马,驴精液的低温贮存

马、驴精液的低温贮存王希平王力波张宇明（黑龙江省家畜繁育指导站１５００６０）张立波（克东县医监督所马、驴精液稀释及低温贮存是将精液采集后，用稀释液将精液进行１∶１～３稀释后，分别装入５ｍｌ的安瓶内（青霉素瓶），经封闭后，置入０～５℃的冰箱中贮存。精子...     

猪精液在不同温度下的保存时间对受胎率的影响

随着养猪业的不断发展，猪人工授精越来越受到人们的重视，技术要求越来越高。为此，我们曾对猪精液在不同温度下不同配方的稀释液能保存的最长时间进行了试验。１方法１．１选择三种不同配方的稀释液１．２将上述三种稀释液分别对一头苏白公猪的精液进行稀释，分装成每份２０mL装入瓶内，贴上标签，间隔１h的自然降温后，放进装有自然温度水的器皿内，再放进８℃～１４℃和１５℃～２２℃的恒温箱内水浴保存，每隔２４h检查一次精子的活力，直到活力低于６０％为止。通过以上试验，证明Ⅰ号稀释液的效果最好，在８℃～１４℃时可保存２４…     

牛精液长期保存效果的观察研究

牛精液经液氮低温处理与保存，其生命性细胞－牛精子究竟能存活多久？早在１９７５年，我们将海福特等公牛精液采用“柠果葡”稀释液稀释处理和“铜纱法工艺”制冻，使冻后精子活力稳定在０．４５级以上。并将４头公牛共２４０份冻精样品长期安放在天台钟牛站进行保存效果观察。１９９６年１１月，取最后一批冻精中的１支给母牛输精，１９９７年４月安全产犊，保存时间达２１年，达到了超长期保存的目的。     

不同处理因素对小尾寒羊精子存活时间的影响

用0．9％的生理盐水和VB12注射液稀释小尾寒羊的鲜精液后，分别放置在恒温箱（25℃），常温（21．3℃－26．4℃），冰箱（5℃－10℃）中保存，试验结果表明：用VB12注射液作为小尾寒羊鲜精液稀释液，在5℃－10℃冰箱中保存，可明显延长精子的有效存活时间。     

鸡精液稀释配方对低温保存精子活力和输精效果的影响

为了完善中国南方地区鸡场公鸡精液的保存技术、提高精液的利用率，本试验研究了在低温（4 ℃）保存的条件下，不同的保存时间（0、4、8、24 h）、不同的稀释液配方（原精液、配方Ⅰ和配方Ⅱ）对精液的精子活力变化以及人工输精繁殖效果的影响。选用33周龄黄鸡母鸡192只、公鸡42只，192只母鸡依笼号分为12组（3种处理精液×4个保存时间），每组16只母鸡，公鸡不分组。统一采精后用两种不同稀释液稀释、低温（4 ℃）保存至0、4、8、24 h后观察精子活力，并对母鸡输精，分组收集鸡蛋，对各组受精率、出雏率、健雏率进行比较分析，以原精液低温保存作为对照。结果显示，两种稀释液组的精子低温（4 ℃）保存4、8、24 h，其精子活力极显著高于原精液组（P<0.01），配方Ⅱ组精子的活力高于配方Ⅰ组（P>0.05）；两种配方稀释液组的精液低温（4 ℃）保存4 h，输精受精率高于原精液组（P<0.05）；两种配方稀释液组的精液在低温（4 ℃）保存8 h，输精受精率极显著高于原精液组（P<0.01）。表明这两种精液稀释液更有利于精液保存，经稀释后的精液可以显著提高受精率，可为中国南方鸡场种公鸡精液保存技术的完善提供有力的数据支撑。     

死精子对猪精液17℃液态保存的影响

为揭示17℃液态保存过程中猪精子质量和功能持续下降的机制，本试验采集9头在役的不同品种公猪（长白、大白和杜洛克）的精液48份，使用BTS溶液等体积稀释后分为3份，其中的两份分别使用反复冻融（方法 A）和低渗处理（方法 B）方法杀死精子并离心获得稀释液A和B，将另一份精液样品离心分离精浆（Seminal Plasma,SP）和精子。分别使用不同体积比例稀释液A:精子（1:1、4:1和19:1），稀释液B:精子（1:1、4:1和19:1）,SP:精子（1:1和4:1）和BTS:精子（4:1）重悬离心后的猪精子，以SP和BTS重悬的精液及原精液样品作为对照，所有精液样品于17℃下保存3 d。结果表明：随着保存时间的延长，所有稀释液和稀释倍数处理均损伤了精子活率和活力（P<0.01）及质膜完整性（P<0.05）。稀释液A比B引起的精子脂质过氧化水平更低（P<0.05）。5倍稀释精子，稀释液B的精子活力较BTS组降低（P<0.05），稀释液B引起的精子细胞内活性氧族（ROS）水平比稀释液A更高（P<0.05），而精液总抗氧化物（TAC）水平更低（P<0.05）...     

犊牛喂料四要点

(一)稀释液的配方 12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黄液20毫升。 (二)稀释方法 将经过检查合格的精液(活力0.6以上、精子密度中等)按1:2～5倍稀释液进行稀释,其稀释原则应保证每个颗粒精液中所含精子数不少于3 000万～4 000万个、解冻后呈直线前进运行的精子不少于1500万个。 (三)冷冻 在装有液氮的容器上置一铜纱网,距液氮面2厘米左右,使温度维持在-80～1000℃。将平衡后的精液用滴管按一定量(0.1毫升)滴于铜纱网,摘完最后一滴停3～5分钟。当精液颗粒颜色变白时,立即浸入液氮,并将全部颗粒取下,收集     

比格犬的繁殖技术Ⅰ.采精及精液冷冻

采用手握法采取比格犬精液,成功率为71.4％,平均射精量2.67mL;精液呈弱酸性,每次射出的精液分三段,精子主要在第二段,精子平均密度为2.105×10~8/mL;新鲜精液的活力为0.8～0.9;精液用两种稀释液稀释后在液氮中保存14～60d,解冻后,其孵活率分别为0.425和0.427.     

鸵鸟精液品质及精液低温保存条件的研究

测定鸵鸟精液生理指标 ,结果表明 ,鸵鸟的射精量为 0 1 7～ 2 0 3mL ,精液 pH6 7～7 3,精子密度为 1 5 7～ 48 0亿 /mL ,原精液精子畸形率 3 0 9%～ 1 3 3% ,精子活率范围0 78～ 0 92。对鸵鸟精液用不同稀释液稀释后低温保存效果比较研究 ,初步获得在 0～ 5℃时用改进MEM液作稀释液以 1∶2比例稀释后 ,精子在设计的条件下存活时间平均约 72h ,而相应原精液或 0 85 %NaCl液作 1∶2稀释的精液在同样条件下精子仅能存活约 2 4h     

马立克氏病二价疫苗稳定性的研究

马立克氏病二价疫苗（Ｚ４＋Ｆｃ－１２６）是一种需在液氮中保存的细胞结合性疫苗．试验表明，疫苗在液氮中保存一年对效价没有影响．疫苗从液氮中取出后，用３７℃温水融化对疫苗病毒的损失最小．根据疫苗在１８种稀释液中的稳定性试验结果，选出一种（５％肉汤－ＳＰＧ）作为疫苗的指定稀释液．用该稀释液稀释的疫苗在使用过程中，存放在冰浴上（０℃）能最好地维持疫苗的稳定性．     

不同稀释剂对猪冷冻精液精子活率的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液，在37℃下离心，弃去精清，收集浓缩段富含精子部分，用7种不同的稀释液进行稀释，应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明，在7种稀释液中，7号稀释液优于其他6种稀释液（P〈0．05）：与其他的冷冻保护剂相比，甘油的冷冻保护性能较好（P〈0．01），其适宜浓度为2～4mL／L：干解冻（40℃～45℃）效果优于湿解冻，解冻后精于活率达0．6～0．49（P〈0．05）；稀释液中添加安钠咖可有效地延长精于的冻后存活时间（P〈0．01）。     

稀释液中添加番茄红素对鸡精子保护作用的研究

为了研发新的鸡精液稀释液,试验在YHFB鸡精液稀释液(分别为B1液、B2液、B3液、B4液)中添加浓度分别为0,0.1,0.2,0.05 mg/mL抗氧化剂番茄红素,按1∶1的比例对鸡混合鲜精进行稀释,稀释后置于长时间保存的低温条件(5℃左右)下,定期检查精子活力,当小于或等于0.3时停止检查;置于高温恶劣环境(41℃水浴)下,每30 min检查1次精子活力,直到精子全部死亡。结果表明:低温条件下不同时间精子活力B1、B4液,B2、B3液均差异不显著(P0.05),添加0.1 mg/mL番茄红素的B2液在48小时前精子活力稍大于B3液,48小时后B3液精子活力稍大于B2液;高温条件下不同时间精子活力各组之间无显著差异(P0.05)。说明在低温条件下鸡精液稀释液中添加0.1 mg/mL番茄红素,能显著延长精子活力,但在41℃的高温条件下对精子的保护作用不明显。     

犬精液稀释液的筛选试验

为了探讨犬精液稀释的最佳稀释,本试验选取近年来哺乳动物常用的4种精液稀释液类型（A为卵黄稀释液,B为三基类稀释液,C为乳糖类稀释液,D为棉子糖类稀释液）进行对比试验,分析它们对公犬精液品质的影响。结果表明,精液液态保存中B稀释液效果最好,含糖的稀释液效果优于不含糖的稀释液,同时发现含棉子糖的D稀释液对精子的液态保护作用优于含乳糖的C稀释液;在精液的冷冻保存中,B稀释液对精液冷冻保存效果优于糖类稀释液。而在两组糖类稀释液中,含棉子糖的稀释液D液的精子活力及死精率效果要优于含乳糖的C稀释,差异显著（P＜0.05）,但C液及D液的精子畸形率检测差异不显著（P＞0.05）。     

火鸡精液液态低温保存

本文研究了3种稀释液在0～5℃下保存火鸡精液的效果及稀释液pH值、稀释比例和卵黄浓度对精子存活力的影响。原精及稀释精液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不保存时,受精率分别为71.7％,64.03％,63.29％和63.77％(P<0.05);在0～5℃下保存48h后,原精完全丧失受精率(0％),而稀释精液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的受精率分别为52.40％,45.30％和20.33％(P<0.01)。火鸡精液在0～5℃保存过程中,pH值降低,原精比稀释精液降低程度大。在本研究条件下,pH6.5和1:3稀释最适合于火鸡精子的存活,稀释液中添加5％或10％卵黄可提高火鸡精子的存活力。     

附睾尾液对绵羊精液冷冻保存的影响

实验旨在研究冷冻稀释液中添加附睾尾液（Cauda Epididymal Fluid,CEF）对绵羊精液冷冻保存的影响。利用假阴道法收集4只湖羊精液并混合,以附睾尾液中总蛋白为基准,在冷冻稀释液中分别添加不同浓度CEF(0、140、280、420μg/mL)。精液经过冷冻后投入液氮保存,解冻后检测精子活力、运动参数,以及质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位、37℃精子存活时间等指标。结果表明：冷冻-解冻后280μg/mL CEF组的精子活力、前向运动、平均路径速度、直线运动速度、直线度、线性度、头部横向位移幅度均显著高于其他各组（P<0.01）,曲线运动速度高于其他各组（P<0.05）;精子质膜完整率、顶体完整率也高于其他各组（P<0.05）;JC-1染色结果显示,280μg/mL CEF组精子线粒体膜电位高于其他各组（P<0.05）;280μg/mLCEF组精子在37℃环境下可存活14h,较对照组精子能多存活4h。可见,在冷冻稀释液中添加适量CEF可以提高精液的冷冻效果。     

稀释液溶质、渗透压、pH值和缓冲指数与低温保存鸡精液效果的关系

将葡萄糖、氯化钠、氯化钾、柠檬酸钠四种物质分别配制成三个渗透压水平(278mOsm、328mOsm、378mOsm)的12种单方精液稀释液，在低温(1～4℃)下进行鸡精液稀释保存试验，在四种物质中各选出一种好的稀释液，再将所选四种单方稀释液按不同比例制成复方精液稀释液，再次进行保存试验。所有稀释液均测定渗透压、pH值、缓冲指数、精子存活时间、精子生存指数等指标。结果表明：①柠檬酸钠、葡萄糖对鸡精液的保存具有重要作用，而氯化钾在鸡精液稀释液中并不是必需的。②复方稀释液保存效果普遍优于单方稀释液。③低温下鸡精液稀释液渗透压应为等渗或接近等渗，且最适渗透压还与构成稀释液的物质种类和相互配比有关系。④稀释液pH值应接近中性，最好与精液pH值保持一致。⑤在缓冲指数为3．894—7．257的范围内，缓冲指数与精子存活时间和生存指数呈现显著的负相关。     

磁场对低温保存牛精液的影响

将５ｍＬ稀释后的新鲜精液分为５组，每组１ｍＬ。取其中１组作为对照组，不经磁场处理，其余４组分别放入磁化杯磁化２ｈ、５ｈ、２４ｈ和一直磁化，５组均放在冰箱０－５℃的环境中保存。对其精子活率、顶体完整率和精子存活时间进行分析，试验重复１５次。结果表明，精液经过磁化可以提高活率，并且延长了存活时间，尤以磁化５ｈ效果最明显，其存活指数比对照组提高了２３．７％，差异显著。磁场能使精液的顶体完善率下降，且随着     

利用猪皮浸出液保存解冻后牛颗粒冷冻精液的研究

将猪皮浸出液（俗称猪皮胨）按一定的比值与一般的精液稀释液混合均匀，然后将牛的颗粒冷冻精液按一定稀释倍数稀释于此液中。利用猪皮胨的固态特性迫使精子停止运动，进而降低解冻后精子的代谢活动、达到延长精子存活时间而不丧失受精能力的目的。其中五号保护剂保存精液60h活力基本不变，六昼夜时活力下降到0．1。     

不同稀释液和温度对猪精液稀释及常温保存效果的影响

本试验分别设计了4种稀释液配方和保存温度。结果表明：1号稀释液（即变温液）对原精液稀释保存效果最好,精子活力、有效存活时间、总存活时间和生存指数分别为0.75、101.5 h、134.6 h、76.8 h,稀释后的精子活力与其他组之间差异不显著（P〉0.05）;精子有效存活时间、总存活时间、生存指数1号与2号配方差异不显著（P〉0.05）,但与其他配方组之间差异极显著（P〈0.01）;且试验得出,17℃条件下保存的稀释精液,其活力、存活时间的生存指数等个指标最高,保存效果最好。     

稀释倍数对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究稀释倍数对湖羊精液4℃保存的影响，本实验使用3只1～2岁体况良好的公羊，将采集的精液稀释2、5、10、15、20、25倍后，检测4℃保存过程中精子活率、活力、运动速率以及质膜完整性和顶体完整性。结果表明：保存3～5 d,10倍稀释保存的精子活率和活力显著高于其他各组；保存1～4 d,25倍高倍稀释的精子活力下降最快，且显著低于其他组；保存1～3 d,10倍稀释保存的精子曲线速率（VCL）和路径速率（VAP）显著高于20和25倍稀释组；保存期间，10倍稀释保存的精子质膜完整性最高，且在第4天显著高于其他组；保存3～5 d,5和10倍稀释保存的精子顶体完整性显著高于15～25倍稀释组。因此，在本实验条件下，5～10倍为湖羊精液4℃保存的最适宜稀释倍数，过低或者过高的稀释倍数都不利于湖羊精液4℃保存。