测定饲料中维生素A和维生素E含量方法的研究

本文旨在建立一种能同时准确测定饲料中维生素A和维生素E含量的方法,试验将样品在碱性条件下65℃水浴超声皂化提取,冰乙酸调pH至中性,乙醇稀释后直接用高效液相色谱法(HPLC)进行测定。结果表明:维生素A在0.036~108IU/mL线性关系良好,相关系数为1.00000,检出限1000IU/kg,方法回收率为95.8%~98.8%,RSD为0.8%~4.4%(n=5);维生素E在0.6~125μg/mL线性关系良好,相关系数为0.99998,检出限15mg/kg,方法回收率为95.3%~102.2%,RSD为0.8%~4.2%(n=5)。本方法快速简便,适用于配合料、浓缩料、维生素预混料和复合预混料中同时准确测定维生素A和维生素E的含量,相对于国标法节省了大量的时间和试剂,可应用于日常大批量饲料检测中。     

高效液相色谱法测定维生素E粉含量

用高效液相色谱法测定饲料添加剂维生素E粉中维生素E含量。采用EclipseXDBC18柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(98∶2,V∶V)为流动相,流速为1.2mL/min,检测波长为285nm,柱温为25℃。在此色谱条件下,维生素E在0.104￣0.602mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,r=0.9998,平均回收率为100.3%,RSD为0.72%。本法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂维生素E粉中维生素E含量测定。     

测定饲料添加剂中维生素A、D3、E含量的新方法

提出用充入氮气和放置皂化过夜的方法同时测定饲料添加剂中维生素A、D3、E的含量。在试样中加入抗氧化剂焦性没食子酸、乙醇和氢氧化钾溶液后充入氮气,在密封和避光的条件下放置24小时,使样品充分皂化。维生素经萃取和提纯后,用高效液相色谱仪进行分析。     

高效液相色谱法测定鱼样中的维生素A、维生素D3和维生素E

本研究旨在探讨采用一次进样同时检测鱼体组织中的维生素A、维生素D3和维生素E的方法。以石油醚提取鱼体组织中的脂溶性维生素,用VARIAN Res Elut 5μCl8 90A色谱柱,流动相为甲醇-水,流速为1.0 mL/min,对提取物中的3种脂溶性维生素进行了良好分离。结果表明,在292 nm波长下,维生素A、维生素D3和维生素E分别在0~15、0~10和0~20μg/mL范围内的进样量与峰面积的线性关系良好。各维生素的检测限:维生素A为0.8×10-3ng,维生素D3为0.06×10-3ng,维生素E为9.0×10-3ng。以石油醚提取鱼体组织中的脂溶性维生素,采用反相高效液相色谱仪在波长292 nm处可同时对鱼体组织中维生素A、维生素D3和维生素E进行较好的分离和测定。     

紫外分光光度法测定亚硒酸钠维生素E注射液及预混剂中维生素E含量

采用紫外分光光度法测定亚硒酸钠维生素E注射液及预混剂中维生素E含量.用乙醇直接破乳提取法、乙醇提取法及超声波助溶法分别提取注射液及预混剂中的维生素E,在284 nm测定.方法的线性范围为60～1 80μg/mL(r=0.999 4);注射液和预混剂的方法回收率分别为100.17%～100.48%和98.08%～99.04%;曰内和日间相对标准偏差,注射液分别为0.37%～0.91%和0.53%～0.62%,预混剂分别为1.15%～1.21%和1.09%～1.25%.该法操作简便、准确快速,分析结果令人满意.     

铈量法测定维生素E粉含量的探讨

本文通过试验找到了影响铈量法测定维生素E粉含量的因素,得到了稳定测试的条件,并将其与气相色谱法测定进行比较,两者分析结果一致。     

气相色谱法测定饲料添加剂中维生素K3和E的含量

复合多维添加剂或预混饲料含有较多维生素E和维生素K3,其中由于维生素E易被氧化,主要以其醋酸酯形式存在。对维生素E醋酸酯含量测定,通常采用高效液相法,或是比色法、荧光法等．样品均需经皂化、提取、洗涤、浓缩等前处理,操作繁琐．时间长,在生产过程中不能及时监测产品的质量,使生产与检测脱节。我们参考有关文献（林海丹等,1996;王玉杰等,2004）,采用不经皂化而直接提取维生素E醋酸酯,同时测定维生素K3的气相色谱法。     

毛细管气相色谱法测定维生素E原料含量

用毛细管气相色谱法测定饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量.以正三十二烷为内标物,采用DB-1毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25um),FID检测器;氮气为载气;柱温为280～290℃,检测器温度为290～300℃;进样口温度为290-300℃;无分流进样.在此色谱条件下,维生素E和内标物正三十二烷分离良好,在0.994～4.013 mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,r=0.9998,经方法评估函数的评价表明,方法不存在恒定系统误差和相关性系统误差,方法准确性较好.本法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量测定.     

西藏主要饲料作物中维生素E含量的测定

维生素E（VE）是动物机体重要的抗氧化物质,也是家畜全混合日粮（TMR）饲料中必须满足的成分。本文通过分析西藏主要饲料作物中维生素E的含量,为家畜合理补饲及饲草配方提供基础数据。本实验采用荧光分光光度法测定饲料作物中VE的含量。结果表明：12种粮食作物与5类豆类作物进行两组均数间的t检验,豆类组间的VE含量显著高于粮食作物,F=27.049,P=0.000,差异极显著。对5类豆类进行组间F检验,F=30.780,P=0.000,差异极显著,含量最高的是黄豆,为（210.904±7.089）μg/g,最低的是刀豆,含量为（145.130±7.301）μg/g。12种粮食作物中,VE含量最高的是青稞,含量为（50.135±1.539）μg/g,最低的是糯米,含量为（23.887±1.400）μg/g,组间F=63.705,P=0.000,差异极显著。综上,黄豆和西藏主要粮食作物青稞可作为主要VE饲料的来源,合理搭配饲料,可以减少当地家畜营养代谢性疾病的发生。[关键词] 荧光分光光度法|维生素E|饲料作物     

紫花苜蓿镰刀菌根腐病研究进展

紫花苜蓿(简称苜蓿)是我国和世界种植面积最大最重要的豆科牧草。由镰刀菌引起的根腐病(称为镰刀菌根腐病)是苜蓿生产上的主要限制因素之一,严重影响该牧草的产量和品质,导致草地衰败和利用年限缩短。镰刀菌作为一类重要的土传病原真菌,一直是苜蓿根腐病研究的热点。由于镰刀菌能在土壤中长期存活,且苜蓿为多年生牧草,导致苜蓿根腐病的防治尤为困难。从苜蓿镰刀菌根腐病的分布与危害、病原种类与生物学特性、侵染源及发病规律、镰刀菌对苜蓿的致病性及致病机理、苜蓿品种对镰刀菌的抗病性以及防治方法等方面阐述苜蓿镰刀菌根腐病的研究进展,并对今后的研究方向进行了展望,以期为苜蓿镰刀菌根腐病后续研究及其防治新方法的开发利用提供理论依据。     

凋萎和不同添加剂对紫花苜蓿青贮品质的影响

以孕蕾后期至初花期紫花苜蓿为材料,在实验室条件下研究了两种凋萎程度(晾晒3 h和晾晒12 h),对应含水率分别为72.6%和61.8%的苜蓿草分别添加乳酸菌接种剂(LAB)、甜菜粕(SB)、乳酸菌+甜菜粕(LAB+SB)、甲酸钠(SF)、甲酸钠+甜菜粕(SF+SB)五组不同添加剂处理及对照组(CK)对苜蓿青贮发酵品质和主要营养成分含量的影响。青贮65 d开封,对青贮进行了感官评定和实验室评定。结果表明,1)添加剂对苜蓿青贮发酵品质有极显著的影响(P<0.01),各种添加剂均不同程度地提高了苜蓿青贮饲料的发酵品质,显著降低了青贮饲料的pH和氨态氮含量;2)两种凋萎程度下苜蓿青贮的NDF、ADF和干物质回收率均与对照组差异不显著,LAB+SB和SF处理显著提高了青贮饲料WSC的含量(P<0.05),添加SB显著降低了青贮饲料的CP值(P<0.05);3)提高原料的凋萎程度能够改善苜蓿青贮饲料的发酵品质,显著提高青贮饲料的CP和WSC含量(P<0.05)。总体来说,不同添加剂的青贮效果不同,添加LAB+SB的青贮品质最佳。     

干旱胁迫对不同抗旱性苜蓿品种根系形态及解剖结构的影响

以强抗旱陇中苜蓿、中抗旱陇东苜蓿和弱抗旱甘农3号紫花苜蓿为试验材料,采用营养液沙培法,以-1.2 MPa PEG-6000模拟干旱胁迫,比较不同胁迫时间(0、3、6、9、12和15 d)对不同抗旱性苜蓿品种幼苗根系形态及解剖结构的影响。结果表明:随胁迫时间的延长,陇中苜蓿的根尖数、根系干重、根系总长度、根系总表面积和木质部面积不断增大;陇中苜蓿和陇东苜蓿的维管束直径、维管束面积和韧皮部面积均不断增大;甘农3号的根系总长度、根系总表面积及皮层占根系直径比例不断增大,而其根系干重、原生和次生木质部导管直径、维管束直径及维管束面积不断减小。胁迫6 d后,陇中苜蓿和陇东苜蓿的根系总长度、根系总表面积和根体积均显著高于甘农3号;胁迫9 d后,陇中苜蓿根系平均直径、根体积、根系干重、维管束面积、木质部面积和次生木质部导管数目均显著高于陇东苜蓿和甘农3号。供试苜蓿均可通过增加根系总长度及次生木质部导管数目响应干旱胁迫。此外,陇中苜蓿可通过增加根体积、根尖数和改善根系解剖结构来适应干旱;陇东苜蓿通过增加维管束直径、维管束面积和韧皮部面积来适应干旱。相比之下,胁迫时间超过9 d时,甘农3号内部输导组织结构的变化削弱了其输导水分的能力。     

全基因组水平紫花苜蓿TCP基因家族的鉴定及其在干旱胁迫下表达模式分析

紫花苜蓿是世界最重要的豆科牧草之一,干旱是影响其产量和地理分布的关键瓶颈。在紫花苜蓿响应干旱胁迫过程中,转录因子发挥着重要的调控作用。TCP（teosinte branchesd 1/cycloidea/pro-liferating cell factors）为植物特有的转录因子,在植物生长、发育、响应逆境胁迫中都具有重要的生物学功能。截至目前,该基因家族在紫花苜蓿中的分布以及响应干旱胁迫的生物学功能仍未见报道。因此,为进一步挖掘紫花苜蓿中响应干旱胁迫功能基因,本研究利用生物信息学方法在全基因组水平对TCP基因家族进行了鉴定,并对其系统进化、基因结构、染色体定位、共线性分析以及干旱胁迫下的表达模式进行了分析。结果表明,紫花苜蓿基因组中共鉴定出40个MsTCP基因,不均匀地分布于20条染色体上,其中包括17对旁系同源基因对,且都是基因片段复制事件。系统发育和保守结构域分析发现,MsTCP基因可以分为2个大分支和3个亚家族（PCF, CIN与CYC/TB1）,同一分支中的成员具有相同氨基酸数目的TCP结构域,同亚家族中的成员具有相似的保守基序与基因结构。此外,通过分析紫花苜蓿响应干旱转录组数据共鉴定出4个可能与紫花苜蓿响应干旱胁迫有关的MsTCP基因（MsTCP23,MsTCP27,MsTCP29,MsTCP33）。qRT-PCR结果进一步表明PEG模拟干旱胁迫处理后,这4个基因的表达量在根和叶中均显著上调,进一步确定了这些基因的确响应紫花苜蓿干旱胁迫。该研究为后期深入解析紫花苜蓿响应干旱胁迫理论以及通过基因工程技术创制高抗旱紫花苜蓿新种质奠定基础。     

施磷、钾肥及微肥对紫花苜蓿种子产量影响的研究进展

查阅大量资料,讨论了在紫花苜蓿种子生产中,施用P肥可促进根系的发生和生长,促进花芽分化,有利于提高种子产量,增强牧草的抗旱、抗寒性能;K肥可促进枝条的横向发展,使子粒增大,种子产量提高,同时可提高牧草的抗寒、抗旱、耐高温和抗病虫能力。众多的报道论述了B,S和Mo等微肥通过增加紫花苜蓿的花序数/枝条、豆荚数/花序和子粒数/豆荚等种子产量构成因素,来促进生殖生长,提高种子产量。     

紫花苜蓿高温诱导启动子pMsMBF1c的克隆与功能分析

植物耐热性受复杂而精细的调控。热诱导启动子能经济、高效的激活或关闭耐热调节途径关键基因的表达,在植物功能基因组研究与现代分子育种技术中起十分重要的作用。以紫花苜蓿耐热候选基因MsMBF1c的编码序列为基础,采用酶切连接的方法分离获得了其上游1748bp序列,生物信息学分析发现该区域具有HSE与GATA结合位点等2个与植物耐热调节相关的保守模体,此外还有5个ABA应答元件(ABRE、MYB2、MIC2、CBF与DPBF)和2个MYB蛋白结合位点,说明MsMBF1c除了参与植物耐热性调节外,还可能参与其他抗逆性调节。构建pBI121-MsMBF1c::GUS双元载体转化野生型拟南芥,荧光定量分析热诱导后的转基因植物中GUS与AtMBF1c基因的表达发现其分别上调了5.4与4.8倍,并且高温诱导下转基因植株的组织化学染色分析同样证明MsMBF1c启动子显著受高温诱导。分离获得紫花苜蓿MsMBF1c启动子序列并转化拟南芥,并且从生物信息学、组织化学染色与基因表达等方面验证该序列能显著被高温诱导,为探讨紫花苜蓿耐热调控机制及通过分子生物技术改善紫花苜蓿耐热性提供理论支撑,最终为培育适应南方高温气候条件的紫花苜蓿新品种提供技术储备。     

NaCl胁迫对苜蓿幼苗生长及不同器官中盐离子分布的影响

研究了不同浓度NaCl胁迫下(盐浓度处理为0,0.1%,0.3%,0.5%,0.7%,0.9%)苜蓿不同器官的生长情况(存活率、根长、茎长、叶片数),以及不同器官中Na⁺、K⁺、Ca²⁺、Mg²⁺的含量,并分析了K/Na、Ca/Na、Mg/Na值的变化。结果表明,存活率、根长、茎长与盐浓度呈负相关,且当NaCl≤0.1%时,有利于苜蓿的生长。除根茎叶中Na⁺含量、根中Ca²⁺与盐浓度呈正相关,茎叶中的Ca²⁺与盐浓度相关性不明显外,根茎叶中K⁺、Mg²⁺、K/Na、Ca/Na、Mg/Na均随盐浓度增加而显著下降,且盐处理与对照差异显著(P＜0.05)。另外从离子角度讨论了盐对苜蓿的毒害以及耐盐的原因。     

氮素对紫花苜蓿种子产量与氮累积动态变化的影响

为研究紫花苜蓿种子生产过程中氮素吸收、分配及利用规律,探索合理的施氮肥措施,通过田间试验研究了不同氮素处理(0,45,90 和135 kg N/hm²)对敖汉苜蓿和公农1号苜蓿氮素累积量、生殖器官氮素累积量及氮素分配率的动态变化以及种子产量、质量及氮素收获指数的影响。结果表明,两个紫花苜蓿品种的种子产量和氮素收获指数都随着施氮量的增加而降低,但是结荚率、单株粒重、千粒重和种子质量却随着施氮量的增加而提高。两个苜蓿品种的氮素累积量及氮素分配率的动态变化表现不一致。根据两个苜蓿品种需氮规律可得出,在返青期一次性施氮肥不能满足紫花苜蓿的需氮规律。其合理的施肥措施是:敖汉苜蓿在现蕾期追施45 kg N/hm²,开花期不施,结荚期补施90 kg N/hm²;公农1号苜蓿在现蕾期不施肥,开花期追施45 kg N/hm²,结荚期补施45 kg N/hm²。研究结果初步确定了赤峰地区苜蓿种子生产田的需氮肥规律及适宜施氮量,为苜蓿种子生产过程中氮肥的合理施用提供了基础数据。     

地膜覆盖对盐碱地紫花苜蓿生长性状及产量的影响

地膜覆盖是盐碱地增产的重要途径之一,为了推进地膜覆盖在盐碱地紫花苜蓿(Medicago sativa)生产中的应用,在河西走廊玉门市黄花农场开展了大田试验,研究了不同盐浓度条件下地膜覆盖对紫花苜蓿生长性状和产量的影响。结果表明,随盐浓度增加,紫花苜蓿出苗率、存活率、 越冬率和产量呈降低的变化态势,而地膜覆盖显著增加了紫花苜蓿出苗率、存活率、越冬率、株高、茎叶比和产量,且在地膜覆盖和盐浓度为0.5%时紫花苜蓿总产量显著高于盐浓度为0.3%无地膜覆盖时的紫花苜蓿总产量,说明地膜覆盖可以应用于盐碱地紫花苜蓿的种植。