以黄花菜为试验材料,利用分光光度法筛选提取其类胡萝卜素的最佳条件。通过单因素试验,研究料液比、超声温度、超声时间、超声功率对提取类胡萝卜素含量的影响,采用正交试验确定超声波法提取黄花菜中类胡萝卜素的最佳提取工艺。结果表明：以丙酮石油醚（1∶1）为提取溶剂,按料液比1∶20（g·mL^-1）,超声温度55℃,超声时间25 min,超声功率200 W进行超声提取,在445 nm波长下测定类胡萝卜素提取液的吸光光度值。此方法所得类胡萝卜素含量为62.16 mg·100g^-1,重复性好。     

丹皮酚提取工艺研究

[目的]优选丹皮酚的最佳提取工艺。[方法]采用正交试验方法,以丹皮酚的提取量/率为指标,考察超声温度、超声时间、提取溶剂浓度（氯化钠溶液）、料液比对提取量/率的影响。[结果]丹皮酚的最佳提取工艺为：超声温度50℃、超声时间20 min、氯化钠溶液浓度3%和料液比1∶10。在此条件下,丹皮酚的提取量和提取率分别为0.964 0 g和85.69%。[结论]超声波提取对丹皮酚的提取量/率影响明显。     

三种微藻与苯酚的相互作用研究

[目的]研究小球藻、螺旋藻和斜生栅藻3种微藻与苯酚的相互作用。[方法]以小球藻、螺旋藻和斜生栅藻为藻种,人工模拟配置不同浓度苯酚的废水为受试水样,进行微藻与苯酚的相互作用研究。[结果]苯酚对小球藻的生长具有促进作用,而对螺旋藻和斜生栅藻均有一定的抑制作用,其中螺旋藻表现得更为敏感,当苯酚浓度高于200 mg/L时,螺旋藻死亡;小球藻、斜生栅藻对低浓度苯酚均有一定的去除能力,并随苯酚浓度增加其去除苯酚能力减弱。[结论]利用微藻处理低浓度含酚废水具有一定的应用价值。     

荔枝壳多糖的超声波提取及其抗氧化活性研究

[目的]优化荔枝壳多糖的超声提取工艺,并研究其抗氧化活性。[方法]通过单因素试验和正交试验研究提取温度、提取时间、提取功率和料液比对荔枝壳多糖提取率的影响,确定最佳提取工艺;采用总抗氧化活性评价荔枝壳多糖的抗氧化活性。[结果]荔枝壳多糖的最佳提取工艺为提取温度80℃,提取时间2.5 h,超声功率180 W,料液比为1∶25 g/m L;荔枝壳多糖总抗氧化活性随多糖浓度增大而提高。[结论]该提取工艺简单、高效,荔枝壳多糖提取率高,提取的多糖具有抗氧化活性。     

大蓟总黄酮超声提取工艺研究

[目的]研究大蓟中总黄酮的超声提取技术,并优选其提取工艺。[方法]用超声提取技术,研究乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比4个单因素对大蓟总黄酮提取的影响,并在单因素研究的基础上进行正交试验,确立最佳的提取条件。[结果]大蓟中总黄酮的最佳提取条件为以70%乙醇作为提取剂,在40℃条件下以料液比1：20,超声提取30min。优化条件下提取的大蓟总黄酮总得率为8.82mg/g。[结论]超声波提取法是一种理想的提取大蓟总黄酮的方法。     

大豆豆渣中异黄酮的超声提取工艺研究

[目的]筛选提取大豆豆渣中异黄酮的最佳工艺。[方法]采用单因素和正交试验法,考察乙醇浓度、超声提取温度、提取时间和料液比等4个因素对大豆豆渣中异黄酮的提取效果,并以芦丁为标准品,利用紫外分光光度法测定提取液中总异黄酮的含量。[结果]最佳提取工艺为：乙醇浓度50%,超声提取温度70℃,提取时间40min,料液比1：20。[结论]该研究为将豆渣变废为宝,在保健食品和医药工业中综合开发和利用提供了试验依据。