牛体外受精冷冻胚胎移植妊娠率影响因素的研究

一、材料与方法1.1试验动物选择无生殖道疾病、发情周期正常、膘情中等的荷斯坦奶牛、蒙古牛、鲁西黄牛、西门塔尔牛作为试验动物。1.2牛体外受精冷冻胚胎全部使用澳大利亚进口胚胎,冷冻方法为开口式玻璃化冷冻法(OPS)。1.3试验方法1.3.1不同品种母牛对体外受精冷冻胚胎移植妊娠率的影响:该试验在内蒙古旭日生物高技术股份有限公司试管牛示范基地选用国内具有代表性的4个牛品种,即蒙古牛、西门塔尔牛、鲁西黄牛和黑白花奶牛作为受体牛。由专人进行统一饲养管理。在移植90天后进行直肠妊娠检查,确定妊娠的受体母牛数。1.3.2受体母牛的饲养…     

体细胞克隆牛生产效率的影响因素

体细胞克隆牛生产效率受实验室环节和胚胎移植环节等多种因素的影响。依据前期试验结果,重点分析了胚胎移植数量、季节变化和胚胎移植受体牛生理状态等因素对体细胞克隆牛生产效率的影响。结果表明:移植2枚胚胎比移植1枚胚胎和3枚胚胎能获得较高的妊娠率和产犊率及较低的流产率;在春、夏和秋季(5~9月)进行胚胎移植的效果显著优于冬季(12~1月);A、B级黄体受体牛的妊娠率显著高于C级黄体受体牛的妊娠率。胚胎移植数量、移植季节和受体牛生理状况均能显著影响克隆牛的生产效率。     

应用胚胎生物技术繁育高产奶牛

本项目由山东省梁山畜牧发展有限公司完成，项目技术创造性强，先后进行了受体鲁西黄牛选育、孕前及孕期的饲养管理，供体牛夏冬季超数排卵，克隆胚胎移植，胚胎规模化移植等方面的技术研究；组装成了以鲁西黄牛为受体，应用胚胎移植技术繁育高产奶牛的配套技术；开创了以鲁西黄牛为受体，应用胚胎移植技术大规模繁育高产奶牛的先例。3年来，生产高产奶牛胚胎516枚，移植受体牛500头次，鲜胚移植成功率达到54％，冻胚移植成功率达到42．8％，体细胞克隆胚胎移植成功率达到20．5％，出生犊牛163头。     

不同亚种牛卵母细胞克隆效率和胚胎移植效果分析

在体细胞核移植(克隆)试验中,作为受体细胞的卵母细胞是制约克隆效率的重要因素之一.本文通过对鲁西黄牛和荷斯坦奶牛进行活体取卵(OPU)试验,并以两个不同亚种的卵母细胞分别作为受体细胞进行奶牛体细胞克隆和胚胎移植试验,经卵母细胞克隆效率和胚胎移植效果分析,探讨以鲁西黄牛代替荷斯坦奶牛作为卵母细胞的供体的可行性.结果显示,夏季鲁西黄牛OPU的效果更好,用鲁西黄牛卵母细胞构建的重构胚的融合率显著高于荷斯坦奶牛;鲁西黄牛卵母细胞形成的克隆胚移植后,其妊娠率、产犊率和活产率与荷斯坦奶牛相当;采用不同亚种克隆胚和不同类型受体牛互相组合进行胚胎移植,结果表明亚种内移植组妊娠率明显高于亚种间移植组,而且亚种内移植组非妊娠牛的返情时间也明显推后.以上结果说明,鲁西黄牛可以代替荷斯坦奶牛作为卵母细胞的供体和胚胎移植受体牛;不同亚种受体牛与克隆胚的适当组合可以显著提高胚胎移植的效果.本研究为以后开展不同亚种间克隆提供了可行性参考.     

品种和超排时间对羊胚胎移植效果的影响

对白萨福克、东弗里生、特克萨尔和陶塞特4个绵羊品种和不同季节超排结果比较表明：（1）品种的繁殖特性是影响超排和鲜胚移植效果的主要因素,白萨福克和东弗里生羊是繁殖季节较长、对激素反应敏感、鲜胚移植产羔率较高、非常适合作为供体羊进行胚胎移植的绵羊品种。（2）超排季节对胚胎移植效果的影响主要表现在供体羊对激素的敏感性反应和胚胎质量等方面。在繁殖季节超排,供体羊对激素的敏感性、产羔质量和可用胚率均高于非繁殖季节,但对鲜胚移植产羔率影响不大。（3）4个品种两批共采集可用胚370枚,移植受体羊315只,受体产羔率74．6％。移植胚胎产羔率69．5％。     

兔胚胎移植影响因素研究

【目的】探讨分析兔胚胎移植的影响因素,为提高兔胚胎移植效率及生产转基因兔奠定基础。【方法】采集获得的交配胚胎经体外培养后,按单只受体移植胚胎数、受体类型（经产母兔与青年母兔）、受体同期发情方式随机分组,对比观察胚胎移植后受体母兔的妊娠情况。【结果】单只受体兔每次移植10～20枚和20～30枚胚胎获得的妊娠率分别为23．1％和20．0％,二者差异不显著（P〉0．05）;采用经产母兔为受体可获得显著高于青年母兔的妊娠率（27．8％vs13．3％,P〈0．05）;以自然同期发情为受体母兔胚胎移植后获得的妊娠率显著高于诱导同期发情的受体母兔（30．7％vs10．0％,P〈0．05）。【结论】兔胚胎移植时选择自然发情的经产母兔作为受体能获得较好的胚胎移植效果,单只受体移植胚胎数以控制在10-30枚为宜。     

奶牛一步细管冷冻胚胎移植试验

一步细管冷冻胚胎移植了76头受体，妊娠37头，移植妊娠率48．68％，与加拿大常规脱甘油的冷冻胚胎移植妊娠率（51．13％）相比较，差异不显著（P＞0．05）。     

影响山羊胚胎移植效果的因素初探

为探讨最佳的胚胎移植方案,提高胚胎移植效率,试验以不同受体山羊为研究对象,比较了不同受体品种、移植胚胎数目、不同季节等因素对胚胎移植效果的影响。结果表明:不同品种受体和移植季节对胚胎移植效果影响不显著(P>0.05);胚胎移植数目对妊娠率没有显著影响(P>0.05),但移植一枚胚胎的胚胎受孕率显著高于移植二枚和三枚胚胎(P<0.01)。     

利用南方地区本地黄牛移植冷冻奶牛胚胎的效果研究

共选用105头江西赣南地区地方黄牛作为受体,分3批次采用不同的发情处理方法及不同的饲养管理方法,分别在夏、秋、冬3个季节开展了一次冷冻胚胎移植工作,3次移植妊娠率分别为40%,36%,53.8%。结果表明:饲养管理及发情处理方法对移植妊娠率产生重要的影响,而黄体直径大小与移植妊娠率高低并不成正比关系,分析了在南方地区选用本地黄牛作为受体时影响胚胎移植妊娠率及移植效率的因素。     

提高地方杂种黄牛移植冷冻奶牛胚胎效果的研究

本试验共选用77头地方杂种黄牛作为受体，进行高产奶牛冷冻胚胎移植。对其中的70头受体牛进行同期发情处理，经过两次PG处理后有58头牛发情，同期发情率为82．9％，移植前经直肠检查有68．6％的受体牛黄体合格。但由于子宫炎症，最后移植了33头受体牛，并达到了51．5％的妊娠率。因此在不存在子宫炎症的情况下，我们已达到比较好的胚胎移植效果。     

中国荷斯坦牛冷冻胚胎分割移植试验研究

牛胚胎冷冻的成功，使胚胎移植技术不受时间、地域的限制，并且可以做到对受体进行选择，从而可提高移植妊娠率；牛胚胎分割的成功，是增加胚胎数目和生产同卵双犊或多犊、获得更多牛犊的一个有效方法。如果将胚胎冷冻和胚胎分割技术结合起来，那未就可以达到既增加胚胎数目，降低胚胎移植成本，又利于胚胎移植技术在生产中推广应用的双重目的，为此开展此项研究。将用１０％甘油为冷冻剂，８枚７日龄中国荷斯坦奶牛的冷冻胚胎，在３５℃水浴解冻，用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液脱除抗冻剂，７枚可用胚胎用简单方法分割成１４枚半胚，将裸半胚成对移植于与胚胎日龄同步的７头受体牛。结果３头妊娠，移植妊娠率为４２．９％（３／７），共产５头牛犊，其中２头产同卵双犊，半胚产犊率为３５．７％（５／１４），按整胚计算产犊率为７１．４％（５／７），较同期未分割的冷冻胚胎的产犊率３７．８％（１７／４５）提高３３．６个百分点。     

牛胚胎移植试验研究

本研究应用国产激素和器械对奶牛进行超数排卵，采用胚胎移植技术使黄牛繁殖奶牛。５ａ共超排供体牛１８５头，成功１５９头，成功率为８１．９５％；共获卵１２０１枚，头均７．５５±６．３７枚，其中可用胚胎８８０枚，头均５．６８±４．９６枚。同期发情处理受体牛２３６头，发情１３９头，发情率５８．９０％；鲜胚移植受体牛１７８头，受胎７８头，受胎率为４３，８２％，其中移植受体黄牛１４５头，受胎６１头，受胎率４２．０７％，移植受体奶牛３３头，受胎１７头，受胎率为５１．５２％；冷冻胚胎移植受体牛６１头，受胎２７头，受胎率为３７．７０％；５３胚胎移植产犊８５头。确立了应用国产激素垂体促卵泡素（ＦＳＨ）和前列腺素（ＰＧＧ＿（２２））诱发牛超数排卵和发情同期化处理的最佳程序和剂量，并总结出了采卵方法、胚胎鉴定、胚胎冷冻保存和移植等相应环节的技术规程。     

外界因素对胚胎移植受体妊娠率的影响

胚胎移植成功率取决于诸多因素。它不仅与供体的胚胎质量、数量、不同发育阶段、供受体发情同步差异、受体品种、体况及繁殖力等内在因素有关,还受季节、气候、环境条件、饲养管理、疾病等外界因素影响。本文就外界因素对波尔山羊移植受体妊娠率的影响进行探讨。     

奶牛鲜胚移植黄牛或奶牛技术应用

对１３头黑白花奶牛作超排处理，超排有效１１头，有效率８４．６％，头均获胚３．５枚，其中可用胚头均２．８枚。移植受体奶牛８头，妊娠４头，妊娠率５０％；移植受体黄牛１６头；妊娠８头，妊娠率５０％。卵巢和黄体发育好的供体牛在超排有效反应及超排后黄体数明显优于差的供体牛（Ｐ〈０．０１）。进口ＦＳＨ和国产ＦＳＨ的超排效果没有显著差异（Ｐ〉０．０５）。     

波尔山羊胚胎回收和移植器械研制与应用

采用自己研制开发的波尔山羊胚胎手术回收和移植的关键器械，共进行122只供体的胚胎回收，回收供体卵巢上正常黄体总计2751枚，回收卵总数2504枚，回收率达到92．3％。采用这种自行研制的胚胎移植器械进行胚胎的子官移植，将2127枚波尔山羊胚胎移植给1182只受体，受体妊娠率达到63．0％（745／1182），证明该胚胎移植器械和制定的应用程序是可行的。     

受体牛黄体位置及黄体等级对胚胎移植效果的影响

为探索黄体等级和黄体位置对胚胎移植后受体牛妊娠率的影响,便于在应用中准确判断受体牛是否可以进行移植,整理、统计分析了137头移植受体牛的记录资料,结果表明:"2次PG"法和"CIDR PG"法处理受体牛,对形成黄体的等级没有影响;同期发情处理后,受体牛A、B、C级黄体的移植妊娠率分别为47.37%、42.86%和48.34%,黄体等级之间无明显差异(p>0.05);左、右侧黄体的妊娠率分别为43.63%和47.56%,移植时黄体存在的位置与移植妊娠率没有明显差异(p>0.05)。     

科苑荟萃

云南水牛的同期发情、超数排卵和胚胎移植试验；无角道塞特绵羊超数排卵技术研究；胚胎移植技术在云南半细毛羊上的应用研究；受体品种、体重及移植季节对杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊体重的影响；波尔山羊胚胎徒手分割试验；波尔山羊胚胎回收和移植器械研制与应用；OPS法玻璃化冷冻绵羊胚胎的移植效果观察；影响绵羊、山羊超数排卵及胚胎移植效果因素分析；安胎散提高羊胚胎移植受胎率及其机理的研究；[编者按]     

提高牛冷冻胚胎移植妊娠产犊率的研究

分别对牛冷冻胚胎的解冻液、解冻后胚胎的质量评定、解冻后的胚胎处理,及受体牛的同步发情处理方法和移植方法等方面开展研究。结果表明：(1)进口解冻液脱甘油的胚胎复苏率为76％(19／25),优于传统解冻液。(2)解冻后未作任何处理直接移植的妊娠率(68．4％),产犊率(47．37％)最高,切割未作培养的次之(妊娠率37．5％,产犊率25％,流产率33．3％),移植前切割培养的最差(妊娠率、产犊率均为9．09％);(3)受体黄体发育正常、同步发情率高达83％,妊娠率高达62．5％;(4)移植枪加套管受体妊娠率(52．9％)明显比不加套管的高。熟练的操作技术受体妊娠率较高(62．5％)。     

规模化养殖肉牛效益好

牛是反刍动物,食草后经过反刍、倒沫,促使体格健壮,得病概率低,比养猪要省事。此外,牛以食粗饲料为主,成本低,农民可放心饲养。我国肉牛基本上分为夏洛莱牛、利木赞牛、鲁西黄牛、秦川牛、延边黄牛、三元杂交牛（法国、德国、中国）和乳肉兼用品种西门塔尔牛,这几个品种性能各有千秋,养殖户可视自己实际情况选择饲养的品种。     

规模化养殖肉牛效益好

牛是反刍动物,食草后经过反刍、倒沫,促使体格健壮,得病概率低,比养猪要省事。此外,牛以食粗饲料为主,成本低,农民可放心饲养。我国肉牛基本上分为夏洛莱牛、利木赞牛、鲁西黄牛、秦川牛、延边黄牛、三元杂交牛（法国、德国、中国）和乳肉兼用品种西门塔尔牛,这几个品种性能各有千秋,养殖户可视自己实际情况选择饲养的品种。