牛的冷冻烙号法

<正> 牛体标号是家畜育种工作中一项必不可少的技术措施。过去对牛所采用的个体标记法是在角上烙字或戴耳标、截耳号、刺墨及火烙等,但这些方法都具有一定缺点。冷冻烙号是给牛作永久标记的一项新技术。利用液态氮在牛皮肤上进行低温烙号,能破坏皮肤中产生色素的色素细胞,而不会损伤毛囊,以后烙号部位长出来的新毛是白色的、清晰明显,极易辨别、永不消失。该法操作简单,对皮肤损伤少、牛体无痛感。随着冷冻精液的推广应用,液氮的来源已经     

两种不同冷冻方法对犬冷冻精液品质的影响

本试验以德国牧羊犬的精液为材料,采用液氮熏蒸法和细管炸熏法两种冷冻方式进行细管冷冻试验,用精子活力、顶体完整率和畸形率,作为判定精子冷冻品质的指标,确定两种冷冻方法对犬冷冻精液效果的影响。结果表明:(1)液氮熏蒸法冷冻后的精子活力为0.30±0.12,细管炸熏法冷冻后的精子活力0.38±0.08,细管炸熏法优于液氮熏蒸法,且差异显著(P<0.05);(2)液氮熏蒸法冷冻后精子顶体完整率42.20±3.51,畸形率25.60±7.03,细管炸熏法冷冻后精子顶体完整率43.50±4.64,畸形率24.50±5.94,细管炸熏法稍优于液氮熏蒸法,差异不显著(P>0.05)。     

奶牛输精过程中应注意的问题

<正>奶牛采用直肠把握子宫颈法输精。笔者从事奶牛人工授精多年,结合自身的实践认为,在输精中应注意以下问题:一、要正确保存和使用牛冷冻细管精液1、保存冻精。牛冷冻精液必须在-196℃的液氮中浸泡保存,因此盛装液氮的液氮罐要保证质量,经常检查,随时补充液氮,绝不允许细管冻精脱离液氮,冻精完全脱离液氮或者部分脱离液氮,都会影响冻精的质量。2、使用细管冻精(1)取放冻精。取冻精时速度要快,要尽量缩短开盖时间,并且只能将盛装冻精的提筒(或纱布袋)提到容器颈基部(10厘米以下),不能到容     

影响杜泊绵羊精液冷冻效果的因素分析

试验分剐采用四种不同冷冻稀释液配方（A、B、C和D）,不同稀释与平衡方法（一步稀释法和两步稀释法）。不同冷冻步骤（直接冷冻法和液氮熏蒸法）．不同解冻方法（漫解冻法和干解冻法）以及不同甘油浓度（4％、5％和6％）进行杜泊绵羊细管冻精的制备,结果发现：分剐以稀释液B、两步稀释法平衡、液氮熏蒸法冷冻、湿解冻法及5％甘油浓度的效果为最佳,冻精解冻后人工授精的妊娠率达到62％。     

牛冷冻精液人工授精技术(三)

三、牛冷冻精液的贮存和运输 1.冷冻精液的贮存①冷冻精液必须放在液氮罐中,浸泡在液氮中保存.     

冷冻精液贮运、保管及使用

安全保管、贮运和合理使用冷冻精液,是保证冻精存活力,提高受胎率的重要环节。1.液氮罐质量量与保管液氮罐是保存冻精的必需品,新买来的或长期没有使用过的旧罐,在使用前必须严格检查,     

不同方法对STO细胞冻存效果的影响

[目的]建立一种更优化的STO细胞冷冻保存方法.[方法]STO细胞传至第3代后,调节其浓度至2.09×105个/mL,开展冷冻保存试验.Ⅰ组将STO细胞置于4℃下平衡,1 h后转入-20℃下,12 h后将其转至液氮中保存;Ⅱ组将STO细胞装入已注入250 mL 95％乙醇的降温器后,立即转至-70℃下,12 h后再将其转至液氮中保存;Ⅲ组将STO细胞悬液于液氮面上方10 cm处平衡20 min,然后将其缓缓转至液氮中.同时,设Ⅳ组为对照组,即STO细胞不进行冷冻处理.在液氮中保存30 d后进行解冻,以STO细胞的回收率、存活率和生长情况为研究指标,通过MTT法进行STO细胞冻存效果评价.[结果]经冷冻处理后,3种方法STO细胞解冻后回收率和存活率均存在显著差异(P<0.05).Ⅱ组细胞解冻后细胞回收率低于Ⅰ组、高于Ⅲ组,但细胞存活率最高(84.91％).与Ⅰ组和Ⅲ组相比,Ⅱ组STO细胞冻存方法不仅能保证冷冻效果,而且可以回收更多的细胞.Ⅱ组STO细胞复苏后生长相对缓慢,但STO细胞经培养后可恢复至冷冻前的生长状态.Ⅰ组和Ⅱ组复苏后STO细胞的增殖速度较快,且增殖率基本相同,而Ⅲ组细胞的增殖速度较慢.[结论]Ⅱ组STO细胞于-70℃冰箱中平衡过夜,再转移至液氮中超低温冷冻是较为理想的保存方法.     

犬精液冷冻与AI的研究报告Ⅰ——用炸熏法冷冻颗粒精液的试验

采集6条公犬的浓伤精液各5或6次,分别将每次采得的精液稀释平衡后分成相等的两部分,用两种不同的方法冷冻:一种是炸熏法,将精液直接滴入液氮,在其中“炸”5—8秒后将颗粒捞出,继续在液氮面上方2cm处熏蒸6分钟;另一种是常规的氟板冷冻法.结果表明:炸熏法的效果优于氟板法,平均冻后活力分别为0.385±0.22和0.331±0.042(p<0.01);平均复苏率分别为53.57±3.55和45.75±1.91(p<0.05);平均顶体完整率分别为44.60±3.10和39.37±5.29(p<0.05).     

藏獒精液冷冻技术的研究

以藏獒为试验材料,对藏獒精液冷冻过程中的几个主要技术环节进行研究,旨在确定适合于藏獒精液冷冻保存的方法.对藏獒精液冷冻过程中降温平衡时间、不同液氮面高度和解冻温度进行研究,结果表明精液用200 Ml水进行降温平衡,距液氮面3 am熏蒸,用40℃解冻时精液的冷冻效果最好.     

液氮及液氮生物容器的合理使用

液氮是一种特殊的工业制成品，在畜牧品种改良工作中，液氮是精液及胚胎的主要冷冻贮存媒介。但笔者在实际生产中，发现由于对液氮及液氮生物容器特性的不了解，而造成的不合理使用现象严重，既易造成液氮的浪费，增加生产成本，严重的还可能发生伤人事故。下面，笔者就液氮使用过程中几个常见问题介绍如下：     

不同方法处理对椰子花粉扫描电镜观察结果的影响

分别用冻干、常温干燥器干燥、36℃烘干、液氮冷冻、-80℃冷冻等5种方法对海南高种椰子花粉的电子扫描显微镜观察样品进行预处理。结果表明:以冻干法的效果最好;常温干燥器干燥与36℃烘干法制备的花粉样品在扫描电镜下观察呈现塌陷、变形状;-80℃冷冻与液氮冷冻处理的雄花外壁呈褐色,花药、花丝潮湿,电镜观察视野中的杂质、碎片较多。     

简便烘干在水稻叶片DNA大量提取中的应用

为探索烘干法替代液氮冷冻法研磨水稻叶片提取DNA的可行性,首先比较50℃低温烘干法与液氮冷冻法研磨水稻叶片提取DNA的扩增效果,然后进一步分析不同温度(50、60、70、80、90℃)烘干水稻叶片研磨提取DNA的扩增效果,筛选最佳的烘干温度。结果表明,水稻叶片在50～70℃下烘干磨碎所提取的DNA均能进行有效扩增,以50℃效果最佳,其与液氮冷冻法研磨叶片提取DNA的扩增效果无明显差异。水稻叶片烘干法具有操作简单、费用低廉及实用性强等诸多优点,在DNA大量提取中可较好地替代液氮冷冻法对叶片进行制备,具有一定的推广应用价值。     

奶牛细管式冷冻精液的保存、输精操作及影响效果的因素

<正>1奶牛细管式冷冻精液保管要制作储存明细表以准确掌握提桶内的细管式冷冻精液位置。同时记录库存细管式冷冻精液数量,每次购入和使用时要严格核对。操作时,每次提桶的取出、放入次数限定在最少。不要把存有细管式冷冻精液的提桶提到距液氮罐口部太近处,要距口部5 cm以下,不能再口部长时间滞留。每一个提桶中尽量保存一头种公牛的细管式冷冻精液。若保存2~3头种公牛精液时,为防止混杂,最好制作隔断,以便识别。定期测量液氮罐中的液氮损耗量,如损     

猪精液颗粒冷冻技术的研究

为提高猪冻精质量,加速猪冻精在生产上的应用,本试验以解冻后的精子活率、顶体完整率和体外受精(IVF)结果作为判定指标,探讨了冷源和Equex.STM对猪精液颗粒冷冻效果的影响。手握法采集成年、健康种公猪精液,分别采用含有Equex.STM的稀释液和普通稀释液进行两步法稀释,然后以干冰或液氮为冷源进行精液冷冻。结果表明,以干冰为冷源滴冻精液冻后活率为0.487833±0.046761,顶体完整率为0.782±0.039704,而以液氮为冷源的方法冻后活率为0.3334±0.055734、顶体完整率为0.5578±0.068482,前者在这两项指标上均显著优于后者(P<0.05)。另外,在稀释液中添加Equex.STM,以干冰为冷源进行滴冻,可使冻精顶体完整率极显著提高(P<0.01)。以含有Equex.STM的稀释液采用干冰滴冻的冻精进行IVF,胚胎卵裂率、囊胚率分别为0.5316±0.125582和0.216±0.053198。结果表明,采用Equex.STM作为冷冻保护剂并以干冰作为冷源可以获得高质量的猪冷冻精子。     

牛胚胎冷冻方法的研究

本试验目的是研究使用常规冷冻法和OPS法对牛体内生产胚胎进行冷冻、保存及移植的效率.结果显示：这两种方法生产的冻胚解冻后的移植受胎率分别为28.89%、26.08%,两者没有显著性差异.对常规冷冻法和OPS法的冻胚生产费用进行比较,OPS法冷冻胚胎比常规冷冻法的步骤简单、费用低,不需要专用设备.     

新疆牛群中检出赤羽病中和抗体

对喀什地区县市的4个牛场和个体养牛区采取被检牛血清样32份，在伊犁6个牛场和个体牛区采取被检牛血清样33份，共计65份血样，采用细胞微量中和试验及琼扩试验，共检出3份阳性样，阳性率为3％。     

圆筒形贮存管对猪精液冷冻保存效果的影响

试验研究了用圆筒形贮存管冷冻猪精液时不同漂浮时间和解冻时不同解冻温度、时间对冷冻保存效果的影响。猪精液冷冻时,圆筒形贮存管在放入液氮罐前,先置液氮面上3 cm处,分别漂浮熏蒸5、10、15、20 min后投入液氮中保存。精液解冻时,分别在37℃＋1.5 min、52℃＋1.0 min、70℃＋0.5 min解冻处理。结果表明,漂浮15 min处理可显著提高猪精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。52℃＋1.0 min处理组的猪精液冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其它2个处理组。试验结果还证实,用圆筒形贮存管冷冻猪精液是可行的,所获得的冷冻后最高精子活率与用0.25 mL麦管获得精子活率无显著差异。     

农业植物病害研究中可培养性病原菌的常用保存方法

介绍了植物可培养性病原菌的几种常用保存方法,如甘油冷冻保藏法、冷冻干燥保藏法、滤纸保藏法、沙土保藏法、斜面低温保藏法、液氮冷冻保藏法和液体石蜡保藏法。     

超低温下辐照对提高诱变效率的作用 I M_1代损伤效应

<正> 改进诱变技术,提高诱变效率,是诱变育种的一个极为重要的课题.二十年来,许多诱变工作者将r射线辐照后的种子用咖啡因(Caffeine)液浸种处理,或在超低温下(-196℃)对水稻干种子进行r射线辐照,以研究M_1的辐照损伤,取得了一些不同的结果.由于辐照、损伤、修复、变异之间具有某种内在联系,因而研究各种诱变因子的损伤效应具有一定的育种利用价值. 1981年在浙江农业大学高明尉教授指导下,曾以液氮冷冻作为辐照前的预处理,并以咖啡因浸种作为后处理,对早籼     

哺乳期犊牛的管理技术要点

<正>1去角犊牛去角的好处,一是便于统一管理,二是防止成年后相互攻击造成损伤。去角的适宜时间是生后7~10d,此时,牛角生长不完善,容易去除。牛犊具有一定的抵抗能力,去角一般不会产生疾病。常用的去角方法有电烙法和固体苛性钠法2种。1.1电烙法需要使用200W~300W的电烙器。将电烙器的烙头砸扁,使其宽度刚好与牛角生长点相称,加热到一定温度,牢牢地压在牛角基部,直到其下部组织烧灼成白色