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徐春厚 《黑龙江八一农垦大学学报》1991,(2)
本文应用间接ELISA法、直接ELISA、对流免疫电泳(CIEP)法和琼脂扩散(ID)法检查了腹泻死亡兔的肠内容物样品32份,从中检测出兔轮状病毒抗原,其检出率分别为50%、43.75%、28.13%。和15.63%。各法的检出率和符合率有明显差异。比较试验表明,检测兔轮状病毒抗原的四种方法各有优缺点。其中,以间接ELISA法较为敏感,以CIEP法较为快速和适用。 相似文献
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用差速离心法纯化的牛轮状病毒(BRV)分别免疫鼠和兔,制备了鼠抗BRV和兔抗BRV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测BRV的双抗体夹心ELISA方法.该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:兔抗BRV IgG包被浓度为10μg·mL-1,鼠抗BRV IgG工作浓度为5 μg·mL-1,样品反应时间60 mi... 相似文献
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为检测所制备的左氧氟沙星人工抗原品质,采用西北农林科技大学兽医药理实验室制备的左氧氟沙星人工抗原免疫BALB/c小鼠,制得鼠抗左氧氟沙星人工抗原的多克隆抗体.以采集的抗血清为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG为二抗、四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立左氧氟沙星人工抗原间接酶联免疫检测法( ELISA).试验结果表明,间接ELISA最佳反应条件为包被抗原质量浓度1 mg/L、4℃过夜、抗原抗体于37℃作用1h、酶标二抗稀释度为1∶2 000.该方法的灵敏度高,且具有良好的准确性和重复性,可以评价左氧氟沙星人工抗原的品质. 相似文献
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用双夹心法ELISA检测兔轮状病毒的研究 总被引:3,自引:1,他引:3
建立了检测兔轮状病毒抗原的夹心法ELISA(DS-ELISA)。用此法检测了67份兔腹泻粪便样品和腹泻死亡兔肠内容物样品。轮状病毒(RV)阳性检出率(31.34%)明显高于双抗体夹心法ELSA(25.37%)和对流免疫电泳(16.41%)。经阻断试验和重复性试验,证明了DS-ELISA具有特异性强和重复性好等优点。 相似文献
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为快速检测鸡传染性法氏囊病毒,使用纯化的鸡抗IBDV多克隆抗体和鼠抗IBDV单克隆抗体,建立了抗原捕获ELISA检测鸡传染性法氏囊病毒的方法.使用建立的方法可以检测到1:160倍稀释的IBDV疫苗及阳性法氏囊组织中的病毒.检测禽流感、新城疫、鸡传染性支气管炎病毒及沙门氏菌、葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、肺炎球菌等结果均为阴性.检测IB-DV超强毒和疫苗毒人工感染鸡的法氏囊、脾、肝及临床样品78份,检出阳性24份,与RT-PCR检测结果相符率为96%(75/78).说明建立的方法敏感、特异,可用于法氏囊病的诊断和监测. 相似文献
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本研究成功地建立了间接酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)用于检测EDS-76病毒抗原的标准化程序。对纯化EDS-76病毒抗原的最低检出量为1ng/Dot,其敏感性约为HA的15.6倍。EDS-76阳性鸡血清特异性阻断试验及交叉反应试验证明,该法对EDS-76病毒抗原的检测具有特异性。试验结果表明,间接Dot-ELISA检测EDS-76病毒抗原,具有敏感性高、特异性强、重复性好、经济、方便、快速等优点,适合于大规模样本的检测。 相似文献
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【目的】建立牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)便捷检测方法,为福建省BRV的流行病学调查检测提供便捷技术支持。【方法】根据GenBank公布的BRV基因组序列,利用Oligo7.0软件设计并合成1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测BRV的RT-PCR方法,同时开展了特异性、敏感性和重复性试验,并将建立的方法应用于22份临床样品的检测。【结果】建立的方法仅能够扩增出BRV的特异性片段,对其他畜禽常见病原体无特异性扩增;该方法的灵敏度为6.86×105 copies·μL-1。对22份临床样品进行检测,检测出12份阳性样品,阳性率为54.55%。【结论】本研究建立的BRV RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床样本的检测,为福建省BRV的诊断和流行病学调查提供了技术支持。 相似文献
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猴轮状病毒(SA11)RT-PCR检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
根据具有高度保守性的编码VP7轮状病毒糖蛋白的基因9序列设计引物,分别进行RT-PCR和NT-PCR扩增。结果:引物Beg9/End9、Beg9-1/End9-1及引物RVG9/aET3、RVG9/aET3-1分别能在一次RT-PCR扩增中出现预期的1062bp和374bp扩增带;引物RvGg/aET3、RVG9/aET3-1在NT-PCR扩增中均能出现预期的374bp扩增带;验证了猴轮状病毒SA11属于血清型3;引物RVG9/aET3进行敏感试验能检测到0.5pg的轮状病毒(SA11)dsDNA。 相似文献
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采用IBD细胞毒油佐剂灭活苗多次免疫易感鸡,制取高免血清效价1:64,提纯IgG抗体并用HRP标记同一IgG抗体,建立一种检测IBDV的敏感性方法──ELISA双抗夹心法。实验用盐析法和离子交换层析法纯化IgG。酶标抗体E/IgGmol比1:43。方阵实验确定最佳反应条件;包被抗体50ug/ml,E-Ab2稀释度为1:120,Ag灵敏度为1:3200;取代反应,抗原阻断反应,无关病毒对照试验均为阴性,并与AGP法对照实验.灵敏度高200倍。以上结果表明:本实验敏感性高,特异性强,简单快速判定客观,对临床诊断IBD流行病有很好的使用价值和推广价值。 相似文献
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前列腺癌是男性泌尿系统最常见的恶性肿瘤.前列腺特异性抗原(PSA) 作为前列腺肿瘤标志物已普遍应用于前列腺癌的早期诊断,本文采用ELISA法测定PSA,现报道如下. 相似文献
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介绍了酶联免疫吸附技术(ELISA)的原理和应用类型,从生物毒素、致病微生物、重金属污染、药物残留、转基因食品、食品中过敏原和食品中违法添加的非食用物质等方面综述了ELISA技术在食品安全检测中的应用,指出了该技术在应用过程中存在的问题,并对该技术的发展趋势与应用前景进行了分析与展望。 相似文献
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猪轮状病毒性腹泻的ELISA双抗夹心法检测及防治建议 总被引:5,自引:0,他引:5
[目的]为猪轮状病毒的针对性防治提供建议。[方法]以不同来源、不同饲养方式下218头猪的粪便为材料,用ELISA双抗夹心法检测其中的轮状病毒(RV)抗原,结合流行病学调查对猪轮状病毒的发病因素及发病特点进行分析。[结果]RV多为隐性感染,且感染率较高。从所取218份样品中共检测出RV阳性50头份,阳性率为22.94%,其中,仔猪170头份,阳性率22.35%,中猪48头份,阳性率25.0%;笼养模式下猪的发病率最低,为17.43%,农户圈养方式下猪的发病率最高,达36.84%。[结论]流行病学调查结果显示,仔猪对RV的感染率高于中猪,采取笼养模式,并对仔猪进行RV防治可降低猪RV的发病率。 相似文献