云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

 以云南野生的早花象牙参叶片为外植体, 探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明: 叶片基部, 暗培养, 水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导; 暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白800 mg·L ^{- 1} +椰子汁50 mL ·L ^{- 1} , 再生培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 生根培养基为1/2MS +NAA 0.8 mg·L ^{- 1}。     

连香树离体快繁初步研究

 连香树为我国珍稀濒危树种, 具有较高的经济价值和观赏价值。本文研究了3年生连香树(Cercidiphyllum japonicum Sieb. et Zucc. ) 带芽茎段的离体培养。筛选出最佳培养基: (1) 腋芽诱导培养基: MS +NAA 0.01 mg·L ^{- 1} ; (2) 丛生芽诱导培养基: MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} ; (3) 丛生芽增殖培养基:MS +BA 2.0 mg·L ^{- 1} + 2,4-D 0.01 mg·L ^{- 1} ; (4) 生根培养基: 1 /2MS + IBA 1.0 mg·L ^{- 1}。     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。     

‘雪青’梨叶片高频再生体系的建立

 以‘雪青’梨叶片为外植体, MS为基本培养基, 培养温度(25 ±1) ℃, 光照强度2 000 lx,14 h /d, 继代周期30 d。在MS + 2,4-D 2 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1}培养基中, 外植体脱分化率达100% ,愈伤组织增殖倍数达12.05; 在MS + 6-BA 5 mg·L ^{- 1} + IAA 0.1 mg·L ^{- 1}中, 不定梢诱导率达100% , 在MS+ 6-BA 2 mg·L ^{- 1} + IAA 0.1 mg·L ^{- 1} +CH 100 mg·L ^{- 1}中, 1～6代不定梢平均繁殖系数达7; 在1 /2MS +IBA 2 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +AC 500 mg·L ^{- 1}中, 不定梢生根率达67.50%; 68株试管苗移栽到珍珠岩营养钵中, 30 d成活46株, 成活率为67.65 %。     

‘富有’和‘次郎’甜柿叶片再生植株的研究

 比较了不同生长调节剂及其种类浓度和培养时间对‘富有’和‘次郎’两个甜柿(Diospyros kaki Thunb. ) 品种的叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。TDZ诱导叶片愈伤组织和不定芽再生的能力很强, 在含ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的培养基中, 愈伤组织的形成率达96% , 愈伤组织不定芽分化率达80%以上,由0.5 mg·L ^{- 1} TDZ诱导形成的富有和次郎愈伤组织, 在含有ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的1/2DKW培养基培养30 d,不定芽分化率均达96%以上, 平均芽数分别为7.8和5.4, 所得再生苗的生根率近75%。     

野生软枣猕猴桃组织培养快繁体系的建立

以从野生资源筛选出的3个优良品系8025、9301、8001(雄株)组培苗的叶片为外植体,研究不同光照强度、不同植物生长调节剂对不定芽叶片再生、不定芽的增殖以及组培苗生根的影响,以期建立野生软枣猕猴桃组织培养快繁体系。结果表明:3个品系不定芽叶片再生培养基均为MS+1 mg/L6-BA+0.3 mg/L TDZ+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂;不定芽增殖培养基为MS+2.5 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L 2,4-D+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂;组培苗生根培养基为1/2 MS+0.2~0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂。     

红千层的离体培养及快速繁殖

 研究了红千层离体快繁的若干影响因素。结果表明: 叶片在MS + 6-BA 115 mg·L ^{- 1}+NAA015 mg·L ^{- 1}中的愈伤组织诱导率43% , 并可直接从愈伤组织表面分化出不定芽, 分化率为69.2%; 腋芽启动培养基为MS + 6-BA 1～1.5 mg·L ^{- 1} + NAA 0.5 mg·L ^{- 1} , 萌动率为77%; 继代和增殖培养基为MS + 6-BA 1 mg·L ^{- 1} +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 平均增殖系数为16.7; 生根壮苗培养基为1 /2MS +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 生根率96.1%; 试管苗生根培养30～35 d移栽, 成活率最高可达90%以上。     

红将军苹果离体叶片高频再生体系研究

以中熟红富士品种红将军组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间、取叶部位等因素对再生率的影响。结果表明,试管苗继代培养3～4代,当代培养25～30d,取顶部嫩叶3～4枚,剪除叶片边缘,将剪切的叶片中部以近轴面接触在最佳诱导分化培养基上:MS+TDZ1.0mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L,培养基pH值5.8,黑暗培养10d后,转入光照培养条件下,再生频率达100%,再生芽数平均4.6个。叶片再生不定芽分化后15～20d转接到苹果继代培养基MS+BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+Ac0.5g/L+蔗糖2%的生根培养基上,光培养15d后,生根率可达86.0%。     

不同基因型梨叶片离体培养和植株再生

 以‘巴梨’、‘身不知’和‘早酥’梨试管苗叶片为外植体, 对不定芽进行了诱导、增殖和生根。重点探讨了基本培养基、植物生长调节剂配比、AgNO₃ 不同浓度和NH4⁺-N与NO3^--N比例对不定芽再生的影响。结果表明, MS + TDZ 0.5 mg/L + IBA 0.1 mg/L为‘巴梨’叶片不定芽发生的最佳培养基。在QL + TDZ 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L培养基上, 暗培养3周后转光下培养, ‘身不知’和‘早酥’分别获得89.6%、81.2%的不定芽再生率和3.45、3.73的平均再生芽数; 对‘巴梨’和‘早酥’不定芽再生有效促进的AgNO₃ 浓度范围为0.1～0.5 mg/L, 0.1～4.0 mg/L的AgNO₃、1∶2～7的NH₄⁺-N∶NO ₃^--N和21.50mmol/L的K+对‘身不知’叶片再生均有促进作用, 缺乏NH₄⁺-N不利于不定芽的再生; 转移到MS+BA1.0 mg/L + IBA 0.1 mg/L培养基上能快速增殖; 在MS、1 /4MS + IBA 1.0～2.5 mg/L +蔗糖5～15 g/L +活性炭0.5～1.0 g/L上获得了不同程度的生根苗。     

中国樱桃‘对樱桃’不定根离体再生植株的研究

 采用中国樱桃‘对樱桃’( Prunus pseudocerasus) 无菌生根苗的不定根作为外植体, 成功诱导了胚性愈伤组织, 实现了通过分化不定芽和诱导初生体细胞胚两种方式再生植株。根切段在MS + NAA1.0 mg/L + BA 0.05 mg/L + IBA 0.05 mg/L 培养基诱导获得胚性愈伤组织, 诱导频率达54.2 % , 该愈伤组织在MS + NAA 1.0 mg/L + BA 0.5 mg/L 培养基上不定芽分化率为100 % , 不定芽在MS + BA 0.5 mg/L + IBA 0.1mg/L 培养基上生长发育良好, 转入MS + NAA 0.02 mg/L + IBA 0.02 mg/L 生根培养基生根率达100 %; 整体不定根系统在MS 附加2 ,4-D 1.0～3.0 mg/L 和BA 0.5 mg/L 的培养基上同时诱导初生体细胞胚发生和单极不定芽发生, 每外植体上平均体细胞胚数5～25 个, 不定芽3～22 个。体细胞胚转到MS + BA 0.5 mg/L +IBA 0.1 mg/L 培养基上发育为完整植株, 植株再生率100 %。     

芜菁高频率再生体系的建立及优化

以3个品种芜菁的带柄子叶和胚轴为外植体,采用苯基噻二唑基脲（thidiazuron,TDZ）配合NAA以及BA配合NAA两种组合研究了适于芜菁离体再生的外植体类型和激素组合。发现带柄子叶为外植体,TDZ 7.0 mg·L^-1 + NAA 1.0 mg·L^-1的组合对不定芽分化最为有利。以此离体再生体系为基础,针对AgNO3浓度、苗龄、2,4-D预培养时间3个因素进行优化,得到了芜菁高频率离体再生体系。结果表明：采用5 d苗龄的带柄子叶作为外植体,在含有2,4-D 1.0 mg·L^-1的MS培养基上预培养2 d,添加TDZ 7.0 mg·L^-1 + NAA 1.0 mg·L^-1 + AgNO3 5.0 mg·L^-1的MS培养基为分化培养基对芜菁离体再生最为有利。依品种不同,最高分化率可以达到90%左右。分化后得到的不定芽在IBA 0.1 mg·L^-1的MS培养基上可以100%生根,移植成活率达95%。     

山杜英离体培养植株再生的研究

 研究了山杜英[Elaeocarpus sylvestris(Lour．)Poir．]带芽茎段的离体培养及植株再生。筛选出最佳培养基：(1)启动培养：Ms+BA 1.0～2.0 mg·L^-1 (单位下同)+NAA 0.05+蔗糖3%；(2)愈伤组织发生型丛生苗增殖培养：MS+BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖3%；腋芽发生型丛生苗增殖培养：MS+BA2.0+IBA 0.1+蔗糖3%；(3)有效苗诱导培养：MS+BA 0.5+IBA 0.1+GA 1.0+蔗糖3%；(4)生根培养：1/2 MS+IBA 3.0+蔗糖2%。用透气膜封FI比用聚乙烯菌膜生根率明显提高，生根明显提前。     

梨矮化中间砧S2 、S5 和PDR54的离体培养研究

 以梨矮化中间砧S2、S5和PDR54试管苗为试材, 探讨了培养基和植物生长调节剂对梨矮化中间砧试管苗增殖和生根的效应。其结果表明: MS培养基较QL、AS和WPM培养基更有利于中间砧茎的增殖, 2～3 mg·L ^{- 1} 6-BA、0.1～0.2 mg·L ^{- 1} IBA和1～2 mg·L ^{- 1} GA₃组合能有效促进S2、S5和PDR54试管苗的增殖, 其增殖倍数达3.71～5.83。综合各品种增殖倍数、茎高度以及茎质量等指标表明, MS + 3.0 mg·L ^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 IBA + 2.0 mg·L^-1 GA₃是S2的最佳增殖培养基; MS + 2.0 mg·L^-1 6-BA + 0.1 mg·L^-1 IBA + 1.0 mg·L^-1 GA₃是S5和PDR54增殖的最佳培养基。同时, S2、S5和PDR54增殖的试管苗在不同的生根条件下分别获得了67%、50%和86%的生根率。     

无核葡萄与中国野生葡萄杂种的胚挽救技术研究

 通过无核葡萄与中国野生葡萄杂交, 获得了4个杂交组合的后代植株, 确定了各杂交组合取胚珠培养的最佳时期。1Flame ×山葡萄; 2红宝石×爱莫无核; 3红宝石×北醇; 4爱莫无核×山葡萄在授粉后45 d取样培养效果较佳; 5长穗无核白×山葡萄授粉后30 d; 6无核白自交在授粉后35 d培养效果较佳。以NitSchs为基本培养基, 附加0.5 mg·L ^{- 1} 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.5 mg·L ^{- 1} IBA + 0.1 mg·L^-1ZT, 适合于1、3、5号杂交组合; 而0.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.1 mg·L^-1ZT适合2、4、6号杂交组合; 胚萌发培养基为2.0 mg·L^-1 IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA +0.2 mg·L^-1 GA₃ , 适合1、2、3、5、6号杂交组合, 而爱莫×山葡萄在1.5 mg·L ^{- 1} IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 GA₃培养基上表现较佳, 生根培养基为1 /2MS基本培养基添加0.15 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA, 它适合1号与5号组合, 0.10 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA适合4号与6号组合。     

不同培养条件对‘丰香’草莓离体叶片再生的影响

 以草莓品种‘丰香’离体叶片为外植体, 探讨了基本培养基、不同细胞分裂素、暗培养、硝酸银浓度以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明, 基本培养基中以MS 最为适合,WPM、QL 、AS 培养基均不利于不定芽的再生, 而TDZ 的诱导效果好于BA。以MS 基本培养基附加TDZ2.0 mg·L - 1和IBA 0.8 mg·L ^-1可以使‘丰香’叶片不定芽的再生率高达72.33 % , 平均每叶再生芽5.59个。暗培养14 d 可以将‘丰香’叶片的不定芽再生率提高到90.09 %。硝酸银对于提高‘丰香’叶片的不定芽再生没有明显效果, 但在一定程度上改变了细胞分化的方向。     

车轮梅茎段高效再生体系的建立

 以车轮梅 (Rhaphiolepis indica L.)茎段为外植体。探讨基本培养基种类、植物生长调节剂组合、蔗糖浓度和AgNO3等因素对茎段器官发生和植株再生的影响。结果表明：MS+6-BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.5 mg·L^-1 + AgNO3 1.0 mg·L^-1+蔗糖40 g·L^-1培养基最适合不定芽的分化和增殖,不定芽分化率达90%以上,平均每外植体分化不定芽数达5.38个。不定芽可在1/2MS培养基中有效伸长,适宜生根培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L^-1,生根率达到100%。     

葡萄器官离体再生和遗传转化体系的建立

以‘森田尼无核’为试材,研究了生长调节物质、外植体类型、抑菌素等主要因素对葡萄离体不定芽再生和转化效率的影响,建立和优化了葡萄的再生和转化体系。结果表明：相对于BA和KT,细胞分裂素TDZ无论单独使用还是与生长素配合使用均可使葡萄不定芽再生频率达到最高;在MS + TDZ 2.0 mg·L^-1 、MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 或MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 + IAA0.1 mg·L^-1培养基上均可以较好地诱导森田尼无核葡萄再生不定芽,再生频率分别为37.4%,40.2%和50.0%;叶盘、茎段和叶柄都可以诱导再生不定芽,在同一种培养上再生频率有差异,但差异不大;采用根癌农杆菌介导的叶盘法转化葡萄时,卡那霉素抗性筛选浓度为20 mg·L^-1;抑菌抗生素使用头胞霉素适宜浓度为400 mg·L^-1,而使用羧苄青霉素时以300 mg·L^-1最佳;获得转化芽45个,部分株系用PCR和Southern 杂交证实,外源基因已整合在葡萄基因组DNA上。