高效液相色谱法测定花生内源激素的改进研究

本实验以花生籽仁为材料,对提取、纯化和利用高效液相色谱法分析测定花生籽仁中内源激素生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)和细胞分裂素(6-BA)含量的方法进行改进,针对花生籽仁中脂肪、酚类含量高等特点,对以往的HPLC分析植物内源激素的植物材料前处理方法进行了改进。试材用液氮研磨后以80%预冷的甲醇浸提,提取液利用旋转蒸发仪浓缩,氯仿去除色素,乙酸乙酯提取激素,交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)去除酚类杂质,以甲醇和水为流动相,254nm吸收波长下检测内源激素含量。     

玉米丝黑穗病菌对植株体内内源激素水平改变的影响

采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,测定玉米苗期接种丝黑穗病菌后植株体内生长素(IAA)、赤霉素(GA)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)4种内源激素的含量变化,从寄主与病菌互作过程中植物内源激素的变化研究玉米对丝黑穗病的抗性机制。研究结果表明,玉米丝黑穗病菌侵染玉米植株后,植株体内单一激素ABA含量提高;IAA、GA和ZR的含量降低;IAA/ABA、ZR/ABA、GA/ABA及(IAA+GA+ZR)/ABA的比值均明显低于对照。激素间的比值变化较单一激素的含量变化更加显著,相对单一激素的调控作用,激素间相互作用对调节植株生长发育更为重要。玉米丝黑穗病菌侵染玉米的过程中,植物内源激素的一系列变化可能是引起植株出现畸形症状(如节间缩短、植株矮化和丛生等)的直接原因。     

3种无核荔枝果实发育过程中内源激素含量变化动态

采用高效液相色谱法(HPLC)测定3个无核荔枝品种果实发育过程中生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)和脱落酸(ABA)等内源激素含量的变化,通过与有核荔枝对比分析,阐明无核荔枝果实发育过程中内源激素的变化规律,并进一步探讨荔枝无核但能发育成大果的原因。结果表明:在果实发育过程中,有核荔枝和无核荔枝果实中GA3和ABA的变化规律基本一致,IAA和ZT表现差异较大,初步认为无核荔枝和有核荔枝果实发育可能有两种不同的激素调控模式,或者果实发育与GA3和ABA关系更为密切;无核荔枝果实中高含量的IAA和低含量的ZT可能是其产生无核的一个重要原因。     

剑麻(AgavehybridNo.11648)花芽分化期内源激素水平变化的研究

为了探究剑麻花芽分化与内源激素水平的关系.在对剑麻H.11648花芽分化进程进行观察的基础上,进行了花芽分化期剑麻花芽中的脱落酸(ABA)、生长素(IAA)、玉米素(ZT)和赤霉素(GA3)4种内源激素含量变化研究.结果表明,剑麻H.11648茎尖ABA、ZT的含量均在花芽分化初期达到高峰,而GA3的含量在花芽分化基本完成时达到高峰,IAA含量在花芽分化中期处于低谷,且内源激素出现高峰或低谷的时间与其花芽分化完成时间一致,表明测试激素均与花芽分化有密切关系.研究发现高水平的ABA、ZT、ABA/GA3、ABA/IAA、ZT/GA3和ZT/IAA及较低水平的GA3、IAA有利于剑麻的成花.     

Determination of 4 Phytohormones in Latex of Hevea brasiliensis bv HPLC

对胶乳中玉米素(ZT)、赤霉素(GA)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)等4种植物激素进行分离和纯化,用80％预冷甲醇浸提,离心,离心后的上清液减压蒸发至水相,调节pH后用固相萃取柱进一步纯化,首先洗脱下GA、IAA和ABA,再洗脱下ZT.对ZT采用等度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸(20/80 v/v),分析时间为10 min,ZT在等度洗脱条件下的出峰时间(min)是5.426,回收率是87％;对GA、IAA和ABA采用梯度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸(20/80v/v),分析时间为34 min,GA、IAA和ABA在梯度洗脱条件下的出峰时间(min)分别为:13.377、16.581和18.988,回收率分别为70％、82％和92％.由于对这4种激素分别检测,从而降低了每份样品中杂质的浓度,取得了良好的分离、检测效果.研究结果表明,试验重现性好,整个提取流程简便,适合胶乳中内源激素的分离与测定.     

茶树春梢萌动生育期内源激素变化的研究

采用高效液相色谱法（HPLC）检测了茶树春梢萌动前后五个阶段4种内源植物激素：吲哚乙酸（IAA），赤霉酸（GA3），脱落酸（ABA），玉米素（ZT）的含量并分析了它们的变化规律。GA3和ABA在越冬期含量最高，随春梢萌发生而下降；IAA和ZT则在越冬期含量最低，春梢萌发初期含量迅速上升，此后上升缓慢或略有下降。与茶树生长状况关系更为密切的是激素之间的相互作用，即两两比值。研究表明：GA3／ABA，IAA／ABA在越冬期最低，随春梢萌动生长而上升。在茶树根系活动微弱时，ZT／IAA值高，随根系活动旺盛该比值逐渐下降。同时研究也表明：ZT／IAA与茶树春梢萌展也有一定关系，即在越冬期比值大，春梢生育期锐降。     

亚麻温敏型雄性不育系花蕾发育过程中内源激素的变化研究

利用间接酶联免疫（ELISA）检测技术，测定了亚麻雄性不育系及可育系花蕾不同发育阶段生长素（IAA）、脱落酸(ABA)、玉米素核苷(ZR)以及赤霉素(GA3)等4种内源激素含量的动态变化，分析了两者间4种内源激素的平衡关系。结果表明：1）在花蕾的整个发育时期，不育系和可育系4种内源激素含量变化趋势差异明显，且含量高低明显不同。结果表明IAA和GA3含量的降低及ABA和ZR含量的提高可能与亚麻雄性不育的发生密切相关。2) IAA/ABA、IAA/ZR、IAA/GA3和GA3/ABA在两者间的变化趋势不一致，且大小差异很大。表明4种内源激素之间平衡关系受到破坏可能会影响到植物的正常生长发育。     

烯效唑干拌种对小麦种子萌发后内源激素含量和物质代谢的影响

以小麦品种绵阳26为材料,研究了烯效唑干拌种对小麦种子萌发后内源激素含量和物质代谢的影响,旨在为利用烯效唑培育壮苗提供理论依据。结果表明,处理种子萌发后胚乳中赤霉素(GA)、脱落酸(ABA)含量为前期降低后期升高,生长素(IAA)、玉米素(ZT)含量与对照差异不大;胚芽中GA、IAA含量降低,ABA、ZT含量升高;胚根中GA、IAA、ZT含量降低,ABA含量为前期低于对照而后期高于对照。烯效唑处理后,α-淀粉酶活性受到抑制,使淀粉类贮藏物质降解缓慢,延长了淀粉的降解时间,有利于小麦由异养向自养过渡;蛋白酶活性得到提高,加快种子氮化物的水解,使可溶性蛋白质积累加快,有利于细胞结构的建成。     

低磷胁迫下不同基因型玉米内源激素的动态变化

用高效液相色谱法测定在低磷胁迫下不同基因型玉米生育进程中叶片和根系内源激素含量的动态变化。结果表明,不同基因型玉米叶片和根系内源激素含量除ABA含量为磷低效自交系>磷高效自交系>F₁外,ZT、GA₃和IAA含量均为F₁>磷高效自交系>磷低效自交系。低磷胁迫下,除ZT含量较正常供磷水平减少外,GA₃、IAA和ABA含量均较正常供磷水平增加。ZT和ABA的变幅表现为磷低效自交系大于磷高效自交系和F₁,GA₃和IAA的变幅表现为磷高效自交系和F₁大于磷低效自交系。此外,低磷胁迫下磷高效自交系与磷低效自交系间同一内源激素最值出现时期不同。说明低磷胁迫下不同磷利用效率自交系内源激素表现出规律性变化,因此可将内源激素作为鉴定和选育玉米磷高效基因型的参考指标。     

橡胶树胶乳中几种植物激素的提取及其高效液相色谱测定法

对胶乳中玉米素（ZT）、赤霉素（GA）、生长素（IAA）和脱落酸（ABA）等4种植物激素进行分离和纯化,用80％预冷甲醇浸提,离心,离心后的上清液减压蒸发至水相,调节pH后用固相萃取柱进一步纯化,首先洗脱下GA、IAA和ABA,再洗脱下ZT。对ZT采用等度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸（20/80 v/v）,分析时间为10 min, ZT在等度洗脱条件下的出峰时间（min）是5.426,回收率是87％;对GA、IAA和ABA采用梯度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸（20/80 v/v）,分析时间为34 min,GA、IAA和ABA在梯度洗脱条件下的出峰时间（min）分别为：13.377、16.581和18.988,回收率分别为70％、82％和92％。由于对这4种激素分别检测,从而降低了每份样品中杂质的浓度,取得了良好的分离、检测效果。研究结果表明,试验重现性好,整个提取流程简便,适合胶乳中内源激素的分离与测定。     

耕作方式对冬小麦内源激素含量及产量的影响

为探讨耕作方式对冬小麦不同生育时期内源激素含量及产量的影响,在大田条件下,设3种耕作方式(耕翻+镇压,旋耕+镇压和旋耕),在小麦各生育时期定期取样,用高效液相色谱法(HPLC)分离、测定小麦5种植物内源激素的含量,并测定各处理小麦的产量及其构成因素。结果表明,在小麦越冬至抽穗期,耕翻+镇压处理下小麦叶片及根的IAA、SA、GA3、ZT含量较高;在抽穗灌浆期,耕翻+镇压处理下小麦叶片及根的IAA、GA3、ZT含量最高,进入灌浆期,耕翻+镇压处理下小麦叶片及根的IAA、SA、GA3、ZT含量下降缓慢,且ABA含量较低。耕翻+镇压处理下的小麦产量较旋耕+镇压及旋耕处理分别提高了3.74%和9.41%,且与旋耕处理的差异达到极显著水平。因此,3种耕作方式处理下,耕翻+镇压有利于提高小麦促生长类激素含量,降低小麦促衰老类激素含量,增加小麦有效穗数,促进籽粒灌浆,提高小麦千粒重,有利于实现小麦的高产优质。     

玉米光温敏无雄穗系植株多种植物激素含量的动态变化

以玉米光温敏无雄穗系I17及其正常系N17植株为试验材料,在春季和秋季种植条件下分别测定叶片与雄穗中生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)和玉米素(ZT)的含量,研究植物激素对玉米光温敏无雄穗系植株雄穗发生及其育性的影响。结果表明,春季种植的无雄穗系I17与正常系N17的叶片和雄穗中IAA、GA3、ZT和ABA含量没有明显差异;秋季种植的无雄穗系I17叶片中IAA、GA3和ZT含量在苗期、抽雄期及花粒期均显著低于正常系N17,ABA含量显著高于N17。在植物激素平衡方面,秋季种植的无雄穗系I17叶片中IAA/ABA、GA3/ABA及ZT/ABA的比值均显著低于正常系N17的相应值。IAA、GA3和ZT的严重亏损与ABA的过量积累是引起玉米无雄穗的重要原因之一。     

甜菜生长发育期内源激素的变化规律

应用高效液相色谱法测定了甜菜生长发育期内源生长素(IAA)、赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)在甜菜根尖和幼叶中的含量，分析了这些内源激素含量对甜菜生长发育的影响。试验结果表明：在甜菜生长发育过程中，根尖和幼叶，均是GA3的含量高于IAA和ABA。幼叶与幼根中IAA比值为11-29，表明甜菜IAA源于幼叶中，IAA含量提高，可促进叶丛快速生长。在糖分积累期，新叶继生时IAA含量迅速提高。随生育进程，幼根中GA3与幼叶中IAA的比值逐渐下降，与叶丛生长速度比较，表现了同步下降的关系。ABA主要存在于幼叶中，是幼根的1．6～17．4倍，随生育进程，幼根中ABA变化较小，有逐步下降趋势，而幼苗中ABA含量在生育后期明显升高。     

茶树新梢内源激素的HPLC分析及日变化

研究了茶树新梢内源赤霉酸（ＧＡ３）、吲哚乙酸（ＩＡＡ）、吲哚乙醛（ＩＡＡＤ）、脱落酸（ＡＢＡ）和玉米素（Ｚｅａｔｉｎ）等激素的ＨＰＬＣ分析方法。在ＯＤＳ（Ｃ１８）反相柱上，ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ和ＡＢＡ用甲醇—乙腈—ＫＨ２ＰＯ４缓冲液系统为流动相、Ｚｅａｔｉｎ用甲醇—乙腈—磷酸缓冲液系统为流动相得到满意的分离，它们与相邻峰间的峰高分离度均在０．６５以上。在紫外波长λＧＡ３＝２１０ｎｍ，λＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ＝２８０ｎｍ和λＺｅａｔｉｎ＝２５４ｎｍ、灵敏度０．００３ａｕｆｓ（ＧＡ３）和０．００１ａｕｆｓ（ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ）条件下，各种激素得到定量。ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ的平均标样添加回收率分别为７６．２４％，８９．６９％，８４．３３％，９０．９６％和８２．０９％。茶树新梢内源激素含量在一天内有明显的变化，其高峰值均出现在１３时左右。一天内以１０—１６时取样进行内源激素测定较适宜     

冰核细菌对枇杷幼果中内源激素的影响

用冰核细菌(INA细菌)接种早钟6号枇杷,经不同低温和不同时间处理后,检测IAA、GA3、ABA和ZT 4种内源激素的含量变化.结果表明:在低温胁迫下,感染INA细菌后枇杷幼果中IAA含量一直处于较低水平;GA3和ZT含量无明显规律性;ABA含量与ABA/GA3比值试验组的峰值均高于对照,但出现峰值之后,两者均迅速下降,且试验组的下降趋势明显快于对照.     

内源激素与多小穗小麦幼穗分化持续时间的关系

以多小穗小麦品系１０－Ａ及其改良系为供试材料,在小麦幼穗分化发育过程中,研究了吲哚乙酸（ＩＡＡ）、玉米素（ＺＴ）、赤霉酸（ＧＡ３）和脱落酸（ＡＢＡ）等４种内源激素与小麦幼穗分化持续期和小穗数间的关系。结果表明,小穗数与单棱分化和二棱分化持续期具有显著的正相关关系（ｒ值分别为０．７６和０．８８）。相对较高水平的ＺＴ含量、ＺＴ／ＩＡＡ值、ＺＴ／ＡＢＡ值和ＧＡ３／ＩＡＡ值具有延长小麦幼穗分化持续期的作用     

乙烯利诱导菠萝[Ananas comosus(L.)Merril]花芽分化过程与内源激素的关系

以14月龄的无刺卡因品种为试材,研究乙烯利诱导菠萝花芽分化过程中茎尖及D叶中内源激素含量的动态变化。结果表明:乙烯利处理促进了菠萝植株内源C2H4和ABA的生成,同时降低了GA3、IAA及ZT水平,促成了菠萝花芽分化,但是乙烯利处理并不影响进入小花分化期后C2H4的释放;花芽开始分化后,C2H4和ABA水平下降,GA3、IAA、ZT水平升高,说明高水平的C2H4和ABA及较低水平的GA3、IAA、ZT有利于菠萝的成花,而较高的GA3、IAA、ZT及低水平的C2H4、ABA有利于菠萝小花的分化和发育。