蒜氨酸酶动力学特性研究

本文研究了蒜氨酸酶的动力学特性,结果表明其最适温度为３０℃,最适ｐＨ值为６．２４,以蒜氨酸为底物,其最大反应速度Ｖｍａｘ＝１２０ｕｎｉｔｓ／ｍｇｏｆｐｒｏｔｅｉｎ,米氏常数Ｋｍ＝６．０２×１０－３ｍｏｌ／Ｌ。本文同时研究了抑制与激活剂对蒜氨酸酶活性的影响。     

蒜氨酸酶动力学性质研究

大蒜中含有一类被称之为大蒜素的含硫化合物,主要由蒜氨酸酶与蒜氨酸发生酶解反应生成,但蒜氨酸酶含量低,对环境较敏感,因而活性表现不稳定,加之目前的生产条件常导致该酶活性被破坏,使得蒜类产品的药理作用不显著。因此,研究蒜氨酸酶的理化性质对于开发应用蒜类药用产品具有重要的指导作用。     

蒜氨酸酶的分离纯化条件分析

采用（NH4）2SO4盐析、Sephadex G-200凝胶过滤对蒜氨酸酶进行了部分纯化。结果表明,蒜氨酸酶的含量和酶活性在（NH4）2SO4为30％～50％时较高,40％时蒜氨酸酶活性最高;经Sephadex G-200凝胶过滤获得的酶液纯化倍数为34．45,回收率为1．72％。     

大蒜蒜氨酸酶基因克隆与序列分析及毕赤酵母表达质粒的构建

根据GenBank登录的蒜氨酸酶序列(S73324)设计上下游引物,利用RT-PCR技术从浙江大蒜鳞茎中扩增蒜氨酸酶基因,获得了长度为1523bp的cDNA序列,提交GenBank(登录号:FJ786257,命名为浙江蒜氨酸酶)。利用生物信息学相关软件对该序列进行同源性比较、进化分析、蛋白质的结构和酶活性中心预测,引用pPICZaC载体构建蒜氨酸酶毕赤酵母真核表达重组质粒。结果表明:浙江蒜氨酸酶与其他葱属植物如大蒜、洋葱、冬葱、火葱和细香葱蒜氨酸酶具有高度同源性,进化关系比较接近,目的基因可以成功构建到毕赤酵母表达载体。浙江蒜氨酸酶三维结构呈树枝状,蛋白质分子的N端含有一个类似表皮生长因子结构域,酶的中心含一个天冬氨酸氨基转移酶超家族结构域;蛋白质结构中Lys-277可能是磷酸吡哆醛的结合位点,Lys-277周围区域可能是酶活性中心部位。重组质粒经鉴定构建正确。     

蒜氨酸酶粗提液的特性

以安徽舒城大蒜为材料,采用离心、盐析、透析等方法从大蒜匀浆中提取蒜氨酸酶粗提液,以L-半胱氨酸亚砜为底物研究蒜氨酸酶的特性及最佳反应条件。结果表明,离心、盐析、透析纯化的蒜氨酸酶的比活分别为粗提时的2.519,3.497,3.703倍。该粗酶液的最适pH值为6.4,最适温度为30℃。当底物浓度低于3μmol/ml时表现为一级反应;当底物浓度在3～5μmol/ml时表现为混合级反应;当底物浓度大于5μmol/ml时属于零级反应。Zn2+、Ca2+、Fe2+可以提高蒜氨酸酶活性170%～200%;EDTA可以提高20%;Cu2+抑制45%。     

蒜氨酸酶动力学性质研究

大蒜中含有一类被称之为大蒜素的含硫化合物,主要由蒜氨酸酶与蒜氨酸发生酶解反应生成,但蒜氨酸酶含量低,对环境较敏感,因而活性表现不稳定,加之目前的生产条件常导致该酶活性被破坏,使得蒜类产品的药理作用不显著。因此,研究蒜氨酸酶的理化性质对于开发应用蒜类药用产品具有重     

盾壳霉几丁质酶和葡聚糖酶酶动力学性质初步研究

盾壳霉几丁质酶和葡聚糖酶酶动力学性质研究表明:几丁质酶和葡聚糖酶的酶促反应,在本试验计量范围内,其反应速度与酶量和底物浓度均呈正相关,但两种酶促反应适宜的温度和pH值有较大差。几丁质酶降解几丁质的最适反应温度为50℃,最适pH值为8.0,葡聚糖酶降解葡聚糖的最适反应温度为60℃,最适pH值为3.0。     

HPLC-MS测定鲜蒜中的蒜氨酸

研究确立了液相色谱-质谱测定大蒜中蒜氨酸的方法。鲜蒜在脱氧水介质中,经微波灭酶后,用甲醇-水提取其中的蒜氨酸,以C18柱分离、质谱检测器检测。方法的线性范围:10.0~320.0 ng/ml;加标回收率为94.0%~99.1%。     

超高压钝化蒜氨酸酶对洋葱降辣的工艺研究

[目的]建立超高压钝化洋葱中蒜氨酸酶以降低洋葱辣味的新工艺。[方法]以洋葱为原料,采用丙酮酸法考察了超高压处理(压力、保压时间、温度)钝化洋葱蒜氨酸酶的效果。[结果]试验得出,在压力300 MPa,保压时间30 min,温度60℃的条件下,洋葱的蒜氨酸酶残留酶活可以降到41.54%,明显降低了洋葱的辣度和刺激性气味。[结论]此加工方法提高了洋葱的食疗价值,并可为开发洋葱新产品提供理论依据。     

土壤过氧化氢酶活度及其动力学特征与土壤性质的关系

该文研究了陕西土中过氧化氢酶活度及其动力学特征与土壤性质的关系。结果表明：土壤过氧化氢酶活度同土壤有机质含量和土壤全氮量呈显著相关；土镶过氧化氢酶总量（Ｖ＿（ｍａｘ））和酶反应速度（Ｖ＿（ｍａｘ）／Ｋ＿ｍ）分别与土壤全氮量和土壤有机质含量呈显著水平，而酶－底物结合的牢固程度（Ｋ＿ｍ）与土壤性质未达到５％的显著水平；在土壤各性质中，土壤全氮量对土壤过氧化氢酶活度及其动力学特征影响最大。     

蒜氨酸酶动力学性质研究（英文）

[Objective] The kinetic characteristics of alliinase was studied to select the optimum reaction performance.[Method] Alliinase activity was measured to analysis the influence of temperature,pH,substrate concentration and metal iron.[Result] Alliinase was an enzyme with thermal instability.Its optimum reaction temperature was 29 ℃ and pH value was 6.1.The Vmax was 0.439 IU/mg and Km was 0.483 mmol/L by using natural extract as substrate.Alliinase activity was activated when the K+,Mg2+,Na+ and Cd2+ existed and alliinase activity was inhibited when Cu2+ existed.[Conclusion] Results showed that the kinetic characteristics of alliinase supply the academic foundation for development and application of garlic medical products.     

国内典型烤烟烟叶的燃烧行为与动力学特性研究

采用热重分析法,全面考察了37个不同产地部位的国内典型烤烟烟叶在4个不同升温速率下的燃烧行为.结果表明,烤烟热解主要分为失水、挥发份析出与燃烧、焦炭燃烧与燃尽阶段;升温速率的改变对TG/DTG曲线产生明显的影响.运用K-A-S法对烤烟在热解过程中的不同转化率下进行动力学分析,给出了所有样品不同阶段的活化能分布,并且发现低温段的活化能高于高温段.最后,对比分析了不同产地、部位活化能的分布情况.     

大蒜试管微鳞茎形成的激素筛选研究

以1/2MS为基本培养基,利用阿城紫皮大蒜茎尖试管苗进行离体培养试验。结果表明,添加不同激素浓度的培养基,对大蒜试管微鳞茎形成有促进作用,各处理条件下的鳞茎指数和鳞茎鲜重间存在不同程度的差异,以1/2MS+0.01mg.L-1NAA+1.5mg.L-1IBA+3%蔗糖+0.8%琼脂的培养基诱导大蒜试管微鳞茎形成效果最佳。     

大蒜多倍体诱导的探究性实验

为探究大蒜多倍体诱导的最优条件,实验设计如下:以大蒜鳞茎作为诱导对象,采用正交试验设计方法,对其进行三因子三变量(秋水仙素浓度、光照处理时间、根尖长度)的多倍体诱导实验。实验结果表明,秋水仙素的浓度为0.1%,全光照,根尖的长度为6mm范围时的诱导效果最佳。此研究结果可为在我国尚未被真正作为经济作物并形成相应产业得到开发的大蒜多倍体育种提供良好的技术基础和实用借鉴。     

湖北海棠抗大蒜病毒活性研究

[目的]探讨湖北海棠抗大蒜病毒的活性。[方法]以湖北海棠提取物浸泡大蒜,用电镜法检测病毒数量。[结果]湖北海棠醇提物具有较强的抗病毒作用。[结论]湖北海棠抗病毒有效成分主要为黄酮类化合物,具有良好的开发应用价值。其中MH-1结构正在鉴定中,MH-2为根皮苷。     

大蒜花芽分化的细胞组织学研究

从解剖学及细胞组织学角度对大蒜花序及花的发育进行了系统观察。结果表明：大蒜在７叶１心时开始花序分化。花序轴基部先产生３枚总苞叶原基，同时顶端分化出顶花原基。顶花原基形成后，整个花序轴分为３～４个分生组织区，之后每个分生组织区顶端再产生１个花原基，并分为３～４个小区，如此反复进行多次，最终组成聚伞类伞形花序。花原基初形成时为球形，不久引长成棒状，在其顶端依次分化出外轮花被片原基和外轮雄蕊原基，内轮花被片原基和内轮雄蕊原基，心皮原基和胚珠原基。文中还对大蒜花序及花分化中的特殊现象进行了初步研究，分析了大蒜不能结实的原因，以期为大蒜有性生殖提供理论依据。