金黄色葡萄球菌天然抗生物被膜物质研究进展

奶牛乳房炎是造成奶牛养殖业巨大经济损失的疾病,金黄色葡萄球菌是导致奶牛乳房炎感染的主要致病菌之一。以生物被膜的群落形式存在的金黄色葡萄球菌,更易逃避宿主免疫系统、降低药物敏感性,从而导致奶牛乳房炎反复发作,最终形成顽固性乳房炎。研究显示,天然抗生物被膜物质对金黄色葡萄球菌生物被膜的抑制作用明显,可作为新的抗菌药物应用于奶牛乳房炎的防治。对金黄色葡萄球菌生物被膜耐药机制和天然抗金黄色葡萄球菌生物被膜物质的最新研究进展进行了概述,以期对防治金黄色葡萄球菌导致的奶牛乳房炎提供参考。     

乳源金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力及多位点序列分型分析

试验以55株乳源金黄色葡萄球菌为研究对象,通过结晶紫染色法分析其生物被膜形成能力,应用PCR技术检测乳源金黄色葡萄球菌的所携带的耐药基因和生物被膜形成相关基因。结果表明,55株金黄色葡萄球菌中34株生物被膜形成能力较强,17株生物被膜形成能力较弱,4株无生物被膜形成能力;55株细菌中17株(31%)携带mec A耐药基因,17株金黄色葡萄球菌分为9个ST型,均属于已发现的ST型,其中ST97和ST398为优势株。上述来源相近的金黄色葡萄球菌分型后,基本位于ST97和ST98两个大簇,说明该地区引起奶牛乳房炎的细菌型别相对较集中。生物被膜相关基因Ica A、Ica D、Ica R、Eno、Atl、aap、Bap和sig B基因的检出率分别为44%、36%、27%、89%、60%、42%、18%和25%。研究表明,乳源金黄色葡萄球菌的生物被膜形成能力较强,生物被膜形成能力较强的菌株均携带多个生物被膜形成相关基因,说明生物被膜的形成过程可能是受多个基因共同调节。     

2例金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎分离鉴定及药敏试验

试验旨在探究黑龙江地区某奶牛场引起奶牛乳房炎的致病菌以及其药敏情况。通过对发病的奶牛乳样进行细菌分离培养及鉴定、生化试验、细菌16S rDNA基因的扩增以及序列分析确定细菌种类;通过K-B试纸法确定该细菌对抗生素药物的敏感性。结果显示,结合镜检结果、生化试验、16S rDNA序列比对情况,确定引起奶牛乳房炎的2株菌株均为金黄色葡萄球菌;该菌株对药物对丁胺卡那高度敏感,对恩诺沙星、环丙沙星中介,对多西环素、链霉素、头孢噻肟耐药。研究表明,分离得到的金黄色葡萄球菌HQ-1、HQ-2,通过使用敏感性药物使奶牛乳房炎得到了有效的控制,提示今后对于奶牛养殖场应加强疾病防控。     

北京地区奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

为了解北京地区奶牛隐性乳房炎中金黄色葡萄球菌的感染情况及对常用药物的敏感性,用科玛嘉显色培养基和16SrRNA PCR检测方法对5个奶牛场的100份隐性乳房炎奶样进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,采用K-B纸片扩增法进行药敏试验。结果表明,显色培养基分离到24株疑似金黄色葡萄球菌,经16SrRNA PCR鉴定,15株为金黄色葡萄球菌;药敏试验结果显示,15株金黄色葡萄球菌均对β-内酰胺类中的氨苄西林产生普遍耐药性,对克林霉素和环丙沙星的耐药率较高,分别为53.33%和40%;对氧氟沙星、庆大霉素、头孢噻肟和头孢曲松的耐药性较低,耐药率为6.67%。说明15株金黄色葡萄球菌分离株对7类9种抗菌药物都有不同程度的耐药性。     

金黄色葡萄球菌乳房炎及其防治

研究人员在调查奶牛场的牛群保健情况时发现,由金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)引起的乳房炎依旧是一大问题.虽然我们对这种细菌有所了解,但由于还没找到彻底杀灭或有效处理的办法,我们仍需设法加以控制.     

新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为调查新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的药物敏感性状况,提高药物治疗效果,本试验通过细菌培养特性、染色特点、形态观察、生化试验鉴定出25株金黄色葡萄球菌并对其进行了耐药性分析。结果显示,25株金黄色葡萄球菌对阿莫西林、杆菌肽、复方新诺明的耐药率均在80%以上,对氟苯尼考和林可霉素却高度敏感,分别为100%和92%;耐药谱型表现为最多的菌株耐9种药物,最少的耐药3种。试验结果表明,该地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌对多种药物存在着严重的多重耐药情况。     

新疆某规模化牛场乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

为了解新疆某规模化牛场奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的感染情况以及对常用抗生素药物的敏感程度。从该牛场采集50份乳样,采用细菌分离培养、16S rRNA鉴定、生化鉴定等方法对菌株进行分离鉴定;使用药敏纸片对已鉴定菌株进行药物敏感试验;从50份乳样中,分离出了16株金黄色葡萄球菌,分离率为32%;分离出1株大肠杆菌,分离率为2%。将16株金黄色葡萄球菌进行药敏试验。结果显示,氨苄西林的耐药率高达100%,庆大霉素和克林霉素也产生了较低的耐药性,其耐药率均为6.25%,而恩诺沙星、头孢噻呋、呋喃妥因、多西环素等具有较强的抗菌活性,其敏感率均高于80%,本试验为牛场预防乳房以及临床用药提供了科学依据。     

细菌生物被膜与奶牛乳房炎

针对生物被膜和奶牛乳房炎的病因进行阐述,分析细菌生物被膜的形成与奶牛乳房炎的发生和治疗的关系,为奶牛乳房炎的防治提供新思路。     

金黄色葡萄球菌性乳房炎的诊治

金黄色葡萄球菌是一种经常引起奶牛乳房炎的细菌，且对一般性药物易产生耐药性，同时又经常表现为隐性感染，给临床诊断和治疗带来许多不便。现就金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎的诊断及防治报道如下。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

[目的] 了解泰州市某奶牛场乳房炎中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）感染情况及其对常用药物的敏感性。[方法] 试验选用Baird-Parker培养基分离、生化鉴定、PCR检测等方法,对采集的9份奶牛乳房炎奶样进行分离鉴定和药敏试验。[结果] 共分离到6株葡萄球菌,进一步通过凝固酶试验和16S rDNA测序等方法鉴定其中3株为金黄色葡萄球菌。药敏试验结果显示,3株金黄色葡萄球菌对青霉素G均耐药,2株对四环素耐药,2株对红霉素和苯唑西林表现为中介。[结论] 该次分离的金黄色葡萄球菌主要对青霉素G和四环素耐药,对其他常用抗生素表现为敏感。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定

从奶牛分离得到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methieillin—resistant Staphylococcus aureus,MRSA）。按常规方法复苏菌株,用血浆凝固酶试验鉴定SA。用KB法、琼脂筛选法、生化鉴定法（VITEK32）、聚合酶链反应等鉴定MRSA。常规分离鏊定的葡萄球菌468株,其中凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase negative Staphylococcus,CNS）361株,检出率为77．149,6,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）105株,检出率为22．44％,MRSA36株检出率为34．29％,2株未定型,占0．42％。而MRSA在乳房炎奶样中检出率高达34．29％,表明新疆兵团部分垦区牛场MRSA已经呈蔓延趋势。     

青海地区奶牛乳房炎葡萄球菌的分离鉴定与药敏试验

为了掌握导致青海地区奶牛乳房炎的最主要病原菌——葡萄球菌流行情况及其对常用药物的敏感性,从而为奶牛乳房炎的治疗提供参考依据,本试验在青海地区18个奶牛场共采集243份乳房炎乳样。应用传统方法进行葡萄球菌的分离培养;通过试管法血浆凝固酶试验与生化鉴定方法,本次共分离出金黄色葡萄球菌43株,木糖葡萄球菌与产色葡萄球菌各6株,腐生葡萄球菌5株,松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌和人葡萄球菌各4 株,头葡萄球菌和模仿葡萄球菌各2株;经K-B纸片扩散法对葡萄球菌耐药性检测结果显示,该地区葡萄球菌主要对头孢类、林可霉素、阿米卡星比较敏感,部分菌株对恩诺沙星与庆大霉素敏感,从而为该地区奶牛乳房炎的有效预防和治疗提供科学依据。     

奶牛隐性乳房炎的检测及病原菌的分离鉴定与药敏试验

试验对内蒙古包头市某奶牛场饲养的451头生产奶牛的1 728个乳区进行检测、病原菌分离鉴定及药敏试验.结果显示,患隐性乳房炎的奶牛252头,阳性率为55.9%:有效乳区1728个,阳性乳区480个,乳区阳性率为27.8%.从检测为隐性乳房炎阳性的乳区乳汁中分别分离到金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、棒状杆菌、沙门氏菌和表皮葡萄球菌.检出菌中传染性致病菌金黄色葡萄球菌和链球菌的检出率高.从药物敏感性试验结果看,头孢唑啉和沙星类药物除了沙门氏菌以外对其他菌均高度敏感,常用药物呈现出不同程度的耐受性;狼毒中草药对链球菌有一定的敏感性,对葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果不好,对棒状杆菌和沙门氏菌没有抑菌作用:乳炎金针为中西药合剂,对6种致病菌抑菌效果都比较好.     

奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

为了解贵阳市某乳业有限公司奶牛场隐性乳房炎流行情况及其主要病原菌,采用CMT方法检出隐性乳房炎乳样后,对阳性乳样进行细菌分离与鉴定,同时对其主要病原菌进行了体外药敏试验。结果表明,该公司奶牛场隐性乳房炎的感染率为40％,主要病原菌为葡萄球菌属和链球菌属细菌,其敏感的抗菌药物有先锋V霉素、利福平、丙氟哌酸、氟哌酸、新霉素、卡那霉素、庆大霉素等,经临床用药观察,有效地控制了该公司奶牛场隐性乳房炎。     

牛源金黄色葡萄球菌生物被膜与毒素基因检测及agr分型

旨在对牛源金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）的生物被膜、耐药性、毒素基因和agr基因型进行研究,并分析agr基因型与毒素基因之间的相关性。分别用微量滴定板法、药敏纸片法和PCR对S.aureus的生物被膜、耐药性和毒素基因进行检测,用多重PCR对S.aureus进行agr分型。结果表明,336株牛源S.aureus均能形成生物被膜,其中,形成中等（++）和强（+++）生物被膜的S.aureus分别占52.1%和47.9%。药敏试验结果显示,S.aureus对青霉素耐药最为严重,耐药率达91.7%,其次是红霉素、卡那霉素、克林霉素和庆大霉素,耐药率分别为89.6%、72.9%、66.7%和60.4%,而所有S.aureus对呋喃妥因和利奈唑胺均表现为敏感。PCR检测结果显示,黏附素基因fnbA检出率最高,达99.7%,其次是icaD、icaA、clfA和cna,检出率分别为98.2%、89.6%、86.0%和56.0%,bap基因检出率最低,为14.6%。肠毒素基因sea的检出率为26.5%,其次是seb（8.3%）和sec（6.8%）,毒素基因tst的检出率占8.3%。分型结果显示,agr Ⅰ型S.aureus是主要的流行菌株,占77.1%,agr Ⅱ、agr Ⅲ和agr Ⅳ型S.aureus流行率分别为14.0%、4.8%和2.1%。统计分析结果表明,agr Ⅰ型S.aureus更具有携带多种毒素基因的潜力,而agr Ⅳ型S.aureus无毒素基因携带潜力。综上表明,牛乳腺炎性S.aureus对常见的抗菌药物耐药严重,毒素基因分布多样,agr Ⅰ型是奶牛乳腺炎性S.aureus主要的基因型,且具有携带多种毒素基因的能力,其潜在威胁应引起重视。     

Investigation of Biofilm Formation,Virulence Genes and agr Typing of Staphylococcus aureus from Bovine Mastitis Cases

The objective of the present study was to investigate the biofilm formation, antimicrobial resistance, virulence genes, and agr genotypes of Staphylococcus aureus (S. aureus) isolated from bovine mastitis cases, and to analyze the correlations between agr genotypes and virulence genes. Biofilm formation, antimicrobial resistance, and virulence genes for 336 strains of S. aureus were detected by microtiter plate method, disk diffusion method, and PCR respectively, and the agr typing of tested strains was determined by multiplex PCR. The results showed that all 336 strains of S. aureus from bovine mastitis were biofilm producers, among which 52.1% and 47.9% of isolates tested were moderate (++) and strong (+++) biofilm producers, respectively. Antimicrobial susceptibility testing demonstrated that S. aureus strains were highly resistant to penicillin, with a resistance rate of 91.7%, followed by erythromycin (89.6%), kanamycin (72.9%), clindamycin (66.7%) and gentamicin (60.4%). However, all isolates were sensitive to nitrofurantoin and linezolid. PCR results showed that the prevalence of fnbA gene was the highest (99.7%), followed by icaD (98.2%), icaA (89.6%), clfA (86.0%), cna (56.0%), and bap (14.6%) genes. Moreover, the sea, seb, sec and tst genes were found in 26.5%, 8.3%, 6.8% and 8.3% of the isolates, respectively. The agr typing results showed that S. aureus strains belonging to agr Ⅰ was predominant in our study, accounting for 77.1% of the isolates, and the frequencies of agr Ⅱ, agr Ⅲ and agr Ⅳ genotypes were 14.0%, 4.8% and 2.1%, respectively. Statistical analysis indicated that the strains of S. aureus belonging to agr Ⅰ genotype have the potential to carry more virulence genes, while no toxin genes could be found in any of the strains belonging to agr Ⅳ. The results revealed high antimicrobial resistance to common antimicrobial agents in S. aureus isolated from bovine mastitis milk samples. Moreover, agr Ⅰ was the predominant genotype with diverse toxin genes in S. aureus from bovine mastitis, and the potential hazard should be of concern.     

安徽部分地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定和药敏试验

为了调查安徽地区奶牛乳房炎流行情况和筛选病原菌敏感药物.采集了安徽省奶牛主要养殖区的隐性乳房炎奶样,分离、鉴定了主要病原菌,并筛选了敏感药物.结果表明,乳房炎主要病原菌为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和无乳链球菌,且2种或2种以上病原菌混合感染占大部分,这些主要病原菌对环丙沙星、恩诺沙星、头孢曲松钠和卡那霉素等抗菌药物高度敏感,为奶牛乳房炎的治疗药物的选择提供了直接依据.