虎杖叶愈伤组织的诱导和白藜芦醇含量的测定

[目的]诱导虎杖叶的愈伤组织并测定其中白藜芦醇的含量。[方法]以虎杖叶为组织培养材料,在28℃和黑暗培养条件下,在含有浓度0.2 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）和浓度1 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）的MS诱导培养基中进行诱导,15 d后把诱导出的愈伤组织转接到相同培养基中培养15 d,转接3次后,把愈伤组织切下放置在相同培养基上继续培养3次后,采用HPLC法测定虎杖叶愈伤组织中白藜芦醇的含量。[结果]诱导出的愈伤组织生长状况良好,并且测得虎杖叶愈伤组织中白藜芦醇的含量为0.24 mg/g。[结论]由叶诱导出的愈伤组织中含有白藜芦醇成分,用HPLC法测定其含量,方法简便、迅捷,结果可靠。     

盾叶薯蓣愈伤组织诱导研究

以试管培养的盾叶薯蓣为材料,研究了基因型、外植体种类、光暗培养条件、激素配比等因子对其愈伤组织诱导的影响。结果表明：不同基因型盾叶薯蓣的愈伤组织诱导率有较大差异;同一基因型,4种外植体(微块茎、幼芽、叶片、胚)的愈伤组织诱导率有所不同,胚和微块茎易诱导出愈伤,幼芽居中,而叶片较难,光暗培养条件下不同外植体的愈伤组织诱导率有差异,暗培养对叶片愈伤诱导有利,而光培养有利于微块茎愈伤组织的形成;2,4-D可以诱导微块茎、幼芽、胚形成愈伤,但6-BA和2,4-D的组合可以显著提高愈伤组织诱导率。叶片愈伤组织的诱导需要添加NAA和6-BA。     

贯叶连翘愈伤组织诱导及其金丝桃素检测

采用不同培养基及激素诱导贯叶连翘愈伤组织,研究了不同蔗糖浓度对愈伤组织生长的影响,同时采用HPLC对不同生长状态的愈伤组织中金丝桃素含量进行检测。结果表明:MS + 2 ,4 -D 0 .2mg/L +KT 0 .0 2mg/L的培养基中愈伤组织的诱导率最高;提高蔗糖浓度可以促进愈伤组织生长,但合成金丝桃素的最佳蔗糖浓度为30g/L ;褐化的愈伤组织中金丝桃素含量明显高于生长状态好的愈伤组织,增加量可达7.5～9倍。     

不同产地加工方法对何首乌中二苯乙烯苷含量的影响

分别采用晒干、烘干法加工处理不同片型、规格的何首乌药材,采用HPLC法测定其中二苯乙烯苷的含量。以考察不同产地加工方法对何首乌中二苯乙烯苷的影响,为优选何首乌的产地加工方法及优化工艺提供依据。结果表明不同片型、规格何首乌二苯乙烯苷的平均含量依次为100℃烘干≈晒干﹥80℃烘干﹥60℃烘干,随着切片厚度的增加,其含量逐渐减少。可见不同产地加工对何首乌中二苯乙烯苷的含量有影响,其中片型、规格对其影响不显著,干燥方法对何首乌中二苯乙烯苷的影响显著。     

生长调节剂对毛白杨叶愈伤组织诱导和植株再生的影响

利用ＮＡＡ，２，４－Ｄ，ＩＡＡ，ＩＢＡ，６－ＢＡ５种生长调节剂的不同浓度和不同组合配比，完成了对毛白杨叶愈伤组织诱导和守速植株的再生。在６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ分别和ＮＡＡ０．２－２．０ｍｇ／Ｌ、２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ、ＩＡＡ２．０ｍｇ／Ｌ共同作用下，叶愈伤组织诱导率均能达到１００％时，愈伤组织在６－ＢＡ１．０ｍｇ‘Ｌ和ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ的作用下芽诱导率为８５％，而适当浓度的ＮＡＡ和ＩＢＡ有促进     

指纹图谱条件下何首乌中二苯乙烯苷的含量测定

采用高效液相色谱仪,在指纹图谱条件下测定了20批何首乌药材中二苯乙烯苷的含量。所选色谱柱Ag-ilent SB-C18(5μm,4.6 mm×250 mm),检测波长280 nm,流动相乙腈-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温25℃,分析时间60 min。经精密度、稳定性、重复性试验考察,RSD均小于3%,平均回收率为100.33%,表明所建立的方法稳定可靠,可满足企业在进行指纹图谱研究的同时进行二苯乙烯苷的含量测定。     

红掌叶不同部位愈伤组织的诱导及植株再生

本文采用红掌叶的叶柄、叶柄与叶片连接处、带主脉叶片及不带主脉叶片作为外植体,对红掌叶不同部位愈伤组织的诱导及植株再生进行了深入研究,结果表明,红掌叶愈伤组织的诱导及分化能力与叶的不同部位有关,叶柄与叶片连接处的诱导效果最好,改良MS（MS中KNO3、NH4NO3、KH2PO4分别改为950 mg/L、825 mg/L、340 mg/L）作基本培养基优于1/2MS和MS,其愈伤组织诱导及分化的最佳培养基为改良MS＋6-BA 1.5 mg/L＋2,4-D 0.5 mg/L（单位下同）;最佳增殖培养基为改良MS或1/2MS＋6-BA1.0＋KT0.1＋NAA0.2;最佳生根培养基为1/2改良MS＋IBA0.3＋NAA0.2。     

明日叶叶的愈伤组织诱导和快速繁殖

为解决生产上短时间快速获得大量的明日叶(Angelica keiskei Koidz)种苗,采用明日叶叶的不同部位作为外植体进行组织培养。结果表明,利于诱导愈伤组织的培养基是N6+6-BA2.0mg/L+NAA2.0～2.5mg/L;愈伤组织诱导丛生芽分化的最佳培养基是N6+6-BA2.0mg/L;丛生芽生根培养的最优培养基是N6+NAA0.5mg/L+AC3.0g/L,其中培养基中加入50.0mg/L的CH可延缓愈伤组织的衰老。     

粗毛淫羊藿幼叶愈伤组织诱导及其总黄酮含量

为了对粗毛淫羊藿野生资源的保护及淫羊藿黄酮离体生产体系提供技术参考,以粗毛淫羊藿幼叶为外植体,研究粗毛淫羊藿愈伤组织诱导的灭菌剂、消毒条件、培养基、激素配比和光照条件,并测定愈伤组织中总黄酮的含量。结果表明:利用粗毛淫羊藿幼叶进行愈伤组织培养,用2%的NaClO消毒14min,接种于培养基MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L+NAA 1mg/L,在24℃光照强度为1 000lx条件下进行诱导效果最好,继代和保存应在适宜的黑暗条件下进行;诱导出的胚性愈伤组织总黄酮含量较高,达5.38%,与野生粗毛淫羊藿总黄酮含量想当,高于药典规定的标准。     

西番莲愈伤组织诱导研究

以紫果西番莲的花蕾为材料,进行组织培养愈伤组织诱导的研究．结果表明：直接剥取子房可快速有效诱导愈伤组织产生,在MS＋2,4-D2．0＋KT2．0培养基中,愈伤细织诱导率为90％,在MS＋2,4-D0．5中培养,愈伤组织增殖倍数为8．98。     

德庆何首乌提取物对成骨细胞增殖的影响

[目的]观察何首乌提取物对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞增殖及量效关系。[方法]在新生大鼠颅骨成骨细胞体系中加入不同浓度的提取物,分别于加药后24、48和72 h用MTT法检测细胞的增殖。[结果]何首乌乙酸乙酯提取物能促进大鼠颅骨成骨细胞的增殖,试验中最佳作用浓度为0.1 mg/ml。[结论]何首乌乙酸乙酯提取物可促进成骨细胞的增值。     

超声-微波协同萃取何首乌中大黄素的工艺研究

[目的]研究超声-微波协同萃取法提取何首乌中的大黄素的最佳工艺条件。[方法]采用L9（34）正交试验考察了料液比、乙醇浓度、提取时间、提取功率对大黄素提取率的影响。[结果]超声-微波协同提取何首乌中大黄素的最佳工艺条件为：料液比1∶10（g/ml）,乙醇浓度85%,提取时间40 min,提取功率60 W。在最佳工艺条件下,何首乌中大黄素的提取量为2.65 mg/g,该方法的提取加标回收率为96.4%,RSD为4.05%。[结论]利用超声-微波协同萃取何首乌中的大黄素,具有质量稳定、速度快、萃取率高等特点。     

高效液相色谱法测定虎杖中的白藜芦醇含量

[目的]以乙醇为萃取剂,优化提取条件,建立高效液相色谱测定虎杖中的白藜芦醇的方法。[方法]色谱柱为phenomenex C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为无水甲醇-（浓度0.25%）乙酸（65∶35,V/V）等梯度洗脱,流速为0.8 ml/min,检测波长306 nm,以白藜芦醇的提取得率为评价指标,采用单因素试验和L25（5^4）正交试验法筛选最佳工艺条件。[结果]提取白藜芦醇的最佳工艺为：乙醇浓度为60%,料液比为1∶30（g/ml）,萃取温度为55℃,萃取时间为15 min;在此条件下,提取的白藜芦醇的提取得率达到0.826μg/g。[结论]该方法简便、快捷、准确性高,适用于虎杖中的白藜芦醇的测定。     

虎杖中白藜芦醇苷不同检测方法的比较

[目的]分析比较不同方法测定的人工栽培虎杖中白藜芦醇苷的含量差异。[方法]采用高效液相色谱法(HPLC)和毛细管电泳法(CE)对人工栽培虎杖中白藜芦醇苷进行测定,并对这2种方法的线性范围、定量重现性、最低检测限及分离分析时间进行比较研究。[结果]选定HPLC-FD为测虎杖中白藜芦醇苷的最佳检测方法。检测条件:色谱柱为Diamonsil-C18(250 mm×0.46 mm,5μm),激发波长为334 nm,发射波长为408 nm,流动相为浓度25%乙腈,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,进样量为10μl。[结论]高效液相色谱法是测定虎杖中白藜芦醇苷含量较理想的方法。     

HPLC法测定益肾乌发口服液中二苯乙烯苷的含量

[目的]建立测定益肾乌发口服液中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-Oβ--D葡-萄糖苷含量的方法。[方法]采用HPLC色谱法对主药何首乌的主要成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-Oβ--D葡-萄糖苷的含量进行定量分析,色谱柱为岛津VP-ODsc（250.0 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（25∶75）;流速1.2 m l/m in,检测波长为320 nm。[结果]2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-Oβ--D葡-萄糖苷在0.487~13.489 mg范围内呈良好的线性关系,加样回收率为99.94%,RSD=1.75%（n=6）。[结论]高效液相色谱法测定益肾乌发口服液中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-Oβ--D葡-萄糖苷的含量方法操作简单、准确、重复性好、精密度高、专属性强,可以作为益肾乌发口服液的质量控制标准。     

超声波辅助提取虎杖中的白藜芦醇的工艺研究

[目的]优选超声波辅助提取虎杖中白藜芦醇的最佳工艺。[方法]采用超声波提取,通过正交试验考察提取时间、提取温度、超声功率对虎杖中白藜芦醇提取率的影响。[结果]虎杖中提取白藜芦醇的最佳工艺为：以无水乙醇为提取剂,超声波的提取温度为80℃,提取时间为45 min,提取功率为200 W。在此条件下,虎杖中白藜芦醇的提取率可以达到0.940%。[结论]用超声波辅助提取虎杖中的白藜芦醇,工艺稳定性好且简便易行,为有效提取白藜芦醇提供了一种安全可靠的方法。     

小蓟叶片愈伤组织的诱导及增殖条件优化

[目的]建立小蓟愈伤组织的诱导及增殖培养体系。[方法]以野生小蓟无菌苗叶片为外植体,分析2,4-D、6-BA、NAA对小蓟愈伤组织的诱导及增殖的影响,确定最适宜的激素组合。[结果]单因素条件下,0.8 mg/L 2,4-D、0.9 mg/L 6-BA、2.0 mg/L NAA为小蓟叶片愈伤组织诱导的最佳浓度;MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.9 mg/L+NAA 2.5 mg/L培养基为小蓟叶片愈伤组织最适诱导组合。单因素条件下,2,4-D、NAA不适合小蓟愈伤组织增殖培养,MS+6-BA 0.3 mg/L为小蓟叶片愈伤最佳增殖培养基。[结论]该研究为小蓟的进一步开发利用奠定基础。     

激素对黑莓‘Kiowa’叶片愈伤组织诱导的影响

以黑莓品种‘Kiowa’无菌苗的叶片为外植体,研究了外源生长调节剂对愈伤组织诱导的影响。结果表明:不同激素种类、浓度及其配比诱导‘Kiowa’的叶片都可以产生愈伤组织,并且诱导率都为100%,但愈伤组织的状态和生长量有显著差异。其中添加2,4-D产生的愈伤组织质量较好,生长素和细胞分裂素组合使用时有抑制愈伤组织诱导的作用;添加1.0 mg/L 2,4-D的MS培养基诱导的愈伤组织多,质地疏松,呈嫩黄色颗粒状。     

高粱幼嫩叶段愈伤诱导与植株再生

[目的]为了建立以幼嫩叶段为外植体的高粱组培技术。[方法]选用育种上常用的8个高粱恢复系材料,进行愈伤组织诱导与分化再生,研究2,4-D浓度对初级愈伤组织诱导的影响,分别对8个材料的诱导率和分化率进行统计,并观察愈伤组织形态。[结果]结果表明,2,4-D是幼嫩叶段诱导愈伤的关键因素,未添加2,4-D的培养基中不能产生愈伤,适宜的2,4-D浓度为2 mg/L。基因型对愈伤组织的质量和形态有很大的影响,不同基因型材料的诱导率和分化率存在很大差异。[结论]通过比较,筛选出了3个诱导率高、愈伤形态优良且分化率较高的基因型三尺三、R111、8643变。