猪瘟活疫苗与口蹄疫灭活疫苗同期与分期免疫效果对比试验

本试验采用单因子试验设计方法,将2窝同期出生的18头仔猪,随机分为试验组和对照组。试验组8头仔猪分别于35、65日龄进行2轮次猪瘟活疫苗和口蹄疫灭活疫苗同期免疫;对照组10头仔猪分别于25、35、55、65日龄进行相同疫苗的分期免疫。通过所有供试猪免疫后进行临床跟踪观察,并于免疫前的23日龄、免疫后的55、95日龄分别检测免疫抗体水平（应用国家规定的ELISA检测方法）。试验结果表明,两种免疫方法免疫后7 d内均未观察明显的应激反应,试验组与对照组两种疫苗的免疫抗体合格率差异均不显著。     

猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗的制备及对家兔的免疫效果

猪瘟病毒E2蛋白不但具有很强的保护性,而且与病毒毒力密切相关。本研究旨在利用基因工程技术,原核表达纯化猪瘟病毒E2蛋白并对其进行N-糖基化修饰,以使其靶向树突状细胞,从而增加其免疫效力。结果表明,经间苯二酚硫酸法及质谱分析鉴定,猪瘟病毒E2蛋白质ε-赖氨酸成功进行了体外糖基化修饰。进而将糖基化E2蛋白质免疫家兔,首免后14d进行第二次免疫,分别在不同时间采血制备血清,经ELISA检测,免疫7d,糖基化E2蛋白质组抗体水平显著高于猪瘟病毒组与E2蛋白质组(P<0.01);至14d时,糖基化E2蛋白质组抗体水平开始下降,与疫苗组、E2蛋白质组相比差异不显著(P>0.05);在二免后14d,糖基化E2蛋白质组抗体水平上升至最高水平,显著高于猪瘟疫苗组和E2蛋白质组(P<0.01);至二免后21d,糖基化E2蛋白质组抗体水平略高于猪瘟疫苗组(P>0.05),显著高于E2蛋白质组(P<0.05);至二免后28d,糖基化E2蛋白质组抗体水平达到稳定值,显著高于另2组(P<0.05)。结果说明,糖基化E2蛋白质免疫后有效诱导了机体的抗体反应,抗体产生快而持久,具有良好的免疫记忆,免疫效果显著优于常规疫苗,是新型疫苗开发的优选抗原,具有很深的开发潜力。     

3种不同类型佐剂的猪瘟E2基因工程亚单位疫苗免疫效果的比较研究

为了筛选用于制备猪瘟E2基因工程亚单位疫苗的佐剂,用水佐剂、双相佐剂以及油包水佐剂分别制备了 3种猪瘟E2基因工程亚单位疫苗,在猪上进行了免疫效果的评价.本试验选取4～5周龄猪瘟病毒病原、抗体阴性猪40头,随机分为8组,每组5头,其中3组用于3种不同佐剂制备的亚单位疫苗的单次免疫效果评价,3组用于疫苗的二次加强免疫效果...     

猪瘟活疫苗(细胞源)两种免疫剂量的使用效果对比

根据基层实际情况,选取2种免疫剂量(1头份和6头份)的政府采购猪瘟活疫苗(细胞源),接种6个场的试验猪。比较免疫后不同时间的抗体合格率,结果显示2种免疫剂量的政府采购猪瘟活疫苗在一免后(40-50日龄)抗体水平较低,二免后(81日龄)抗体水平显著提高,均达到全群保护的合格率,且2种免疫剂量无差别。1头份免疫剂量能获得良好的免疫效果。     

猪瘟病毒E2蛋白酵母表达及其免疫活性研究

猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,呈世界性分布,对养猪业危害严重。猪瘟病毒属于黄病毒科、瘟病毒属,在自然条件下只感染猪。E2蛋白是猪瘟病毒的重要结构蛋白,也是猪瘟病毒的主要保护性抗原。以猪瘟病毒E2蛋白胞外区基因为模板,构建毕赤酵母表达载体pPICZαA-E2,并通过电转获得毕赤酵母X-33阳性克隆,经SDS-PAGE、Western blot鉴定筛选出猪瘟病毒E2蛋白表达菌株。通过亲和层析技术纯化蛋白,并将蛋白免疫动物,进行免疫原性分析。结果表明,猪瘟病毒E2蛋白在毕赤酵母中成功分泌性表达,经纯化纯度达95%以上;动物试验显示,该蛋白具有良好的免疫原性,为猪瘟病毒亚单位疫苗及相关检测技术的开发奠定了基础。     

猪瘟疫苗不同免疫剂量免疫效果对比试验

为探讨不同免疫剂量下猪瘟疫苗的免疫效果,对规模猪场150头仔猪进行免疫对比试验.结果显示,25～30日龄首免1头份、60～65日龄二免1头份即可达到较好免疫效果,25～30日龄首免2头份、60～65日龄二免2头份免疫效果稍优于免疫1头份,二免后仔猪抗体合格率均达了国家规定的70％的标准.     

猪瘟病毒E2蛋白研究进展

猪瘟（Classical Swine Fever,CSF）是由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus,CSFV）引起的一种急性、接触性传染病。目前该病流行于除北美洲和大洋洲以外的其他大洲和地区,呈世界性分布,在一些原已宣布消灭猪瘟的欧洲国家（荷兰、比利时、英国、德国、意大利、西班牙等）又相继复发。虽然我国长期坚持全面接种猪瘟兔化弱毒疫苗,但目前猪瘟在我国依然存在,流行特点从以往的频发大面积流行转变为无规律区域性的散发,隐性持续性感染病例增多,因此应明确猪瘟病毒的基因组结构和最具免疫防制研究价值的抗原蛋白结构,为研制新型有效的疫苗和诊断试剂提供理论依据。本文就猪瘟病毒的基因组结构、猪瘟病毒E2蛋白的结构、功能、所包含的抗原表位以及E2蛋白的表达应用等方面的研究进展作以综述。     

猪瘟疫苗田间免疫效果监测

为准确掌握猪瘟疫苗免疫效果,2010-2012年对投放安徽省的猪瘟疫苗免疫效果进行了监测。采用抗体阻断ELISA方法,检测了454个猪场7439份免疫猪瘟弱毒活疫苗1个月左右的血清中猪瘟免疫抗体水平。结果显示,安徽省猪瘟疫苗免疫效果总体良好,免疫抗体合格率超过了70％：脾淋组织苗和细胞苗免疫效果相当,但脾淋组织苗免疫效果稳定,细胞苗免疫效果稳定性较差：不同厂家疫苗免疫效果参差不齐。     

浅谈提高猪瘟疫苗的免疫效果

猪瘟是猪的一种高度传染性致死性传染病,其特征,急性的主要是高热稽留和小血管壁变性引起的出血、梗塞和坏死等变化。而慢性的,则以纤维素性、坏死性肠炎为特征。近几年出现的非典型猪瘟,     

五个不同厂家猪瘟活疫苗免疫效果对比试验

对市面上常见的5个厂家生产的猪瘟活疫苗进行免疫效果比较试验,并通过兔体热反应法比较不同疫苗间的效价。选取75头30日龄未免疫猪瘟疫苗的健康仔猪,根据不同的母源抗体水平进行分组免疫,于免前及一免后7、14、21、28、35、42 d,二免后7、14、21、35、49、63、77、91、126 d进行采血并进行抗体检测,比较不同厂家猪瘟活疫苗的免疫效果。结果表明,A、B厂家的疫苗效价最高,其次为C、E厂家疫苗,最后为D厂家疫苗;不同厂家的猪瘟活疫苗免疫不同水平母源抗体的仔猪,所产生的免疫效果为A厂家疫苗最优,表现出较高的抗体水平和较长的持续期,其后依次为C、B、E、D厂家疫苗。     

猪瘟和伪狂犬活疫苗几种免疫方式的免疫效果评价

为了评价猪瘟和伪狂犬活疫苗的免疫效果,采用猪瘟活疫苗（传代细胞源）和伪狂犬活疫苗（Bartha—K61株）对35—40日龄猪瘟和伪狂犬母源抗体阴性的健康仔猪分为4组,分别进行单独注射、分点同时注射与混合注射,观察各组注射后的副反应,并对不同时期的抗体用ELISA试验检测血清抗体效价来评价其免疫效果。试验结果表明,两种疫苗同时分点注射和混合注射,相互间的干扰很小,两种疫苗同时注射不影响各自免疫抗体的产生,原因可能是两疫苗共同刺激动物的免疫器官后有提高动物产生免疫抗体的作用．     

N-糖基化猪瘟病毒E2蛋白不同接种剂量对BALB/c小鼠的免疫效果分析

E2蛋白（E2 protein,E2-Pro）为猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）的主要结构蛋白之一,是CSFV最主要的保护性抗原,因此应用体外糖基化技术获得的N-糖基化E2蛋白（glycosylated E2 protein,Gly-E2-Pro）理论上可进一步增强机体的免疫应答。为了验证这一设想以及获得最佳的免疫效果,本研究分别将Gly-E2-Pro按20,50,100μg/只,接种BALB/c小鼠,同时设E2-Pro与CSFV对照,于不同时间采血制备血清,通过血清中IgG、IL-4及INF-γ水平的测定,评价Gly-E2-Pro的免疫效果及确定最佳免疫剂量。结果显示,免疫Ⅰ组（20μg/只）Gly-E2-Pro虽刺激机体产生了IgG免疫应答,但水平较低,与E2-Pro、CSFV组差异不显著;免疫Ⅲ组（100μg/只）Gly-E2-Pro免疫后,前期出现免疫抑制,至28d抗体水平急剧上升,达到极高值;免疫Ⅱ组（50μg/只）Gly-E2-Pro免疫后,血清IgG水平显著高于E2-Pro与CSFV组,同时显著高于免疫Ⅰ组与Ⅲ组。以上结果说明,Gly-E2-Pro可有效增强机体的体液免疫应答,50μg/只为最佳接种剂量。     

三个厂家猪瘟活疫苗免疫效果比较试验

在同一条件下对3个厂家生产的猪瘟细胞源活疫苗进行了免疫效果评价试验,并与猪瘟传代细胞苗免疫效果进行比较。结果发现3个厂家生产的猪瘟细胞源活疫苗存在一定差异,2个厂家的免疫效果较好,1个厂家的免疫效果较差。猪瘟传代细胞苗免疫效果优于猪瘟细胞源活疫苗,猪瘟传代细胞苗免疫1次,抗体合格率高,持续时间长,猪瘟细胞源活疫苗要免疫两次才能获得比较好的效果。同时,我们发现高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）对猪瘟抗体产生有一定影响。     

河源某猪场两种猪瘟疫苗田间免疫效果对比试验

通过在河源某猪场,对不同厂家两种猪瘟疫苗单独使用及混合使用后的的免疫效果对比,得出以下结论：首免和二免均使用猪瘟传代细胞苗免疫的效果最好;首免使用猪瘟脾淋苗,二免使用猪瘟传代细胞苗免疫的效果次之;首免和二免均使用脾淋苗免疫的效果最差。     

猪瘟病毒E2蛋白A-D抗原表位区的原核表达与蛋白纯化

为制备具有活性的猪瘟ELISA抗体检测试剂盒包被抗原,本研究将猪瘟病毒E2蛋白主要抗原表位区A-D部分基因插入表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28a-E2AD,将其转化至大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达。对IPTG浓度和诱导时间进行优化,确定在37℃条件下、IPTG终浓度为0.2 mmol/L时诱导表达4 h,E2AD蛋白的表达量最高。通过对包涵体的纯化条件进行摸索,最终获得目的蛋白的浓度为0.2 g/L。Western blot分析结果显示,E2AD蛋白能够被猪瘟阳性血清特异性识别,表明纯化后的E2AD蛋白具有良好的反应原性。该结果为进一步开展猪瘟ELISA抗体检测试剂盒的研制工作奠定了基础。     

猪瘟活疫苗的田间免疫效果试验

猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的一种烈性传染病,因其致死率高、危害严重,而受到各养猪国家的高度重     

不同厂家猪瘟疫苗免疫效果比对试验

为准确掌握汉中市规模猪场使用量最大的两种猪瘟疫苗在实际应用中的免疫效果,在规模猪场选择4窝体质健康、体重接近的仔猪,随机分成4组,每组10头,分别接种猪瘟脾淋苗和细胞苗,采用IHA方法检测免疫接种前后抗体效价。结果显示,用标准剂量免疫后,2种疫苗都不能对猪群产生保护作用,用2头份剂量在仔猪30日龄首免,首免后28d加强免疫,2种疫苗都能对猪群产生很好的保护作用,能满足预防猪瘟疫病的需要,同时猪瘟脾淋苗免疫后刺激机体产生抗体的速度快,可用于紧急免疫接种。广大养殖户可以根据实际情况,科学合理选择使用猪瘟疫苗。     

亚硒酸钠维生素E合剂及维生素C对猪瘟疫苗免疫效果的影响

亚硒酸钠维生素Ｅ合剂及维生素Ｃ对猪瘟疫苗免疫效果的影响王兴金，何后军，花象柏（江西农业大学畜牧兽医学院，南昌３３００４５）吴星和，危友才（江西省南城县畜牧良种场）近年来有关猪瘟疫苗免疫失败的报道屡见不鲜。增加疫苗用量、改变免疫程序在一定程度上可以改善...     

猪瘟病毒E2蛋白双抗体夹心ELISA定量方法的建立

本研究旨在建立定量检测猪瘟病毒（CSFV）E2重组蛋白的双抗体夹心ELISA方法。用 CSFV WH303单克隆抗体包被96孔酶标板,用CSFV 1B6单克隆抗体连接HRP作为酶标抗体,以杆状病毒表达纯化的CSFV E2蛋白作为标准品蛋白,建立双抗体夹心ELISA定量方法。用SDS-PAGE方法检测标准品蛋白的纯度,BCA蛋白定量法定量标准品蛋白的浓度。稀释标准品至线性区间,绘制标准曲线。用棋盘法确定包被单克隆抗体和酶标抗体及标准品蛋白的最适稀释度。用批间重复和批内重复试验验证该方法的重复性和稳定性。SDS-PAGE结果显示,CSFV E2蛋白的标准品纯度>95%,BCA蛋白定量法测定CSFV E2蛋白的标准品浓度为1.553 mg/mL。包被单克隆抗体的浓度为0.1 μg/mL,酶标抗体的最适稀释度为1∶400。CSFV E2蛋白标准品稀释浓度在2.43~77.65 μg/mL范围内有很好的线性关系,相关系数R²值在0.99以上。批间和批内重复性检测试验变异系数均<15%。本试验成功建立了定量检测CSFV E2重组蛋白的双抗体夹心ELISA检测方法,该方法具有良好的重复性和稳定性,为CSFV E2蛋白的定量提供了有效方法。     

猪瘟病毒E2蛋白配体表位的筛选与鉴定

为进一步精确定位猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白配体表位信息,利用DNASIS(Ver.2.5)软件分析设计合成7条多肽,主要覆盖E2蛋白,分别命名为SE21、SE22、SE231、SE232、SE241、SE242、SE03,同时设计合成1条无关多肽CP,均标记FITC。将PK-15细胞作为靶细胞,通过多肽与PK-15细胞结合试验、多肽抑制CSFV感染PK-15细胞试验和CSFV阻断多肽与PK-15细胞结合试验,筛选和鉴定E2蛋白配体表位。结果表明,多肽SE241、SE242与PK-15细胞结合的平均荧光强度分别为74.43±4.59和83.60±3.11,显著高于其他多肽,抑制CSFV感染PK-15细胞的感染抑制率也显著高于其他多肽,同时这2条多肽与PK-15细胞的结合被CSFV有效阻断。证实SE241、SE242多肽为CSFV与靶细胞PK-15细胞结合的配体表位,并能抑制CSFV感染PK-15细胞。本试验为CSFV新型多肽疫苗或免疫佐剂的研制提供依据。